Бланк тулуз пьерона 1 класс: Тест на изучение внимания «Тулуз-Пьерон»

Опубликовано 16.05.199621.09.2022 автором alexxlab

Содержание

Возрастные нормативы скорости выполнения теста Тулуз-Пьерона — Студопедия

Поделись

Методики, которые могут применяться для диагностики детей с СДВГ.

Составитель: Конина Екатерина Викторовна.

Материал взят с сайта: https://infourok.ru/metodiki-po-diagnostiki-sdvg-2434592.html

Объект диагностики	Направление диагностики	Методика, Автор	Источник
Дети	Постановка диагноза	Диагностические критерии по классификации DSM — IV	Заваденко Н.Н. Гиперактивность и дефицит внимания в детском возрасте. – М., 2005
	Внимание	Модификация метода Пьерона-Рузера	Ануфриев А.Ф., Костромина С.Н. Как преодолеть трудности в обучении детей. – М., 1999
		Тест Тулуз-Пьерона	Сиротюк А. Л. Синдром дефицита внимания с гиперактивностью. – М., 2008
		«Найди и вычеркни»(адаптация Е.В. Доценко)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		«Домик»(Н.И. Гуткина)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		«Проставь значки»	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		«Запомни и расставь точки»	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		Методика «ДА и НЕТ» (Е.Е. Кравцова)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
	Память	«10 слов» (А.Р. Лурия)	Бобченко Т.Г., Пронина Е.В. Организация производственной практики в дошкольном образовательном учреждении. – Владимир, 2008.
	Мышление	«Лабиринт»	Павлова Т.Л. Диагностика готовности ребенка к школе. – М., 2007 Ануфриев А.Ф., Костромина С.Н. Как преодолеть трудности в обучении детей. – М., 1999
		«Раздели на группы» (А.Я Иванова, адаптация Е.В.Доценко)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		«Исключение лишнего» (предметный вариант)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		«Обведи контур» (исследование наглядно-действенного мышления)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
	Эмоциональная сфера	Рисуночные тесты: «Рисунок семьи», «Несуществующее животное»	Венгер А.П. Психологические рисуносные тесты. – М., 2003.
	Самооценка	Методика «Лесенка» (В.Г. Щур)	Широкова Г.А. Практикум для детского психолога. — Ростов-на-Дону, 2006. Бобченко Т.Г., Пронина Е.В. Организация производственной практики в дошкольном образовательном учреждении. – Владимир, 2008.
	Координация движений	Проба на реципрокную координацию(А.Р. Лурия)	Глозман Ж.М., Потанина А.Ю., Соболева А.Е. Нейропсихологическая диагностика в дошкольном возрасте. – СПб., 2008.
	Координация движений	Исследование моторики и координации движений и детей. (Н.Н. Заваденко)	Заваденко Н.Н. Гиперактивность и дефицит внимания в детском возрасте. – М., 2005.
	Самоконтроль и произвольность	Тест самоконтроля и произвольности	Сиротюк А.Л. Синдром дефицита внимания с гиперактивностью. – М., 2008
Родители		Анкета для родителей (Заваденко Н.Н., 2005)	Заваденко Н.Н. Гиперактивность и дефицит внимания в детском возрасте. – М., 2005.
Родители		Анкета для родителей	Брязгунов И.П., Касатикова Е.В. Непоседливый ребенок. – М., 2001
Педагоги		Анкета для педагогов	Брязгунов И.П., Касатикова Е.В. Непоседливый ребенок. – М., 2001
Педагоги		Выявление синдрома дефицита внимания	Шарапановская Е.В. Воспитание и обучение детей с ММД и ПШОП. – М., 2005

Диагностические критерии СДВГ по классификации DSM — IV

Заваденко Н. Н. Гиперактивность и дефицит внимания в детском возрасте. – М., 2005

К основным диагностическим критериям СДВГ по современным классификациям МКБ-10 и DSM – IV (АПА, 1994) относятся следующие признаки.

· Несоответствующие нормальным возрастным характеристикам и свидетельствующие о недостаточных адаптационных возможностях:

o Нарушения внимания

o Гиперактивность и импульсивность

· Первые симптомы постоянно сохраняются на протяжении как минимум 6 месяцев в такой степени выраженности, которая свидетельствует о плохой адаптации ребенка.

· Недостаточная адаптация проявляется в различных ситуациях и видах окружающей обстановки (дома и в школе), несмотря на соответствие уровня интеллектуального развития нормальным возрастных показателям.

Для постановки диагноза необходимо наличие следующих симптомов, приведенных в разделах I и II:

I. Шести или более из перечисленных симптомов невнимательности, которые сохраняются у ребенка на протяжении как минимум 6 месяцев и выражены настолько, что свидетельствуют о недостаточной адаптации и несоответствии нормальным возрастным характеристикам

Невнимательность

1. Ребенок часто неспособен удерживать внимание на деталях; из-за небрежности, легкомыслия допускает ошибки в школьных заданиях, в выполняемой работе и других видах деятельности.

2. Обычно с трудом сохраняет внимание при выполнении заданий или во время игр.

3. Часто складывается впечатление, что ребенок не слушает обращенную к нему речь.

4. Часто оказывается не в состоянии придерживаться предлагаемых инструкций и справиться до конца с выполнением уроков, домашней работы или обязанностей на рабочем месте (что никак не связано с негативным или протестным поведением, неспособностью понять задание).

5. Часто испытывает сложности в организации самостоятельного выполнения заданий и других видов деятельности.

6. Обычно избегает, высказывает недовольство и сопротивляется вовлечению в выполнение заданий, которые требуют длительного сохранения умственного напряжения (например, школьных заданий, домашней работы).

7. Часто теряет вещи, необходимые в школе и дома (например, игрушки, школьные принадлежности, карандаши, книги, рабочие инструменты).

8. Легко отвлекается на посторонние стимулы.

9. Часто проявляет забывчивость в повседневных ситуациях.

II. Шесть или более из перечисленных симптомов гиперактивности и импульсивности, которые сохраняются на протяжении по меньшей мере б месяцев и выражены настолько, что свидетельствуют о недостаточной адаптации и несоответствии нормальным возрастным характеристикам

Гиперактивность

1. Часто наблюдаются беспокойные движения в кистях и стопах; сидя на стуле, ребенок крутится, вертится.

2. Часто встает со своего места в классе во время уроков или в других ситуациях, когда нужно оставаться на месте.

3. Часто проявляет бесцельную двигательную активность: бегает, крутится, пытается куда-то залезть, причем в таких ситуациях, когда это неприемлемо.

4. Обычно не может тихо, спокойно играть или заниматься чем-либо на досуге.

5. Часто находится в постоянном движении и ведет себя так, «как будто к нему прикрепили мотор».

6. Часто бывает болтливым.

Импульсивность

7. Часто отвечает на вопросы не задумываясь, не выслушав их до конца.

8. Обычно с трудом дожидается своей очереди в различных ситуациях.

9. Часто мешает другим, пристает к окружающим (например, вмешивается в беседы или игры).

Методика изучения концентрации и устойчивости внимания
(модификация метода Пьерона — Рузера)

Ануфриев А.Ф., Костромина С.Н. Как преодолеть трудности в обучении детей. – М., 1999

Инструкция: «Закодируйте таблицу, расставив в ней знаки по образцу».

Образец 1

Таблица 1

Анализ результатов: Фиксируется количество ошибок и время, затраченное на выполнение задания.

Оценка: Высокий уровень устойчивости внимания — 100% за 1 мин 15 сек без ошибок. Средний уровень устойчивости внимания — 60% за 1 мин 45 сек с 2 ошибками. Низкий уровень устойчивости внимания — 50% за 1 мин 50 сек с 5 ошибками. Очень низкий уровень концентрации и устойчивости внимания — 20% за 2 мин 10 сек с 6 ошибками (по М.П.Кононовой).

Тест Тулуз-Пьерона

Сиротюк А.Л. Синдром дефицита внимания с гиперактивностью. – М., 2008

Исследование внимания (концентрации, устойчивости, переключаемости), психомоторного темпа, волевой регуляции, динамики работоспособности во времени.

Применяется для обследования детей от 6 лет.

Если такого квадратика среди образцов нет, то его следует подчеркнуть (проговаривание инструкции необходимо сопровождать демонстрацией соответствующих действий). Сейчас вы будете последовательно обрабатывать все квадратики тренировочной строчки, зачеркивая совпадающие с образцами и подчеркивая несовпадающие. Работать необходимо строго по инструкции.

Нельзя:

1. Сначала вычеркнуть все квадратики, совпадающие с образцами, а потом подчеркнуть оставшиеся.

2. Ограничиться только вычеркиванием квадратиков.

3. Подчеркивать сплошной чертой, если подряд встречаются несовпадающие с образцами квадратики.

4. Выполнять инструкцию наоборот: подчеркивать совпадающие и вычеркивать несопадающие с образцами квадратики».

Только после того, как дети все поняли, они могут приступить к самостоятельной обработке тренировочных строчек на своих бланках. Тем, кто не понял, необходимо индивидуально на бланке показать, как надо работать.

Продолжение инструкции: «Теперь будем работать все вместе и точно по времени. На каждую строчку дается 1 минута. По команде «Стоп!» необходимо перейти к обработке следующей строчки. В каком бы месте вас ни застал сигнал, надо сразу перенести руку на следующую строчку и без перерыва продолжать работу. Работать нужно как можно быстрее и как можно внимательнее».

Обработка результатов происходит при помощи наложения на бланк ключа, изготовленного из прозрачного материала. На ключе маркером выделены места, внутри которых должны оказаться зачеркнутые квадратики. Вне маркеров все квадратики должны быть подчеркнуты.

Для каждой строчки подсчитывается:

1. Общее количество обработанных квадратиков (включая ошибки).

2. Количество ошибок.

За ошибку считаются неверная обработка, исправления и пропуски. Затем значения переносятся на бланк фиксации результатов.

Номер строки	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
Количество обработанных знаков
Количество ошибок

К основным расчетным показателям детей с СДВГ относятся коэффициент точности выполения теста (показатель концентрации внимания) и показатель устойчивости внимания.

1. Скорость выполнения теста ( V ) – общая сумма обработанных знаков делится на количество рабочих строчек.

2. Коэффициент точности выполнения теста (или показатель концентрации внимания) – отношение правильно обработанных знаков к общему числу обработанных знаков.

3. Устойчивость внимания

Где у_i – количество ошибок в строке, α – среднее количество ошибок в строке, n – количество рабочих строчек.

Возрастные нормативы скорости выполнения теста Тулуз-Пьерона

Возрастная группа	Патология	Слабая	Возрастная норма	Хорошая	Высокая
6-7 лет	0 — 14	15 – 17	18 — 29	30 — 39	40 и более
1 класс	0 — 19	20 — 27	28 — 36	37 — 44	45 и более
2 класс	0 — 22	23 — 32	33 — 41	42 — 57	58 и более
3 класс	0 — 15	16 — 25	26 — 36	37 — 48	49 и более

Характеристика методики диагностики ММД — Студопедия

Поделись

Тест Тулуз-Пьерона является одним из вариантов «корректурной пробы», общий принцип которой был разработан Бур-доном еще в 1895 году. Суть задания состоит в дифференцировании стимулов, близких по форме и содержанию в течение длительного, точно определенного времени.

«Классический» вариант теста Тулуз-Пьерона (30 строчек) применим для широкого возрастного диапазона, начиная с 15 лет. Укороченный вариант (10 строчек) можно использовать, начиная с 3 класса. Для детей 6-8 лет (1-2 класс) мы предлагаем упрощенный вариант методики. Он был разработан с учетом еще не полного сенсомоторного развития детей этого возраста и меньшего объема их оперативной памяти. Использовать тест (даже в упрощенном варианте) на детях более младшего возраста не рекомендуется, так как он перестает быть валидным. Вывод сделан на основании апробации теста (с согласия родителей) на детях 4,5-5,5 лет (всего 19 человек). Очевидным и основным препятствием в выполнении теста было отсутствие «рабочей» мотивации, готовности точно следовать инструкции (личностная незрелость), а также недостаточное развитие мелкой моторики. Повторное обследование детей через год показало совершенно другие результаты.

В тесте Тулуз-Пьерона стимульным материалом являются 8 типов квадратиков, различающихся тем, к какой грани или к какому из углов добавлены черные полукруг или четверть круга Тестовый бланк состоит из 10 строчек, на которых в случайном порядке расположены все типы используемых квадратиков В верхнем левом углу бланка изображены квадратики-образцы (два — на бланках для дошкольников и учащихся 1-2 классов; три — на бланках для учащихся 3-11 классов). В расположенных ниже строчках обследуемый должен находить и зачеркивать квадратики, аналогичные образцам, а остальные — подчеркивать. Время работы с каждой строчкой ограничено. Дети от 6 лет до 6 класса работают с каждой строчкой 1 минуту. Начиная с 7 класса, на работу с каждой строчкой отводится 55 секунд. Когда отведенное время истекает, обследуемый должен переходить к следующей строчке, независимо от того, смог он обработать предыдущую до конца или нет.

— монотонная, несложная деятельность, требующая постоянного напряжения внимания и волевого усилия. Согласно Колларику и Черны, тест стандартизован на нескольких выборках [20,145]. Распределение результатов является нормальным. Валидность доказана по множественным корреляциям с родственными тестами. Прогностическая валидность установлена для оценки успеваемости, технического рисования и способностей к технике. При использовании факторного анализа тест попадает в фактор, объединяющий тесты на перцепцию, внимание, память, воображение, общую остроту ума и сообразительность.

На взрослой выборке результаты тестирования стабильны во времени. Результаты, полученные на детях, отражают их возрастное психофизиологическое развитие. Скорость выполнения теста связана с возрастным созреванием нервной системы и своих максимальных значений с последующей стабилизацией достигает к 15-18-летнему возрасту. Черны отмечает перспективность использования теста в клинических условиях [20, 147], однако у нас в стране, согласно литературным данным, он пока не получил широкого распространения.

Нами тест Тулуз-Пьерона используется с 1983 года в общем комплексе с различными личностными и интеллектуальными тестами в рамках аттестации, профотбора, профориентации и консультирования. Массовые обследования дошкольников и школьников проводятся с 1991 года (по мере адаптации диагностического комплекса к соответствующим возрастным группам).

В первые годы использования теста Тулуз-Пьерона, когда основная группа обследуемых состояла из лиц старше 15-16 лет, резко аномальные варианты его заполнения встречались редко. Однако подробный анализ этих, хотя и единичных, случаев всегда указывал на различные осложнения неврологического характера, имевшие место в раннем детстве. С первых же лет массовых обследований дошкольников и младших школьников стало очевидно, что подобные аномальные варианты отнюдь не редки, а составляют до 30% и более от всей выборки. Характерным для таких протоколов было исключительно большое количество ошибок, в 3-5 раз превышающее средние показатели, скорость выполнения теста нередко оказывалась в 2 раза ниже возрастной нормы. Кроме явных количественных отличий, проявились и специфические качественные особенности в виде нескольких типов профилей, характеризующих изменение скорости выполнения теста во времени.

Значительное разнообразие данных анамнеза, медицинских диагнозов и заключений, а также и их отсутствие, с одной стороны, осложняло обобщение и квалификацию аномальных вариантов, получаемых по тесту Тулуз-Пьерона. Но, с другой стороны, вырисовывающаяся общая картина хорошо соответствовала тому, как в уже достаточно обширной литературе описывались легкие формы энцефалопатий или ММД.

Логично было предположить, что тест Тулуз-Пьерона диагностирует ближайшие психологические проявления ММД. Для подтверждения этой гипотезы, выводы, сделанные на основе тестирования, проверялись в процессе параллельного неврологического обследования детей. Ряд экспериментальных проверок был проведен совместно с Центром Коррекции при СПбУПМ. В течение 1993 — 1996 гг. апробация теста осуществлялась на базе школ № 10 и № 153, предназначенных для обучения детей с отклонениями в адаптации и развитии. При сравнении результатов тестирования и результатов энцефалографического обследования, в процессе лечения и психологической коррекции всегда отмечалась идентичная динамика. Если данные ЭЭГ свидетельствовали о нормализации работы мозга, то и по тесту Тулуз-Пьерона отмечались значительное повышение точности выполнения задания и сглаживание («нормализация») профиля. Если сначала результаты тестирования свидетельствовали об оптимизации психической деятельности (повышение точности выполнения теста, сглаживание профиля), то при последующем энцефалографическом обследовании отмечались улучшения и со стороны работы мозга.

Практика работы показала, что методика Тулуз-Пьерона является адекватным, быстрым и простым способом косвенной диагностики ММД (по ближайшим нарушениям психической деятельности). Она не имеет ограничений для повторных применений, поэтому удобна для анализа динамики ММД, оценки эффективности лечения или коррекции. Еще одно преимущество методики состоит в том, что она фактически является экспресс-методом (занимает не более 15 минут), пригодным для массовых обследований.

Для тестирования учащихся школ во всем возрастном диапазоне мы предлагаем 4 бланка. Первый бланк, состоящий из 10) строчек и содержащий два квадратика-образца, рассчитан на дошкольников (не младше 6 лет) и учащихся 1 -2 классов общеобразовательных школ. Второй бланк аналогичен первому и отличается от него только большей длиной строчек (больше квадратиков в каждой строчке). Он рассчитан на учащихся 2-х классов гимназий. Практика показывает, что эти дети работают с большей скоростью и им не хватает длины строчек на первом бланке. В свою очередь, детям первой группы не рекомендуется давать второй бланк: в этом случае у них может возникнуть ощущение неуспеха, так как их работа будет заканчиваться на большом расстоянии от окончания строки. Третий бланк, состоящий из 10 строчек и содержащий три квадратика-образца, предназначен для учащихся 3-6 классов общеобразовательной школы Четвертый бланк отличается от третьего только длиной и рассчитан на учащихся 7-11 классов общеобразовательных школ и учащихся 5-11 классов гимназий.

Для более полной оценки возможных осложнений в развитии ребенка тест Тулуз-Пьерона необходимо использовать в комплексе с интеллектуальными и личностными психодиагностическими методиками. В этом случае при тестировании дошкольников и учащихся 1-2 классов всю процедуру тестирования необходимо начинать с методики Тулуз-Пьерона, чтобы определить особенности их работоспособности или дефекта, поскольку это очень важно в начале школьного обучения. Обследование третьеклассников и более старших ребят лучше начинать с тестов интеллекта, а методику Тулуз-Пьерона использовать в середине комплекса для контроля утомляемости и внимательности.

3) Тест «Визуальные классификации». Психодиагностика готовности детей к обучению в школе

Психодиагностика готовности детей к обучению в школе

курсовая работа

4) Методика «Образец и правило»

2.1 Тест Тулуз-Пьерон

психологический готовность школа обследование

Тест Тулуз-Пьерона является одним из вариантов «корректурной пробы», общий принцип которой был разработан Бурдоном еще в 1895 году. Суть задания состоит в дифференцировании стимулов, близких по форме и содержанию в течение длительного, точно определенного времени.

Тест Тулуз-Пьерона первично направлен на изучение свойств внимания (концентрации, устойчивости, переключаемости) и психомоторного темпа, вторично — оценивает точность и надежность переработки информации, волевую регуляцию, личностные характеристики работоспособности и динамику работоспособности во времени. «Классический» вариант теста Тулуз-Пьерона (30 строчек) применим для широкого возрастного диапазона, начиная с 15 лет. Укороченный вариант (10 строчек) можно использовать, начиная с 3 класса. Для детей 6-8 лет (1-2 класс) мы предлагаем упрощенный вариант методики. Он был разработан с учетом еще не полного сенсомоторного развития детей этого возраста и меньшего объема их оперативной памяти. Использовать тест (даже в упрощенном варианте) на детях более младшего возраста не рекомендуется, так как он перестает быть валидным.

В тесте Тулуз-Пьерона стимульным материалом являются 8 типов квадратиков, различающихся тем, к какой грани или к какому из углов добавлены черные полукруг или четверть круга. Тестовый бланк состоит из 10 строчек, на которых в случайном порядке расположены все типы используемых квадратиков. В верхнем левом углу бланка изображены квадратики-образцы (два — на бланках для дошкольников и учащихся 1-2 классов; три — на бланках для учащихся 3-11 классов). В расположенных ниже строчках обследуемый должен находить и зачеркивать квадратики, аналогичные образцам, а остальные — подчеркивать.

Время работы с каждой строчкой ограничено. Дети от 6 лет до 6 класса работают с каждой строчкой 1 минуту. Начиная с 7 класса, на работу с каждой строчкой отводится 55 секунд. Когда отведенное время истекает, обследуемый должен переходить к следующей строчке, независимо от того, смог он обработать предыдущую до конца или нет.

К преимуществам теста относится его независимость от культурной принадлежности, уровня вербального и социального интеллекта обследуемого, даже существенные речевые и слуховые дефекты не влияют на результативность его выполнения. Задания простые, решаются наглядно, посредством сравнения с образцами. По своему характеру работа с тестом — монотонная, несложная деятельность, требующая постоянного напряжения внимания и волевого усилия. Практика работы показала, что методика Тулуз-Пьерона является адекватным, быстрым и простым способом косвенной диагностики минимальных мозговых дисфункций (по ближайшим нарушениям психической деятельности). Она не имеет ограничений для повторных применений, поэтому удобна для анализа динамики ММД, оценки эффективности лечения или коррекции. Еще одно преимущество методики состоит в том, что она фактически является экспресс-методом (занимает не более 15 минут), пригодным для массовых обследований. [10. стр.13]

Обязательным является расчет двух показателей: скорость выполнения теста и точность выполнения теста (или показатель концентрации внимания)

Основные расчетные показатели:

1. Скорость выполнения теста:

n — число рабочих строчек;

xi — количество обработанных знаков в строке.

Таким образом, общая сумма обработанных знаков делится на количество рабочих строчек.

2. Коэффициент точности выполнения теста (или показатель концентрации внимания):

v — скорость;

а — среднее количество ошибок в строке;

n — количество рабочих строчек;

уi — количество ошибок в строке.

Таким образом находится отношение правильно обработанных знаков к общему числу обработанных знаков.

Дополнительные расчетные показатели:

1. Устойчивость скорости во времени:

n — количество рабочих строчек;

xi — количество обработанных знаков в строке.

v — средняя скорость.

2. Устойчивость внимания:

п — количество рабочих строчек;

у/ — количество ошибок в строке;

а — среднее количество ошибок в строке.

3. Связь скорости и точности выполнения теста (коэффициент корреляции V и а):

[10. стр.20]

В нашей работе мы используем только основные показатели.

Нормативные данные по основным показателям:

	патология	слабый уровень	средний уровень	хороший уровень	высокий уровень
Скорость переработки информации	меньше 14	15-17	18-29	30-39	больше или равно 40
Внимательность	меньше или равно 0,89	0,9-0,91	0,92-0,95	0,96-0,97	больше или равно 0,98

[9. стр.180]

2.2 Прогрессивные матрицы Равена

Прогрессивные матрицы Равена были разработаны с целью оценки как можно более прямым путем двух компонентов фактора g (общего интеллекта — ОИ), выделенных К.Спирманом (С.Spearman, 1927) в 1923 г.: (1) продуктивной способности, т.е. способности делать выводы, извлекать смысл из хаотического материала, схематизировать, обычно на невербальном уровне, и создавать концепции, позволяющие легко оперировать сложными понятиями; (2) репродуктивной способности — способности усваивать и воспроизводить вербальную информацию. [7. стр.58]

В соответствии с проведенным Спирманом теоретическим анализом фактора g этот тест требует главным образом выявления отношений между абстрактными элементами. Задания состоят из набора матриц, организованных в строки и столбцы, в каждой из которых один элемент пропущен. Задача состоит в том, чтобы выбрать подходящий элемент-вставку из заданного набора вариантов. Самые легкие варианты требуют лишь точность различения, тогда как более сложные предполагают использование аналогий, перестановок, чередований паттерна и других логических отношений. Тест Равенна обычно проводится без ограничений во времени и может предъявляться индивидуально или группе испытуемых. Инструкции крайне просты и даются устно. Имеется три формы матриц Равенна, различающихся по уровню трудности. Стандартные прогрессивные матрицы — форма, пригодная для обследования «средней» части человеческой популяции в возрастных границах от 6 до 80 лет. Более легкая — Цветные прогрессивные матрицы — рассчитана на тестирование детей более младшего возраста и специфических групп, которые по разным причинам невозможно протестировать с помощью Стандартных прогрессивных матриц. Нормы установлены для детей от 5,5 до 11,5 лет, а так же для выборок лиц пожилого возраста без снижения интеллекта (от 60 до 89) и умственно отсталых взрослых. Третья форма — Прогрессивные матрицы повышенной сложности — была специально разработана для тестирования подростков и взрослых, превосходящих средний уровень популяции. [1. стр.291]

Тесты ПМР использовались более чем в 2000 исследованиях, результаты которых опубликованы (обзоры J. H.Court & J.Raven, 1995; J.H.Court, 1994), и широко применяются практическими психологами.

Стандартная методика прогрессивных матриц (СПМ) впервые прошла полную стандартизацию в 1938 г. на 1407 детях в Ипсвиче, Англия (J.C.Raven, 1941). В последующие годы было выполнено еще несколько нормативных исследований. [7. стр.59]

Нормативные данные:

Визуальное мышление	патология	слабый уровень	средний уровень	хороший уровень	высокий уровень
линейное (серия А)	0-4	5-6	7-9	10-11	12
структурное (серия В)	0-1	2-4	5-8	9-11	12

[9. стр.180]

Делись добром 😉

Игра в практической деятельности психолога

1.

2 Основные классификации игр

Детские игры — явление неоднородное. Даже глаз непрофессионала заметит, насколько разнообразны игры по своему содержанию, степени самостоятельности детей, формам организации, игровому материалу…

Исследования межличностного конфликта в группе студентов

1.2 Структура конфликта и его классификации

Конфликт является не только системой, но и процессом. Поэтому структура конфликта — это совокупность устойчивых связей конфликта, обеспечивающих его целостность, тождественность самому себе, отличие от других явлений социальной жизни…

Межличностный конфликт и пути его решения

1.2.2 Классификации конфликтов

Наличие огромного количества общих и частных классификаций конфликта, данных психологами, говорит о том, что их возможно столько, сколько различных сторон выявляет в нем психология. К основным признакам…

Методы диагностики в психологии

Классификации методов по Й. Шванцаре

Й. Шванцара объединяет психодиагностические методы в группы по следующим основаниям: · по используемому материалу (вербальные, невербальные, манипуляционные, тесты «бумаги и карандаша» и т. д…

Механизмы формирования характера

Тип характера по классификации Э. Фромма

Данная классификация относится в основном к взрослым людям и представляет типологию характеров преимущественно с точки зрения отношения к людям (напомним, что характер человека проявляется также в отношении к делу)…

Нарушения сна

3.1 Классификации нарушений сна

Международная классификация расстройств сна и бодрствования включает: · диссомнии; · парасомнии; · нарушения сна, связанные с другими заболеваниями; · предполагаемые болезни сна. Диссомния определяется как расстройство…

Особенности влияния музыкальных занятий на развитие умственной работоспособности детей младшего школьного возраста с замедленным психическим развитием

1.1.2 Классификации ЗПР

1. Т.А. Власова и М.С. Певзнер выделили две наиболее многочисленные группы и охарактеризовали их как [3, 17]: — дети с психофизическим инфантилизмом. Это дети с нарушенным темпом физического и умственного развития. ЗПР…

Потребности и мотивы личности

КЛАССИФИКАЦИИ ВИДОВ

Потребности и мотивы человека многообразны. В науке представлены различные их классификации. Виды потребностей и мотивов Классификации потребностей Классификация мотивов В отечественной психологии (В.Д…

Психодиагностика готовности детей к обучению в школе

2.3 Тест «Визуальные классификации»

Задание состоит из 4 задач и позволяет оценить уровень развития понятийного образного мышления. Каждая строчка в задании состоит из 5 картинок. На первой изображена елочная игрушка, огурец, помидор, морковь и яблоко. На второй яблоки и груши…

Психология разрешения конфликтов между руководителем и подчиненными

1. Понятие и классификации конфликта

Конфликт (от лат. conflictus — столкновение) — столкновение разнонаправленных целей, интересов, позиций, мнений или взглядов субъектов взаимодействия, фиксируемых ими в жесткой форме. В основе любого конфликта лежит ситуация…

Современные методы исследования психофизиологии памяти

Глава 2.

Визуальные методы исследования памяти

…

Стратегии выявления лжи в процессе межличностного общения

2.2 Причины лжи и её классификации

Если говорить о причинах лжи, то этот вопрос достаточно объёмный, и его можно рассматривать с разных точек зрения. Почему мы обманываем себя и других? Как правило, мы обманываем друг друга…

Сущность, процесс развития, классификации конфликтов. Управление конфликтной ситуацией

4. Классификации конфликтов.

По проблемам классификации социальных конфликтов среди исследователей нет единой точки зрения. Думается, можно присоединиться к В.И. Сперанскому, который предлагает определять основные виды конфликтов в зависимости от того…

Характер как психологический феномен

2.3 Классификации характеров

«Существует множество различных оснований классификации и типологий характеров. Большую известность приобрели классификации характеров Теофраста, Ж. де Лабрюйера, Ф. Галля, Ф. Джордано, Ф. Полана, Н. Лосского, К.Г. Юнге, А.Ф. Лазурского, Э. Фромма…

Эмоциональная сфера личности: эмоции и чувства, их виды. Теории эмоций

2.2 Классификации чувств

Для классификации чувств могут быть разные основания. Так…

404 — Документ не найден.

Карта сайта
Сайты подведомственных учреждений

Томская область, г. Стрежевой, ул. Коммунальная, 1/1

8 (38259) 5-58-04

Написать письмо

Запрошенная Вами страница не найдена. Возможно, мы удалили или переместили ее. Возможно, вы пришли по устаревшей ссылке или неверно ввели адрес. Воспользуйтесь поиском или картой сайта.

gor_l
av2020
prokuratura
- Определен порядок проведения ГИА в условиях ограничений, введенных в связи с распространением новой коронавирусной инфекции (COVID-19)
- Утвержден новый порядок подачи заявлений о распоряжении средствами материнского капитала
- Созданы реестры лиц, лишенных родительских прав
- Об ответственности родителей за неуплату штрафа за своих несовершеннолетних детей
- О принудительном исполнении решений об отобрании ребенка или его передаче
- Обязанности и ответственность родителей
- Об ответственности за преступления против семьи и несовершеннолетних
- Моему ребенку недавно установили инвалидность. Какие меры социальной поддержки положены нашей семье в этой связи?
- О воинской обязанности граждан и ответственности за нарушения в данной сфере
- Правительство расширило возможности покупки жилья для молодых семей в рамках госпрограммы
- О Правилах организованной перевозки группы детей автобусами
- Ответственность за преступления против семьи и несовершеннолетних.
- Инвалид может приобрести техническое средство реабилитации по электронному сертификату
- Доступ в жилое помещение для проведения ремонтных работ
- Ответственность за размещение фотографий несовершеннолетних без согласия их родителей и иных законных представителей
- Уточнен порядок расчета среднедушевого дохода для предоставления социальных услуг бесплатно
- Упрощена процедура обращения пенсионеров за получением компенсации стоимости проезда к месту отдыха
- Усилена ответственность за повторное управление транспортным средством в нетрезвом виде
- Льготы для многодетных родителей в трудовой сфере и пенсионного обеспечения
- Гражданин стал «двойником» должника по исполнительному производству, что делать?
- Штраф за оскорбление.
- Жестокое обращение с ребенком карается законом.
- Поправки в Закон о потребительском кредите
- Обязательная дактилоскопия безвизовых иностранных граждан в Российской Федерации и сроки временного пребывания
- С 1 декабря должен быть обеспечен доступ к социально значимым Интернет — сайтам
- С 30 декабря 2021 года упростится порядок регистрации актов гражданского состояния.
ТОЧКА РОСТА
- Новости 2021
- Новости 2022
Платежные реквизиты
Мероприятия 18 марта
доступная среда
Выборы_2018
Об управлении
- Контакты
- Образовательные учреждения
- Полномочия
- Историческая справка
- Муниципальный общественный совет
Документы
- Материалы для проверки. (Комитет по контролю, надзору и лицензированию в сфере образования ТО)
  - Основополагающие документы
  - Дошкольное образование
  - Начальное общее, основное общее, среднее общее образование
  - Дополнительное образование
  - ПМПК
  - Олимпиада школьников
  - Аттестация руководящих кадров
  - Организация отдыха детей
  - Организация питания в общеобразовательных школах
  - Управление культуры, спорта и молодежной политики
  - Мониторинг системы образования
- Устав
- План работы
- Публичный доклад
- Приказы
- Муниципальные задания
  - Ведомственный перечень муниципальных услуг
  - Муниципальное задание на 2022 год
  - Муниципальное задание на 2021 год
  - Муниципальное задание на 2020 год
  - Муниципальное задание на 2019 год
  - Муниципальное задание на 2018 год
  - Муниципальное задание на 2017 год
  - Муниципальное задание на 2016 год
  - Муниципальное задание на 2015 год
- Муниципальная программа
- Документы по вопросам имущественных и земельных отношений
- Отчеты о реализации ВЦП
- Концепция развития МСО
- Стандарты
- Комплекс мер
- Профилактика и безопасность
  - Пожарная безопасность
  - Безопасность жизни и здоровья
- Ведомственный контроль
- Родительская плата ДОУ
- Мониторинг системы образования
Деятельность
- Независимая оценка результатов обучения
  - Региональный мониторинг качества
  - ГИА
    - Информация для родителей
  - Мониторинг качества образования
- Профориентация обучающихся
- Профилактика правонарушений
  - Нормативные документы
  - Информация Прокуратуры города Стрежевой
    - Прокуратура г. Стрежевого разъясняет, что такое неустойка по алиментам.
    - Прокуратура г. Стрежевого разъясняет порядок рассмотрения обращений граждан.
  - Методические рекомендации
- Инклюзивное образование
  - Нормативные документы
    - Муниципальный уровень
    - Региональный уровень
- Электронное обучение и ДОТ
  - Мониторинг по ИКТ
  - Дистанционное обучение
- Центр ППМС помощи
  - О Центре ППМС помощи
    - Сведения о Центре ППМС помощи
    - Направления деятельности Центра ППМС помощи
    - Документация Центра ППМС помощи
  - Территориальная психолого-медико-педагогическая комиссия
    - Сведения о ТПМПК
    - Направление деятельности ТПМПК
    - Документация ТПМПК
    - Перечень документов, необходимых для записи на ТПМПК
  - Нормативно-правовая база
    - Муниципальная нормативно-правовая база
    - Федеральная нормативно-правовая база
  - Мероприятия Центра ППМС помощи
  - В помощь педагогам
  - Рекомендации родителям
- Отдых и трудоустройство обучающихся
- Год Экологии
- Предоставление государственных и муниципальных услуг
- Персонифицированное дополнительное образование
- Реализация ФГОС
  - ФГОС ДО
  - ФГОС ОО
- Муниципальная методическая служба
  - Городская Школа конкурса профессионального мастерства
  - Конференции, фестивали и семинары для педагогов
  - Конкурсы
    - Конкурсы для образовательных учреждений
    - Профессиональные педагогические конкурсы
    - Конкурсы для обучающихся
  - Документы
  - Педагогический калейдоскоп
- Профильное обучение
- Работы со школами с низкими образовательными результатами
  - Документы
  - Успешные практики
- Психологическая служба в системе общего образования городского округа Стрежевой
- Муниципальная программа по развитию пространственного мышления дошкольников
- Механизмы управления качества
- Муниципальная программа Совершенствование качества дошкольного образования
- Функциональная грамотность
- Торги — аренда муниципального имущества
- Мониторинг качества дошкольного образования
Кадровое обеспечение
- Кадровые документы
- Вакансии
- Резерв
- Аттестация педагогических и руководящих кадров
- Противодействие коррупции
  - Меры по противодействию коррупции
  - Отчеты о выполнении плана мероприятий по противодействию коррупции
  - Протоколы Комиcсии по соблюдению требований к служебному поведению муниципальных служащих
  - Информация о ходе реализации антикоррупционных мер
  - Контакты горячей линии
- Защита персональных данных работников
Новости
Профсоюз
- Об организации
- Для председателей ПК
- Документы
- Отдых
- Профдисконт
Интернет-приёмная
Сайты подведомственных учреждений
Карта сайта
Президентские спортивные игры и состязания
- Президентские спортивные игры
  - 2021-2022 учебный год
  - 2020-2021 учебный год
  - 2019 — 2020 учебный год
  - 2018 — 2019 учебный год
  - 2017 — 2018 учебный год
    - Муниципальный этап
  - 2016 — 2017 учебный год
    - Школьный этап
    - Муниципальный этап
  - 2015 — 2016 учебный год
    - Школьный этап
    - Муниципальный этап
- Президентские состязания
  - 2020 — 2021 учебный год
  - 2019 — 2020 учебный год
  - 2018 — 2019 учебный год
  - 2017 — 2018 учебный год
    - Муниципальный этап
  - 2016 — 2017 учебный год
    - Школьный этап
    - Муниципальный этап
  - 2015 — 2016 учебный год
    - Школьный этап
    - Муниципальный этап
Зачисление в детский сад
Зачисление в первый класс
Летняя кампания
Реализация концепции развития математического образования
Стрежевому 50 лет
Добро пожаловать на портал государственных услуг Томской области!
Национальный проект «Образование»
- Отчеты
Пушкинская карта
Доброшкола

Методики, которые могут применяться для диагностики детей с СДВГ.

Методики, которые могут применяться для диагностики детей с СДВГ.

Объект диагностики	Направление диагностики	Методика, Автор	Источник
Дети	Постановка диагноза	Диагностические критерии по классификации DSM — IV	Заваденко Н.Н. Гиперактивность и дефицит внимания в детском возрасте. – М., 2005
	Внимание	Модификация метода Пьерона-Рузера	Ануфриев А.Ф., Костромина С.Н. Как преодолеть трудности в обучении детей. – М., 1999
		Тест Тулуз-Пьерона	Сиротюк А.Л. Синдром дефицита внимания с гиперактивностью. – М., 2008
		«Найди и вычеркни»(адаптация Е.В. Доценко)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		«Домик»(Н. И. Гуткина)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		«Проставь значки»	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		«Запомни и расставь точки»	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		Методика «ДА и НЕТ» (Е.Е. Кравцова)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
	Память	«10 слов» (А.Р. Лурия)	Бобченко Т.Г., Пронина Е.В. Организация производственной практики в дошкольном образовательном учреждении. – Владимир, 2008.
	Мышление	«Лабиринт»	Павлова Т. Л. Диагностика готовности ребенка к школе. – М., 2007 Ануфриев А.Ф., Костромина С.Н. Как преодолеть трудности в обучении детей. – М., 1999
		«Раздели на группы» (А.Я Иванова, адаптация Е.В.Доценко)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		«Исключение лишнего» (предметный вариант)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
		«Обведи контур» (исследование наглядно-действенного мышления)	Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.
	Эмоциональная сфера	Рисуночные тесты: «Рисунок семьи», «Несуществующее животное»	Венгер А.П. Психологические рисуносные тесты. – М., 2003.
	Самооценка	Методика «Лесенка» (В. Г. Щур)	Широкова Г.А. Практикум для детского психолога. — Ростов-на-Дону, 2006. Бобченко Т.Г., Пронина Е.В. Организация производственной практики в дошкольном образовательном учреждении. – Владимир, 2008.
	Координация движений	Проба на реципрокную координацию (А.Р. Лурия)	Глозман Ж.М., Потанина А.Ю., Соболева А.Е. Нейропсихологическая диагностика в дошкольном возрасте. – СПб., 2008.

Исследование моторики и координации движений и детей. (Н.Н. Заваденко)	Заваденко Н.Н. Гиперактивность и дефицит внимания в детском возрасте. – М., 2005.
Самоконтроль и произвольность	Тест самоконтроля и произвольности	Сиротюк А.Л. Синдром дефицита внимания с гиперактивностью. – М., 2008
Родители		Анкета для родителей (Заваденко Н.Н. , 2005)	Заваденко Н.Н. Гиперактивность и дефицит внимания в детском возрасте. – М., 2005.
Родители		Анкета для родителей	Брязгунов И.П., Касатикова Е.В. Непоседливый ребенок. – М., 2001
Педагоги		Анкета для педагогов	Брязгунов И.П., Касатикова Е.В. Непоседливый ребенок. – М., 2001
Педагоги		Выявление синдрома дефицита внимания	Шарапановская Е.В. Воспитание и обучение детей с ММД и ПШОП. – М., 2005

Диагностические критерии СДВГ по классификации DSM — IV

Заваденко Н.Н. Гиперактивность и дефицит внимания в детском возрасте. – М., 2005

Несоответствующие нормальным возрастным характеристикам и свидетельствующие о недостаточных адаптационных возможностях:
Первые симптомы постоянно сохраняются на протяжении как минимум 6 месяцев в такой степени выраженности, которая свидетельствует о плохой адаптации ребенка.
Недостаточная адаптация проявляется в различных ситуациях и видах окружающей обстановки (дома и в школе), несмотря на соответствие уровня интеллектуального развития нормальным возрастных показателям.

Для постановки диагноза необходимо наличие следующих симптомов, приведенных в разделах I и II:

Невнимательность

2. Обычно с трудом сохраняет внимание при выполнении заданий или во время игр.

3. Часто складывается впечатление, что ребенок не слушает обращенную к нему речь.

8. Легко отвлекается на посторонние стимулы.

9. Часто проявляет забывчивость в повседневных ситуациях.

Гиперактивность

1. Часто наблюдаются беспокойные движения в кистях и стопах; сидя на стуле, ребенок крутится, вертится.

4. Обычно не может тихо, спокойно играть или заниматься чем-либо на досуге.

5. Часто находится в постоянном движении и ведет себя так, «как будто к нему прикрепили мотор».

6. Часто бывает болтливым.

Импульсивность

7. Часто отвечает на вопросы не задумываясь, не выслушав их до конца.

8. Обычно с трудом дожидается своей очереди в различных ситуациях.

9. Часто мешает другим, пристает к окружающим (например, вмешивается в беседы или игры).

Методика изучения концентрации и устойчивости внимания
(модификация метода Пьерона — Рузера)

Ануфриев А.Ф., Костромина С.Н. Как преодолеть трудности в обучении детей. – М., 1999

Инструкция:«Закодируйте таблицу, расставив в ней знаки по образцу».

образец 1

таблица 1

Анализ результатов: Фиксируется количество ошибок и время, затраченное на выполнение задания.

Тест Тулуз-Пьерона

Сиротюк А.Л. Синдром дефицита внимания с гиперактивностью. – М., 2008

Применяется для обследования детей от 6 лет.

Инструкция: «Внимание! Слева в верхней части Ваших ответных бланков нарисованы два квадратика-образца. С ними надо сравнивать все остальные квадратики, нарисованные на бланке. Строчка, находящаяся сразу под образцами и не имеющая номера – тренировочная строчка (черновик). На ней Вы сейчас попробуете, как надо выполнять задание. Необходимо последовательно сравнивать каждый квадратик тренировочной строки с образцами. В том случае, если квадратик тренировочной строки совпадает с каким либо из образцов, его следует зачеркнуть одной вертикальной черточкой. Если такого квадратика среди образцов нет, то его следует подчеркнуть (проговаривание инструкции необходимо сопровождать демонстрацией соответствующих действий). Сейчас вы будете последовательно обрабатывать все квадратики тренировочной строчки, зачеркивая совпадающие с образцами и подчеркивая несовпадающие. Работать необходимо строго по инструкции.

Нельзя:

Сначала вычеркнуть все квадратики, совпадающие с образцами, а потом подчеркнуть оставшиеся.
Ограничиться только вычеркиванием квадратиков.
Подчеркивать сплошной чертой, если подряд встречаются несовпадающие с образцами квадратики.
Выполнять инструкцию наоборот: подчеркивать совпадающие и вычеркивать несопадающие с образцами квадратики».

Для каждой строчки подсчитывается:

Общее количество обработанных квадратиков (включая ошибки).
Количество ошибок.

Номер строки	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
Количество обработанных знаков
Количество ошибок

Скорость выполнения теста ( V ) – общая сумма обработанных знаков делится на количество рабочих строчек.
Коэффициент точности выполнения теста (или показатель концентрации внимания) – отношение правильно обработанных знаков к общему числу обработанных знаков.
Устойчивость внимания

Где у_i– количество ошибок в строке, α – среднее количество ошибок в строке, n – количество рабочих строчек.

Возрастные нормативы скорости выполнения теста Тулуз-Пьерона

Возрастная группа	Патология	Слабая	Возрастная норма	Хорошая	Высокая
6-7 лет	0 — 14	15 – 17	18 — 29	30 — 39	40 и более
1 класс	0 — 19	20 — 27	28 — 36	37 — 44	45 и более
2 класс	0 — 22	23 — 32	33 — 41	42 — 57	58 и более
3 класс	0 — 15	16 — 25	26 — 36	37 — 48	49 и более

Возрастные нормативы точности выполнения теста Тулуз-Пьерона

Возрастная группа	Патология	Слабая	Возрастная норма	Хорошая	Высокая
6-7 лет	0,88 и менее	0,89 – 0,90	0,91 – 0,95	0,96 – 0,97	0,98 – 1,0
1-2 класс	0,89 и менее	0,90 – 0,97	0,92 – 0,95	0,96 – 0,97	0,98 – 1,0
3 класс	0,89 и менее	0,90 – 0,91	0,92 – 0,93	0,94 – 0,96	0,97 – 1,0

Точность выполнения теста связана с концентрацией внимания, однако может зависеть и от следующих характеристик: переключение внимания, объем внимания, оперативная память, визуальное мышление, личностные характеристики. Если ошибки возрастют пропорционально расстоянию от образцов, т.е. по мере продвижения вправо и вниз на ответном бланке, то нарушены объемныех характеристики внимания, сужено поле внимания. Выпадение или подмена образцов типичны для ослабленной оперативной памяти. Ошибки, связанные с одновременным вычеркиванием квадратиков, как соответсвующих образцам, так и тех, которые им зеркальны или симметричны относительно вертикальной оси, свидетельствуют о недостатках визуального мышления и анализа, а также несформированности разделения право-левой ориентации.

Методика «Найди и вычеркни»
(адаптация Е.В. Доценко)

Психодиагностика детей в дошкольных учреждениях (методики, тесты, опросники). Сост. Е.В. Доценко. – Волгоград, 2007.

Для исследования внимания использовалась методика «Найди и вычеркни», один из вариантов «корректурной пробы», общий принцип которой был разработан Б. Бурдоном в 1895 г. Применение корректурной пробы для диагностики синдрома дефицита внимания с гиперактивностью предлагают И. П. Брязгунов и Е.В. Касатикова [3], Л.А. Ясюкова [17], поскольку нарушение внимания является характерной особенностью синдрома гиперактивноси. Выбор этой методики обосновывается тем, что тестовое задание в этой методике предназначено для оценки переключения и распределения внимания ребенка. Эта методика адаптирована для детей дошкольного возраста, ее можно проводить в виде игры, в ней использованы знакомы детям изображения.

Ребенку показывается бланк, на котором в случайном порядке даны изображения простых фигур: треугольник, прямоугольник, флажок, круг, звезда, половинка круга.

Инструкция: « Сейчас мы с тобой поиграем в такую игру: я покажу тебе картинку, на которой нарисовано много разных фигурок. Когда я скажу тебе «начинай», ты по строчкам этого рисунка начнешь искать и зачеркивать те фигурки, которые я назову. Искать и зачеркивать их надо до тех пор, пока я не скажу слово «стоп». Ты должен сразу остановиться и показать, какую фигуру увидел последней. После этого я отмечу это место и снова скажу «начинай». После этого ты продолжишь делать то же самое – искать и вычеркивать фигуры. Так будет несколько раз, пока я не скажу «конец». На этом игра закончится».

Ребенок работает 2,5 минуты, в течении которых 5 раз через каждые 30 секунд ему говорят «стоп».

Для проведения этой методики необходим бланк, секундомер, карандаш для ребенка и ручка для экспериментатора.

Фамилия, имя __________________________________________ Возраст _____________

Дата обследования _________________________

Обработка результатов

№	Просмотрено изображений N	Количество ошибок n	Продуктивность и устойчивость S=0,5xN – 2,8xn/t (t=30 и 150)
1
2
3
4
5
Общ

Фамилия, имя __________________________________________ Возраст _____________

Дата обследования _________________________

Обработка результатов

№	Просмотрено изображений N	Количество ошибок n	Продуктивность и устойчивость S=0,5xN – 2,8xn/t (t=30 и 150)
1
2
3
4
5
Общ

Обработка и оценка результатов. При обработке определяется количество фигур, просмотренных ребенком в течении 2,5 минут, а также отдельно за каждый 30-сек интервал. По формуле определяется общий показатель развитости продуктивности и устойчивости внимания:

S = 0.5 х N – 2.8 xt /t

Где S – показатель продуктивности и устойчивости внимания

N – количество изображений , просмотренных ребенком за время работы

t – время работы

n – количество ошибок, допущенных за время работы. Ошибками считаются пропущенные нужные или зачеркнутые ненужные изображения.

По показателям строится график, на основе анализа которого можно судить о динамике изменения во времени продуктивности и устойчивости внимания ребенка.

Рисунок 1. Варианты графиков, показывающих динамику продуктивности и устойчивости внимания по методике «Найди и вычеркни»

На рисунке № 1 представлены различные зоны продуктивности и типичные кривые, которые могут быть получены в результате психодиагностики внимания ребенка по данной методике.

График динамики продуктивности и устойчивости внимания

1,25
1,00
0,75
0,50
0,25
0,00

0,5 1,0 1,5 2,0 2,5

Методика «Домик»

(Н.И. Гуткина).

Методика «Домик» позволяет выявить умение ребенка ориентироваться в своей работе на образец, умение точно скопировать его, выявляет особенности развития произвольного внимания, пространственного восприятия, сенсомоторной координации и тонкой моторики руки. И.П. Брязгунов рекомендует использовать в комплексном обследовании детей с гиперактивностью широко применяемые в психологической практике рисуночные техники. Эта методика рассчитана на детей 5 – 10 лет.

Методика «Домик» представляет собой задание на срисовывание картинки, изображающей домик, отдельные детали которого составлены из прописных букв. Материал: картинка, изображающая домик, лист А4, простой карандаш.

Инструкция: «Перед тобой лежит лист бумаги и карандаш. На этом листе нарисуй пожалуйста, точно такую же картинку, которую ты видишь на этом рисунке (перед ребенком кладется листок – «Домик»). Не торопись, будь внимательным, постарайся, чтобы твой рисунок был точно такой же, как этот на образце. Если ты что-то не так нарисуешь, то стирать не надо, а надо поверх неправильного или рядом нарисовать правильно. Тебе понятно задание? Тогда начинай рисовать». По окончании работы ребенку предлагается проверить, все ли у него верно.

Обработка результатов производится путем подсчета баллов, начисляемых за ошибки. Безошибочное копирование оценивается в 0 баллов.

Ошибками считаются:

1. Отсутствие каких-либо деталей рисунка (4 балла)

2. Увеличение отдельных деталей рисунка более чем в 2 раза (3 балла)

3. Неправильно изображенный элемент рисунка (2 балла)

4. Неправильное расположение деталей в пространстве рисунка (1 балл)

5. Отклонение прямых линий более чем на 30 градусов от заданного направления (1 балл)

6. Разрывы между линиями в тех метах, где они должны быть соединены (1 балл за каждый разрыв).

7. Залезание линий одна на другую (1 балл за каждое залезание).

При анализе рисунка так же надо обращать внимание на характер линий, которые могут говорить как о развитии мелкой моторики, так и о личностных особенностях ребенка. Хорошее выполнение рисунка оценивается как «0» баллов. Таким образом, чем хуже выполнено задание, тем выше полученная испытуемым суммарная оценка. Но при интерпретации результатов эксперимента необходимо учитывать возраст испытуемого. Так, дети 5 лет почти не получают оценку «0» из-за недостаточной зрелости мозговых структур, отвечающих за сенсомоторную координацию.

Методика «Домик» *

(Н.Н. Гуткиной)

Фамилия, имя _________________________________ Возраст ________________

Дата обследования ______________

Баллы	Ошибки	Выполнение
0	нет
4	Отсутствует какая-либо деталь: — правая половина забора — левая половина забора — дым — труба на крыше — крыша — штриховка на крыше — окно — линия основания домика
3	Увеличение отдельных деталей рисунка более чем в 2 раза (за каждую деталь)
2	Неправильно изображенный элемент рисунка Количество неважно.
1	Неправильное расположение деталей в пространстве рисунка: — Забор не на одной линии с домом — Смещение трубы к левому углу крыши — Смещение окна в сторону от центра — Расположение дыма более чем на 30 градусов отклоняется от горизонтальной линии — Основание крыши по размеру соответствует основанию домика, а не превышает его
1	Отклонение прямых линий более чем на 30 градусов от заданного направления
1	Разрывы между линиями в тех местах, где они должны быть соединены (1 балл за каждый разрыв) Если линии штриховки крыши не доходят до линии крыши (1 балл за штриховку в целом)
1	Залезание линий одна на другую (1 балл за каждое залезание)
	Сумма баллов

Методика «Проставь значки»

Выбор этой методики обусловлен тем, что тестовое задание в этой методике предназначено для оценки переключения и распределения внимания ребенка. Перед началом выполнения задания мы показывали ребенку рисунок 2 и объясняли, как с ним работать.

Инструкция: «Эта работа заключается в том, чтобы в каждом из квадратиков, треугольников, кружков и ромбиков ты должен проставить тот знак, который задан вверху на образце, т.е., соответственно, галочку, черту, плюс или точку».

Дети непрерывно работали, выполняя это задание в течение двух минут, а общий показатель переключения и распределения внимания каждого ребёнка определялся по формуле:

гдеS – показатель переключения и распределения внимания;

N – количество геометрических фигур, просмотренных и помеченных соответствующими знаками в течение двух минут;

n – количество ошибок, допущенных во время выполнения задания. Ошибками считались неправильно проставленные знаки или пропущенные, т. е. не помеченные соответствующими знаками, геометрические фигуры. Результаты исследования отражены в диаграмме диагностики внимания детей с СДВГ и с нормой развития (см. диаграмма 1).

Методика «Запомни и расставь точки»

Выбор этой методики обусловлен тем, что с помощью данной методики оценивается объём внимания ребёнка. Для этого использовался стимульный материал, изображённый на рисунке 3.

Лист с точками предварительно разрезался на 8 малых квадратов, которые затем складывались в стопку таким образом, чтобы вверху оказался квадрат с двумя точками, а внизу – квадрат с девятью точками (все остальные идут сверху вниз по порядку с последовательно увеличивающимся на них числом точек).

Перед началом эксперимента ребенок получал следующую инструкцию:

«Сейчас мы поиграем с тобой в игру на внимание. Я буду тебе одну за другой показывать карточки, на которых нарисованы точки, а потом ты сам будешь рисовать эти точки в пустых клеточках в тех местах, где ты видел эти точки на карточках».

Далее ребенку последовательно, на 1–2 сек, показывалась каждая из восьми карточек с точками сверху вниз в стопке по очереди и после каждой очередной карточки предлагалось воспроизвести увиденные точки в пустой карточке за 15 сек. Это время давалось ребенку для того, чтобы он смог вспомнить, где находились увиденные точки, и отметить их в пустой карточке.

Методика Е.Е. Кравцовой «Да и нет».

Цель: выявить уровень сформированности контекстного общения со взрослыми у детей 6 – 7 летнего возраста.

Метод: эксперимент, беседа.

Материал: два комплекта вопросов.

Процедура проведения.

Методика Е.Е. Кравцово построена на основе общеизвестной детской игры в фанты. Согласно инструкции ребенок должен отвечать на вопросы экспериментатора с таким расчетом, что требуют употребления именно запрещенных слов. Предполагается, что дети, утратившие непосредственность поведения, смогут перейти от импульсивных ответов, на которые провоцировал прямой смысл задаваемых вопросов, к ответам, соответствующим правилам игры. В этом случае количество верных ответов становится прямым показателем произвольности в общении.

Эксперимент состоит из трех серий. Проводится индивидуально, ответы протоколируются.

Первая серия. Дети отвечают на вопросы взрослого, не используя слов «да», «нет». Экспериментатор объясняет ребенку правила игры, приводит примеры вопросов и ответов на них, задает пробные вопросы, а затем переходит к собственно игре.

Всего ребенку задается 25 вопросов: 20 провоцирующих и 5 нейтральных. В этой серии экспериментатор никак не оценивает ответы детей и на их прямые вопросы «Правильно?» не отвечает. По окончании игры в этой серии ребенок должен повторить правила игры, а затем оценить свои ответы, то есть сказать, использовал он или нет запрещенные слова.

Вторая серия. Взрослый задает детям аналогичные вопросы (но не те же, что в первой серии, а из второго набора). В отличие от первой серии, после каждого ответа дается оценка его верности – соответствия правилам игры. Если ребенок отвечает неверно, то экспериментатор забирает у него фант. Фантами могут служить, например, игрушки, разрезные картинки.

Третья серия. Детям предлагаются вопросы, аналогичные тем, которые задавались в предыдущих сериях. Однако, отвечать на эти вопросы дети должны только после «знака» экспериментатора. Взрослый подавал «знак» через десять секунд после каждого вопроса. Если дети пытаются отвечать на вопрос, не дожидаясь «знака», то экспериментатор останавливает их и обращает внимание на то, что «знака» еще не было и отвечать пока нельзя.

Обработка данных.

По результатам эксперимента для каждой возрастной группы вычисляют среднее количество верных ответов и среднее время работы, выделяют самые трудные и самые легкие вопросы, определяют количество детей в каждой группе, правильно оценившие свои ответы.

На основании полученных данных выявляют уровень сформированности контекстного общения ребенка со взрослыми. Рассматривают результативность деятельности детей в эксперименте (количество верных ответов) во взаимосвязи с показателем уровня произвольности в общении со взрослым.

Вопросы к методике «Да и нет не говорите»

(первый комплект)

Ты любишь смотреть мультфильмы?
Ты видел когда-нибудь кошку?
Солнышко какого цвета?
Ты сейчас ешь конфету?
Днем есть на небе звезды?
Сейчас ночь?
Завтра ты пойдешь в школу?
В каком городе ты живешь?
Когда выходной, ты ходишь в детский сад?
Птички в норках живут?
Может ли кошка съесть мышку?
Рыбки живут в воде?
После зимы наступает осень?
Летом в пальто ходят?
Ты любишь рисовать?
На день рождения тебе подарили подарок?
Как зовут твоего друга?
Снег летом бывает?
Ты хочешь стать космонавтом (артисткой)?
Ты делаешь утром зарядку?
Игрушки живые?
Какого цвета халат у врача?
Ты сейчас спишь?

Вопросы к методике «Да и нет не говорите»
(второй комплетк)

Сейчас идет дождь?
Ты красивый?
Ты умеешь разговаривать?
Какого цвета небо?
У тебя есть нос?
Ты любишь жевательную резинку?
Ты хотел бы уехать в Америку?
Купить тебе самолет?
Где живут лягушки?
Хочешь стать волшебником?
Пойдешь ко мне жить?
Любишь папу с мамой?
У тебя есть кот?
Тебе нравится в садике?
Сколько ножек у стола?
Хочешь стать летчиком?
Сейчас весна?
Зимой шуба греет?
Солнце светит всегда?
Когда снег бывает?
Белые медведи живут на севере?
У тебя есть бабушка?
Вода мокрая?
Тебя зовут Сережа?
Кем ты хочешь стать?

Методика «10 слов» (А. Р. Лурия).

Бобченко Т.Г., Пронина Е.В. Организация производственной практики в дошкольном образовательном учреждении. – Владимир, 2008.

Методика предназначена для изучения развития речевой кратковременной непосредсвенной механической памяти, динамики запоминания. Методика может быть использована для обследования детей, начиная с 5 лет. Проводится индивидуально.

Содержание методики включает инструкцию, стимульный материал, бланк для фиксирования ответов.

Стимульный материал представлен 10 именами существительными, не связанными между собой по смыслу, значение которых знакомо дошкольнику: лес, хлеб, окно, стул, вода, брат, конь, гриб, игла, мед.

Провдится в 5 этапов

Инструкция: «Сейчас я прочту 10 слов. Слушать надо внимательно. Когда окончу читать, сразу же повтори столько слов, сколько запомнишь. Повторять можно в любом порядке. Понятно?»

Экспериментатор читает слова медленно, четко. Когда испытуемый повторяет слова, экспериментатор в своем протоколе ставит крестики под этими словами. Записываются в соответствующей ячейке слова, которые ребенок запомнил с ошибкой.

Затем экспериментатор продолжает инструкцию (второй этап). Продолжение инструкции. «Сейчас я снова прочту те же самые слова, и ты опять должен повторить их — и те, которые уже назвал, и те, которые в первый раз пропустил,— все вместе, в любом порядке».

3 – 5 этапы. Инструкция: «Еще раз».

Ответы ребенка не исправляются и не критикуются. В конце надо обязательно похвалить: «Задание было трудное, ты молодец, много запомнил».

Количественный анализ

1. Подсчитать количество правильно воспроизведенных слов после каждого предъявления – Р_n, где n – порядковый номер предъявления

2. Вычислить показатель продуктивности запоминания – среднее значение правильно воспроизведенных слов

P_cp = (P₁ + P₂ + P₃ + P₄ + P₅) / 5

3. Построить диаграмму «Динамики продуктивности запоминания».

Качественный анализ

Уровень патологии – 0-1 слово
Слабый уровень, субнорма – 2 слова
Средний уровень – 3-4 слова
Хороший уровень – 5-7 слов
Высокий уровень – 8-10 слов

Таким образом, для 5-7 летних детей показатель продуктивности запоминания в норме равен 3-5 единицам.

По форме кривой можно делать некоторые выводы относительно особенностей запоминания детей. У здоровых детей количество правильно воспроизведенных слов планомерно увеличивается.

Если количество правильно воспроизведенных слов на одном из этапов начинает планомерно уменьшаться, это свидетельствует о повышенной утомляемости, снижении концентрации внимания.

Кривая, имеющая вид плато, характерна для эмоционально вялых детей, не заинтересованных в том, чтобы запомнить лучше.

Неустойчивая продуктивность запоминания и зигзагообразная кривая имеет место при неустойчивом внимании.

Анализ допущенных ошибок.

Если ребенок заменяет исходные слова близкими по смыслу «конь» — «лошадка», «хлеб» — «булка», «брат» — «мальчик» и т.д. – это значит, что происходит образное кодирование информации, и зрительная память дошкольника доминирует над аудиальной. Ребенок запоминает не то, что слышит, а тот образ, которые при этом у него активизируется. В этом случае понимать и запоминать информацию ребенок будет неточно, искаженно. В этом случае при проведении коррекционно-формирующей работы важно контролировать точность воспроизведения информации ребенком, следить за правильностью его речи, уточнять значения слов.

Употребление уменьшительно-ласкательных форм слова – «братик», «грибок», «лошадка» — характерно для инфантильных детей.

Застревание на ошибках – повторяют одну и ту же ошибку от этапа к этапу – свидетельствует об инертности познавательных процессов.

Динамика продуктивности запоминания.

У здоровых детей количество правильно воспроизведенных слов планомерно увеличивается.

Кривая, имеющая форму плато, характерна для эмоционально вялых детей, не заинтересованных в том, чтобы запомнить лучше.

Неустойчивая продуктивность запоминания и зигзагообразная кривая имеют место при неустойчивом внимании.

При написании выводов учитываются результаты количественного и качественного анализа.

Протокол обследования

Фамилия, имя _______________________________ Возраст ________________

Дата обследования _____________________________

Этап

Лес

Хлеб

Окно

Стул

Вода

Брат

Конь

Гриб

Игла

Мёд

Лишние слова

Р_n

Р_ср

Методика «Лабиринт»

Павлова Т. Л. Диагностика готовности ребенка к школе. – М., 2007

Ануфриев А.Ф., Костромина С.Н. Как преодолеть трудности в обучении детей. – М., 1999

Методика направлена на выявление уровня сформированности наглядно-образного (в частности, наглядно-схематического) мышления (умения пользоваться схемами и условными изображениями при ориентировке в ситуации).

Материал представляет собой изображение полянок с разветвленными дорожками и домиками на их концах, а также «писем», условно указывающих путь к одному из домиков, помещенных под полянкой. Вводные задачи состоят из двух задач — задачи «А» и задачи «Б». Решение каждой из задач проверяется экспериментатором. Далее следуют основные задачи. На рисунках к задачам 1-2 изображены только разветвленные дорожки и домики в конце них; на всех остальных каждый участок дорожки помечен ориентиром, причем в задачах 3-4 одинаковые по содержанию ориентиры даны в разной последовательности; в задачах 5-6 каждое разветвление помечено двумя одинаковыми ориентирами. В задачах 7-10 два одинаковых ориентира даны в разных последовательностях и расставлены не на отрезках пути, а в точках разветвления. На «письмах» к задачам 1-2 изображена ломаная линия, показывающая направление пути, по которому должен вестись поиск. В «письмах» к задачам 3-6 в определенной последовательности снизу вверх даны изображения тех предметов, мимо которых надо идти. В «письмах» к задачам 7-10 изображены одновременно и повороты пути (ломаная линия), и необходимые ориентиры.

Чтобы найти нужный путь, ребенок должен учитывать в задачах 1-2 направления поворотов, в задачах 3-4 — характер ориентиров и их последовательность, в задачах 5-6 — сочетания ориентиров в определенной последовательности, в задачах 7-10 — одновременно ориентиры и направления поворотов.

Инструкция

Детям вначале дают две вводные задачи, затем по порядку задачи 1-10. Инструкция дается после того, как дети открыли первый листок тетради с вводной задачей.

«Перед вами полянка, на ней нарисованы, дорожки и домики в конце каждой из них. Нужно правильно найти один домик и зачеркнуть его. Чтобы найти этот домик, надо посмотреть на письмо. (Экспериментатор указывает на нижнюю часть страницы, где оно помещено.) В письме нарисовано, что надо идти мимо травки, мимо елочки, а потом мимо грибка, тогда найдете правильный домик. Найдите этот домик, а я посмотрю, не ошиблись ли» .

Проверяющий смотрит, как решил задачу ребенок, и, если нужно, объясняет и исправляет ошибки.

Переходя ко второй задаче, проверяющий предлагает детям перевернуть листок и говорит:

«Здесь тоже два домика, и опять нужно найти домик. Но письмо тут другое: в нем нарисовано, как идти и куда поворачивать. Нужно опять идти от травки прямо, а потом повернуть в сторону» .

Проверяющий при этих словах проводит рукой по чертежу в письме». Решение задачи снова проверяется, ошибки объясняются и исправляются.

Затем идет решение основных задач. К каждой из них дается краткая дополнительная инструкция.

К задачам 1-2:

«Вписьме нарисовано, как надо идти, в какую сторону поворачивать. Начинайте двигаться от травки. Найдите нужный домик и зачеркните его» .

К задаче 3:

«Смотрите на письмо. Надо идти от травки, мимо цветочка, потом мимо грибка, потом мимо березки, потом елочки. Найдите нужный домик и зачеркните его».

К задаче 4:

«Смотрите на письмо. Надо пройти от травки, сначала мимо березки, потом мимо грибка, мимо елочки, потом стульчика. Отметьте домик».

К задачам 5-6:

«Будьте очень внимательны. Смотрите на пись -мо, отыскивайте нужный домик и зачеркните его».

К задачам 7-10:

«Смотрите на письмо, в нем нарисовано, как нужно идти, около какого предмета поворачивать и в какую сторону. Будьте внимательны, отыщите нужный домик и зачеркните его».

Оценка результатов.

Оценка производится в сырых баллах без перевода в нормализованную шкалу.

При обработке результатов по каждой из задач №1 – 6 за каждый правильный поворот начисляется 1 балл. Поскольку необходимо сделать 4 поворота, максимальное количество баллов за каждую из задач – 4. В задачах №7 – 10 за каждый правильный поворот начисляется 2 балла, в задачах №7, 8 (два поворота) максимальное количество баллов равно 4; в задачах №9, 10 (три поворота) – 6 баллов. Все оценки, полученные ребенком в отдельных задачах, суммируются.

При оценке результатов необходимо учитывать номер выбранного домика и номер задачи (см. ключ). В месте пересечения их координат указана оценка (в баллах). Номер выбранного домика и оценка заносится в протокол. Все оценки суммируются. Максимальное количество очков — 44.

Образец протокола

ФИО ______________________________________ Дата рождения _________________

Дата обследования ____________________________________

№ задачи	№ домика, указанного испытуемым	Оценка (в баллах)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Суммарный балл

Ключ

№ домиков	№ задачи
	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
1	1	0	0	1	1	0	0	2	4	0
2	1	0	0	1	1	0	0	2	2	0
3	1	0	0	1	1	0	0	4	0	2
4	1	0	0	1	1	0	2	2	0	0
5	2	0	0	2	4	0	0	0	0	0
6	2	0	0	2	3	0	0	0	2	0
7	4	0	0	4	2	0	2	0	0	2
8	3	0	0	3	2	0	0	2	0	4
9	0	2	4	0	0	1	2	0	4	2
10	0	2	3	0	0	1	0	2	2	2
11	0	3	2	0	0	1	0	0	0	4
12	0	4	2	0	0	1	0	0	0	2
13	0	1	1	0	0	3	4	0	0	4
14	0	1	1	0	0	4	2	2	0	6
15	0	1	1	0	0	2	2	0	0	2
16	0	1	1	0	0	2	2	0	2	2
17									2	2
18									2	4
19									0	0
20									2	0
21									6	0
22									4	0
23									2	2
24									2	0
25									0	0
26									2	4
27									0	0
28									2	0
29									0	2
30									0	0
31									4	0
32									2	0

Интерпретация полученных результатов

38-44 балла — дети с детальным соотнесением одновременно двух параметров. Имеют достаточно полные и расчлененные пространственные представления.

31-38 — дети с незавершенной ориентировкой на два параметра (обычно правильно решают первые 6 задач). При учете одновременно двух параметров постоянно соскальзывают к одному. Это обусловлено недостаточной стойкостью и подвижностью в развитии пространственных представлений.

24-31 балл — дети с четкой завершенностью ориентировки только на один признак. Им доступно построение и применение пространственных представлений простейшей структуры.

18-24 — для этих детей характерна незавершенная ориентировка даже на один признак. Они членят задачу на этапы, но к концу работы теряют ориентир. У них только начинает формироваться способ наглядно-образной ориентировки в пространстве.

Менее 18 баллов — дети с неадекватными формами ориентировки. Они предпринимают попытку найти нужный домик, но их выбор случаен. Это обусловлено несформированностью умения соотносить схему с реальной ситуацией, т.е. неразвитостью наглядно-образного мышления.

Нумерация домиков в различных задачах

Приложение к методике «Лабиринт’

Методика «Раздели на группы»
(А.Я Иванова, адаптация Е.В.Доценко).

Цель данной методики – оценка образно-логического мышления ребенка.

Ход исследования: ребенку показывается картинка, на которой нарисованы геометрические фигуры: круги, квадраты, треугольники, ромбы следующих цветов – красные, желтые, синие и белые и двух размеров. Одна и та же фигура при классификации может войти в несколько разных групп.

Инструкция: «Внимательно посмотри на картинку и раздели представленные на ней фигуры на как можно большее число групп. В каждую такую группу должны входить фигуры, выделяемые по одному общему для них признаку. Назови все фигуры, входящие в каждую из групп и по какому признаку они выделены». На выполнение задания отводится 3 минуты.

Оценка результатов:
10 баллов – ребенок выделил все группы фигур за время меньше чем 2 минуты.
8-9 баллов – выделил все группы за время от 2,5 до 3 минут.
6-7 баллов – выделил все группы фигур за время от 2,5 до 3 минут.
4-5 баллов – за время 3 минуты ребенок сумел назвать только от 5 до 7 групп.
2-3 балла – за время 3 минуты ребенок сумел выделить только от 2 до 3 групп.
0-1 балл – за время 3 минуты ребенок сумел выделить не более 1 группы фигур.

Выводы об уровне развития:

10 баллов – очень высокий.

8-9 баллов – высокий.

4-7 баллов – средний.

2-3 балла – низкий.

0-1 балл – очень низкий.

Методика «Раздели на группы» *

Фамилия, имя __________________________________ Возраст ___________

Дата обследования __________________

№	Группы	Отметка о нахождени
1	Треугольники
2	Круги
3	Квадраты
4	Ромбы
5	Красные фигуры
6	Синие фигуры
7	Желтые фигуры
8	Белые фигуры
9	Большие фигуры
10	Малые фигуры
Время выполнения
Балл

Методика «Исключение лишнего»

Предметный вариант

Эта методика предназначена для детей от 4 до 5 лет. Она призвана исследовать процессы образно-логического мышления, умственные операции анализа и обобщения у ребенка.

В методике детям предлагается серия картинок, на которых представлены разные предметы, в сопровождении следующей инструкции:

«На каждой из этих картинок один из четырех предметов является лишним. Внимательно посмотри на картинки и определи, какой предмет и почему является лишним.

На решение отводится 3 минуты.

Оценка результатов.

10 баллов – ребенок решил поставленную перед ним задачу за время, меньшее чем 1 минута, назвав лишние предметы на всех картинках и правильно объяснив, почему они являются лишними.

8-9 баллов – ребенок правильно решил задачу за время от 1 до 1,5 мин.

6-7 баллов – ребенок справился с задачей за время от 1,5 до 2 мин.

4-5 баллов – ребенок решил задачу за время от 2 до 2,5 мин.

2-3 балла – ребенок решил задачу за время от 2,5 до 3 мин.

1. балл – ребенок за 3 мин не справился с заданием.

Выводы об уровне развития

10 баллов – очень высокий

8-9 баллов – высокий

4-7 баллов – средний

2-3 балла – низкий

0-1 балл – очень низкий

Методика «Обведи контур»

Методика предназначена для исследования наглядно-действенного мышления.

Детям дается бланк с рисунком и дается следующая инструкция:

Как можно быстрее и как можно точнее воспроизведи на правой половине этого же рисунка тот контур, который нарисован на его левой части. Все линии надо стараться делать прямыми и точно соединить углы фигур. Желательно также, чтобы контуры фигур были нарисованы в тех же самых местах, где они изображены на рисунках в левой части.

Оценка результатов:

Оценки даются в баллах в зависимости от скорости и качества выполнения задания.

10 баллов – ребенок затратил на выполнение всего задания меньше чем 90 секунд, причем все линии на рисунках прямые и точно соединяют углы фигур. Все линии точно следуют по заданных контурам.

8-9 баллов – на выполнение задания ушло от 90 до 105 секунд. При этом имеет место хотя бы один из следующих недостатков: одна или две линии не являются вполне прямыми; в двух или в трех случаях начертанные линии не вполне правильно соединяют углы фигур; от двух до четырех линий выходят за пределы контура; от четырех до пяти углов соединены неточно.

6-7 баллов – на выполнение задания ушло от 105 до 120 секунд. При этом дополнительно обнаружен хотя бы один из следующих недочетов: три или четыре линии непрямые; от четырех до шести углов соединены не вполне точно; от пяти до шести линий выходят за пределы контура; от шести до семи углов соединены не вполне точно.

4-5 баллов – на выполнение задания затрачено от 120 до 135 секунд. Имеется хотя бы один из следующих недочетов: пять или шесть линий не являются вполне прямыми; от семи до десяти углов соединены не вполне правильно; есть семи или восемь линий, которые не являются вполне прямыми; имеется от восьми до десяти углов, которые соединены не вполне точно.

2-3 балла – на выполнение задания ушло от 135 до 150 секунд. Отмечен хотя бы один из следующих недостатков: от семи до десяти линий непрямые; от одиннадцати до двадцати углов соединены не вполне правильно; от девяти до восемнадцати линий выходят за пределы контура; от одиннадцати до семнадцати углов соединены не вполне правильно.

0-1 балл – на выполнение задания ушло более 150 секунд. Почти все линии, за исключением одной или двух, не являются прямыми; почти все углы, за исключением одного или двух, соединены неправильно.

Выводы об уровне развития:

10 баллов – очень высокий

8-9 баллов – высокий

4-7 баллов – средний

2-3 балла – низкий

0-1 балл – очень низкий.

Обведи контур

Фамилия, имя _______________________________ Дата рождения _____________

Дата обследования _________________________________

Рисунок семьи

Венгер А.П. Психологические рисуносные тесты. – М., 2003.

Этот тест предлагается для выявления особенностей семейных взаимоотношений в восприятии ребенка

Метод используется преимущественно при обследовании детей, начиная с четырехлетнего возраста, но может быть с успехом применен и для выяснения отношения к семейной сфере у взрослого человека.

Проведение тестирования. Лист бумаги кладут перед обследуемым горизонтально. Инструкция: «Нарисуйте на этом листе всю свою семью». Если обследуемый задает вопросы: «А кого рисовать?», «А бабушку рисовать?», «А можно я нарисую своего друга?», «Мою – это значит мою собственную или родительскую, в которой я воспитывался?» (последний вопрос иногда задают взрослые, имеющие собственную семью), – то проверяющий отвечает: «Я не знаю, кто входит в вашу семью. Вы знаете это лучше меня».

В отличие от этого, в ответе на вопрос, рисовать ли себя, следует дать понять, что это желательно, например, можно сказать с полувопросительной интонацией: «Ты ведь член своей семьи?».

По завершении рисунка выясняют, какого члена семьи изображает каждый из нарисованных персонажей. При этом обследующий не должен высказывать собственных предположений. Так, указывая на кого-либо из персонажей, не следует спрашивать: «Это кто, папа?». Вопросы должны звучать нейтрально: «Кто это? А это?». Могут быть дополнительные вопросы типа: «Где все это происходит?», «Что вы делаете?» или «Что делает каждый из тех, кого ты нарисовал?» и т.п. Беседу проводят в свободной форме.

Несуществующее животное

Венгер А.П. Психологические рисуносные тесты. – М., 2003.

Это одна из наиболее информативных рисуночных методик . Ее рекомендуется использовать, начиная со старшего дошкольного возраста (с пяти – шести лет).

Проведение тестирования. Лист бумаги кладется перед обследуемым горизонтально. Инструкция: «Я хочу посмотреть, насколько у вас развиты воображение, фантазия (как ты умеешь фантазировать, воображать). Придумайте и нарисуйте животное, которого на самом деле нет, никогда не было и которого до вас никто не придумал – ни в сказках, ни в компьютерных играх, ни в мультфильмах».

Если обследуемый говорит, что не знает, как рисовать, не умеет, не может ничего придумать и т.п., то надо ободрить его, объяснить, что для этого задания не нужно ничего уметь. Поскольку требуется нарисовать животное, которого на самом деле нет, то совершенно все равно, каким оно получится. Если обследуемый долго думает, не приступая к рисованию, то следует посоветовать ему начать рисовать, как получается, а дальше придумывать по ходу рисования.

Когда обследуемый кончает рисовать, его просят придумать животному название. Его записывают в протоколе. Если придумывание названия вызывает очень большие затруднения, то эту часть задания опускают. При необходимости выясняют, какой части тела (или какому органу) соответствуют те или иные детали изображения.

Бывает, что вместо несуществующего животного изображают обычное, известное, что отражается в его названии (заяц, осел и т.п.). В этом случае нужно попросить сделать еще один рисунок, нарисовав на этот раз животное, которого на самом деле не бывает. Инструкцию при этом полностью повторяют. Если и повторный рисунок представляет собой изображение реального животного, то эту работу прекращают. Если вид нарисованного животного вполне обычен (например, явно изображен заяц), но названо оно необычно (например, сказано, что это «волшебный заяц»), то задание считается успешно выполненным и повторять его не нужно.

Выяснив название животного, проверяющий говорит: «Теперь расскажите про него, про его образ жизни. Как оно живет?». Рассказ записывают, по возможности, дословно. При обследовании подростка или взрослого человека можно предложить ему написать рассказ об образе жизни придуманного животного самостоятельно.

Если в рассказе нет достаточных сведений о животном, то по окончании работы задаются дополнительные вопросы:

• Чем оно питается?

• Где живет?

• Чем обычно занимается?

• Что любит делать больше всего?

• А чего больше всего не любит?

• Оно живет одно или с кем-нибудь?

• Есть у него друзья? Кто они?

• А враги у него есть? Кто? Почему они его враги?

• Чего оно боится, или оно ничего не боится?

• Какого оно размера?

Затем обследуемому предлагают представить, что это животное встретило волшебника, который готов выполнить любые три его желания, и спрашивают, какими могли бы быть эти желания. Все ответы записывают в протоколе.

Беседа о придуманном животном может варьироваться проверяющим в зависимости от особенностей обследуемого и от целей обследования. Приведенный список вопросов – не обязательный, а ориентировочный.

ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ЗАДАНИЯ К ТЕСТУ «НЕСУЩЕСТВУЮЩЕЕ ЖИВОТНОЕ»

Разработанные задания «Злое животное», «Счастливое животное», «Несчастное животное» позволяют выявить: скрытые агрессивные или депрессивные тенденции, реакцию на угрозу («Злое животное»), ценности и стремления обследуемого («Счастливое животное»), характер имеющихся опасений, сознаваемые и неосознанные представления обследуемого о его наиболее острых проблемах («Несчастное животное»). Задания «Злое животное» и «Несчастное животное» хорошо выявляют степень устойчивости обследуемого к стрессам разного рода.

Проведение тестирования. Для каждого дополнительного задания дают отдельный чистый лист бумаги, который кладут перед обследуемым горизонтально. Инструкция к заданию «Злое животное»: «Теперь придумайте и нарисуйте еще одно несуществующее животное. На этот раз не любое, а самое злое и страшное, которое вам удастся придумать». По окончании рисования задают вопрос: «В чем проявляется то, что это животное – самое злое и страшное?». Могут быть заданы и еще какие-либо вопросы о его образе жизни.

Инструкция для задания «Счастливое животное»: «Теперь нарисуйте самое счастливое несуществующее животное, какое вам удастся придумать». Инструкция для задания «Несчастное животное»: «Нарисуйте самое несчастное несуществующее животное, какое вам удастся придумать». По завершении рисунка выясняют, почему нарисованное животное – самое счастливое (несчастное), что именно делает его счастливым (несчастным).

Методика «Лесенка» (В.Г. Щур)

Широкова Г.А. Практикум для детского психолога. — Ростов-на-Дону, 2006.

Методика предназначена для изучения самооценки дошкольника и измеряет уровень ее адекватности.

Диагностика проводится индивидуально.

Процедур диагностики. Ребенку показывают лист бумаги с нарисованной на нем лесенкой с семью ступеньками, где средняя ступенька имеет вид площадки, и объясняют задание.

Инструкция: «Если всех детей рассадить на этой лестнице, то на верхних ступеньках будут хорошие дети: умные, добрые, послушные – чем выше, тем лучше (показать: «хорошие», «очень хорошие», «самые хорошие»). А на трех нижних ступеньках окажутся плохие дети – чем ниже, тем хуже («плохие», «очень плохие», «самые плохие»). На средней ступеньке дети не плохие и не хорошие. Покажи, на какую ступеньку ты поставишь себя. Объясни почему». Для того чтобы легче было выполнять задание, предлагают поместить на ту или иную ступеньку карточку с изображение мальчика или девочки (в зависимости от пола ребенка). После того, как ребенок сделал пометку, его спрашивают: «Ты на самом деле такой или хотел бы быть таким? Отметь, какой ты на самом деле и каким ты хотел бы быть». «Покажи, на какую ступеньку тебя бы поставила мама (воспитательница, папа)».

Используют стандартный набор характеристик: «хороший – плохой», «добрый – злой», «умный – глупый», «смелый – трусливый» и т.д.

В процессе обследования нужно учитывать, как ребенок выполняет задание: испытывает колебания, раздумывает, аргументирует свой выбор. Если ребенок не дает никаких объяснений, ему нужно задать уточняющие вопросы: «Почему ты себя сюда поставил? Ты всегда такой?» и т.д.

Качественный анализ результатов.

Наиболее характерные особенности выполнения задания дошкольниками с завышенной, адекватной и заниженной самооценкой

№	Способ выполнения задания	Тип самооценки
1	Не раздумывая, ставит себя на самую высокую ступеньку, считает, что мама и воспитатель оценивают его так же; аргументируя свой выбор, ссылается на мнение взрослого: «Я хороший. Хороший и больше никакой, это мама так сказала».	Неадекватно завышенная самооценка
2	После некоторых раздумий и колебаний ставит себя на самую высокую ступеньку; объясняя свои действия, называет свои недостатки и промахи, но объясняет их внешними, не зависящими от него причинами; считает, что оценка взрослых в некоторых случаях может быть ниже его собственной: «Я, конечно, хороший, но иногда ленюсь. Мама говорит, что я неаккуратный».	Завышенная самооценка
3	Обдумывая задание, ставит себя на 2 или 3 ступеньку; объясняет свои действия, ссылаясь на реальные ситуации и достижения; считает, что оценка взрослого такая же.	Адекватная самооценка
4	Ставит себя на нижние ступеньки; свой выбор не объясняет или ссылается на мнение взрослого: «Мама так сказала». Из-за высокой тревожности и неуверенности в себе часто отказывается выполнять задание, на все вопросы отвечает: «Не знаю».	Заниженная самооценка

Методика «Лесенка» (В.Г. Щур) *

Фамилия, Имя ___________________________________________ Группа __________

Возраст _______________________ Дата проведения ____________________________

Проба на реципрокную координацию (А.Р. Лурия).

Глозман Ж.М., Потанина А.Ю., Соболева А.Е. Нейропсихологическая диагностика в дошкольном возрасте. – СПб., 2008.

Проба на реципрокную координациюнаправлена на выявление сформированности механизмов серийной организации движений и межполушарного взаимодействия, координации движений. Данная проба проводится с 4 лет, она понятна детям, проводится очень быстро, в игровой форме.

Ход выполнения: исследователь кладет на стол обе кисти, одна из которых сжата в кулак, а у другой распрямлены пальцы. Затем, не меняя местоположения рук на столе, обследователь одновременно одну кисть разжимает, а другую сжимает в кулак. После нескольких показов предлагается ребенку выполнять такие же движения вместе. С 5 лет после нескольких сопряженных движений ребенок может выполнять пробу на реципрокную координацию самостоятельно.

Критерии балловых оценок:
0 баллов – плавные двуручные движения.
0,5 баллов – замедленное вхождение в задание, или неполное сжимание и распрямление ладони, или замедленное, напряженное, но координированное выполнение (один из симптомов)
1 балл – несколько указанных выше симптомов одновременно.
1,5 балл – отставание одной руки или поочередное выполнение с коррекцией после указания на ошибку.
2 балла – отставание одной руки или поочередное выполнение с неполной коррекцией после указания на ошибку.
3 балла – невозможность выполнения данной пробы, симметричное выполнение (уподобление).

Проба на реципрокную координацию *

(Ладонь – кулак)

Фамилия, имя ________________________________________ Возраст __________________

Дата обследования ___________________________

Балл	Проба	Выполнение
0	Плавные двуручные движения
0,5 Один из симптомом	— Замедленное вхождение в задание — неполное сжимание и распрямление ладони — замедленное , напряженное, но координированное выполнение
1 Несколько симптомов одновременно	— Замедленное вхождение в задание — неполное сжимание и распрямление ладони — замедленное , напряженное, но координированное выполнение
1,5	Отставание одной руки или поочередное выполнение с координацией после указания на ошибку
2	Отставание одной руки или поочередное выполнение с неполной координацией после указания на ошибку
3	Невозможность выполнения данной пробы, симметричное выполнение (уподобление)

Исследование моторики и координации движений у детей

Заваденко Н. Н. Гиперактивность и дефицит внимания в детском возрасте. – М., 2005.

Методика состоит из двух основных разделов.

Раздел 1. Задания на ходьбу по линии и удерживание равновесия.

Раздел 2. Задания на чередование движений конечностей.

Результаты выполнения оцениваются в баллах. Во время обследования в таблицах отмечаются оценки за выполнение каждого задания, затем эти оценки суммируются. Рассчитывают три оценки: за выполнение заданий раздела 1, заданий раздела 2 и общая оценка. Кроме того, в разделе 2 регистрируется время выполнения 20 последовательных движений.

Задания на ходьбу по линии и на удержание равновесия

Для проведения необходима четко обозначенная на полу линия шириной 5 см и длиной 2,5 – 3 м. Ребенок должен быть в легкой обуви с мягкой подошвой или без обуви в носках. Сначала ребенку дается первая попытка для тренировки; оценка ставится по результатам второй попытки при выполнении 10 шагов. Шаги не должны быть слишком большими . Фиксируются избыточные движения (вспомогательные, балансирующие движения руками) и число ошибок (отступлений от линии). В 1 и 2 пробах ошибкой считается также опора на всю подошвенную поверхность стопы, в 3 и 4 – промежуток между пяткой и носком. За избыточные движения и каждую ошибку начисляется по 1 баллу.

№	Задание	Избыточные движения: 0 баллов – нет 1 балл — есть	Оценка в баллах (число ошибок)
1	Ходьба на носках, руки опущены вниз	0 1	0 1 2 3 4 5 6 7
2	Ходьба на пятках, руки опущены вниз	0 1	0 1 2 3 4 5 6 7
3	Ходьба приставными шагами вперед. Пятка ставится к носку, руки разведены в стороны	0 1	0 1 2 3 4 5 6 7
4	Ходьба приставными шагами назад (спиной), носок ставится к пятке, руки разведены в стороны	0 1	0 1 2 3 4 5 6 7

В заданных позах необходимо удерживать равновесие в течении 20 с (время фиксируется секундомером). В зависимости от времени, на протяжении которого ребенок способен удерживать равновесие, в правом столбце выставляется соответствующая оценка (в баллах):

0 баллов – 20 и более секунд;

1 балл – от 15 до 19 секунд;

2 балла – от 10 до 14 секунд;

3 балла – от 0 до 9 секунд.

В столбце «избыточные движения» фиксируются вспомогательные установки рук, тенденция к падению, за наличие которых начисляется по 1 баллу.

№	Задание	Избыточные движения 0 баллов – нет 1 балл — есть	Оценка в баллах
			20 с	19-15 с	14-10 с	9-0 с
			0	1	2	3
1	Проба Ромберга (ступни ставятся рядом, глаза закрыты, руки вытянуты вперед, пальцы разведены): а) вспомогательные установки рук; б) тенденция к падению	0 1
2	Усложненная проба Ромберга (пятка приставлена к носку, глаза закрыты, руки вытянуты вперед, пальцы разведены): а) вспомогательные установки рук; б)тенденция к падению	0 1
3	Стояние на правой ноге (руки опущены вниз, левая нога поднята и согнута в колене): а) вспомогательные установки рук; б)тенденция к падению	0 1
4	Стояние на левой ноге (руки опущены вниз, правая нога поднята и согнута в колене): а) вспомогательные установки рук; б)тенденция к падению	0 1

Задания на чередование движений конечностей

Ребенок и исследователь сидят на стульях напротив друг друга. Высота стула для ребенка должна быть подобрана в соответствии с его ростом, так чтобы его ступни касались пола своей поверхностью. Каждая серия движений сначала показывается ребенку, а затем воспроизводится им для тренировки. Ребенку объясняют, что он должен ритмично повторять движение много раз и делать это так быстро, как только возможно. Оцениваются время (с помощью секундомера) и качество выполнения 20 последовательных движений. Отмечается наличие синкинезий (одновременных лишних движений), гиперметрии (избыточности движений по амплитуде) и дизритмии (нарушений ритма при повторении движений):

0 баллов – нет

1 балл – есть.

Виды синкинезий: сопутствующие движения головой и других конечностей, орофациальные – сокращения мышц лица (мимических) и мышц вокруг рта, зеркальные – аналогичные движения в противоположной конечности.

№	Задание	Время выполнения в секундах	Движения головы, конечностей	Орофациальные	Зеркальные	Гипермертрия движений	Дизритмия движений
1	Постукивание носком стопы о пол: справа слева		0 1	0 1	0 1	0 1	0 1
2	Хлопки ладонью по колену: справа слева		0 1	0 1	0 1	0 1	0 1
3	Удары указательным пальцем о большой палец: справа слева		0 1	0 1	0 1	0 1	0 1

Последовательные удары 2 – 5-го пальцев о большой палец

справа

слева

0 1

Результаты исследования моторики и координации движений у здоровых мальчиков, М ± σ

(М – средняя величина, σ – стандартное отклонение)

Исследованные показатели

5-6 лет,

n= 19

7-8 лет,

n = 34

9-10 лет

n = 28

11-12 лет

n = 42

13-14 лет

n = 46

Оценка (в баллах)

Общая сумма баллов

26,6±4,6

16,4±0,1

10,0±6,0

9,9±4,6

8,0±4,0

Раздел 1. Задания на ходьбу и равновесие

11,3±4,9

5,8±3,1

3,5±2,7

4,1±2,3

2,6±1,9

Раздел 2. Задание на чередование движений

15,7±5,3

10,6±5,0

6,7±5,6

6,0±3,1

5,4±3,3

Время выполнения 20 последовательных движений (в сек)

Постукивания носком стопы

справа

слева

9,5±2,4

9,2±2,0

8,0±2,0

8,3±2,2

6,9±1,5

6,9±1,2

6,5±1,5

6,9±1,8

6,2±1,5

6,2±1,7

Хлопки ладонью по колену

справа

слева

7,3±1,4

7,3±1,1

7,3±2,0

7,0±2,1

5,3±1,5

5,2±1,7

6,1±1,5

6,3±1,7

6,0±1,5

6,0±1,6

Удары указательного пальца о большой палец

справа

слева

8,1±1,3

8,1±1,4

7,5±1,5

7,4±1,8

6,5±1,4

6,3±1,7

6,3±1,4

6,4±2,1

5,8±1,4

5,7±1,5

Последовательные удары 2-5 пальцев о большой палец

справа

слева

15,4±4,0

16,3±4,4

14,0±2,8

13,9±3,4

11,9±3,0

11,3±3,5

8,4±1,8

7,7±2,1

7,4±2,0

7,1±2,3

Результаты исследования моторики и координации движений у здоровых девочек, М ± σ

(М – средняя величина, σ – стандартное отклонение)

Исследованные показатели

5-6 лет,

n= 25

7-8 лет,

n = 28

9-10 лет

n = 20

11-12 лет

n = 42

13-14 лет

n = 47

Оценка (в баллах)

Общая сумма баллов

22,7±8,9

14,2±6,0

9,1±5,5

7,6±4,1

Раздел 1. Задания на ходьбу и равновесие

10,3±7,1

5,1±4,4

4,2±3,1

3,6±2,3

2,7±2,2

Раздел 2. Задание на чередование движений

12,4±5,3

9,0±4,1

4,9±3,8

4,0±2,9

3,6±2,5

Время выполнения 20 последовательных движений (в сек)

Постукивания носком стопы

справа

слева

8,9±2,8

8,7±2,6

8,0±2,0

7,5±1,1

6,9±1,5

6,5±1,3

6,5±1,5

6,8±1,6

6,2±1,5

6,0±1,6

Хлопки ладонью по колену

справа

слева

7,2±1,2

7,0±1,1

6,5±1,4

6,4±1,5

5,8±1,6

5,5±1,5

6,4±1,7

6,6±1,8

5,9±1,6

6,1±1,8

Удары указательного пальца о большой палец

справа

слева

7,9±1,7

7,6±1,7

7,7±1,6

7,7±1,8

6,0±1,8

6,1±1,6

6,6±1,4

6,3±1,5

6,2±1,3

5,9±1,4

Последовательные удары 2-5 пальцев о большой палец

справа

слева

15,2±3,3

15,4±3,8

12,9±2,9

12,6±3,4

9,3±3,2

9,0±3,3

7,8±1,5

7,6±1,8

7,0±1,5

6,6±1,4

Тест самоконтроля и произвольности

Сиротюк А. Л. Синдром дефицита внимания с гиперактивностью. – М., 2008

Предназначен для диагностики детей старшего дошкольного и младшего школьного возраста. Ребенку предлагается рассмотреть по очереди четыре картинки и описать изображенные на них ситуации, предлагая свои варианты решения проблем.

Если ребенок объясняет, что причины неудачи в скамейке, качелях, горке, краске, т.е. неудачи не зависят от персонажей, то он еще не умеет оценивать себя и контролировать свои действия. Если ребенок видит причину неудач в самом герое и предлагает потренироваться, подрасти, позвать на помощь, значит у него развиты навыки самоконтроля и самооценки. Если ребенок видит причины неудач и в герое, и в объекте, то это может говорить о хорошей способности к разностороннему анализу ситуации.

Анкета для родителей детей 5 – 15 лет для выявления СДВГ
и малых мозговых дисфукнций(Заваденко Н.Н., 2005)

Заваденко Н.Н. Гиперактивность и дефицит внимания в детском возрасте. – М., 2005.

Опросник предназначен для выявления СДВГ и минимальных мозговых дисфункций. Опросник представлен в виде таблицы. Он содержит перечень вопросов по 76 симптомам, которые могут наблюдаться при различных формах СДВГ и ММД. Опросник позволяет не только зафиксировать те или иные симптомы, но и оценить степень их выраженности в баллах. Помимо балльной оценки отдельных симптомом дается количественная оценка поведения по специальным шкалам (путем суммирования баллов за несколько сочетающихся друг с другом симптомов).

Ответы оцениваются следующим образом:

Симптом отсутствует – 0 баллов

Выражен слабо – 1 балл

Выражен значительно – 2 балла

Выражен очень сильно – 3 балла.

Все вопросы сгруппированы по 12 шкалам.

Оценки по шкалам вычисляются путем суммирования оценок по отдельным симптомам, затем полученная сумма делиться на число данных ответов (в некоторых случаях ответить на тот или иной вопрос не представляется возможным либо родители случайно пропускают отдельные пункты).

Интерпретацию результатов опросника для родителей должен осуществлять только специалист (врач или психолог), который делает заключение о целесообразности дальнейшего обследования ребенка. Анкетирование может осуществляться повторно, для того чтобы более объективно оценить состояние ребенка в динамике.

Оценка по шкалам симптомов

№	Название шкалы	Симптомы, относящиеся к шкалам
1	Церебрастенические симптомы	1 – 5
2	Психосоматические симптомы	6 – 12
3	Тревожность, страхи и навязчивости	13 – 18
4	Моторная неловкость	19 – 23
5	Гиперактивность	24 – 28
6	Нарушения устной речи	29 – 34
7	Дефицит внимания	35 – 39
8	Эмоционально-волевые нарушения	40 – 45
9	Проблемы поведения	46 – 53
10	Агрессивность и оппозиционные реакции	54 – 62
11	Трудности школьного обучения	63 – 69
12	Нарушения чтения и письма	70 – 76

Анкета для родителей

Дата заполнения (число, месяц, год)______________________________________

Ваши фамилия и инициалы __________________________________________

Характер родства с ребенком ___________________________________________

Ваше образование ____________________________________________________

Ваша профессия _____________________________________________________

Фамилия и имя ребенка _______________________________________________

Дата рождения ребенка (число, месяц, год) ________________________________

пол (подчеркните нужное): мальчик девочка

Состав семьи, в которой живет и воспитывается ребенок: (перечислите проживающих совместно членов семьи и укажите возраст каждого из них):

1. ____________________________________________________________

2.____________________________________________________________

3.____________________________________________________________

4.____________________________________________________________

5.____________________________________________________________

Семья проживает (подчеркните нужное):

в отдельном доме, отдельной квартире из _____ комнат, в коммунальной

квартире занимает ______комнат

Жилая площадь на одного члена семьи составляет _____ кв. метров

Есть ли отдельная комната у ребенка: Да Нет

Ваш ребенок (подчеркните нужное):

посещает детский сад: обычный, логопедический, воспитывается дома; учится в школе: общеобразовательной, по программе 1—3, по программе 1-4

В каком классе _________________________________________________

В специальном классе (укажите в каком) ____________________________

Есть ли у Вашего ребенка трудности поведения: Да Нет

Если есть, опишите их____________________________________________

В каком возрасте трудности поведения появились впервые ____________

Есть ли у Вашего ребенка сложности с учебой в школе (подчеркните нужное): Да Нет

Если есть, опишите их_____________________________________________

В каком классе и с какой четверти они начались _____________________

________________________________________________________________

Укажите средние оценки по основным предметам (учитывая успеваемость за последний месяц):

Русский язык _______________

Чтение или литература_______

Математика ________________

Природоведение ____________

История ___________________

Труд ______________________

Физкультура _______________

Другие предметы (укажите какие) _______________________________________

____________________________________________________________________

Есть ли в настоящее время у Вашего ребенка какие-либо увлечения (подчеркните нужное): Да Нет

Если есть, опишите какие ______________________________________________

____________________________________________________________________

Посещает ли в настоящее время Ваш ребенок, помимо детского сада или школы, дополнительно какие-либо другие занятия, кружки, секции и т. д. (подчеркните нужное): Да Нет

Если да, перечислите какие _____________________________________________

По сравнению с другими детьми, с которыми он (она) занимается вместе, его (ее) успехи в этих занятиях: хуже, лучше, как у всех, не знаете (подчеркните нужное).

Если дополнительных занятий несколько, то укажите это отдельно для каждого из них_________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Есть ли в настоящее время у Вашего ребенка какие-либо проблемы со здоровьем, хронические заболевания (подчеркните нужное): Да Нет

Если да, опишите их ___________________________________________________

В каком возрасте появились эти нарушения _______________________________

Были ли раньше у Вашего ребенка какие-либо проблемы со здоровьем,

(подчеркните нужное): Да Нет

Если да, укажите, какие заболевания и в каком возрасте имели место ________________________________________________________________________

Ниже перечисляются различные проблемы со стороны самочувствия и поведения ребенка. Определите, насколько, по Вашему мнению, данное нарушение было характерно для Вашего ребенка за последний месяц: не было вообще; выражено мало, выражено значительно, выражено очень сильно.

Сделайте свой выбор и поставьте галочку в соответствующей колонке.

Проблемы в самочувствии и поведении ребёнка	Не было вообще	Выражено мало	Выражено значительно	Выражено очень сильно
1.Повышенная утомляемость
2.Капризность, плаксивость, колебания настроения
3. Плохой аппетит
4. Головные боли: ___ раз за неделю, за месяц
5.Нарушения сна (подчеркните): трудности засыпания, беспокойный поверхностный сон, плохие сны
6. Ночное недержание мочи: __ раз в неделю, за месяц
7.Дневное недержание мочи: _ раз за неделю, за месяц
8. Пачкает одежду калом: ___ раз за неделю, за месяц
9. Беспричинные боли в животе
10. Беспричинные боли по всему телу или в различных частях тела
11.Внезапные ночные пробуждения с плачем, снохождение, сноговорение: раз за неделю, за месяц
12.Частые простуды
13.Боится незнакомых людей, новых ситуаций
14. Боится оставаться один
15. Боится, отказывается посещать детский сад
16. Cocёт пальцы, грызет ногти, кусает губы, теребит волосы, другое
17.Многократно повторяет одни и те же действия (подчеркните): касается частей тела (каких?), теребит одежду, другие (укажите)
18.Наблюдаются быстрые подергивания (тики) лицевых мышц, головы, плеч, рук, туловища, ног
19.Медлителен, вял в движениях, по сравнению с другими детьми менее подвижен
20.Неуклюжесть, неловкость, плохая координация движений
21. Плохо застегивает пуговицы, завязывает шнурки, с трудом пользуется ножницами
22.Путает правую и левую руки
23.Плохо рисует
24.Находится в постоянном движении, будто к нему прикрепили мотор, постоянно бегает, пытается куда-то залезть в ситуациях, когда это неприемлемо

25. Шумный, не может тихо, спокойно играть или заниматься чем-либо на досуге
26. Не может сидеть спокойно: крутится, вертится, наблюдаются беспокойные движения в кистях и стопах
27. Встает со своего места во время занятий, уроков в школе или в других ситуациях, когда нужно оставаться на месте.
28. Часто бывает болтливым.
29. Речь невнятная, плохо выговаривает те или иные звуки
30.Неправильно произносит слова, искажает
31. Речь обеднена, запас слов ограничен по сравнению со сверстниками
32. С трудом подбирает слова, неточно употребляет слова, плохо выражает свои мысли
33. Заикается
34.Недостаточно понимает смысл речи окружающих людей
35. Невнимателен, легко отвлекается
36. С трудом сохраняет внимание при выполнении домашних и учебных заданий, во время различных занятий на досуге
37. Не может доводить дела, выполнять задания самостоятельно, до конца
38. Отвечает на вопросы, не задумываясь, не выслушав их до конца
39. Теряет свои вещи в детском саду, школе и дома
40. Ведет себя несоответственно возрасту, как маленький
41. Стеснителен, боится не понравиться окружающим
42.Обидчивый, раздражительный
43. Не может постоять за себя
44. Считает себя несчастным
45. Бывают истерики
46.Дразнится, паясничает
47. Неряшлив, неопрятен
48.Шумный, часто кричит, говорит слишком громко
49.Проявляет непослушание дома
50.Не слушает воспитателя или учителя, хулиганит в саду и школе
51. Обманывает взрослых
52. Был замечен в кражах вещей
53. Был замечен в употреблении алкогольных напитков, наркотиков. Укажите, каких и в каком возрасте ____________________________________
54. Вспыльчив, поведение не предсказуемо
55.Ссорится с детьми, угрожает им
56. Дерется с детьми
57. Дерзит и открыто не подчиняется взрослым, отказывается выполнять их просьбы
58. Недоброжелателен и злопамятен
59. Сквернословит
60. Намеренно совершает поступки, раздражающие других людей
61. Сознательно ломает и портит вещи
62. Жестоко обращается с домашними животными
Все остальные рубрики касаются детей, посещающих школу
63. С трудом понимает и усваивает новый учебный материал.
64. Отказывается выполнять школьное задание, если оно не получается.
65. Плохо запоминает стихотворения, правила, таблицу умножения (подчеркните нужное)
66. Трудности с устным счетом
67. Трудности с решением математических задач
68. Во время школьных занятий не старателен, безответственен
69. Не любит ходить в школу
70. Читает медленно, не может читать слитно
71. Во время чтения делает много ошибок
72. С трудом понимает прочитанное
73. Пишет медленно и неаккуратно, коряво

74. При письме (подчеркните нужное) пропускает гласные, согласные буквы, слоги, окончания, слова пишет слитно
75. При письме путается, ошибается в буквах, сходных по написанию
76. В письменных работах много грамматических ошибок

Пожалуйста, опишите также те жалобы и нарушения у вашего ребенка, которые не были упомянуты в данной анкете _________________________________________

______________________________________________________________________

Анкета для родителей

Брязгунов И.П., Касатикова Е.В. Непоседливый ребенок. – М., 2001

Появились у ребенка в возрасте до 7 лет следующие признаки, наблюдались ли они более 6 месяцев? Принимается только «Да» (1 балл) или «Нет» (0 баллов).

№

Признаки

Баллы

Суетливые движения руками и ногами или, сидя на стуле, извивается

С трудом остается на стуле при выполнении каких-либо занятий

Легко отвлекается на посторонние стимулы

С трудом ожидает очереди для вступления в игру

Отвечает на вопросы, подумав и раньше, чем вопрос закончен.

С трудом исполняет инструкции других.

С трудом удерживает внимание при выполнении заданий или в игровых ситуациях.

Часто переключается с одного незаконченного дела на другое.

Во время игр беспокоен.

Часто чрезмерно разговорчив.

В разговоре часто прерывает, навязывает свое мнение, в детских играх часто является «мишенью».

Часто кажется, что не слышит, что сказано ему или ей.

Часто теряет предметы и вещи, необходимые для работы дома или в группе (игрушки, карандаши, книги и др.).

Игнорирует физическую опасность и возможные последствия (например, бежит по улице «без оглядки»)

Общее число баллов

Если общее число баллов 8 и более, вам необходимо показать ребенка специалисту.

Анкета для педагогов

Брязгунов И.П., Касатикова Е.В. Непоседливый ребенок. – М., 2001

В какой степени выражены нижеперечисленные признаки и ребенка?

Проставьте соответствующие цифры: 0 – отсутствие признака, 1 – присутствует в незначительной степени, 2 – присутствует в умеренной степени, 3 – присутствует в выраженной степени.

№	Признак	Баллы
1	Беспокоен, извивается как уж
2	Беспокоен, не может оставаться на одном месте
3	Требования ребенка должны выполняться немедленно
4	Задевает, беспокоит других детей
5	Возбудимый, импульсивный
6	Легко отвлекается, удерживает внимание на короткий период времени
7	Не заканчивает работу, которую начинает
8	Поведение ребенка требует повышенное внимание учителя
9	Не старателен в учебе
10	Демонстративен в поведении (истеричен, плаксив)
	Общее число баллов

Если результат 11 и более баллов для девочек и 15 и более для мальчиков, вам необходимо показать ребенка специалисту.

Анкета для педагогов

Выявление синдрома дефицита внимания

Шарапановская Е.В. Воспитание и обучение детей с ММД и ПШОП. – М., 2005

№	Признаки
1	Беспокойные движения в кистях и стопах; сидя на стуле, ребенок корчится, извивается
2	Неумение сидеть спокойно на месте, когда это требуется
3	Легкая отвлекаемость на посторонние стимулы
4	Нетерпеливость, неумение дожидаться своей очереди во время игры и в различных ситуациях в коллективе
5	Неумение сосредоточиться: на вопросы часто отвечает не задумываясь, не выслушивает их до конца
6	Сложности, не связанные с негативным поведением или недостаточным пониманием при выполнении предложенных заданий
7	С трудом сохраняемое внимание при выполнении заданий или во время игр
8	Частые переходы от одного незавершенного действия к другому
9	Неумение играть тихо
10	Болтливость
11	Мешает другим, пристает к окружающим
12	Часто складывается впечатление, что ребенок не слушает обращенную к нему речь
13	Частые потери ребенком вещей
14	Способность совершать опасные действия, не задумываясь о последствиях.
	Всего

Наличие у ребенка по крайней мере восьми из перечисленных 14 симптомов, которые постоянно наблюдаются, лежит в основе диагноза СДВГ.

Все проявления данного синдрома можно разделить на три группы:

— признаки гиперактивности – 1, 2, 9, 10

— невнимательности – 3, 6, 8, 12, 13

— импульсивность – 4, 5, 11, 14

Адрес публикации: https://www.prodlenka.org/metodicheskie-razrabotki/493312-metodiki-kotorye-mogut-primenjatsja-dlja-diag

Франк Пьеррон / ПРЕМЬЕРА / «Отслеживаемые движения»

А вот и невероятный НЛО! Если имя режиссера Франка Пьеррона вам не знакомо, вам не обязательно сомневаться в своем уличном авторитете: Франк всегда был человеком в тени, мастерски документируя катание на скейтборде издалека из чистой страсти, никогда не чувствуя нужно поставить себя там, чтобы сохранить все это не что иное, как чистое удовольствие. С девяностых до середины нулевых (эра французского журнала Chill, если кто помнит) Франк снимал все форматы, от видео VX-1000 до Super 8 или 16-мм пленки. Его взгляд из тех, что культивирует детали и прославляет энергию; и его искреннее волнение, кажется, находит свое отражение в отснятом материале, поскольку его ящики полны кассет и пленок, на которых запечатлены вневременные стили, исполненные некоторыми из самых классических скейтеров. Шли годы, и Франк в конечном итоге сделал карьеру в области аудиовизуального искусства на телевидении, но, к счастью для нас, он никогда не расставался со своей первой юношеской любовью к скейтбордингу, и в прошлом месяце после того, как мы спросили его, есть ли у него какие-либо невидимые кадры, чтобы поделиться, он будет сидеть на том, что мы могли бы показать на (теперь недавнем) Das Days Movie Night в Париже, он ни разу не колебался. #За культуру! В конечном итоге весь этот обмен мнениями привел к этому клипу: «Tracked Movements», импровизированному названию проекта, отражающему процесс поиска потерянных кадров, но также являющемуся одним из основных актов съемок скейтбординга, а также многих других. даже более глубокие значения мы оставим на ваше усмотрение, как вы того заслуживаете. Независимо от его названия, важно то, как страсть и энтузиазм Франкса пережили прошедшие пятнадцать лет, и сегодня LIVE Skateboard Media с гордостью представляет его вам в форме этой временной капсулы редактирования, безвременно отслеживая движения многих парижских скейт-активистов, которые в конечном итоге внесли большой вклад в местную культуру, историю и сцену, каждый по-своему. И, конечно же, мы встретились с месье Франком достаточно долго, чтобы познакомить его с нашей классической процедурой «5 W»!

LIVE Skateboard Media: Yo Franck! Не могли бы вы сказать нам , когда были сняты все эти невидимые кадры? Какой была тогда сцена в Париже, помните, кто были сильные личности, горячие точки и магазины?

Франк Пьеррон: Эти кадры были сняты в период между 1999 и концом 2000, максимум началом 2001 года.

На что была похожа сцена? Что ж, если учесть, что между 1990 и 1995 годами люди в основном занимались техническими трюками (сальто с прессом, двойное сальто, нолли-сальто. ..), примерно в то время мы уже перешли на более «тяжелый» стиль катания: больше лестниц, большие зазоры, более длинные поручни… Больше, лучше, быстрее. Который никогда не прекращался с тех пор, как кажется.

Для меня парижская сцена была разделена на два лагеря: скейтшоп Street Machine / лагерь журнала SuGaR, а затем лагерь скейтшопа Snowbeach Warehouse / журнал Tricks, с горсткой свободных электронов, плавающих между ними. Я также пытался быть одним из них, чтобы улавливать понемногу все, что происходит, что в итоге привело к тому, что я действовал в основном независимо, но эй, по крайней мере, я был свободен!

«[Василий Риттер] был вашей визой для Ла Дефа…»

Горячие точки в то время? Берси, ла Деф’ (ла Дефанс), Ле Дом, Кретей… Все фигуристы магниты. Вы должны были встретить знакомые лица там в любое время.

Франк в Риме, 2000. Экскурсия по клише! Тел.: Leo Vernhet

Как видеооператор, я уже пытался искать новые места, а Вассили, король Ла Дефа, был очень хорош в поиске драгоценных камней; la Déf’ и тогда только расширялась с каждым днем. Василий был твоей визой в Ла Деф’, он там всех знал, у тебя никогда не было проблем, когда он был рядом. Между прочим, некоторые из его кадров в этом монтаже, клипы, в которых он одет в бежевую одежду, были сняты Филиппом Левёром.

«Тогда камера и «рыбий глаз» были настоящим капиталовложением, особенно когда ты безработный»

Самир Крим знал центр Парижа; поэтому он был проводником во все новые, еще нетронутые или неизвестные места.

Два вышеупомянутых скейт-шопа, Street Machine (rue Bailleuil) и Snowbeach Warehouse (до сих пор на бульваре Ришара Ленуара) были основными местами для тусовки перед тем, как отправиться кататься на коньках и сниматься. Мы смотрели видео там, на VHS, а затем на DVD (в то время не было YouTube, что мне больше нравилось), все были в восторге и просто ладили.

LSM: С кем в основном вы снимались в то время? Как вы со всеми связались, и есть ли кто-то, с кем у вас остались самые теплые воспоминания о съемках скейтбординга?

Франк: Я снимал многих людей: Уильяма Фана, Вассили Риттера, Венсана Брессола, Стефана Ларанса, Франка Баратьеро, Тони Броссара, Самира Крима, Матье Левасло, Янна Гарина, Люй-Па Сина, Джона Монье, Матье Кувелье, а также несколько приезжих профессионалов из США. Мы всегда связывались через магазины, из уст в уста, либо на конкурсах, либо прямо на местах.

В то время в Париже было немного кинооператоров; тогда камера и «рыбий глаз» были настоящим капиталовложением, особенно если вы безработный.

LSM: Почему вы стали снимать скейтбординг? Каков ваш фон?

Франк: Я впервые начал кататься на скейтборде, потому что устал от командных видов спорта, особенно из-за одного тупого тренера по дзюдо, которого я помню в подростковом возрасте.

Так что я, естественно, переключился на фигурное катание. В начале-середине девяностых я был приличным техническим скейтбордистом, но быстро понял, что никогда не стану следующим Тони Хоуком или Мэттом Хенсли, так что давайте попробуем на камеру.

Франк, флип на 360!

Это произошло само собой, потому что скейтбординг тогда породил творчество (в конце концов, он все еще только формировался, и многое еще оставалось сделать), видео вдохновляли в то время.

«Просмотр видео TransWorld был лучше, чем любой теоретический курс по кинопроизводству»

Съемка скейтбординга была продолжением того, что мне по сути нравилось делать, мне очень нравились такие видео, как видео Пауэлла «Public Domain» или «Shackle» H-Street. Me Not», ну и видео из Санта-Крус.

Я посмотрел так много скейт-видео, что научился кино; Я всему научился сам, от видеосъемки до использования пленки Super 8, 16 или 16 мм.

Просмотр видеороликов TransWorld (которые тогда были полны творчества) был лучше любого теоретического курса по кинопроизводству, и воспитал во мне определенный визуальный язык и чувство ритма при монтаже и съемке.

В начале девяностых я писал видеообзоры для доисторического французского скейт-журнала B-Side, поэтому у меня был легкий доступ ко всем новым видео через журнал или V7 Distribution.

Франк, мега-винтажная горка в Туре!

Затем какое-то время я работал и помогал управлять скейтшопом в Туре, потом мне пришлось идти на военную службу, после чего владелец не хотел меня брать, так что я на какое-то время остался без работы и убил время вокруг Франции, чтобы снимать здесь и там в Нанте, Тулузе, Руане. ..

Магазин скейтбордов Bud тогда только что открылся в Руане, и мы с Полом Лабади закончили тем, что снимали «Data», получасовой полнометражный фильм, это было еще в 1998. Я практически переехал в Руан на четыре месяца, прихватив с собой свой монтажный компьютер (что-то редкое в то время), и мы все время выполняли бесконечную миссию: днем снимали, вечером редактировали и спали в утро, почему-то все были подавлены… Теперь, оглядываясь назад, я чувствую, что мы могли бы снять больше лайфстайл-материалов, ну да ладно.

«Очень молодой Лукас Пуч, которому в то время было девять или десять лет…»

Затем, в 1999 году, я отправился на обучение монтажу в Тулузу, а затем снимал местных жителей: Фабьен Мартин, Дж. Дж. Руссо , Гай Дориак и совсем юный Лукас Пуч, которому тогда было лет девять или десять…

Обучение окончено, я переехал в Париж, потому что именно там проходят все телешоу во Франции, и больше нигде.

Франк, оператор канадского телеканала CTV.

LSM: Где тебе больше всего понравилось сниматься, в Париже? Много клипов Ла Дефанс в «Tracked Movements», вы были особенно близки к этой сцене? Насколько большое значение вы бы придали эстетике места или стилю скейтбордиста?

Franck: У меня не было любимого места, но визуально мне очень нравился La Déf’, а не, скажем, Bercy.

Там великолепная архитектура, только огромные современные здания и городские пейзажи. Это не Нью-Йорк, но достаточно близко!

Но, возможно, это было в основном подсознательно. В основном я ходил по пятам за теми, кто оказывался свободным.

Я бы предпочел снимать на открытых площадках, а не на подземных парковках или тайных площадках, это точно. Но в Париже много дождей.

Франк и Карим Кэмпбелл, 1999 г., демонстрация Axion в Кретей!

LSM: Что больше всего поразило вас на ночном кинопоказе Das Days? Как вы относитесь к тому, чтобы представить эти классические кадры новым поколениям? Как вам понравились реакции? Мотивировало ли это вас на что-то большее?

Franck: Это сложно, потому что я не привык быть в центре внимания, я скорее привык молчать за камерой или монтажным компьютером, но позитивные реакции меня воодушевили и вдохновили. мне продолжать размещать больше этих старых кадров, над которыми я сижу. Почему бы не продолжать?

Спасибо Live Skateboard Media, Бену Дебердту за предоставленную возможность и Аймерику Нокусу за монтаж всего материала.

Спасибо за хорошо проведенное время: Франсуа, Арно и Матье, спасибо Себ Карайол, Флориан из Bud Skateshop (сделаем еще один?), Поль Лабади, Филипп Льюёрс, все остальные, кто помогал мне на этом пути и болел за меня. снимать их в Туре, Орлеане, Париже, Руане, Нанте, Тулузе…

Продолжаем!

Опухоль головного мозга со слитым геном ATXN1-NUTM1 расширяет гистологический спектр NUTM1-реаранжированных неоплазий

Список журналов
Acta Neuropathol Commun
т.7; 2019
PMC6937844

Acta Neuropathol Commun. 2019; 7: 220.

Опубликовано онлайн 2019Dec 30. doi: 10.1186/s40478-019-0870-8

, ^1, ² , ^3, ⁴ , ¹ , ¹ , ⁵ , ² , ¹ , ¹ , ¹ , ¹ , ⁶ , ⁷ , ^3, ⁴ and ^1, ²

Author information Article notes Copyright and License information Отказ от ответственности

Дополнительные материалы

Мы сообщаем о новом слиянии генов ATXN1-NUTM1 в примитивной опухоли головного мозга (рис. а). Женщина 21 года обратилась в отделение неотложной помощи с симптомами повышения внутричерепного давления, нарушением зрения и правосторонним гемипарезом. Она сообщила о необычных головных болях в течение последних 3 недель. МРТ показала фронтальную опухоль с внутриопухолевым кровоизлиянием (рис. б). Вся опухоль была удалена хирургическим путем. Никакого дополнительного лечения больной не получал. Через 16 месяцев после операции у пациента не было симптомов, и МРТ не показала рецидива опухоли.

Открыть в отдельном окне

Слияние генов ATXN1-NUTM1 , подтвержденное ОТ-ПЦР и секвенированием по Сэнгеру ( a ). МРТ выявило лобное образование. Усиление после введения контраста (T1) ( b ). Представительная гистопатология. Слева рыхлый участок с нейроноподобными опухолевыми клетками (*фрагмент). Справа увеличение плотности клеток ( c ). Фасцикулярная архитектура с тремя митозами (стрелки) ( d ). Наблюдались хондроидоподобные, миксоидные и гиалинизированные участки ( и ). Недифференцированные клетки с крупными ядрышками на хондромиксоидном фоне ( f ). Наблюдали сильное окрашивание GFAP. Опухоль показала сосудистую пролиферацию ( г ). Окрашивание нейрофиламента ограничивало опухолевую массу без значительного окрашивания внутри опухоли ( ч ). р53 накапливается в ядрах опухолей ( и ). Окрашивание антител против NUT, показывающее гомогенную внутриядерную экспрессию ( j )

Гистологические признаки характеризовались фасцикулярной структурой и хондромиксоидными областями (рис. c, d, e, f). Были видны нейроноподобные опухолевые клетки (рис. c). Митотическая активность в целом была низкой, но в некоторых очагах увеличивалась (рис. d). Сильное окрашивание GFAP привело к первоначальной диагностике неклассифицированной глионейронной опухоли, несмотря на негативность olig2 и PS100 (рис. g). Микроскопически опухоль была хорошо очерчена (рис. з). p53 накапливался (рис. i). CD56 был сильно экспрессирован. TTF1, хромогранин, синаптофизин, CD34, p63, CK5/6 и актин гладких мышц были отрицательными. Экспрессия ATRX, INI1 и BRG1 сохранялась. Используя гейдельбергский классификатор опухолей ЦНС, основанный на метилировании ДНК, прогнозирование класса не было получено с более чем ≥0,9.доверительный порог [1]. Ближайшим объектом была группа CNS Ewing Family Tumor CIC с оценкой 0,235 (дополнительный файл 1: таблица S1) (данные о метилировании: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo; {«type «:»entrez-geo»,»attrs»:{«text»:»GSE138550″,»term_id»:»138550″}}GSE138550). Эта группа опухолей связана со слиянием генов CIC-NUTM1 [6]. Мы наблюдали сильное гомогенное ядерное окрашивание антителом против NUT, что свидетельствует о наличии слияния CIC-NUTM1 (рис. j). Секвенирование РНК с использованием панели Illumina TruSight RNA Fusion и Manta для вызова слияния выявило новые ATXN1-NUTM1 сплав. Слияние CIC-NUTM1 не обнаружено. ETV4 был сверхэкспрессирован, как и в CIC-слитых саркомах [4, 6]. В опухолевой ДНК не было обнаружено патогенных вариантов с использованием панели таргетного секвенирования из 571 гена (дополнительный файл 2: таблица S2).

Транскрипт слитого гена охватывал почти всю кодирующую последовательность ATXN1 и все области экзонов 6, 7 и 8 NUTM1 . Наиболее распространенная карта точек разрыва NUTM1 между экзонами 1 и 2, но точки разрыва на дистальном конце экзона 5 также были описаны в некоторых CIC-NUTM1 саркомы [4].

Первоначально связанные с карциномами средней линии NUT, слияния NUTM1 в настоящее время описаны в широком спектре опухолей, от карциномы до саркомы и лейкемии [2, 3, 7]. Наиболее распространенным геном-партнером слияния при карциноме и саркоме является BRD4 , за которым следуют BRD3 и NSD3 . Недавно были описаны различные новые партнеры [2, 3, 5]. Прогноз при этих опухолях, как правило, неблагоприятный, хотя лейкемии, связанные с NUT, по-видимому, связаны с лучшим прогнозом и YAP1-NUTM1 ассоциирован с доброкачественными опухолями кожи придатков [3, 5].

CIC реаранжированные саркомы часто сливаются с DUX4 и реже с NUTM1 [4, 7]. Все CIC реаранжированные опухоли, независимо от их местоположения или гена-партнера слияния, имеют один и тот же транскриптомный профиль, определяющий молекулярную подгруппу, отличную от карциномы NUT [4, 7]. Интересно, что ATXN1 кодирует ataxin1, который образует комплекс репрессора транскрипции с CIC. Оба они являются частью оси регулятора митотического клеточного цикла CIC-ATXN1-ATXN1L [8]. Исключая CIC-NUTM1 слитых опухолей, ранее сообщалось только об одной реаранжированной опухоли головного мозга NUTM1 , а именно о цитокератин-отрицательной BRD4-NUTM1 PNET-подобной опухоли теменной доли у 3-летнего мальчика с GFAP и положительным результатом на синаптофизин. При профилировании метилирования это новообразование не кластеризовалось с опухолями группы CNS Ewing Family Tumor CIC [2].

Сообщалось о миксоидной и хондроидной дифференцировке в NUTM1 -реаранжированных саркомах, но это необычно для первичных глионейрональных опухолей. Невозможно оценить, указывает ли сильная позитивность GFAP в нашем конкретном случае на глиальную опухоль или саркому с миоэпителиальной дифференцировкой из-за отсутствия положительного окрашивания и специфичности для других протестированных маркеров. Положительный результат GFAP был описан в 3 из 4 9 случаев.0181 NUTM1 реаранжированы мягкие ткани или висцеральные саркомы, в отличие от группы CNS Ewing Family Tumor CIC , которая не экспрессирует какие-либо маркеры дифференцировки [2, 6]. Мы рекомендуем проводить NUT-иммуногистохимию с последующим секвенированием РНК для выявления любых потенциальных генов-партнеров слияния NUTM1 в GFAP+/olig2-неклассифицированной глиоме, особенно с миксоидными и/или хондроидными признаками. Слитый ген ATXN1 — NUTM1 может определять новую группу редких первичных опухолей головного мозга. Прогностическое влияние 9Партнеры по слиянию 0181 NUTM1 и локализация в мозге NUTM1 реаранжированных опухолей требуют дальнейшего изучения.

Дополнительный файл 1: Таблица S1. Результаты гейдельбергского классификатора опухолей ЦНС на основе метилирования ДНК (объекты и баллы). ^{(12K, xlsx)}

Дополнительный файл 2: Таблица S2. Список из 517 генов детского рака в панели секвенирования целевых генов дракона (Illumina_TruSeq Custom Amplicon). ^{(44K, xls)}

Образцы были получены из банка опухолей CHU de Toulouse BB-0033-00014. Мы благодарим «Société Française des Cancers de l’Enfant» за их поддержку.

AS, FT, FB, EUC внесли основной вклад в написание рукописи. JMP, GP, YN, BMO провели молекулярно-генетические исследования. AS, SP, EUC охарактеризованы гистологическими особенностями. YN, CD выполнили выравнивание последовательностей. FER, DLC, MG, IC участвовали в сборе данных. Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.

Примечание издателя

Springer Nature остается нейтральной в отношении юрисдикционных претензий в опубликованных картах и институциональной принадлежности.

Дополнительная информация прилагается к данному документу по адресу 10. 1186/s40478-019-0870-8.

1. Capper D, Jones DTW, Sill M, et al. Классификация опухолей центральной нервной системы на основе метилирования ДНК. Природа. 2018; 555: 469–474. doi: 10.1038/nature26000. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

2. Диксон Б.С., Сун Ю.С., Розенблюм М.К., Рейтер В.Е., Харб М., Вундер Дж.С., Суонсон Д., Антонеску Ч.Р. Слияния генов NUTM1 характеризуют подмножество недифференцированных опухолей мягких тканей и внутренних органов. Ам Дж. Сург Патол. 2018;42:636–645. doi: 10.1097/PAS.0000000000001096. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

3. Hormann FM, Hoogkamer AQ, Beverloo HB et al. (2019) NUTM1 является партнером рецидивирующего слитого гена при остром лимфобластном лейкозе, связанном с предшественниками В-клеток, связанном с повышенной экспрессией генов на полосе хромосом 10p12.31–12.2. Гематология. [до печати] PubMed PMID: 30872366 [бесплатная статья PMC] [PubMed]

4. Le Loarer F, Pissaloux D, Watson S, et al. Клинико-патологические особенности сарком CIC-NUTM1 , нового молекулярного варианта семейства CIC -слитых сарком. Ам Дж. Сург Патол. 2019;43:268–276. doi: 10.1097/PAS.0000000000001187. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

5. Sekine S, Kiyono T, Ryo E, et al. Рецидивирующие слияния YAP1-MAML2 и YAP1-NUTM1 при пороме и порокарциноме. Джей Клин Инвест. 2019;130:3827–3832. doi: 10.1172/JCI126185. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

6. Sturm D, Orr BA, Toprak UH, et al. Новые новообразования опухоли головного мозга возникают в результате молекулярной классификации ЦНС-ПНЭО. Клетка. 2016; 164:1060–1072. doi: 10.1016/j.cell.2016.01.015. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

7. Watson S, Perrin V, Guillemot D, et al. Транскриптомное определение молекулярных подгрупп мелкокруглоклеточных сарком. Джей Патол. 2018; 245:29–40. doi: 10.1002/path. 5053. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

8. Wong D, Lounsbury K, Lum A, et al. Транскриптомный анализ CIC и ATXN1L раскрывают функциональную взаимосвязь, используемую раком. Онкоген. 2019;38:273–290. doi: 10.1038/s41388-018-0427-5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Статьи из Acta Neuropathologica Communications предоставлены здесь с разрешения BioMed Central

Вакцинация и заражение свиней Salmonella Typhimurium вызывает системный и локальный многофункциональный CD4+ T-клеточный ответ

Введение

Salmonella Typhimurium (STM) — грамотрицательная факультативная внутриклеточная бактерия, принадлежащая к семейству Enterobacteriaceae и способная инфицировать широкий круг хозяев. Небрюшнотифозные серовары Salmonella , такие как STM, часто вызывают пищевой гастроэнтерит у людей из-за их зоонозных свойств и представляют постоянный риск для безопасности пищевых продуктов (1, 2). Помимо яиц и яичных продуктов, свинина и свинина являются основными переносчиками ВТМ человеку через пищевая цепочка (3, 4).

Сальмонеллез свиней может проявляться диареей и вялостью у поросят-отъемышей; однако во многих случаях свиньи инфицируются субклинически и часто становятся животными-носителями Salmonella , сохраняющейся в миндалинах, кишечнике и связанных с кишечником лимфоидных тканях (5). В дополнение к гигиеническим мерам и стратегиям вмешательства в кормление вакцинация считается эффективным средством борьбы с Salmonella на пораженных свинофермах (6). Живая аттенуированная гистидин-адениновая ауксотрофная вакцина Salmoporc (Ceva Santé Animale, Либурн, Франция, ранее называвшаяся IDT Biologika GmbH) коммерчески доступна в Европе, и в нескольких исследованиях уже было доказано, что она уменьшает клинические признаки, выделение и колонизацию тканей у свиней (7). –13).

До сих пор исследования иммунного ответа против STM у свиней были сосредоточены на выявлении признаков иммунитета, опосредованного антителами. Было показано, что вакцинация свиней Salmoporc индуцирует Salmonella -специфические антитела IgM, IgG и IgA (11, 14). В исследованиях, в которых свиней заражали вирулентным штаммом STM, наблюдалось увеличение Salmonella -специфических IgM-антител с переключением класса IgM-IgG, происходящим через 14 дней после заражения, а также индукцией Salmonella -специфические антитела IgA (15, 16). В отличие от гуморального иммунного ответа, клеточно-опосредованный иммунный ответ на СТМ у свиней до настоящего времени подробно не исследовался. Существующие исследования были в основном сосредоточены на измерении экспрессии мРНК цитокинов у поросят, инфицированных STM (17–20).

Инфекция STM более интенсивно изучалась на мышах, где было показано, что CD4 ⁺ Т-клетки играют доминирующую роль в первичной элиминации инфекции (21, 22). В частности, для успешного уничтожения бактерий требуется развитие клеток Th2 и продукция ими фактора некроза опухоли-α (TNF-α) и интерферона-γ (IFN-γ), что приводит к активации макрофагов (23–26). Кроме того, интерлейкин-17A (IL-17A), продуцируемый клетками Th27, способствует защите, рекрутируя нейтрофилы в кишечник и регулируя экспрессию эпителиальных белков плотных контактов (27, 28). На самом деле 9Было показано, что 0355 Salmonella -специфические клетки Th2 и Th27 развиваются одновременно в селезенке и кишечнике орально инфицированных мышей (29). Более поздние исследования на мышах также продемонстрировали важность нециркулирующих в тканях резидентных клеток памяти Th2, которые способны немедленно реагировать в случае повторного заражения (30). В отличие от мышей, у которых СТМ приводит к септицемии, колонизация СТМ у свиньи в основном сосредоточена в кишечном тракте. Таким образом, большой интерес представляет локальный клеточный иммунный ответ в кишечных и брыжеечных лимфатических узлах, а также образование Т-клеток памяти в этих тканях. Хотя идентификация резидентных в тканях Т-клеток (Trm) у свиней пока невозможна из-за отсутствия антител, специфичных к ассоциированным с Trm маркерам, дифференцировка CD4 ⁺ Т-клеток свиньи можно анализировать по экспрессии CD8α и CD27 (31). Таким образом, среди свиных CD4 ⁺ Т-хелперных клеток можно выделить три основных подмножества: подмножество CD8α ^— CD27 ⁺ CD4 ⁺ Т-клеток составляют наивные клетки, а CD8α ⁺ CD27 + и подмножества CD8α ⁺ CD27 ^— представляют центральную и эффекторную память CD4 ⁺ Т-клеток соответственно (32).

Из-за отсутствия знаний об опосредованном Т-клетками иммунитете у свиней в ответ на инфекции STM, мы изучили антиген-специфический CD4 ⁺ Т-клеточный иммунный ответ свиней, как местный, так и системный. CD4 ⁺ Т-клетки и их продукцию IFN-γ, TNF-α и IL-17A анализировали в различных органах с помощью внутриклеточного окрашивания цитокинов (ICS) после стимуляции in vitro антигеном Salmonella . Наши результаты показывают индукцию СТМ-специфических многофункциональных CD4 ⁺ Т-клеток после вакцинации и инфицирования СТМ, которые преимущественно обладали фенотипом эффекторной памяти и преобладали в кишечнике свиньи.

Материалы и методы

Эксперимент по вакцинации и заражению животных

Перед исследованием свиноматки (крупная белая x ландрас) из свиноводческой фермы, принадлежащей университету в Нижней Австрии, были протестированы на Salmonella -специфические антитела с помощью IDEXX Swine Тест на антитела к сальмонелле (IDEXX Europe, Хофддорп, Нидерланды). Были отобраны пять свиноматок с самым низким отношением пробы к положительным (S/P), и шестнадцать четырехнедельных кастрированных самцов свиней (крупная белая x ландрас x пьетрен) от этих свиноматок были включены в исследование. Поросята на этой ферме регулярно вакцинируются против ЦВС-2 (Ingelvac CircoFLEX 9).0135® , Boehringer-Ingelheim, Ingelheim am Rhein, Germany) в возрасте трех недель и Mycoplasma hyopneumoniae (M ⁺ PAC ^®, MSD Animal Health, Кенилворт, США) в первую и третью неделю жизни . После прибытия животных взвешивали и использовали полученные данные для достижения аналогичного распределения животных с разной массой тела в двух группах: контрольная группа из четырех животных (свиньи №1-4) и группа из двенадцати животных, которая впоследствии была вакцинирована. и контрольно-инфицированные (свиньи №5-16, V+I). Животные содержались в двух отдельных комнатах на соломенной подстилке в течение первых шести недель. За неделю до заражения всех животных перевели в помещение с уровнем биологической безопасности (BSL) 2 Венского университета ветеринарной медицины, при этом контрольную группу и группу V+I разместили в отдельных отсеках помещения. 9Статус поросят, свободных от 0355 Salmonella , был подтвержден серологическим тестированием на специфические антитела к Salmonella с помощью теста IDEXX Swine Salmonella Ab Test (IDEXX Europe) (рис. 1). Кроме того, образцы кала были собраны за 9, 7 и 6 дней до первой вакцинации и протестированы на Salmonella . Методология этого микробиологического тестирования описана ниже в главе 2.4. Все поросята дали отрицательный результат на Salmonella в фекалиях в указанные моменты времени.

Рисунок 1 Salmonella -специфические антитела в сыворотке в ходе эксперимента. Salmonella -специфические антитела измеряли с помощью ELISA в сыворотке всех животных. Отношение образца к положительному (S/P) рассчитывали путем деления оптической плотности (OD) образцов на OD положительного эталонного контроля. Пунктирная линия представляет отсечение при отношении S/P 0,25. Результаты < 0,25 определялись как отрицательные, образцы ≥ 0,25 — как положительные. На левом графике показаны соотношения для контрольных животных, на правом графике для вакцинированных и инфицированных животных. Даты прививок (SD0, SD19) отмечены синими звездочками, дата заражения (SD40) красной звездочкой. Комбинация различных символов и цифр представляет значения отдельных животных.

Начиная с пятинедельного возраста группу V+I перорально вакцинировали дважды с интервалом в 19 дней [дни исследования (SD) 0 и 19] 1 мл живой аттенуированной гистидин-адениновой ауксотрофной STM-вакцины (Salmoporc, Ceva Santé Animale, Дессау-Росслау, Германия), содержащий дозу 1,33 x 10 ⁹ колониеобразующих единиц (КОЕ). Контрольная группа перорально получала 1 мл водопроводной воды. Вакцину наносили с помощью круглой канюли, прикрепленной к шприцу на 5 мл. Через три недели после второй иммунизации (SD40) животных группы V+I перорально заражали 5 мл на животное, содержащим 1 x 10 ⁹ КОЕ/мл вирулентного монофазного штамма STM (DT193, № RKI 06-1900, описан в (33) и предоставлен Ceva Innovation Center GmbH). Для заявки через набор для перорального дренчера (Ceva Santé Animale) штамм для контрольного заражения смешивали с раствором сахарной свеклы для повышения приемлемости для животных. Контрольная группа получила 5 мл свекольного сиропа, разведенного водой. Через две недели после заражения вскрытие проводили в течение пяти дней подряд (SD 52–56). Всех животных анестезировали внутримышечной инъекцией кетамина гидрохлорида (Наркетан 9).0135® , 10 мг/кг массы тела, Vétoquinol, Lure Cedex, Франция) и азаперон (Stresnil ^®, 1,3 мг/кг массы тела, Elanco, Гринфилд, США) с последующей эвтаназией посредством внутрисердечной инъекции T61 ^® (тетракаина гидрохлорид, мебезония йодид и эмбутрамид, 1 мл/10 кг массы тела, MSD Animal Health). Эксперимент на животных был одобрен институциональным комитетом по этике, Консультативным комитетом по экспериментам на животных (§12 Закона об экспериментах на животных, Tierverssuchsgesetz — TVG) и Федеральным министерством науки, исследований и экономики (BMWF-68.205/0241-WF/V). /3б/2016).

Клиническое обследование, вскрытие и сбор образцов

Клинический мониторинг животных проводили ежедневно, наблюдения регистрировали и оценивали по системе баллов, учитывая ректальную температуру, диарею, рвоту и изменения в поведении. Кроме того, еженедельно регистрировали массу тела всех животных. После эвтаназии внутренние органы всех животных оценивали на наличие патологических изменений путем визуального осмотра. Образцы кала брали у всех животных в начале исследования (SD -9, -7, -6), а также с двухнедельными интервалами после первой вакцинации (СД 12, 26) для бактериологического исследования. Образцы крови из яремной вены ( Vena jugularis ) брали у всех животных перед вакцинацией (SD0) и перед второй иммунизацией и контрольным заражением (SD 19, 26, 40). В дни вскрытия (SD 52–56) кровь брали путем пункции сердца у анестезированных животных перед эвтаназией. В эти дни также брали образцы из печени, селезенки, миндалин, тощекишечных лимфатических узлов, подвздошно-ободочных лимфатических узлов, тощей, подвздошной и слепой кишки. Образцы ткани печени, тощей, подвздошной и слепой кишки всегда брали из одной и той же области органа. Образец печени брали из дорсальной части левой доли. Тощая кишка была полностью развернута и определена середина. С этого момента было рассечено 15 см ткани в оральном и аборальном направлении (т.е. общая длина 30 см). Для образца подвздошной кишки срез 30 см перорально из Собран Ostium ileale . Образец слепой кишки был перевязан в 5 см от кончика слепой кишки.

Обнаружение специфических антител к S

almonella в сыворотке

Сыворотку получали после центрифугирования образцов крови в течение 10 мин и 1900 × г при комнатной температуре. Для обнаружения Salmonella -специфических антител образцы сыворотки тестировали с использованием имеющегося в продаже набора ELISA (тест IDEXX Swine Salmonella Ab, IDEXX Europe, Hoofddorp, Нидерланды) в соответствии с инструкциями производителя. Результаты регистрировали как отношения S/P, определяемые соотношением между средней оптической плотностью (OD) каждого образца и средней OD положительного контроля. Согласно рекомендациям производителя, отношения S/P < 0,25 определялись как отрицательные, а образцы ≥ 0,25 — как положительные.

Микробиологическое исследование

Печень, селезенка, миндалины, тощекишечные лимфатические узлы, подвздошно-ободочные лимфатические узлы, тощая кишка, подвздошная кишка и слепая кишка у умерщвленных животных, а также образцы кала, взятые до и после обеих иммунизаций животных, были исследованы на наличие Salmonella энтерика . Образцы высевали штрихами на чашки с агаром с ксилозо-лизин-дезоксихолатом (XLD) (BBL™, Becton Dickinson (BD), Гейдельберг, Германия) и инкубировали на воздухе при температуре 37°C в течение 48 часов. Кроме того, все образцы были предварительно обогащены забуференной пептонной водой (BPW, Millipore™, Merck KGaA, Дармштадт, Германия) в течение 24 часов при 37°C. После инкубации 0,1 мл каждой культуры переносили в бульон Rappaport-Vassiliadis R10 и Selenite (оба Difco™, BD), инкубировали в течение 24 ч при 42°C, а затем субкультивировали на чашках с агаром XLD (BBL™, BD) и инкубировали в аэробных условиях при 37°C в течение 48 ч. Предположительно Колонии Salmonella были подтверждены масс-спектрометрией MALDI TOF.

Выделение лимфоцитов

Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) выделяли из гепаринизированной крови, взятой у моноветок (Kabe Labortechnik, Nümbrecht-Elsenroth, Germany) с помощью центрифугирования в градиенте плотности (Pancoll human, плотность: 1,077 г/мл, PAN Biotech, Айденбах, Германия; 30 мин при 920 x г ( ). Лимфоциты из селезенки, миндалин и мезентериальных лимфатических узлов выделяли, как описано ранее (31). Для сбора лимфоцитов собственной пластинки (LPL) из тощей и подвздошной кишки открытый кишечник промывали стерильным фосфатно-солевым буфером (PBS, PAN Biotech) и разрезали на мелкие кусочки (приблизительно 2x2x2 мм). Затем ткань инкубировали в течение 60 минут при 37°C на шейкере в HBSS с добавлением 2 мМ DTT (Carl Roth GmbH+Co.KG, Карлсруэ, Германия), 0,1 мМ ЭДТА (Carl Roth) и 25 ЕД/мл ДНКазы. Тип 1 (ThermoFisher, Уолтем, Массачусетс, США) для высвобождения интраэпителиальных лимфоцитов. Супернатанты после этой инкубации удаляли, а оставшуюся ткань помещали в среду для культивирования клеток (RPMI 1640 с добавлением 100 МЕ/мл пенициллина и 0,1 мг/мл стрептомицина (все PAN Biotech)) для удаления следов ДТТ и ЭДТА на 15 мин при 37°С. °С. После этого ткань переносили в среду для культивирования клеток с добавлением 25 ед/мл ДНКазы типа 1 и 300 ед/мл коллагеназы 1 (ThermoFisher) для ферментативной деградации. После инкубации в течение 60 мин на шейкере при 37°С супернатанты собирали, центрифугировали при 4°С и 600 x г в течение 10 мин, и клеточный осадок повторно суспендировали и фильтровали через клеточный фильтр. Клетки повторно суспендировали в 40% Percoll ^® (GE Healthcare Bio-Sciences, Питтсбург, Пенсильвания, США) и покрывали слоем 70% Percoll перед центрифугированием при комнатной температуре в течение 30 минут при 920 x g . Клетки из интерфазы собирали, дважды промывали PBS и один раз средой для культивирования клеток (как указано выше, но с 5% фетальной телячьей сывороткой (FCS, Merck, Дармштадт, Германия). После этого клетки повторно суспендировали в среде для культивирования клеток с добавлением гентамицин и 10% FCS.Все препараты клеток подсчитывали на гематологическом анализаторе Sysmex XP 300 (Sysmex Europe GmbH, Нордерштедт, Германия)9.0003

Получение антигена

Salmonella для стимуляции in vitro

Антигены для стимуляции in vitro лимфоцитов получали следующим образом. Вакцинный штамм (STM № 421/125) и контрольный штамм (STM № RKI 06-1900) культивировали через две прекультуры в среде STM 6/83 (внутренняя) при 37°C и 150 об/мин на шейкер. Затем культуру центрифугировали при 7000 x g в течение 10 минут, и осадок повторно суспендировали в PBS. После определения колониеобразующих единиц концентрат инактивировали нагреванием на водяной бане при 60°С в течение 90 мин. Затем антиген разделяли на аликвоты и хранили при -80°C до использования.

In Vitro Стимуляция и ICS

Для внутриклеточного окрашивания IFN-γ, TNF-α и IL-17A, 5 x 10 ⁵ свежевыделенных клеток культивировали в 200 мкл/лунку круглодонных 96-луночных титрационные микропланшеты (Greiner Bio One, Frickenhausen, Германия) Для стимуляции в лунки помещали либо инактивированный нагреванием 1,9 x 10 ⁸ КОЕ/мл вакцинный штамм STM, либо инактивированный нагреванием 2,7 x 10 ⁸ КОЕ/мл контрольного штамма STM. В пилотных экспериментах мы установили, что частоты цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток стабилизировались при дозах СТМ >10 ⁸ КОЕ/мл (данные не показаны). Затем планшеты культивировали в течение приблизительно 19 часов при 37°C. Клетки, инкубированные в среде для культивирования клеток, служили только в качестве отрицательного контроля. В течение последних 4 часов культивирования брефельдин A (BD GolgiPlug™, BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния, США) присутствовал в микрокультурах в конечной концентрации 1 мкг/мл. Культивируемые клетки собирали и ресуспендировали в буфере, содержащем PBS с 3% FCS. Для анализа фенотипа субпопуляций лимфоцитов методом проточной цитометрии (FCM) клетки окрашивали первичными моноклональными антителами к CD4 (mIgG2b, клон: 74-12-4), CD8α (mIgG2a, клон: 11/29).5/33, биотинилированный) и CD27 (mIgG1, клон: b30c7), все произведены и подготовлены собственными силами. Связывание первичных антител определяли с помощью следующих вторичных реагентов: козий антимышиный IgG2b-A488, крысиный антимышиный IgG1-PE-Cy7 (оба ThermoFisher) и стрептавидин-BV421 (BioLegend, Сан-Диего, Калифорния, США). Для исключения мертвых клеток использовали Fixable Viability Dye eFlour780 (ThermoFisher) в соответствии с протоколом производителя с 0,025 мкл реактивного красителя на образец. Свободные сайты связывания вторичных антител блокировали цельными молекулами мышиного IgG (2 мкг на образец; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA, USA). После этого образцы были зафиксированы и пермеабилизированы с помощью набора для фиксации/пермеабилизации BD Cytofix/Cytoperm™ (BD Biosciences) в соответствии с инструкциями производителя. За этим последовало внутриклеточное окрашивание IFN-γ-PE (mIgG1, клон: P2G10, BD Biosciences), TNF-α-BV605 (mIgG1, клон: Mab11, BioLegend) и IL-17A-A647 (mIgG1, клон: SCPL1362, БД бионауки). Все этапы инкубации проводили в течение 96-луночные круглодонные планшеты в течение 20 мин при 4 °C, за исключением этапа внутриклеточного окрашивания, который проводился в течение 30 мин. Анализы FCM выполняли на FACSCanto™ II (BD Biosciences). Были зарегистрированы данные по крайней мере 1 x 10 ⁶ лимфоцитов на образец для РВМС, селезенки, миндалин и лимфатических узлов. Для клеток, выделенных из тощей и подвздошной кишки, регистрировали не менее 3 х 10 ⁵ лимфоцитов. Данные были проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo™ для Windows (версия 10.4.1; FlowJo, Ашленд, штат Орегон, США).

Статистический анализ

Данные для графиков на рисунках 1, 7 и S2, включая расчет среднего значения, медианы и стандартного отклонения, были проанализированы с помощью GraphPad Prism 5 (GraphPad Software, Сан-Диего, Калифорния, США). Статистический анализ был выполнен в R версии 3.6.2 (R Core Team (2019). R: язык и среда для статистических вычислений. R Foundation for Statistical Computing, Вена, Австрия. URL https://www.R-project.org /). Мы подогнали одномерные линейные смешанные модели, используя функцию lmer в пакете R lme4 v1.1-21 (34) с log10 преобразованными частотами цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток в качестве «ответа». Основные эффекты лечения животных и стимуляции in vitro, а также взаимодействие между ними были смоделированы как фиксированные категориальные эффекты с двумя уровнями (контроль против инфицированных) и тремя уровнями (среда, вакцинный штамм и контрольный штамм) соответственно. Эффект случайной перехватной свиньи был включен в модель для учета ковариационной структуры (несколько наблюдений на свинью) в наших данных. Для проверки гипотез мы использовали оценку максимального правдоподобия, установив для параметра REML значение false. Все предположения для линейных смешанных моделей были выполнены. Остатки и случайные пересечения были нормально распределены, а остатки гомоскедастичны. Мы проверили отсутствие коллинеарности через обобщенные коэффициенты инфляции дисперсии (35) с использованием функции vif в пакете автомобиль v3.0-8 (36). Мы рассчитали контрасты между средними методами лечения животных методом наименьших квадратов и уровнями стимуляции in vitro соответственно с пакетом emmeans v1.4.7 (37). Значимость была заявлена при многократном тестировании с поправкой на 10% ложных открытий (38). Далее мы выполнили анализ основных компонентов с пакетом factoextra v1.0.7 (39). Мы создали побочные сюжеты, используя функцию fviz_pca_biplot , которые отображают баллы PCA выборок (показаны точками) и загрузки каждой переменной (показаны векторами) на одном графике. Точки, расположенные близко друг к другу, представляют образцы с близкими значениями. Чем длиннее вектор переменной, тем больше влияние этой переменной на этот главный компонент. Векторы, направленные в одном направлении и образующие между собой небольшие углы, можно интерпретировать как положительно коррелированные, векторы, образующие угол 90°, — как некоррелированные, а векторы, направленные в противоположных направлениях, — как отрицательно коррелированные. Мы также подготовили тепловые карты с функцией тепловая карта.2 в пакете gplots v3.0.3. (40). Иерархическая кластеризация с использованием метода option = «ward.D2» на основе евклидовых расстояний для строк и столбцов показана в виде дендрограмм. Для этих многомерных описательных графиков использовали центрированные и масштабированные частоты продуцирующих цитокины CD4 ⁺ Т-клеток, скорректированные на индивидуальные эффекты свиней. Мы рассчитали эти остаточные значения путем вычитания эффектов ограниченного максимального правдоподобия BLUP на животных (опция REML установлена на true), оцененных по той же линейной смешанной модели, которая использовалась для проверки гипотез, из log10 преобразованных необработанных частот цитокин-продуцирующих CD4 9. 0135 + Т-клеток. Во время статистического анализа было обнаружено, что одно животное из контрольной группы (свинья № 4) является выбросом в большинстве проанализированных тканей и поэтому было исключено из набора данных ICS и последующих многомерных графиков, а также для проверки гипотез о фенотипах, продуцирующих цитокины. для всех тканей.

Результаты

Клинические признаки, серология и микробиологические исследования

Из-за недостатка знаний о Т-клеточном ответе свиней на STM, эксперимент на животных для этого исследования был разработан для достижения сильной стимуляции иммунной системы свиней. свиней в группе V+I двукратной вакцинацией и последующей контрольной инфекцией, основанной на предыдущих наблюдениях, демонстрирующих эффективность вакцины Salmoporc (11). При таком дизайне исследования никаких неблагоприятных последствий для здоровья свиней после заражения не ожидалось. Действительно, среднесуточная прибавка веса развивалась однородно для обеих групп на протяжении всего исследования. После переезда в помещение для животных BSL2 обе группы показали повышение ректальной температуры в течение одного дня с температурой в диапазоне от 39.3°С и 40,4°С и среднее повышение на 0,35°С в контрольной группе и на 0,2°С в группе В+И. Это повышение температуры, скорее всего, можно объяснить стрессом от переезда и адаптации к новой среде. После этого у всех животных до конца исследования ректальная температура находилась в физиологических пределах. Кроме того, легкие признаки диареи (например, пастообразный кал) наблюдались у небольшого числа животных V+I в течение трехдневного интервала после инфицирования контрольным заражением (данные не показаны).

Для подтверждения успешного заражения животных СТМ исследовали продукцию сывороточных антител, а также присутствие СТМ в органах. Гуморальный ответ против STM оценивали с использованием коммерчески доступного теста IDEXX Swine Salmonella Ab Test (рис. 1). Результаты ELISA на антитела Salmonella подтвердили статус животных, свободных от Salmonella , в начале исследования (SD0). Все поросята контрольной группы оставались серологически отрицательными в течение Сальмонелла зр. на всем протяжении эксперимента. Отношения S/P у животных из группы V+I умеренно повышались после второй иммунизации, и дальнейшее существенное увеличение наблюдалось после контрольного заражения на SD40.

Образцы селезенки, печени, миндалин, тощекишечных лимфатических узлов, подвздошно-ободочных лимфатических узлов, тощей кишки, подвздошной кишки и слепой кишки, взятые при вскрытии каждого животного, были проанализированы на наличие Salmonella enterica . № Salmonella spp. могли быть обнаружены в контрольной группе в любом из отобранных органов (рис. 2). Что касается группы V+I, Salmonella spp. могут быть выделены из всех трех выбранных частей кишечника, тощекишечных лимфатических узлов и подвздошно-ободочных лимфатических узлов по крайней мере у двух животных. Кроме того, Salmonella spp. также были идентифицированы в миндалинах всех V+I животных. Селезенка и печень были отрицательными как для контрольной группы, так и для группы V+I. Поскольку свиньи содержались в изолированных условиях и вакцинный штамм имеет ограниченную персистенцию, можно предположить, что обнаружение Salmonella spp. является пробным штаммом STM. Образцы кала, собранные до (SD -9, -7, -6) и после обеих вакцинаций (SD 12, 26) у всех животных (контрольная и группа V+I) результаты теста на Salmonella spp. были отрицательными. также (данные не показаны).

Рисунок 2 Обнаружение Salmonella Typhimurium в день вскрытия. Микробиологический анализ проводили для селезенки, печени, миндалин, тощекишечного лимфатического узла, подвздошно-ободочного лимфатического узла, тощей кишки, подвздошной кишки и слепой кишки. Результаты отображаются в виде тепловой карты: темно-синие/синие прямоугольники указывают на обнаружение Salmonella Typhimurium путем выделения на агаре. Светло-голубые прямоугольники указывают на изоляцию после обогащения. Белые прямоугольники показывают отрицательные результаты для Salmonella Typhimurium.

Продукция IFN-γ, TNF-α и/или IL-17A CD4

⁺ Т-клетками после стимуляции СТМ — клеточный ответ в отношении продукции IFN-γ, TNF-α и IL-17A. С этой целью стимулировали РВМС, а также лимфоциты, выделенные из селезенки, миндалин, тощекишечных лимфатических узлов, подвздошно-ободочных лимфатических узлов, тощей и подвздошной кишки, собранных на конечных SD in vitro либо с вакцинным штаммом, либо со штаммом контрольной инфекции. Клетки, культивированные только в среде, служили отрицательным контролем. Для анализа цитокин-продуцирующих клеток и их фенотипа проводили многоцветную ФКМ. Чтобы идентифицировать Salmonella -специфические CD4 ⁺ Т-клетки, клетки CD4 ⁺ были включены в живые лимфоциты и дополнительно проанализированы на продукцию IFN-γ, TNF-α и IL-17A (рис. S1A). Впоследствии был применен булев гейтинг, что привело к семи возможным фенотипам, продуцирующим цитокины: монопродуцирующий IFN-γ, монопродуцирующий TNF-α, монопродуцирующий IL-17A, совместно продуцирующий IFN-γ/TNF-α, IFN- Клетки, совместно продуцирующие γ/IL-17A, совместно продуцирующие TNF-α/IL-17A, и тройные клетки, продуцирующие IFN-γ/TNF-α/IL-17A.

Необработанные частоты этих цитокин-продуцирующих фенотипов для всех органов и in vitro стимуляций перечислены в таблице S1.

Частота цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток различалась у разных животных и органов после стимуляции с помощью СТМ (рис. S1B-D). Сравнивая частоты цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток в органах, самые высокие частоты Salmonella -специфических CD4 ⁺ Т-клеток для всех фенотипов, связанных с цитокинами, можно было наблюдать в препаратах LPL тощей и подвздошной кишки (рис. масштаб оси Y на этом рисунке варьируется между тощей и подвздошной кишкой, лимфоидными органами и кровью/селезенкой).

Чтобы выяснить значимость отмеченных различий между контрольной группой и животными V+I, мы решили смоделировать пропорции цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток для всех фенотипов, животных и органов в обобщенной линейной смешанной модели. Все образцы от контрольных животных, а также нестимулированные образцы от животных V+I, культивируемых только в среде, служили референтными значениями. Влияние каждой отдельной свиньи сильно повлияло на данные, поэтому для каждого образца были рассчитаны остатки, чтобы минимизировать влияние фактора «животное». Анализ основных компонентов (PCA) и анализ тепловой карты были проведены на остатках цитокин-продуцирующих CD4 9.0135 + Т-клеток. За исключением монопродуцирующих IFN-γ CD4 ⁺ Т-клеток в крови, не было обнаружено существенных различий в частоте цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток между стимуляцией вакцинным штаммом и контрольным инфекционным штаммом (таблица S2). ). Кроме того, между обоими вариантами стимуляции в PCA и анализе тепловой карты не наблюдалось отдельной кластеризации (данные не показаны). По этим причинам данные обоих вариантов стимуляции были объединены для всех последующих анализов.

Кластерный анализ STM-стимулированных IFN-γ/TNF-α/IL-17A, продуцирующих CD4

⁺ Т-клеток

STM в первую очередь поражает желудочно-кишечный тракт и делает это, нарушая эпителиальный барьер кишечника. Чтобы изучить локальный иммунный ответ Т-клеток в этом месте инвазии, сначала был проведен кластерный анализ для двух отделов кишечника (тощая кишка, подвздошная кишка, рис. 3). Измерение 1 PCA показало четкое разделение точек данных, полученных из ткани кишечника, на две фракции: Образцы от животных V + I, стимулированных СТМ, сгруппированы вместе (оранжевые точки) с одной стороны. На противоположной стороне все образцы от контрольных животных (синие точки при стимуляции антигеном СТМ, зеленые точки при культивировании в среде), а также образцы V+I, культивированные только в среде (остальные зеленые точки), образовывали кластер (рис. 3А, С). Следовательно, Измерение 1 возникло в результате лечения животных (контроль против вакцинации и инфекции), а также стимуляции отдельных образцов (среда против антигена STM). Для обоих отделов кишечника на измерение 1 приходилось более 80% вариаций. Измерение 2, на которое приходится 8,1% и 10,1% вариации в тощей и подвздошной кишках соответственно, связано с типом продукции цитокинов. Клетки, продуцирующие преимущественно IFN-γ и совместно продуцирующие IFN-γ/TNF-α, сгруппированы вместе в верхнем квадранте, в то время как фенотипы, содержащие IL-17A, были сгруппированы в другом направлении. Выводы PCA были подтверждены результатами анализа тепловой карты (рис. 3B, D). На тепловых картах показано увеличение (красный) и уменьшение (синий) относительного содержания цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток. Относительное обилие фенотипов было заметно увеличено в образцах из группы V+I, которые были стимулированы СТМ, по сравнению с образцами от контрольных животных и образцами, содержащими только среду. В результате образовались два отдельных кластера, в которых образцы V+I, стимулированные СТМ, четко отделены от образцов контрольных животных и образцов от всех животных, культивируемых в среде. Опять же, аналогично результатам PCA, иерархическая группировка фенотипов цитокинов на дендрограммах показала, что IL-17A ⁺ фенотипов, таких как тройная продукция IFN-γ/TNF-α/IL-17A, копродукция IFN-γ/IL-17A и копродукция TNF-α/IL-17A CD4 ⁺ Т-клетки тесно родственные фенотипы, в то время как CD4 ⁺ Т-клетки, продуцирующие совместно IFN-γ/TNF-α, и монопродуцирующие IFN-γ Т-клетки группируются отдельно от них. Чтобы определить, являются ли наблюдаемые различия между контролем и группой V+I значимыми, были рассчитаны значения p для всех фенотипов и органов и при необходимости скорректированы для многократного тестирования (9).0355 p — значения ниже 0,1 считались значимыми). Достоверные различия между контрольной группой и группой V+I были обнаружены для 5 из 7 фенотипов в обоих отделах кишечника (табл. 1). Фенотипы, не достигающие значительных различий между группами, включали монопродуцирующие IL-17A CD4 ⁺ Т-клетки в обеих тканях кишечника, а также монопродуцирующие IFN-γ CD4 ⁺ Т-клетки в тощей кишке и TNF-α/IL-. 17A, совместно продуцирующие CD4 ⁺ Т-клеток в подвздошной кишке.

Рисунок 3 Неконтролируемый кластерный анализ для Salmonella Typhimurium (STM), стимулированный интерфероном-γ (IFN-γ)/фактором некроза опухоли-α (TNF-α)/интерлейкином-17A (IL-17A), продуцирующим CD4 ⁺ Т-клеток, выделенных из тощей и подвздошной кишки. (A) Анализ основных компонентов (PCA) на основе остатков, рассчитанных для Т-клеток, продуцирующих цитокины CD4 ⁺, полученных из тощей кишки и стимулированных in vitro с помощью STM или только среды. Каждый цветной кружок представляет собой один из трех образцов, полученных от одного животного. Образцы, стимулированные СТМ (вакцина или контрольный штамм), показаны оранжевым цветом для животных V+I и синим цветом для контрольных животных; образцы из обеих групп, культивированные только на среде, показаны зеленым цветом. Стрелки изображают фенотипы, продуцирующие цитокины. (B) Тепловая карта остатков, рассчитанная для продуцирующих цитокины CD4 ⁺ Т-клеток, полученных из тощей кишки и стимулированных in vitro с помощью СТМ или только среды. Тепловые карты, созданные на основе данных, преобразованных в Z-показатели, показывают увеличение (красный) или снижение (синий) относительной численности цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток. Каждая строка представляет фенотип, продуцирующий цитокины, а каждый столбец — образец. Цифры под столбцами указывают номера отдельных животных. Образцы, стимулированные СТМ (вакцина или контрольный штамм), обозначены оранжевыми прямоугольниками для животных V+I и синими прямоугольниками для контрольных животных; образцы из обеих групп, культивированные только на среде, обозначены зелеными прямоугольниками. (C, D) То же, что и (A) , (B) , но для Т-клеток, продуцирующих цитокины CD4 ⁺, полученных из подвздошной кишки.

Таблица 1 Расчет контрастов Salmonella -специфических ответов цитокинов CD4 ⁺ Т-клеток между контрольными и V+I свиньями в тощей и подвздошной кишках.

Глядя на набор лимфатических органов, кластеризация в обоих кишечных лимфатических узлах была аналогична кластеризации, наблюдаемой в тощей и подвздошной кишке, как для PCA, так и для тепловых карт (рис. 4A–D). В обоих мезентериальных лимфатических узлах образцы V+I, стимулированные СТМ, сгруппировались вдали от контрольных образцов и образцов только со средой, при этом размер 1 составлял примерно 70% вариации (рис. 4А, С). Следует отметить, что монопродуцирующий IFN-γ CD4 ⁺ Т-клетки сгруппированы отдельно от всех других фенотипов в PCA. Скорее всего, это связано с увеличением содержания клеток, продуцирующих цитокины, у некоторых контрольных животных для этого фенотипа, как показано на соответствующих тепловых картах (рис. 4B, D). Соответственно, различия в относительном количестве монопродуцентов IFN-γ между группами не достигали значимости ни для одного из лимфатических узлов (таблица 2). По сравнению с наблюдениями в кишечнике, фенотипы, которые включали IL-17A, также образовывали тесно связанные кластеры в обоих лимфатических узлах, как показано на дендрограммах тепловой карты. P -значения для обоих лимфатических узлов выявили значительные различия между контрольными условиями и STM-стимулированными образцами от животных V+I для монопродуцирующих TNF-α, копродуцирующих IFN-γ/TNF-α и TNF-α/IL- 17A, совместно продуцирующие CD4 ⁺ Т-клеток. Дополнительные значительные различия были достигнуты для копродуцирующих IFN-γ/IL-17A и тройных продуцирующих IFN-γ/TNF-α/IL-17A CD4 ⁺ Т-клеток в подвздошно-ободочных лимфатических узлах. Однако в миндалинах разделение образцов V+I, стимулированных СТМ, от контрольных животных и образцов, содержащих только среду, было менее отчетливым (рис. 4E, F). Соответственно, в миндалинах между группами не было обнаружено существенных различий в количестве продуцирующих цитокины фенотипов (таблица 2).

Рисунок 4 Неконтролируемый кластерный анализ для Salmonella Typhimurium (STM)-стимулированный интерферон-γ (IFN-γ)/фактор некроза опухоли-α (TNF-α)/интерлейкин-17A (IL-17A), продуцирующий CD4 ⁺ Т-клеток, выделенных из тощекишечного лимфатического узла (JLN), подвздошно-ободочного лимфатического узла (ICLN) и миндалин. (A) Анализ главных компонентов (PCA) на основе остатков, рассчитанных для цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток, полученных из тощекишечного лимфатического узла и стимулированных in vitro только с СТМ или средой. Каждый цветной кружок представляет собой один из трех образцов, полученных от одного животного. Образцы, стимулированные СТМ (вакцина или контрольный штамм), показаны оранжевым цветом для животных V+I и синим цветом для контрольных животных; образцы из обеих групп, культивированные только на среде, показаны зеленым цветом. Стрелки изображают фенотипы, продуцирующие цитокины. (B) Тепловая карта остатков, рассчитанных для цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток, полученных из тощекишечного лимфатического узла и стимулированных in vitro только с СТМ или средой. Тепловые карты, созданные на основе данных, преобразованных в Z-показатели, показывают увеличение (красный) или снижение (синий) относительной численности цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток. Каждая строка представляет фенотип, продуцирующий цитокины, а каждый столбец — образец. Цифры под столбцами указывают номера отдельных животных. Образцы, стимулированные СТМ (вакцина или контрольный штамм), обозначены оранжевыми прямоугольниками для животных V+I и синими прямоугольниками для контрольных животных; образцы из обеих групп, культивированные только на среде, обозначены зелеными прямоугольниками. (C–F) То же, что и (A) , (B) , но для CD4 ⁺ Т-клеток, полученных из подвздошно-ободочного лимфатического узла (C, D) и миндалины (E, F) .

Таблица 2 Расчет контрастов Salmonella -специфических CD4 ⁺ Т-клеточных цитокиновых ответов между контрольными и V+I свиньями в тощекишечном лимфатическом узле (JLN), подвздошно-ободочном лимфатическом узле (ICLN) и миндалинах.

Кластерный анализ на STM-стимулированный цитокин-продуцирующий CD4 ⁺ T-клеток также выполняли для крови и селезенки, чтобы лучше понять системный иммунный ответ CD4 ⁺ T-клеток против STM (рис. 5). За некоторыми исключениями, контрольные образцы и образцы только со средой в значительной степени сгруппированы вдали от образцов V+I, стимулированных СТМ, и на измерение 1 приходилось около 50% вариаций в крови и селезенке (рис. 5А, С соответственно). В отличие от проанализированных тканей кишечника и лимфатических узлов, относительное содержание цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток, разбросанных по группам животных и типу стимуляция in vitro (среда по сравнению с антигеном STM) (фиг. 5B, D). Тем не менее, значительные различия между контролем и группой V+I могут быть обнаружены для IFN-γ/TNF-α, совместно продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток в крови и селезенке, с дополнительными значительными различиями для IFN-γ/IL-17A и IFN. -γ/TNF-α/IL-17A, совместно продуцирующие CD4 ⁺ Т-клеток в крови (табл. 3). Следует отметить, что совместно продуцирующие IFN-γ/TNF-α CD4 ⁺ Т-клетки представляли собой единственный фенотип, который значительно различался между контрольными и V+I животными во всех органах, за исключением миндалин.

Рисунок 5 Неконтролируемый кластерный анализ для Salmonella Typhimurium (STM)-стимулированный интерферон-γ (IFN-γ)/фактор некроза опухоли-α (TNF-α)/интерлейкин-17A (IL-17A), продуцирующий CD4 ⁺ Т-клетки выделены из крови и селезенки. (A) Анализ основных компонентов (PCA) на основе остатков, рассчитанных для цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток, полученных из крови и стимулированных in vitro с помощью СТМ или только среды. Каждый цветной кружок представляет собой один из трех образцов, полученных от одного животного. Образцы, стимулированные СТМ (вакцина или контрольный штамм), показаны оранжевым цветом для животных V+I и синим цветом для контрольных животных; образцы из обеих групп, культивированные только на среде, показаны зеленым цветом. Стрелки изображают фенотипы, продуцирующие цитокины. (B) Тепловая карта остатков, рассчитанная для цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток, полученных из крови и стимулированных in vitro с помощью СТМ или только среды. Тепловые карты, созданные на основе данных, преобразованных в Z-показатели, показывают увеличение (красный) или снижение (синий) относительной численности цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток. Каждая строка представляет фенотип, продуцирующий цитокины, а каждый столбец — образец. Цифры под столбцами указывают номера отдельных животных. Образцы, стимулированные СТМ (вакцина или контрольный штамм), обозначены оранжевыми прямоугольниками для животных V+I и синими прямоугольниками для контрольных животных; образцы из обеих групп, культивированные только на среде, обозначены зелеными прямоугольниками. (C, D) То же, что и (A) , (B) , но для Т-клеток, продуцирующих цитокины CD4 ⁺, полученных из селезенки.

Таблица 3 Расчет контрастов Salmonella -специфических CD4 ⁺ Т-клеточных цитокиновых ответов между контрольными и V+I свиньями в крови и селезенке.

Кластерный анализ

Salmonella -специфических цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток по органам и фенотипам

Из-за заметных различий между органами с точки зрения обеих частот цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток и тип продукции цитокинов, мы провели кластерный анализ стимулированных СТМ образцов от животных V+I, который охватил все семь органов. Здесь можно было наблюдать формирование трех кластеров с помощью PCA (рис. 6). Кровь и селезенка как два системных органа образовывали один кластер с миндалинами и лимфатическими узлами, образующими другой плотный кластер лимфатического происхождения на той же стороне, в то время как все образцы из ткани кишечника группировались отдельно. Как видно из необработанных данных (рис. S2), содержания Salmonella -специфические Т-клетки, продуцирующие цитокины CD4 ⁺, в тощей и подвздошной кишках значительно превышали таковые, обнаруженные в других органах, как указано стрелками для всех фенотипов, продуцирующих цитокины, указывающими на скопление образцов ткани кишечника (рис. 6). Соответственно, на Измерение 1 приходится 88,7% изменчивости в наборе данных. Следует отметить, что измерение 2 учитывало только 5,2% вариабельности, но все же давало четкое разделение крови и селезенки по сравнению с лимфатическими органами. В сочетании с фенотипами продукции цитокинов, где клетки, продуцирующие один IFN-γ, и клетки, совместно продуцирующие IFN-γ/TNF-α, отделены от других фенотипов, это указывает на то, что фенотипы, продуцирующие IL-17A, менее выражены в системном иммунном ответе. обнаруживаются в крови и селезенке.

Рисунок 6 Анализ главных компонентов (PCA) для STM-стимулированного интерферона-γ (IFN-γ)/фактора некроза опухоли-α (TNF-α)/интерлейкина-17A (IL-17A), продуцирующих CD4 ⁺ T клетки, выделенные из различных органов. PCA на основе остатков, рассчитанных для цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток, полученных из тощей кишки, подвздошной кишки, тощекишечного лимфатического узла (JLN), подвздошно-ободочного лимфатического узла (ICLN), миндалин, крови и селезенки после стимуляции in vitro с помощью STM. Каждый цветной кружок представляет собой один из двух образцов от одного животного (стимуляция либо вакциной, либо контрольным штаммом). Образцы окрашены в соответствии с органом происхождения (кровь: красная, селезенка: оранжевая, JLN: синяя, ICLN: светло-голубая, миндалины: фиолетовая, тощая кишка: зеленая, подвздошная кишка: светло-зеленая). Стрелки изображают фенотипы, продуцирующие цитокины.

Кластеризация фенотипов, продуцирующих цитокины, как видно на дендрограммах тепловой карты (рис. 3, 4 и 5B, C), также характеризовалась такой группировкой. Можно было наблюдать, что в органах фенотипы, содержащие IL-17A, образовывали близкородственные кластеры, тогда как IFN-γ одиночные, TNF-α одиночные и IFN-γ/TNF-α совместно продуцирующие CD4 ⁺ Т-клетки в значительной степени группировались отдельно. Чтобы изучить это с альтернативной точки зрения, тепловые карты были рассчитаны индивидуально для всех фенотипов, продуцирующих цитокины (рис. S3). Для большинства исследованных фенотипов появились отчетливые кластеры для STM-стимулированных образцов V+I, с одной стороны, и контрольных образцов и образцов, содержащих только среду, с другой стороны. В соответствии с наблюдениями на рисунке 6 дендрограммы показали, что органы преимущественно образуют кластеры в зависимости от их соответствующего происхождения из системной, лимфатической или кишечной ткани.

Экспрессия CD8α и CD27 на

Salmonella -специфические цитокин-продуцирующие CD4 ⁺ Т-клетки

Ранее было показано, что свиные CD4 ⁺ Т-клетки могут дифференцироваться в наивные CD4 ^{+ 90 CD8α ^— CD27 ⁺ фенотип, тогда как CD8α ⁺ CD27 ⁺ и CD8α ⁺ CD27 ^— CD4 ⁺ Т-клетки составляют центральную память (TcmTem) и эффекторы соответственно 32). Поэтому мы проанализировали CD8α наряду с экспрессией CD27 для всех семи фенотипов, продуцирующих цитокины, во всех органах (рис. 7). Стратегия селекции для идентификации этих фенотипов показана на рисунке S4. Репрезентативные необработанные данные для экспрессии CD8α/CD27 цитокин-продуцирующего CD4 ⁺ Т-клеток после СТМ-стимуляции показано на рисунке S5. Как показано на фиг. 7, едва ли были обнаружены Salmonella -специфические цитокин-продуцирующие CD4 ⁺ Т-клетки с ранее не охарактеризованным фенотипом CD8α ^— CD27 ^—. Кроме того, CD8α ^— CD27 ⁺ наивные Т-клетки показали лишь низкую способность к продукции цитокинов за некоторыми исключениями, такими как отдельные продуценты TNF-α и IL-17A в крови. Вместо этого сальмонелла -специфические цитокин-продуцирующие CD4 ⁺ Т-клетки преимущественно имели фенотип эффекторной памяти CD8α ⁺ CD27 ^—, особенно в тканях кишечника. В то время как CD8α ⁺ CD27 ⁺ популяция центральной памяти присутствовала в основном для двойных IFN-γ/TNF-α и тройных IFN-γ/TNF-α/IL-17A CD4 ⁺ Т-клеток в проанализированных не -кишечник, фенотипы цитокинов, присутствующие в тощей и подвздошной кишках, были почти исключительно эффекторными Т-клетками памяти.}

Рисунок 7 CD8α и CD27 экспрессия цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток в анализируемых органах. Окрашивание внутриклеточных цитокинов проводили на лимфоцитах, выделенных из ткани органа, после стимуляции в течение ночи in vitro контрольным штаммом. CD4 ⁺ Т-клетки анализировали на экспрессию интерферона-γ (IFN-γ), фактора некроза опухоли-α (TNF-α) и интерлейкина-17A (IL-17A) и группировали по семи цитокин-продуцирующим фенотипам. Цитокин-продуцирующий CD4 ⁺ Т-клетки были далее субгейтированы для CD8α и CD27 для идентификации четырех CD8a/CD27-определяемых клеточных популяций: CD8α ^— CD27 ⁺ (зеленый), CD8α ⁺ CD27 ⁺ (голубой), CD8α ⁺ CD27 ^— (темно-синий), CD8α ^— CD27 ^— (фиолетовый). Отдельные графики показывают процент CD8a/CD27-определяемых клеточных популяций для каждого фенотипа, продуцирующего цитокины, у отдельных животных группы V+I. Черные полосы обозначают медиану, а усы показывают межквартильный размах. Данные были получены со дня вскрытия соответствующих животных.

Обсуждение

Информация о Т-клеточном ответе свиней на СТМ все еще недостаточна. По большей части предыдущие исследования были сосредоточены на обнаружении местных и системных иммунных ответов на уровне мРНК и обнаружили, что инфекция STM у свиней вызывает активацию экспрессии мРНК цитокинов, таких как IFN-γ, TNF-α и IL-1β (16–16). 20). Однако фенотип клеток, продуцирующих эти транскрипты мРНК, не исследовался. Только в одном исследовании также измерялась экспрессия факторов транскрипции T-bet, Gata-3 и Foxp3 в CD4 9.0135 + Т-клеток после заражения STM (41), но результаты не были полностью убедительными. Иными словами, в мышиной модели CD4 ⁺ Т-клетки широко признаны основной подгруппой иммунных клеток, ответственной за защиту от STM (21, 22). Следовательно, мы решили сосредоточить наше исследование на CD4 ⁺ Т-клетках.

Принимая во внимание также отсутствие знаний о величине Т-клеточного ответа свиней на STM, мы решили стимулировать иммунную систему путем двойной вакцинации Salmoporc и последующей контрольной инфекции вирулентным штаммом STM. Мы выбрали эту схему, потому что она также использовалась в прошлом для демонстрации эффективности вакцины. Эти исследования показали, что по сравнению с двумя вакцинациями или однократной инфекцией титры STM-специфических IgG в крови были самыми высокими после этой комбинации двух вакцинаций и последующей контрольной инфекции (11). Следовательно, мы предположили, что это также может указывать на активацию CD4 ⁺ Т-клетки на системном уровне. Мы также предположили, что это, вероятно, совпало бы с активацией Т-клеток в слизистой оболочке кишечника, поскольку вакцина и контрольная инфекция применялись перорально.

Из семи органов, проанализированных в этом исследовании, самая высокая колонизация СТМ была обнаружена в миндалинах. Это неудивительно, поскольку известно, что миндалины инвазируются различными бактериями, при этом СТМ часто приводит к персистирующей инфекции в этом месте (42, 43). Следует отметить, что миндалины были тканью с самой низкой частотой цитокин-продуцирующих CD4 9.0135 + Т-клеток и никаких существенных различий по любому фенотипу цитокинов не было обнаружено между животными V+I и контрольными условиями. Одним из возможных объяснений может быть расположение возбудителя внутри органа. В отличие от тощей и подвздошной кишки, где СТМ проникает в эпителиальные клетки, он в основном находится внеклеточно в миндалинах свиньи (44), что затрудняет атаку иммунной системы на патоген. Исследования последних лет также представляют доказательства того, что экспрессия бактериальных генов связана с выживаемостью и персистенцией Salmonella в миндалинах сильно отличается от экспрессии генов, связанных с этими механизмами в кишечнике и ассоциированных с кишечником лимфатических узлах (45–47). Еще одним фактором может быть противовоспалительный характер миндалин. У человека дендритные клетки, происходящие из миндалин, индуцируют только слабый Т-клеточный ответ на патогены, встречающиеся на слизистой оболочке, но скорее поддерживают иммунотолерантность (48). Это наблюдение согласуется с исследованиями на свиньях, где присутствие Actinobacillus pleuropneumoniae в миндалинах индуцировало увеличение экспрессии IL-10 (49).). Хотя продукция IL-10 не измерялась в нашем исследовании, возможен аналогичный сценарий, который мог бы объяснить плохую индукцию ответов Th2 и Th27 в этом органе.

В отличие от всех других органов, мы обнаружили самые высокие частоты цитокин-продуцирующих Salmonella -специфических CD4 ⁺ Т-клеток в LPL, выделенных из тощей и подвздошной кишки. Следует отметить, что инфекция STM у свиней в основном ограничивается кишечником, тогда как потенциальная системная инфекция недостаточно изучена (50). Модели на мышах показали, что может иметь место диссеминация в мезентериальные лимфатические узлы, кровь и системные органы (51). Мы не нашли Salmonella в селезенке и печени любого животного через две недели после заражения. Поскольку иммунная система животных V+I уже была активирована вакцинацией до заражения, возможно, что инфекция была либо уже излечена, либо даже не распространилась на эти системные участки. В соответствии с этим только несколько фенотипов цитокин-продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток показали значительное повышение в крови и селезенке животных V+I (таблица 3). Больше фенотипов, значительно отличающихся между V+I и контрольными свиньями, было обнаружено для исследованных лимфатических узлов, дренирующих кишечник (таблица 2), тогда как в срезах кишечника были индуцированы почти все семь возможных фенотипов, продуцирующих цитокины (таблица 1). Это согласуется с исследованиями на мышах и людях, где Т-клетки, находящиеся в собственной пластинке пластинки, уже признаны важным элементом ответа на СТМ и Сальмонелла Тифи (52–54). Присутствие очень высокого содержания Salmonella -специфических Т-клеток, продуцирующих цитокины CD4 ⁺, в собственной пластинке кишечника животных V+I в нашем исследовании предполагает, что они также играют жизненно важную роль в иммунном ответе слизистой оболочки против STM. инфекции у свиньи.

При более внимательном рассмотрении семи возможных фенотипов, продуцирующих цитокины, в различных органах стало очевидно, что фенотипы, содержащие IL-17A, образуют тесно связанные кластеры, часто отделяющиеся от IFN-γ и IFN-γ/TNF-α, совместно продуцирующих CD4 ⁺ Т-клеток. Это разделение особенно заметно в тощей и подвздошной кишках. Хорошо известно, что клетки Th27 и их сигнатурный цитокин IL-17A способствуют иммунитету слизистых оболочек и защите от внутриклеточных кишечных патогенов (55–57). Ранее было показано, что инфекция STM индуцирует экспрессию цитокинов Th27 в слизистой оболочке кишечника других видов, таких как мыши, телята и макаки-резусы (27, 58). Истощение клеток Th27 в слизистой оболочке кишечника макак-резусов при заражении вирусом иммунодефицита обезьян коррелировало с повышенной диссеминацией STM в брыжеечных лимфатических узлах (27), что позволяет предположить, что клетки Th27 важны для сдерживания заболевания. С другой стороны, обсуждалось, что IL-17A-индуцированное рекрутирование нейтрофилов и возникающее в результате воспаление используется патогенами, такими как STM, и в конечном итоге способствует бактериальной колонизации (59). ). Поскольку все животные V+I были вакцинированы перед заражением, и мы не обнаружили никаких признаков воспаления в их кишечнике, негативное влияние фенотипов Th27, специфичных для Salmonella , наблюдаемое в этом исследовании, кажется маловероятным. Вместо этого мы приводим доказательства того, что клетки Th27, по-видимому, также играют защитную роль в защите хозяина от STM у свиней.

Однако, в отличие от других популяций IL-17A ⁺, монопродуцирующие IL-17A CD4 ⁺ Т-клетки были единственным цитокиновым фенотипом, который не достиг значимой разницы между контрольной группой и свиньями V+I ни в одной из групп. органы. Действительно, мы наблюдали во всех органах, что CD4 ⁺ Фенотипы Т-клеток, состоящие из более чем одного цитокина, такие как IFN-γ/TNF-α, IFN-γ/IL-17A, TNF-α/IL-17A и IFN-γ/TNF-α/IL- 17А, в целом достигали значительных различий по сравнению с контрольной группой чаще, чем Т-клетки, продуцирующие один цитокин CD4 ⁺. Т-клетки, продуцирующие несколько цитокинов, также называемые многофункциональными (МФ) Т-клетками, были связаны с защитой от нескольких бактериальных и вирусных инфекций у людей и мышей (60–63), и было обнаружено, что они функционально превосходят своих аналогов, продуцирующих только один цитокин (64). ). Исследования на свиньях также продемонстрировали участие антиген-специфических МФ CD4 ⁺ Т-клеток в ответ на различные патогены (65–68). В то время как совместное производство IFN-γ, TNF-α и IL-2 Т-клетками часто исследуется, сообщения об этих цитокинах в сочетании с IL-17A в контексте инфекционных заболеваний довольно скудны. Что касается Salmonella , то в крови и терминальном отделе подвздошной кишки человека были зарегистрированы ответы Т-клеток MF IL-17A. Вакцинация или заражение Salmonella Typhi приводили к индукции МФ CD8 ⁺ и CD4 9Было показано, что ответы 0135 + Т-клеток, которые в случае МФ CD8 ⁺ Т-клеток в РВМС, коррелируют с исходом заболевания (54, 69, 70). Насколько нам известно, это первое описание одновременной продукции IL-17A с IFN-γ и TNF-α антиген-специфическими CD4 ⁺ T-клетками у свиньи, и можно предположить, что MF CD4 ⁺ T-клеток может служить коррелятом защиты от инфекции STM у свиней. В частности, IFN-γ/TNF-α, совместно продуцирующие CD4 ⁺ Т-клетки, кажутся многообещающими кандидатами, поскольку значительные различия между группами были достигнуты для шести из семи проанализированных органов для этого фенотипа, включая кровь. Более того, основываясь на наблюдениях на мышиной модели, вполне вероятно, что эти клетки вносят вклад в клиренс СТМ за счет мощной стимуляции макрофагов, поглотивших патоген (23, 26).

Интересно, что недавно было показано, что незнакомая стимуляция клеток Th2 способствует разрешению инфекции Salmonella у мышей (71, 72). Это описывает механизм, при котором Т-клетки стимулируются независимыми от Т-клеточного рецептора (TCR) стимулами, такими как воспалительные цитокины, без распознавания TCR родственного антигена, представленного антигенпрезентирующими клетками. Поскольку в нашем исследовании мы проанализировали общее количество CD4 ⁺ Т-клеток и использовали цельный бактериальный антиген для in vitro повторной стимуляции, возможно, что часть измеренной продукции цитокинов CD4 ⁺ Т-клетками может быть получена в результате неродственной стимуляции, а не в результате прямой стимуляции TCR. До сих пор эти реакции свидетелей в основном были описаны в эффекторных или памяти CD4 ⁺ Т-клетках (73, 74). Учитывая сильную стимуляцию, примененную в нашем исследовании с двумя вакцинациями и контрольной инфекцией, можно предположить, что некоторые из Т-клеток в наших анализах уже достигли состояния дифференцировки, которое могло позволить им реагировать неродственным образом. Хотя это может привести к несколько завышенным числам специфичных для СТМ CD4 ⁺ Т-клеток у животных V+I, это может более точно отражать ситуацию, происходящую в естественных условиях .

Для исследования дальнейшей функциональной дифференциации мы рассмотрели экспрессию CD8α и CD27, которые были предложены для различения центральной (Tcm) и эффекторной памяти (Tem) CD4 ⁺ Т-клеток у свиньи (32). Salmonella -специфический цитокин-продуцирующий CD4 ⁺ Т-клетки во всех органах преимущественно экспрессировали CD8α при отсутствии CD27, что соответствует фенотипу Tem у свиньи. И наоборот, предыдущие исследования вирусных инфекций у свиней показали, что CD4 9Субпопуляция 0135 + Tcm была способна продуцировать IFN-γ, TNF-α и/или IL-2 (66, 75). Тем не менее, мы обнаружили два фенотипа, а именно IFN-γ/TNF-α, совместно продуцирующие IFN-γ/TNF-α/IL-17A, тройные продуценты CD4 ⁺ Т-клеток, со значительной популяцией клеток, коэкспрессирующих CD8α и CD27 в тканях вне кишечника, что указывает на субпопуляцию Tcm. Поскольку IFN-γ/TNF-α, совместно продуцирующие CD4 ⁺ Т-клетки, также присутствовали в значительно более высоких количествах в V+I по сравнению с контрольными животными в крови, они могут быть использованы в качестве фенотипа для STM T-клеточного иммунитета у свинья.

В тощей и подвздошной кишке почти все клетки независимо от цитокинового фенотипа проявляли признаки клеток Tem. Действительно, в основном клетки Tem достигают нелимфоидных тканей, таких как кишечник (76, 77). Пул памяти слизистой оболочки содержит рециркулирующие, а также резидентные Т-клетки памяти (Trm), которые остаются в ткани в течение длительного времени, чтобы инициировать немедленный иммунный ответ против кишечных патогенов (77, 78). У людей Salmonella Typhi-специфические клетки CD4 ⁺ Trm индуцировались в слизистой оболочке подвздошной кишки после иммунизации Ty21a (54). Кроме того, было показано, что резидентные клетки памяти Th2 незаменимы для защиты от инфекции STM у мышей (30). К сожалению, из-за отсутствия доступных антител к маркерам тканевой резидентности клетки Trm еще не могут быть идентифицированы у свиней. Тем не менее, мы можем предположить, что часть популяции, идентифицированная в настоящее время как Tem-клетки в кишечнике, может представлять Trm-клетки. Эти клетки, возможно, уже были индуцированы вакцинацией, постоянно осели в кишечнике и повторно активировались при заражении контрольным заражением.

В заключение, вакцинировав поросят живой аттенуированной вакциной STM и заразив их вирулентным штаммом STM, мы смогли продемонстрировать индукцию STM-специфических многофункциональных CD4 ⁺ Т-клеток во всех органах с сильным обогащением слизистой оболочки кишечника. Эти клетки преимущественно обладали фенотипом эффекторной памяти. Их многофункциональный цитокиновый профиль предполагает участие в защитном иммунитете против инфекции STM и копродукции IFN-γ/TNF-α CD4 ⁺ Т-клетки в крови могут быть дополнительно исследованы в качестве маркера долговременного защитного иммунитета против инфекций STM. Наконец, мы считаем, что наше исследование формирует важную основу для более глубоких исследований Т-клеточного ответа свиней на ВТМ только после вакцинации или инфекции. Таким образом постулируемые корреляты защиты будут дополнительно подтверждены.

Заявление о доступности данных

Необработанные данные, подтверждающие выводы этой статьи, будут предоставлены авторами без неоправданных оговорок.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Консультативным комитетом по экспериментам на животных Венского университета ветеринарной медицины и Федеральным министерством науки, исследований и экономики (BMWF-68.205/0241-WF/V/3b/2016). ).

Вклад авторов

SSp, TT, VF, AS и WG придумали идею и разработали проект. ES, CK и AL организовали эксперимент на животных и вскрытие со сбором образцов. EV, AP, JL, KM и MS выполнили выделение лимфоцитов и in vitro стимуляция. SSc провел эксперименты по проточной цитометрии. JS провел бактериологический анализ. Доктор медицинских наук провел статистический анализ. SSc и WG проанализировали эксперименты, интерпретировали данные и написали рукопись. SSp, TT, VF, AL и AS помогали в интерпретации данных. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Финансирование

Этот проект финансировался компанией Ceva Innovation Center GmbH (ранее принадлежавшей IDT Biologika GmbH), Дессау-Росслау, Германия.

Конфликт интересов

SSp, TT и VF работают в Ceva Innovation Center GmbH.

Авторы заявляют, что данное исследование финансировалось Ceva Innovation Center GmbH (ранее принадлежавшей IDT Biologika GmbH), Дессау-Рослау, Германия. Спонсор участвовал в исследовании следующим образом: соавторы, нанятые спонсором, участвовали в разработке исследования и интерпретации результатов, как указано в заявлении о «вкладе автора». Однако это не повлияло на научную достоверность исследования и представленных результатов.

Остальные авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Мы благодарим Микаэлу Кох за проведение теста IDEXX Swine Salmonella Ab Test, а также Хайко Штейна, Маркуса Цихара и Софи Дюрлингер за их помощь в работе с животными.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www. frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2020.603089/full#supplementary-material

Ссылки

1. Majowicz SE, Musto J, Scallan E, Angulo FJ, Kirk M, O’Brien SJ, et al. Глобальное бремя нетифоидного сальмонеллезного гастроэнтерита. Clin Infect Dis (2010) 50:882–9. doi: 10.1086/650733

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

2. Ченг Р.А., Иде Ч.Р., Видманн М. Охватывая разнообразие: различия в механизмах вирулентности, тяжести заболевания и адаптации хозяина способствуют успеху нетифозной сальмонеллы как патогена пищевого происхождения. Front Microbiol (2019) 10:1368. doi: 10.3389/fmicb.2019.01368

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

3. EFSA. Европейское агентство по безопасности пищевых продуктов (EFSA) и Европейский центр профилактики и контроля заболеваний (ECDC): Сводный отчет Европейского союза о тенденциях и источниках зоонозов, зоонозных агентов и вспышек болезней пищевого происхождения в 2017 г. EFS2 (2018) 16:22 –67. doi: 10.2903/j.efsa.2018.5500

Полный текст CrossRef | Академия Google

4. Campos J, Mourão J, Peixe L, Antunes P. Небрюшнотифозная сальмонелла в производственной цепочке свиноводства: всесторонний анализ ее воздействия на здоровье человека. Pathogens (2019) 8. doi: 10.3390/pathogens8010019

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

5. Бонарди С. Сальмонелла в цепочке производства свинины и ее влияние на здоровье человека в Европейском Союзе. Epidemiol Infect (2017) 145:1513–26. doi: 10.1017/S095026881700036X

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

6. Андрес В.М., Дэвис Р.Х. Меры биобезопасности для борьбы с сальмонеллой и другими инфекционными агентами на свинофермах: обзор. Compr Rev Food Sci Food Saf (2015) 14:317–35. doi: 10.1111/1541-4337.12137

Полный текст CrossRef | Google Scholar

7. Спрингер С., Линднер Т. , Штайнбах Г., Зельбитц Х.Дж. Исследование эффективности генетически стабильной живой вакцины Salmonella typhimurium для применения на свиньях. Берл Мунк Tierarztl Wochenschr (2001) 114:342–5. doi: 10.31274/safepork-180809-1072

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

8. Эддикс М., Пальцер А., Хормансдорфер С., Ритцманн М., Хейнрици К. Uberprüfung der Verträglichkeit des Salmonella Typhimurium-Lebendimpfstoffes Salmoporc für drei Tage alte Saugferkel. DTW Dtsch Tierarztl Wochenschr (2009) 116: 249–54.

Реферат PubMed | Google Scholar

9. Roesler U, Stief M, Leffler M, Truyen U, Lehmann J, Szabo I, et al. Стойкость, экскреция и эффективность аттенуированной сальмонеллезной вакцины у поросят-сосунов. Prakt Tierarzt (2010) 91:59–65.

Google Scholar

10. Дэвис Р., Гослинг Р.Дж., Уэльс А.Д., Смит Р.П. Использование аттенуированной живой вакцины Salmonella Typhimurium на трех племенных свинофермах: долгосрочное наблюдательное полевое исследование. Comp Immunol Microbiol Infect Dis (2016) 46:7–15. doi: 10.1016/j.cimid.2016.03.005

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

11. Theuß T, Ueberham E, Lehmann J, Lindner T, Springer S. Иммуногенный потенциал живой вакцины Salmonella Typhimurium для свиней против монофазной Salmonella Typhimurium DT 193. BMC Vet Res (2017) 13:343. doi: 10.1186/s12917-017-1271-5

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

12. Смит Р.П., Андрес В., Мартелли Ф., Гослинг Б., Марко-Хименес Ф., Воган К. и др. Вакцинация матерей как стратегия сокращения Salmonella Typhimurium на свинофермах. J Appl Microbiol (2018) 124:274–85. doi: 10.1111/jam.13609

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

13. Питерс Л., Дьюульф Дж., Бойен Ф., Броссе С., Вандерсмиссен Т., Рассхарт Г. и др. Бактериологическая оценка вакцинации против Salmonella Typhimurium аттенуированной вакциной в субклинически инфицированных стадах свиней. Назад Vet Med (2020) 182:104687. doi: 10.1016/j.prevetmed.2019.04.016

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

14. Trepnau D, Ulrich E, Uhlig R, Lindner T, Selbitz HJ, Rösler U, et al. Antikörperantwort nach Impfung von Mastschweinen mit einem Salmonella-Typhimurium-Lebendimpfstoff в Abhängigkeit von der Applikationsform. Берл Мунк Tierarztl Wochenschr (2008) 121:334–40.

Реферат PubMed | Google Scholar

15. Сабо И., Шерер К., Ройслер У., Аппель Б., Неклер К., Хенсель А. Сравнительный анализ и валидация тест-систем ELISA для диагностики сальмонеллы тифимуриума свиней на убое. Int J Food Microbiol (2008) 124:65–9. doi: 10.1016/j.ijfoodmicro.2008.02.022

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

16. Матиасович Дж., Степанова Х., Кудлачкова Х., Хавличкова Х., Сисак Ф., Рыхлик И. и др. Иммунный ответ свиней на инфекции Salmonella enterica serovar Derby и Typhimurium. Vet Microbiol (2014) 170:284–90. doi: 10.1016/j.vetmic.2014.02.003

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

17. Мартинс Р.П., Лоренци В., Арсе С., Лусена С., Карвахаль А., Гарридо Дж.Дж. Механизмы врожденного и адаптивного иммунитета эффективно индуцируются в подвздошных пейеровых бляшках свиней, инфицированных Salmonella typhimurium. Dev Comp Immunol (2013) 41:100–4. doi: 10.1016/j.dci.2013.04.020

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

18. Meurens F, Berri M, Auray G, Melo S, Levast B, Virlogeux-Payant I, et al. Ранний иммунный ответ после инфекции Salmonella enterica subspecies enterica serovar Typhimurium в петлях тощей кишки свиньи. Вет Рез (2009) 40:5. doi: 10.1051/vetres:2008043

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

19. Knetter SM, Bearson SM, Huang T-H, Kurkiewicz D, Schroyen M, Nettleton D, et al. Salmonella enterica serovar Typhimurium, инфицированные свиньи с разным уровнем выделения, демонстрируют различные клинические, периферические цитокиновые и транскриптомные фенотипы иммунного ответа. Innate Immun (2015) 21:227–41. doi: 10.1177/17534255812

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

20. Кольядо-Ромеро М., Арсе С., Рамирес-Бу М., Карвахаль А., Гарридо Дж. Дж. Количественный анализ иммунного ответа на инфекцию Salmonella typhimurium вдоль кишечника свиньи. Vet Res (2010) 41:23. doi: 10.1051/vetres/2009072

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

21. Курц Дж. Р., Гоггинс Дж. А., Маклахлан Дж. Б. Инфекция сальмонеллы: взаимодействие между бактериями и иммунной системой хозяина. Immunol Lett (2017) 190:42–50. doi: 10.1016/j.imlet.2017.07.006

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

22. Фам О.Х., МакСорли С.Дж. Защитный иммунный ответ хозяина на сальмонеллезную инфекцию. Future Microbiol (2015) 10:101–10. doi: 10.2217/fmb.14.98

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

23. Nauciel C, Espinasse-Maes F. Роль гамма-интерферона и фактора некроза опухоли альфа в устойчивости к инфекции Salmonella typhimurium. Infect Immun (1992) 60:450–4. doi: 10.1128/IAI.60.2.450-454.1992

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

24. Хесс Дж., Ладель С., Мико Д., Кауфманн С.Х. Инфекция Salmonella typhimurium aroA- у мышей с иммунодефицитом, нацеленным на гены: основная роль CD4+ TCR-альфа-бета-клеток и IFN-гамма в бактериальном клиренсе независимо от внутриклеточной локализации. J Immunol (1996) 156:3321–6.

Реферат PubMed | Google Scholar

25. Равиндран Р., Фоли Дж., Стокласек Т., Глимчер Л.Х., МакСорли С.Дж. Экспрессия T-bet Т-клетками CD4 необходима для устойчивости к сальмонеллезной инфекции. J Immunol (2005) 175:4603–10. doi: 10.4049/jimmunol.175.7.4603

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

26. Тубо Н.Дж., Дженкинс М.К. CD4+ Т-клетки: хранители фагосомы. Clin Microbiol Rev (2014) 27:200–13. doi: 10.1128/CMR.00097-13

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

27. Raffatellu M, Santos RL, Verhoeven DE, George MD, Wilson RP, Winter SE, et al. Дефицит интерлейкина-17 в слизистой оболочке, вызванный вирусом иммунодефицита обезьян, способствует распространению сальмонелл из кишечника. Nat Med (2008) 14:421–8. doi: 10.1038/nm1743

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

28. Абуслеме Л., Мутсопулос Н.М. IL-17: обзор и роль в оральном иммунитете и микробиоме. Oral Dis (2017) 23:854–65. doi: 10.1111/odi.12598

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

29. Lee S-J, McLachlan JB, Kurtz JR, Fan D, Winter SE, Baumler AJ, et al. Временная экспрессия бактериальных белков инструктирует экспансию Т-клеток CD4 хозяина и развитие Th27. PLoS Pathog (2012) 8:e1002499. doi: 10.1371/journal.ppat. 1002499

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

30. Бенун Дж.М., Перес Н.Г., Ван Н., Фам О.Х., Рудисилл В.Л., Фогасси З.Н. и др. Оптимальная защита от инфекции Salmonella требует нециркулирующей памяти. Proc Natl Acad Sci USA (2018) 115:10416–21. doi: 10.1073/pnas.1808339115

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

31. Reutner K, Leitner J, Essler SE, Witter K, Patzl M, Steinberger P, et al. Свиной CD27: идентификация, экспрессия и функциональные аспекты в субпопуляциях лимфоцитов свиней. Dev Comp Immunol (2012) 38:321–31. doi: 10.1016/j.dci.2012.06.011

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

32. Reutner K, Leitner J, Müllebner A, Ladinig A, Essler SE, Duvigneau JC, et al. Экспрессия CD27 различает Т-хелперные клетки свиньи с функционально отличными свойствами. Vet Res (2013) 44:18. doi: 10.1186/1297-9716-44-18

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

33. Трюпшух С., Лаверде Гомес Дж. А., Эдиберидзе И., Флигер А., Рабш В. Характеристика полирезистентной сальмонеллы Typhimurium 4,5,12:i:- DT193 штамма, несущего новый геномный остров, примыкающий к локусу тРНК thrW. Int J Med Microbiol (2010) 300:279–88. doi: 10.1016/j.ijmm.2010.02.001

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

34. Бейтс Д., Махлер М., Болкер Б., Уокер С. Подгонка линейных моделей смешанных эффектов с использованием lme4. J Stat Software (2015) 67. doi: 10.18637/jss.v067.i01

CrossRef Полный текст | Google Scholar

35. Фокс Дж., Монетт Г. Обобщенная диагностика коллинеарности. J Am Stat Assoc (1992) 87:178–83. doi: 10.1080/01621459.1992.10475190

CrossRef Full Text | Google Scholar

36. Fox J, Weisberg S. Компаньон R для прикладной регрессии . Тысяча дубов, Калифорния: SAGE (2019).

Google Scholar

37. Lenth R. Расчетные предельные средние, также известные как средние наименьших квадратов [пакет R emmeans версия 1. 4.8] . (2020). Доступно по адресу: https://CRAN.R-project.org/package=emmeans.

Google Scholar

38. Бенджамини Ю., Хохберг Ю. Контроль уровня ложных открытий: практичный и мощный подход к множественному тестированию. JR Stat Soc Ser B Methodol (1995) 57:289–300. doi: 10.1111/j.2517-6161.1995.tb02031.x

Полный текст CrossRef | Google Scholar

39. Кассамбара А., Мундт Ф. Извлечение и визуализация результатов многомерного анализа данных [R package factoextra версия 1.0.7] . (2020). Доступно по адресу: https://CRAN.R-project.org/package=factoextra.

Google Scholar

40. Warnes GR, Bolker B, Bonebakker L, Gentleman R, Huber W, Liaw A, et al. Различные инструменты программирования R для построения данных [пакет R gplots версии 3.0.4] . (2020). Доступно по адресу: https://CRAN.R-project.org/package=gplots.

Google Scholar

41. Kreuzer S, Rieger J, Strucken EM, Thaben N, Hünigen H, Nöckler K, et al. Характеристика субпопуляций CD4+ и клеток CD25+ в лимфатической ткани подвздошной кишки поросят-отъемышей, инфицированных Salmonella Typhimurium с кормлением Enterococus faecium или без него. Vet Immunol Immunopathol (2014) 158:143–55. doi: 10.1016/j.vetimm.2014.01.001

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

42. Вуд Р.Л., Поспишил А., Роуз Р. Распространение персистирующей инфекции Salmonella typhimurium во внутренних органах свиней. Am J Vet Res (1989) 50:1015–21.

Реферат PubMed | Google Scholar

43. Fedorka-Cray PJ, Kelley LC, Stabel TJ, Gray JT, Laufer JA. Альтернативные пути инвазии могут влиять на патогенез Salmonella typhimurium у свиней. Infect Immun (1995) 63:2658–64. doi: 10.1128/IAI.63.7.2658-2664.1995

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

44. van Parys A, Boyen F, Volf J, Verbrugghe E, Leyman B, Rychlik I, et al. Salmonella Typhimurium обитает в основном в виде внеклеточного патогена в миндалинах свиней, независимо от связанных с биопленкой генов csgA, csgD и adrA. Vet Microbiol (2010) 144:93–9. doi: 10.1016/j.vetmic.2009. 12.021

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

45. Boyen F, Pasmans F, van Immerseel F, Morgan E, Adriaensen C, Hernalsteens J-P, et al. Гены Salmonella Typhimurium SPI-1 способствуют колонизации кишечника, но не миндалин у свиней. Microbes Infect (2006) 8:2899–907. doi: 10.1016/j.micinf.2006.09.008

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

46. van Parys A, Boyen F, Leyman B, Verbrugghe E, Haesebrouck F, Pasmans F. Тканеспецифическая экспрессия генов Salmonella Typhimurium во время персистенции у свиней. PLoS One (2011) 6:e24120. doi: 10.1371/journal.pone.0024120

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

47. Verbrugghe E, van Parys A, Leyman B, Boyen F, Haesebrouck F, Pasmans F. HtpG способствует персистенции Salmonella Typhimurium в кишечнике свиней. Vet Res (2015) 46:118. doi: 10.1186/s13567-015-0261-5

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

48. Hallissey CM, Heyderman RS, Williams NA. Дендритные клетки, происходящие из миндалин человека, являются слабыми индукторами Т-клеточного иммунитета к патогенам, встречающимся на слизистой оболочке. J Infect Dis (2014) 209:1847–56. doi: 10.1093/infdis/jit819

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

49. Müllebner A, Sassu EL, Ladinig A, Frömbling J, Miller I, Ehling-Schulz M, et al. Actinobacillus pleuropneumoniae запускает экспрессию IL-10 в миндалинах, что способствует колонизации и сохранению инфекции у свиней. Vet Immunol Immunopathol (2018) 205:17–23. doi: 10.1016/j.vetimm.2018.10.008

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

50. Boyen F, Haesebrouck F, Maes D, van Immerseel F, Ducatelle R, Pasmans F. Небрюшнотифозные сальмонеллезные инфекции у свиней: более пристальный взгляд на эпидемиологию, патогенез и контроль. Vet Microbiol (2008) 130:1–19. doi: 10.1016/j.vetmic. 2007.12.017

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

51. Уотсон К.Г., Холден Д.В. Динамика роста и диссеминации сальмонелл in vivo. Cell Microbiol (2010) 12:1389–97. doi: 10.1111/j.1462-5822.2010.01511.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

52. Gautreaux MD, Deitch EA, Berg RD. Т-лимфоциты в защите хозяина от бактериальной транслокации из желудочно-кишечного тракта. Infect Immun (1994) 62:2874–84. doi: 10.1128/IAI.62.7.2874-2884.1994

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

53. Yu X, Zhang H, Yu L, Liu M, Zuo Z, Han Q, et al. CD4+ Т-клетки собственной пластинки кишечника способствуют бактерицидной активности макрофагов через галектин-9и Взаимодействие Tim-3 во время инфекции Salmonella enterica Serovar Typhimurium. Infect Immun (2018) 86. doi: 10.1128/IAI.00769-17

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

54. Бут Дж.С., Голдберг Э., Барнс Р.С., Гринвальд Б.Д., Штейн М.Б. Пероральная брюшнотифозная вакцина Ty21a вызывает антиген-специфические резидентные CD4+ Т-клетки памяти в терминальном слое собственной пластинки подвздошной кишки человека и эпителиальных компартментах. J Transl Med (2020) 18:102. doi: 10.1186/s12967-020-02263-6

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

55. Khader SA, Gopal R. IL-17 в защитном иммунитете к внутриклеточным патогенам. Вирулентность (2010) 1:423–7. doi: 10.4161/viru.1.5.12862

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

56. Дубин П.Дж., Коллс Дж.К. Цитокины Th27 и мукозальный иммунитет. Immunol Rev (2008) 226:160–71. doi: 10.1111/j.1600-065X.2008.00703.x

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

57. Sellge G, Magalhaes JG, Konradt C, Fritz JH, Salgado-Pabon W, Eberl G, et al. Клетки Th27 являются доминирующим подтипом Т-клеток, примируемым Shigella flexneri, опосредующим защитный иммунитет. J Immunol (2010) 184:2076–85. doi: 10.4049/jimmunol.0

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

58. Raffatellu M, Santos RL, Chessa D, Wilson RP, Winter SE, Rossetti CA, et al. Капсула, кодирующая локус viaB, снижает экспрессию интерлейкина-17 и врожденные реакции слизистой оболочки кишечника крупного рогатого скота во время инфекции Salmonella enterica серотипа Typhi. Infect Immun (2007) 75:4342–50. doi: 10.1128/IAI.01571-06

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

59. Liu JZ, Pezeshki M, Raffatellu M. Цитокины Th27 и взаимодействия хозяин-патоген на слизистой оболочке: дихотомия помощи и вреда. Цитокин (2009) 48:156–60. doi: 10.1016/j.cyto.2009.07.005

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

60. Casazza JP, Betts MR, Price DA, Precopio ML, Ruff LE, Brenchley JM, et al. Приобретение прямых противовирусных эффекторных функций ЦМВ-специфичными CD4+ Т-лимфоцитами с клеточным созреванием. J Exp Med (2006) 203:2865–77. doi: 10.1084/jem.20052246

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

61. Darrah PA, Patel DT, de Luca PM, Lindsay RW, Davey DF, Flynn BJ, et al. Многофункциональные клетки Th2 определяют коррелят опосредованной вакциной защиты от Leishmania major. Nat Med (2007) 13:843–50. doi: 10.1038/nm1592

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

62. Kosinska AD, Johrden L, Zhang E, Fiedler M, Mayer A, Wildner O, et al. Буст-иммунизация ДНК-прайм-аденовирусом индуцирует энергичный и многофункциональный Т-клеточный ответ против гепаднавирусных белков в модели мышей и сурков. J Virol (2012) 86:9297–310. doi: 10.1128/JVI.00506-12

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

63. Lindenstrøm T, Agger EM, Korsholm KS, Darrah PA, Aagaard C, Seder RA, et al. Туберкулезная субъединичная вакцинация обеспечивает длительный защитный иммунитет, характеризующийся многофункциональными Т-клетками памяти CD4. J Immunol (2009) 182:8047–55. doi: 10.4049/jimmunol.0801592

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

64. Каннанганат С., Ибегбу С., Ченнаредди Л., Робинсон Х.Л., Амара Р.Р. Антивирусные Т-клетки CD4, продуцирующие множественные цитокины, функционально превосходят клетки, продуцирующие одиночные цитокины. J Virol (2007) 81:8468–76. doi: 10.1128/JVI.00228-07

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

65. Käser T, Pasternak JA, Delgado-Ortega M, Hamonic G, Lai K, Erickson J, et al. Chlamydia suis и Chlamydia trachomatis индуцируют многофункциональные Т-клетки CD4 у свиней. Вакцина (2017) 35:91–100. doi: 10.1016/j.vaccine.2016.11.050

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

66. Koinig HC, Talker SC, Stadler M, Ladinig A, Graage R, Ritzmann M, et al. Вакцинация против ЦВС-2 индуцирует Т-клетки, совместно продуцирующие IFN-γ/TNF-α и играющие потенциальную роль в защите. Вет Рез (2015) 46:20. doi: 10.1186/s13567-015-0157-4

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

67. Talker SC, Stadler M, Koinig HC, Mair KH, Rodríguez-Gómez IM, Graage R, et al. Вирусная инфекция гриппа А у свиней привлекает многофункциональные и перекрестно-реактивные Т-клетки в легкие. J Virol (2016) 90:9364–82. doi: 10.1128/JVI.01211-16

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

68. Holzer B, Morgan SB, Matsuoka Y, Edmans M, Salguero FJ, Everett H, et al. Сравнение гетеросубтипической защиты у хорьков и свиней, индуцированной одноцикловой вакциной против гриппа. J Immunol (2018) 200:4068–77. doi: 10.4049/jimmunol.1800142

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

69. Fresnay S, McArthur MA, Magder L, Darton TC, Jones C, Waddington CS, et al. Специфичные для Salmonella Typhi многофункциональные CD8+ T-клетки играют доминирующую роль в защите человека от брюшного тифа. J Transl Med (2016) 14:62. doi: 10.1186/s12967-016-0819-7

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

70. Макартур М.А., Штейн М.Б. Гетерогенность многофункционального IL-17A, продуцирующего S.typhi-специфические CD8+ Т-клетки, у добровольцев после иммунизации против брюшного тифа Ty21a. PLoS One (2012) 7:e38408. doi: 10.1371/journal.pone.0038408

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

71. Фам О.Х., О’Доннелл Х., Аль-Шамхани А., Керриннес Т., Цолис Р.М., МакСорли С.Дж. Т-клеточная экспрессия IL-18R и DR3 необходима для неродственной стимуляции клеток Th2 и оптимального удаления внутриклеточных бактерий. PLoS Pathog (2017) 13:e1006566. doi: 10.1371/journal.ppat.1006566

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

72. O’Donnell H, Pham OH, Li L-x, Atif SM, Lee S-J, Ravesloot MM, et al. Сигналы Toll-подобных рецепторов и инфламмасом сходятся, чтобы усилить врожденную бактерицидную способность Т-хелперов 1 клеток. Иммунитет (2014) 40:213–24. doi: 10.1016/j.immuni.2013.12.013

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

73. Ди Генова Г., Савельева Н., Сучацкий А., Третьеборо С.М., Стивенсон Ф.К. Посторонняя стимуляция активированных CD4+ Т-клеток неродственной специфичности после ревакцинации столбнячным анатоксином. Eur J Immunol (2010) 40:976–85. doi: 10.1002/eji.200940017

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

74. Bangs SC, Baban D, Cattan HJ, Li CK-F, McMichael AJ, Xu X-N. Т-клетки памяти CD4+ человека являются предпочтительными мишенями для активации свидетелей и апоптоза. J Immunol (2009) 182:1962–71. doi: 10.4049/jimmunol.0802596

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

75. Talker SC, Koinig HC, Stadler M, Graage R, Klingler E, Ladinig A, et al. Величина и кинетика многофункциональных CD4+ и CD8β+ Т-клеток у свиней, инфицированных вирусом свиного гриппа А. Vet Res (2015) 46:52. doi: 10.1186/s13567-015-0182-3

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

76. фон Андриан У.Х., Маккей Ч.Р. Функция Т-клеток и их миграция. Две стороны одной медали. N Engl J Med (2000) 343:1020–34. doi: 10.1056/NEJM200010053431407

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

77. Шенкель Дж. М., Масопуст Д. Резидентные в тканях Т-клетки памяти. Иммунитет (2014) 41:886–97. doi: 10.1016/j.immuni.2014.12.007

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

78. Фам О.Х., МакСорли С.Дж. Дивергентное поведение Т-клеток памяти слизистой оболочки. Mucosal Immunol (2015) 8:731–4. doi: 10.1038/mi.2015.52

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Амори Пьеррон из Monster Energy занял первое место на Кубке мира UCI по скоростному спуску на горных велосипедах в Ленцерхайде, Швейцария – europe-cities.

com

ШВЕЙЦАРИЯ

Сахар Миззи 10 июля 2022 г.

Амори Пьеррон из Monster Energy занимает первое место на Кубке мира UCI по скоростному спуску на горных велосипедах в Ленцерхайде, Швейцария

Действуй. Я просто очень взволнован!» – Амори Пьеррон

ЛЕНЦЕРХАЙДЕ, Швейцария (PRWEB)
10 июля 2022 г.

Продолжайте получать прибыль! Monster Energy поздравляет гонщиков команды Амори Пьеррона с победой в элитном дивизионе среди мужчин на чемпионате мира по скоростному спуску на горных велосипедах Mercedes-Benz UCI 2022 года в Ленцерхайде, Швейцария, в субботу. В четвертой гонке Кубка мира в сезоне 26-летний спортсмен из Бриуда, Франция, завершил спуск за 2:47,153 и защитил свою позицию номер один в рейтинге Кубка мира Mercedes-Benz UCI по горным велосипедам 2022 года.

В элитном женском дивизионе Камилла Баланш из Monster Energy заняла второе место с общим временем 3:16. 170. На глазах у родных болельщиков 32-летняя спортсменка из Ла-Шо-де-Фон в Швейцарии также сохранила свое лидерство в сезоне 2022 года.

Знаменитая трасса расположена в Ленцерхайде, Швейцария, на высоте 5577 футов и является самой высокой точкой сезона Кубка мира UCI по скоростному спуску 2022 года. Трасса длиной 2,2 км включает в себя технические и чрезвычайно быстрые участки вплоть до финиша.

Пьеррон из Monster Energy пришел в Ленцерхайде под номером один в таблице лидеров 2022 года. Ему тоже нужно было свести счеты: в 2021 году «летучий француз» едва не одержал свою первую победу на Кубке мира в Ленцерхайде, но решающая ошибка на последнем отрезке гонки разрушила его планы. Теперь он вернулся за добавкой.

Столкнувшись с конкуренцией со стороны американки Дакоты Нортон и канадца Финна Айлса, Пьеррон сохранил самообладание и продемонстрировал безупречное выступление в финальной гонке. С финишным временем 2:47,153 француз одержал победу, финишировав на дистанции более чем на 1,4 секунды впереди своего ближайшего соперника.

«Я чувствовал себя хорошо все выходные, а когда ты чувствуешь себя хорошо, ты просто должен сделать это. Я просто очень взволнован!» сказал Пьеррон из Monster Energy, финишировав первым в гонке в Леоганге.

Победа в Ленцерхайде продолжает доминирующий сезон для Пьеррона, который выиграл три из четырех гонок Кубка мира и выиграл квалификацию на этой гонке. «Летучий француз» начал свой сезон 2022 года с побед подряд в Лурде, Франция, и Форт-Уильям, Шотландия, прежде чем финишировать в Леоганге на этапе Тура на четвертом месте. Он остается на первом месте с 830 очками — колоссальные 274 очка впереди следующего гонщика — в таблице лидеров Кубка мира по горным велосипедам Mercedes-Benz UCI 2022 года.

«Я так взволнован! Я просто так сильно пошла. Я действительно хотел сделать один-один [финиш] с квалификациями и финалами, и я никогда не выигрывал квалификацию в этом году. Я очень рад быть последовательным и одержать еще одну победу в этом сезоне. Первый поворот был разрушен, я был в восторге! Мне просто нужно было не торопиться в первых нескольких поворотах, а затем нажать на газ. Думаю, в этом году трасса была более техничной», — сказал Пьеррон.

В женском элитном дивизионе Баланче из Monster Energy приехала в Ленцерхайде как лучшая участница рейтинга сезона 2022 года. Подбадриваемая восторженной публикой в родном городе, она намеревалась одержать свою первую победу в карьере на сложной трассе и вышла первой из квалификации.

Но когда все было сказано и сделано в финальной гонке в субботу, Баланш показала результат 3:16.170, сразу после Мириам Николь из Франции, занявшей первое место.

Баланче был в восторге от того, что финишировал вторым здесь, дома, на оглушительном праздновании после гонки. Швейцарская трасса не является ее любимой трассой, поэтому удержание очков в общем зачете и серебряной медали в эти выходные было почти так же хорошо, как и победа.

«Я очень взволнован. Конечно, победа была бы лучше, но я очень рад второму месту. Мой пробег не был идеальным, поэтому заслуженным. Они сделали здесь несколько хороших изменений, и трасса стала более сложной, так что в этом году я остался доволен. Это было здорово, спасибо фанатам!»

Второе место в субботу удерживает Баланче на первом месте в таблице лидеров Кубка мира по горным велосипедам Mercedes-Benz UCI 2022 года в элитном женском дивизионе. Она одержала победу в Лурде, Франция, и Леоганге, Австрия, и заняла второе место в Форт-Уильяме, Шотландия. С 895 очками на доске она опережает ближайшую соперницу на 100 очков.

Изабела Янкова из Болгарии заняла четвертое место среди юниоров и начинает восстанавливать форму, которая была в начале года, когда она увезла домой победу в Лурде. Лорис Вержье финишировал на 8-м месте среди элитных мужчин, за ним следуют Тибо Дапрела на 10-м, Дэнни Харт на 12-м, Марк Уоллес на 14-м, Коннор Фирон на 19-м.th и Трой Броснан на 20-м месте.

Что дальше для Пьеррона и Баланша? Оставайтесь с нами, поскольку Кубок мира UCI направляется в Вальнорд Пал Аринсал в Андорре, где состоится пятый раунд сезона 15 июля.

Подробнее об Амори Пьерроне, Камилле Баланш и посетите нашу команду спортсменов на горных велосипедах http://www. monsterenergy.com. Также следите за Monster Energy на YouTube, Facebook, Instagram, Twitter и отмечайте эксклюзивные обновления сезона MTB 2022 года.

###

О энергии монстров

Расположенная в Короне, Калифорния, компания Monster Energy является ведущим продавцом энергетических напитков и альтернативных напитков. Monster Energy отказывается признавать традиционное и поддерживает сцену и спорт. Будь то мотокросс, бездорожье, NASCAR, MMA, BMX, серфинг, сноуборд, лыжи, скейтборд или рок-н-ролльный стиль жизни, Monster Energy — это бренд, который верит в подлинность и находится в центре того, чем занимается его спорт, спортсмены и музыканты. представляют. Это больше, чем напиток, это образ жизни спортсменов, спортсменов, групп, верующих и фанатов. Узнайте больше о Monster Energy, включая все ее напитки, ниже http://www.monsterenergy.com.

‹ На Змека Цтнице в Праге охотился волк. Он спас его и поразил воображение › ВИДЕОСТРИМ ЧТК: Министры внутренних дел обсудят войну в Украине в Праге

Publications du CRPV de Toulouse

Andre L, Gallini A, Montastruc F, Coley N, Montastruc JL, Vellas B , Андриё С. , Гардетт В. ; Исследовательская группа MAPT/DSA. Антихолинергическое воздействие и снижение когнитивных функций у пожилых людей: влияние определений антихолинергического воздействия в 3-летнем анализе исследования Multidomain Alzheimer Preventive Trial (MAPT). Бр Дж Клин Фармакол. 2019;85:71-99.

Andre L, Gallini A, Montastruc F, Montastruc JL, Piau A, Lapeyre-Mestre M, Gardette V. Связь между воздействием антихолинергических (атропиновых) препаратов и когнитивной функцией в продольных исследованиях среди лиц старше 50 лет: систематическая обзор. Eur J Clin Pharmacol. 2019 ;75:1631-1644.

Araujo M, Hurault-Delarue C, Bouilhac C, Petiot D, Benevent J, Vayssière C, Vidal S, Montastruc JL, Damase-Michel C, Lacroix I. Нестероидные противовоспалительные препараты (NSAID) Рецепты от 6-й месяц беременности : влияние рекомендаций органов здравоохранения. Фундам Клин Фармакол. 2019;33:581-588.

Bagheri H. Интерес фармакоэпидемиологии к изучению антикоагулянтов. Терапия. 2019 ;74:245–248.

Bataillard M, Beyens MN, Mounier G, Vergnon-Miszczycha D, Bagheri H, Cathebras P. Повреждение мышц из-за взаимодействия фузидиевой кислоты и статина: обзор 75 случаев из французской базы данных фармаконадзора и литературных отчетов. Am J Ther. 2019 ;26:e375–e379.

Боду Э., Беневан Ж., Монтаструк Ж.Л., Туати Г., Ашон Ле Камю К. Побочные эффекты лечения вальпроевой кислотой в неонатальном периоде. нейропедиатрия. 2019 ;50:31–40.

Бего Б., Монтастрюк Ж.Л. Фармакоэпидемиология, новая парадигма оценки лекарств. Терапия. 2019 ;74:167–168.

Benevent J, Lacroix I. Лекарства и беременность, оценка соотношения риска и пользы. Actualités Pharmaceutiques. 2019 ; 588:21–27.

Беневент Дж., Араужо М., Юро-Деларю С., Монтаструк Дж.Л., Соммет А., Лакруа И., Дамаз-Мишель С. Фармакоэпидемиология при беременности. Терапия. 2019 ;74:289–300.

Benevent J, Hurault-Delarue C, Araujo M, Montastruc JL, Lacroix I, Damase-Michel C. POMME: Новая когорта для оценки долгосрочных эффектов после воздействия пренатальных препаратов. Препарат Саф. 2019 ;42:45-54.

Benevent J, Hurault-Delarue C, Araujo M, Montastruc F, Montastruc JL, Lacroix I, Damase-Michel C. Повышенное потребление лекарств от расстройств пищеварения у детей, подвергшихся внутриутробному воздействию препаратов с атропиновыми свойствами. Фундам Клин Фармакол. 2018 ;33:314–326.

Berger E, Delpierre C, Despas F, Bertoli S, Bérard E, Bombarde O, Bories P, Sarry A, Laurent G, Récher C, Lamy S. Объясняется ли социальное неравенство в выживаемости при остром миелоидном лейкозе различиями в лечении использование ? Результаты французского продольного обсервационного исследования среди пожилых пациентов. БМК Рак. 2019 ;19:883.

Карр Д.Ф., Фрэнсис Б., Йоргенсен А.Л., Чжан Э., Чиной Х., Хекберт С.Р., Бис Дж.К., Броди Дж.А., Флойд Дж.С., Псати Б.М., Молохия М., Лапейре-Местре М., Конфорти А. , Альфиревич А., ван Стаа Т. , Пирмохамед М. Общегеномное исследование ассоциации статин-индуцированной миопатии у пациентов, набранных с использованием канала данных UK Clinical Practice Research. Клин Фармакол Тер. 2019 ; 106:1353-1361.

Чарльтон Р., Дамаз-Мишель С., Юро-Деларю С., Джини Р., Лоан М., Пьерини А., Пуччини А., Невилл А., Сноуболл Дж., Моррис Дж. К. ; Консорциум EUROmediSAFE. Сократил ли совет по назначению вальпроата натрия число назначений женщинам? Обсервационное исследование в трех европейских странах в период с 2007 по 2016 год. Фармакоэпидемиол. Препарат Саф. 2019;28:1519-1528.

Clapes V, Rousseau R, Despas F, Montastruc JL, Olivier P. Неблагоприятные лекарственные реакции с участием ингибиторов протеинкиназы : исследование базы данных французского фармаконадзора по сравнению безопасности у молодых и пожилых пациентов (≥ 75 лет) с раком. Фармацевтическая медицина. 2018 ;33:21–27.

Compaci G, Conte C, Oberic L, Ysebaert L, Laurent G, Despas F. Устойчивое ухудшение качества жизни в подгруппе выживших после лимфомы: двухлетнее проспективное исследование. БМК Рак. 2019;19:1178.

Concordet D, Gandia P, Montastruc JL, Bousquet-Mélou A, Lees P, Ferran AA, Toutain PL. Levothyrox®: новые и старые лекарственные формы: можно ли менять их для миллионов пациентов? Клиническая фармакокинетика. 2019 ;58:827-833.

Concordet D, Gandia P, Montastruc JL, Bousquet-Mélou A, Lees P, Ferran AA, Toutain PL. Ответ авторов Lechat et al. Новые и старые лекарственные формы Levothyrox®: можно ли менять их для миллионов пациентов? Клиническая фармакокинетика. 2019;58:13553-1354.

Concordet D, Gandia P, Montastruc JL, Bousquet-Mélou A, Lees P, Ferran AA, Toutain PL. Ответ авторов Николя. Новые и старые лекарственные формы Levothyrox®: можно ли менять их для миллионов пациентов? Клиническая фармакокинетика. 2019 ;58:961-963.

Concordet D, Gandia P, Montastruc JL, Bousquet-Mélou A, Lees P, Ferran AA, Toutain PL. Ответ авторов Castello-Bridoux et al. Комментарий к новым и старым препаратам Levothyrox®: можно ли менять их для миллионов пациентов? Клиническая фармакокинетика. 2019;58:973-975.

Concordet D, Gandia P, Montastruc JL, Bousquet-Mélou A, Lees P, Ferran AA, Toutain PL. Ответ авторов Косте и др. «Новые и старые лекарственные формы Levothyrox®: можно ли менять их для миллионов пациентов?» Клиническая фармакокинетика. 2019 ;58:967-968.

Concordet D, Gandia P, Montastruc JL, Bousquet-Mélou A, Lees P, Ferran AA, Toutain PL. Ответ автора Трешо. Комментарий к новым и старым препаратам Levothyrox®: можно ли менять их для миллионов пациентов? Клиническая фармакокинетика. 2019;58:979-980.

Conte C, Vaysse C, Bosco P, Noize P, Fourrier-Reglat A, Despas F, Lapeyre-Mestre M. Значение базы данных медицинского страхования для проведения фармакоэпидемиологических исследований в онкологии. Терапия. 2019 ;74:279–288.

Conte C, Bourrel R, Despas F, Lapeyre-Mestre M. Существует ли чрезмерное использование ингибиторов протонной помпы при B-клеточных неходжкинских лимфомах? Когортное исследование, основанное на французской базе данных медицинского страхования в регионе Юг-Пиренеи. Фундам Клин Фармакол. 2019;33:327-338.

Криккс Э., Пулло Э., Мулис Г., Гулабчанд Р., Фиески К., Галисье Л., Мейнин В., Коппо П., Деларю Р., Касасновас О., Рус-Вейл Д., де Леваль Л., Парренс М., Мишель М., Дюпюи Ж. , Le Bras F, Fataccioli V, Martin-Garcia N, Godeau B, Haïoun C, Gaulard P, Mahevas M. Клинический спектр, эволюция и лечение аутоиммунных цитопений, связанных с ангиоиммунобластной Т-клеточной лимфомой. Евр Дж Гематол. 2019 ;103:35–42.

Дардонвиль К., Сальгуьеро Э., Руссо В., Шебане Л., Файли Х.Л., Готье С., Монтаструк Х.Л., Карвахаль А., Багери Х. Лекарственно-индуцированный остеопороз/остеомаляция : анализ во французской и испанской базах данных фармаконадзора. Eur J Clin Pharmacol. 2019 ;75:1705-1711.

De Barros S, Vayr F, Despas F, Strumia M, Podevin C, Gauthier M, Delabesse E, Soulat JM, Laurent G, Huguet F, Herin F. Влияние хронического миелоидного лейкоза на занятость : французский прогноз исследование. Энн Хематол. 2019 ;98:615-623.

Де Жерме С., Рютер М., Монтастрюк Ф., Руссо В., Лапейр-Местре М., Монтастрюк Ж.Л. Тенденции воздействия атропиновых (антихолинергических) средств на пожилых людей: 10-летний анализ французской базы данных EGB. Фундам Клин Фармакол. 2019 ;33:471–478.

Деспас Ф., Руссо В., Лафори М., Де Канекод С., Дюрье Г., Багери Х., Монтастрюк Ф., Монтастрюк Ж.Л. Связаны ли гиполипидемические препараты с риском развития катаракты ? Исследование фармаконадзора. Фундам Клин Фармакол. 2019:33 ;695-702.

Durrieu G, Dardonville Q, Clanet M, Montastruc JL. Дисплазия шейки матки у пациента с рассеянным склерозом, получавшего натализумаб. Фундам Клин Фармакол. 2019;33:125-126.

Фаврельер С., Лафе-Шебассье С., Фоконно Б., Квилле А., Елехе-Окума М., Монтаструк Ф., Перо-Поша М.С. Нелогичная ассоциация налмефена и опиоидов: анализ французской базы данных фармаконадзора. Терапия. 2019 ;79:365-374.

Флойд Дж.С., Блох К.М., Броуди Дж.А., Марото С., Сиддики М.К., Грегори Р., Карр Д.Ф., Молохия М., Лю Х, Бис Дж.К., Ахмед А., Лю Х, Холлберг П., Юэ К.Ю., Магнуссон П.К.Е., Бриссон Д. , Виггинс К.Л., Моррисон А.С., Хури Э., Маккейг П., Стрикер Б.Х., Лапейр-Местре М., Хекберт С.Р., Галлахер А.М., Чиной Х., Гиббс Р.А., Бондон-Гиттон Э., Трейси Р., Бурвинкль Э., Годе Д., Конфорти А., ван Стаа Т., Ситлани К.М., Райс К.М., Мейтланд-ван дер Зее А.Х., Ваделиус М., Моррис А.П., Пирмохамед М., Палмер К.А., Псати Б.М., Альфиревич А ; Консорциум ПРОГНОЗ-ADR и EUDRAGENE. Фармакогеномика миопатии, связанной со статинами: метаанализ редких вариантов секвенирования всего экзома. ПЛОС Один. 2019 ;14:e0218115.

Humbert X, Fedrizzi S, Chrétien B, Sassier M, Bagheri H, Combret S, Drici MD, Le Bas F, Puddu PE, Alexandre J. Гипертензия, вызванная ингибиторами обратного захвата серотонина: анализ двух баз данных фармаконадзора. Фундам Клин Фармакол. 2019 ;33:296–302.

Юро-Деларю К., Моррис Дж. К., Чарльтон Р., Джини Р., Лоан М., Пьерини А., Пуччини А., Невилл А., Сноуболл Дж., Дамас-Мишель К. ; Консорциум EUROmediSAFE. Назначение противоэпилептических препаратов, включая вальпроат, беременным женщинам: исследование в трех европейских странах. Фармакоэпидемиол Препарат Саф. 2019 ; 28:1510-1518.

Hurault-Delarue C, Lacroix I, Bénard-Laribière A, Montastruc JL, Pariente A, Damase-Michel C. Антидепрессанты во время беременности : французское исследование использования лекарств в когорте EFEMERIS. Eur Arch Psychiatry Clin Neurosci. 2019 ; 841–849.

Кагелиду Ф., Дюрье Г., Клавенна А. Фармакоэпидемиологические исследования для разработки и оценки лекарственных средств в педиатрии. Терапия. 2019 ;74:315–324.

Коффи К.Г., Силуэ Д.А., Лоран С., Боиди К., Коуи С., Компачи Г., Адеба З.Х., Камара И., Ботти Р.П., Богнини А.С., Саного И., Деспас Ф., Лоран Г. AMAFRICA, программа для пациента-навигатора для сопутствующих пациентов с лимфомой во время химиотерапии в Кот-д’Ивуаре: проспективное рандомизированное исследование. БМК Рак. 2019 ;19:1247.

Лакруа К., Хелоуфи Ф., Монтаструк Ф., Беннис Ю., Пиццольо В., Микаллеф Дж. Серьезные побочные эффекты цефалоспоринов со стороны центральной нервной системы: национальный анализ серьезных сообщений, зарегистрированных во французской базе данных фармаконадзора. J Neurol Sci. 2019; 398:196-201.

Lafaurie M, Montastruc F. Интерес к медицинской консультации по фармаконадзору: пример дефицита витамина B12, вызванного метформином. Пресс Мед. 2019 ;48:1216-1221.

Lapeyre-Mestre M, Montastruc F. Интерес фармакоэпидемиологии к фармакодинамике и анализу механизма действия лекарств. Терапия. 2019;74:209-2014.

Mines ML, Pacheco T, Castel-Lacana E, de Boissezon X, Marque P, Montastruc F. Венозный тромбоз после ботулинотерапии нижних конечностей: отчет о клиническом случае и обзор литературы. Ann Phys Rehabil Med. 2019 ;62:457-458.

Montastruc F, Nie R, Loo S, Rej S, Dell’Aniello S, Micallef J, Suissa S, Renoux C. Ассоциация арипипразола с риском психиатрической госпитализации, членовредительства или самоубийства. Джама Психиатрия. 2019 ;76:409-417.

Montastruc F, Benevent J, Rousseau V, Durrieu G, Sommet A, Montastruc JL. Риск диабета при приеме фибратов и статинов: фармакоэпидемиологическое исследование в Vigibase®. Фундам Клин Фармакол. 2018 ;33:108–112.

Montastruc F, Renoux C, Dell’Aniello S, Simon TA, Azoulay L, Hudson M, Suissa S. Применение абатацепта при ревматоидном артрите и риск развития рака: популяционное сравнительное когортное исследование. Ревматология (Оксфорд). 2019 ;48:1053-1058.

Монтаструк Ф., Хосров-Хавар Ф., Соммет А., Ренукс С., Монтаструк Дж.Л. Введение тамоксифена и риск паркинсонизма. Eur J Clin Pharmacol. 2019 ;75:135–136.

Montastruc JL, Benevent J, Montastruc F, Bagheri H, Despas F, Lapeyre-Mestre M, Sommet A. Что такое фармакоэпидемиология? Определение, методы, интерес и клиническое применение. Терапия. 2019 ;74:169–174.

Монтаструк Дж., Монтастрюк Ф., Беневен Дж., Дюрье Г., дю Плантье Ж.М., Багери Х., Сомме А., Дамаз-Мишель К. Тинтин в стране наркотиков: фармакологический подход к фармаконадзору. Терапия. 2019 г.; 74:445-447.

Mouly S, Roustit M, Bagheri H, Perault-Pochat MC, Molimard M, Bordet R. Французский кризис Levothyrox®: мы сделали все, что могли, но…. Терапия. 2019 ;74:431-435.

Nguyen KD, Nguyen HA, Vu DH, Le TT, Nguyen HA Jr, Dang BV, Nguyen TN, Nguyen DH, Nguyen TB, Montastruc JL, Bagheri H. Конкретные сигналы анализа непропорциональности. Препарат Саф. 2018 ;42:671-682.

Нгуен К.Д., Тран Т.Н., Нгуен М.Т., Нгуен Х.А., Нгуен Х.А. младший, Ву Д.Х., Нгуен В.Д., Багери Х. Лекарственно-индуцированный синдром Стивенса-Джонсона и токсический эпидермальный некролиз во вьетнамской базе данных о спонтанных побочных реакциях на лекарства: подгруппа подход к анализу непропорциональности. Дж. Клин Фарм Тер. 2019 ;44:69-77.

Никол С., Мулис Ф., Бондон-Гиттон Э., Дюрье Г., Монтастрюк Дж. Л., Багери Х. Отличаются ли отчеты разных авторов о спонтанных побочных реакциях на лекарства? Исследование в Центре фармакологического надзора Тулузы. Терапия. 2019;5:521-525.

Petitpain N, Devos D, Bagheri H, Rocher F, Gouraud A, Masmoudi K, Coquerel A. Является ли воздействие ингибитора TNF фактором риска бокового амиотрофического склероза? Фундам Клин Фармакол. 2019 ;33:689-694.

Пейро-Сен-Поль Л., Бенье П., Демессин Л., Биур М., Хиллэр-Бюйс Д., де Канекод С. , Федрицци С., Париенти Дж.Дж. Синдром Кушинга из-за взаимодействия между ритонавиром или кобицистатом и кортикостероидами : исследование случай-контроль во Французской базе данных фармаконадзора. J Антимикробная химиотерапия. 2019;74:3291-3294.

Сабатье П., Амар Дж., Монтаструк Ф., Руссо В., Шебан Л., Буханик Б., Монтастрюк Дж. Л. Рак молочной железы и спиронолактон : обсервационное постмаркетинговое исследование. Eur J Clin Pharmacol. 2019 ;75:1593-98.

Соммет А. Интерес фармакоэпидемиологии к изучению антибиотиков. Терапия. 2019 ;74:249–253.

Сомме А., Парьенте А. Методы фармакоэпидемиологии. Терапия. 2019 ;74:187–197.

Сомме А., Беневан Ж., Руссо В., Шебан Л., Доурос А., Монтаструк Ж.Л., Монтаструк Ф. Какие фторхинолоны имеют самый высокий риск развития аневризмы аорты ? Практический/неконкретный пример в VigiBase®. J Gen Intern Med. 2019 ;34:502–503.

Tournier M, Montastruc F. Интерес фармакоэпидемиологии к изучению психотропных средств. Терапия. 2019 ;74:239–244.

Tranchard F, Gauthier J, Hein C, Lacombe J, Brett K, Villars H, Sallerin B, Montastruc JL, Despas F. Идентификация лекарств пациентом: Восприятие пациентов, врачей и фармацевтов. Therapie. 2019;74:591-598.

Truffert E, Fournier Charrière E, Treluyer JM, Blanchet C, Cohen R, Gardini B, Haas H, Liard F, Montastruc JL, Nicollas R, Pondaven S, Stahl JP, Wood C, Couloigner V. Руководство Французское общество оториноларингологии (SFORL): Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) и детские ЛОР-инфекции. Укороченная версия. Eur Ann Оториноларингол Head Neck Dis. 2019 ; 136:289–294.

Watson S, Durrieu G. Мидостаурин, реакция фоточувствительности. ВОЗ УМЦ, 2019 г.: 1-7.

Ysebaert L, Larcher M, Compaci G, Oberic L, Sahnes L, Banos A, Araujo C, Sommet A, Laurent G, Despas F. Телефонные звонки медсестры онкологического отделения вдвое снижают риск снижения интенсивности дозы иммунохимиотерапии: результаты рандомизированное исследование FORTIS при хроническом лимфоцитарном лейкозе. Энн Хематол. 2019 ;98:931-939.

Генетическое происхождение и разнообразие диких свиней с Мадагаскара (Potamochoerus larvatus, семейство Suidae)

%PDF-1.6 % 1 0 объект > эндообъект 2 0 объект >поток 2020-11-19T20:52:29+05:30Springer2020-11-20T12:05:06+01:002020-11-20T12:05:06+01:00application/pdfhttps://doi.org/10.1038/s41598-020-77279- 5

Издательская группа Nature UK

Научные отчеты, https://doi.org/10.1038/s41598-020-77279-5

Генетическое происхождение и разнообразие диких свиней с Мадагаскара (Potamochoerus larvatus, семейство Suidae)

Кэрол Ли

Дженна Дэй

Стивен М. Гудман

Мигель Педроно

Гийом Бенар

Лоран Франц

Питер Дж. Тейлор

Майкл Дж. Эррера

Хайме Гонгора

10. 1038/s41598-020-77279-52010-04-23true
springer.com
springerlink.com
https://doi.org/10.1038/s41598-020-77279-510.1038/s41598-020-77279-52045-2322journalScientific ReportsThe Author(s)2010-04-23true10.1038/s41598-020-77279-5noindex
springer.com
springerlink.com
VoRuuid:37c4314e-8e9f-4f22-82d0-8c58543bed16uuid:8d4aa65a-f6a7-4dc0-9c99-9dc36d898ba2default1
converteduuid:f02c6413-66c6-4968-8f4b-9fa6c30040e1converted to PDF/A-2bpdfToolbox2020-11-19T20:53:40+05: 30
Библиотека Adobe PDF 15.0; изменено с помощью iText® 5.3.5 © 2000-2012 1T3XT BVBA (SPRINGER SBM; лицензионная версия) 2B
http://ns.adobe.com/pdfx/1.3/pdfxAdobe Document Info PDF eXtension Schema
externalMirrors crossmark:MajorVersionDateCrossmarkMajorVersionDateText
externalMirrors crossmark:CrossmarkDomainExclusiveCrossmarkDomainExclusiveText
перекрестие внутренних зеркал: DOIdoiText
externalMirrors crossmark:CrosMarkDomainsCrossMarkDomainsseq Text
internalA имя объекта, указывающее, был ли документ изменен для включения информации о перехвате robotsText
внутренний идентификатор стандарта PDF/XGTS_PDFXVersionText
внутренний уровень соответствия стандарту PDF/XGTS_PDFXConformanceText
internalCompany создает PDFCompanyText
internalDate, когда документ был последний раз измененSourceModifiedText
http://crossref. org/crossmark/1.0/crossmarkCrossmark Схема
внутренняяОбычно то же, что и prism:doiDOIText
externalThe дата публикации публикацииe.MajorVersionDateText
internalCrossmarkDomainExclusiveCrossmarkDomainExclusiveText
internalCrossMarkDomainsCrossMarkDomainsseq Text
http://prismstandard.org/namespaces/basic/2.0/prismPrism Схема
externalЭтот элемент содержит URL-адрес статьи или единицы контента. Платформа атрибутов необязательно разрешена для ситуаций, в которых необходимо указать несколько URL-адресов. PRISM рекомендует использовать в сочетании с этим элементом подмножество значений платформы PCV, а именно «мобильный» и «веб-сайт». ПРИМЕЧАНИЕ. PRISM не рекомендует использовать значение #other, разрешенное в словаре, контролируемом платформой PRISM. Вместо использования #other обратитесь к группе PRISM по адресу [email protected], чтобы запросить добавление вашего термина в словарь, контролируемый платформой.urlURI
externalЦифровой идентификатор объекта для статьи. DOI также может использоваться в качестве идентификатора dc:identifier. При использовании в качестве dc:identifier форма URI должна быть захвачена, а голый идентификатор также должен быть захвачен с помощью prism:doi. Если в качестве требуемого dc:identifier используется альтернативный уникальный идентификатор, то DOI следует указывать как голый идентификатор только в пределах prism:doi. Если необходимо указать URL-адрес, связанный с DOI, то prism:url можно использовать вместе с prism:doi для предоставления конечной точки службы (т. е. URL-адреса). текст
externalISSN для электронной версии выпуска, в котором встречается ресурс. Разрешает издателям включать второй ISSN, идентифицирующий электронную версию выпуска, в котором встречается ресурс (поэтому e(lectronic)Issn. Если используется, prism:eIssn ДОЛЖЕН содержать ISSN электронной версии.issnText
внутренний номер томаvolumeText
внутренний номер проблемы номер текста
внутренняя стартовая страницаstartingPageText
внутренняя конечная страницаendingPageText
externalТип агрегации указывает единицу агрегации для коллекции контента. Комментарий PRISM рекомендует использовать словарь управляемого типа агрегации PRISM для предоставления значений для этого элемента. Примечание. PRISM не рекомендует использовать значение #other, разрешенное в настоящее время в этом контролируемом словаре. Вместо использования #other, пожалуйста, обратитесь в группу PRISM по адресу [email protected], чтобы запросить добавление вашего термина в словарь контролируемого типа агрегации. агрегатионтипетекст
externalНазвание журнала или другого издания, в котором был/будет опубликован ресурс. Обычно это будет использоваться для предоставления названия журнала, в котором статья появилась в качестве метаданных для статьи, а также такой информации, как название статьи, издатель, том, номер и дата обложки. Примечание. Название публикации можно использовать, чтобы различать печатный журнал и онлайн-версию, если названия различаются, например «magazine» и «magazine.com».publicationNameText
externalCopyrightcopyrightText
http://ns.adobe.com/pdf/1.3/pdfAdobe PDF Schema
internalОбъект имени, указывающий, был ли документ изменен для включения информации треппингаTrappedText
http://ns. adobe.com/xap/1.0/mm/xmpMMXMP Схема управления мультимедиа
внутренний идентификатор на основе UUID для конкретного воплощения документаInstanceIDURI
internalОбщий идентификатор для всех версий и представлений документа. DocumentIDURI
internalОбщий идентификатор для всех версий и представлений документа.OriginalDocumentIDURI
http://www.aiim.org/pdfa/ns/id/pdfaidPDF/A ID Schema
internalPart of PDF/A standardpartInteger
внутреннее изменение стандарта PDF/AamdText
внутренний уровень соответствия стандарту PDF/A, текст
http://www.niso.org/schemas/jav/1. 0/javNISO
externalValues for Journal Article Version являются одним из следующих: АО = Авторский оригинал SMUR = Представленная рукопись находится на рассмотрении AM = принятая рукопись П = Доказательство VoR = версия записи CVoR = исправленная версия записи EVOR = Расширенная версия Recordjournal_article_versionClosed Выбор текста
конечный поток эндообъект 3 0 объект > эндообъект 7 0 объект [90 R 10 0 R 11 0 R 12 0 R 13 0 R 14 0 R 15 0 R 16 0 R 17 0 R 18 0 R 19 0 R 20 0 R 21 0 R 22 0 R 23 0 R 24 0 R 25 0 R 26 0 R 27 0 R 28 0 R 29 0 R 30 0 R 31 0 R 32 0 R 33 0 R] эндообъект 9 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article. indd:CR11:78)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[387.969 399.314 393.552 387.173]>> эндообъект 10 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR12:79)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[394.869 399.314 400.452 387.173]>> эндообъект 11 0 объект >/Подтип/Ссылка/Назначение(41598_2020_77279_Article.indd:CR13:80)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[233,866 389,314 239,477 377,173]>> эндообъект 12 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR14:81)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[510.859 389.314 516.469 377.173]>> эндообъект 13 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR14:81)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[225.903 369.314 231.52 357.173]>> эндообъект 14 0 объект >/Подтип/Ссылка/Назначение(41598_2020_77279_Article.indd:Fig1:22)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[266,25 339,431 270,61 327,173]>> эндообъект 15 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR15:82)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[271. 976 309.431 277.604 297.173]>> эндообъект 16 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR16:83)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[430.218 299.431 435.887 287.173]>> эндообъект 17 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR15:82)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[325.034 279.314 330,835 267,173]>> эндообъект 18 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR15:82)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[342.551 239.314 348.255 227.173]>> эндообъект 19 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR17:84)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[349.632 239.314 355.335 227.173]>> эндообъект 20 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR15:82)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[299.036 219.314 304.741 207.173]>> эндообъект 21 0 объект >/Подтип/Ссылка/Назначение(41598_2020_77279_Article.indd:CR18:85)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[306.12 219.314 311.825 207.173]>> эндообъект 22 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article. indd:CR19:86)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[313.204 219.314 318.91 207.173]>> эндообъект 23 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR8:75)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[452.119 199.314 454.892 187.173]>> эндообъект 24 0 объект >/Подтип/Ссылка/Назначение(41598_2020_77279_Article.indd:CR20:87)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[456.191 199.314 461.736 187.173]>> эндообъект 25 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR9:76)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[549.305 179.431 552.121 167.173]>> эндообъект 26 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR21:88)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[327.309 159.314 332.978 147.173]>> эндообъект 27 0 объект >/Подтип/Ссылка/Назначение(41598_2020_77279_Article.indd:CR22:89)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[461.42 139.314 467.177 127.173]>> эндообъект 28 0 объект >/Subtype/Link/Dest(41598_2020_77279_Article.indd:CR25:92)/F 4/Type/Annot/H/N/Border[0 0 0]/AP>/Rect[470.

Возрастные нормативы скорости выполнения теста Тулуз-Пьерона — Студопедия

Характеристика методики диагностики ММД — Студопедия

3) Тест «Визуальные классификации». Психодиагностика готовности детей к обучению в школе

Психодиагностика готовности детей к обучению в школе

Делись добром 😉

1.

1.2 Структура конфликта и его классификации

1.2.2 Классификации конфликтов

Классификации методов по Й. Шванцаре

Тип характера по классификации Э. Фромма

3.1 Классификации нарушений сна

1.1.2 Классификации ЗПР

КЛАССИФИКАЦИИ ВИДОВ

2.3 Тест «Визуальные классификации»

1. Понятие и классификации конфликта

Глава 2.

2.2 Причины лжи и её классификации

4. Классификации конфликтов.

2.3 Классификации характеров

2.2 Классификации чувств

404 — Документ не найден.

Методики, которые могут применяться для диагностики детей с СДВГ.

Методика «Проставь значки»

Методика «Запомни и расставь точки»

Франк Пьеррон / ПРЕМЬЕРА / «Отслеживаемые движения»

Опухоль головного мозга со слитым геном ATXN1-NUTM1 расширяет гистологический спектр NUTM1-реаранжированных неоплазий

Вакцинация и заражение свиней Salmonella Typhimurium вызывает системный и локальный многофункциональный CD4+ T-клеточный ответ

Введение

Материалы и методы

Эксперимент по вакцинации и заражению животных

Клиническое обследование, вскрытие и сбор образцов

Обнаружение специфических антител к S

Микробиологическое исследование

Выделение лимфоцитов

Получение антигена

Статистический анализ

Результаты

Клинические признаки, серология и микробиологические исследования

Продукция IFN-γ, TNF-α и/или IL-17A CD4

Кластерный анализ STM-стимулированных IFN-γ/TNF-α/IL-17A, продуцирующих CD4

Кластерный анализ

Экспрессия CD8α и CD27 на

Обсуждение

Заявление о доступности данных

Заявление об этике

Вклад авторов

Финансирование

Конфликт интересов

Благодарности

Дополнительный материал

Ссылки

Амори Пьеррон из Monster Energy занял первое место на Кубке мира UCI по скоростному спуску на горных велосипедах в Ленцерхайде, Швейцария – europe-cities.

Publications du CRPV de Toulouse

Генетическое происхождение и разнообразие диких свиней с Мадагаскара (Potamochoerus larvatus, семейство Suidae)

Добавить комментарий Отменить ответ

Рубрики