Методика диагностики: Картотека методик диагностики для разных возрастных периодов (2)

Содержание

Картотека методик диагностики для разных возрастных периодов (2)

Продолжение...

Психологические тесты для диагностики психологической готовности к школе

  • Тест Керна-Йерасека – методика для диагностики уровня готовности к школьному обучению. Существенным преимуществом теста является его разносторонность (использование словесных, графических способов исследования, ориентация на широкий социальный круг факторов, влияющих на ребенка).
  • Тест "Способность к обучению в школе" Г.Вицлака (1972) предназначен для диагностики психологической готовности к школе детей 5-7 лет.
  • Методика Н.И. Гуткиной "Домик" предназначена для диагностики сформированности мелкой моторики у детей.
  • Методики А. Л. Венгера "Дорисуй мышкам хвосты" и "Нарисуй ручки для зонтиков"
    предназначены для диагностики сформированности мелкой моторики у детей.
  • Методика "Езда по дорожке" предназначена для выявления уровня развития психомоторики ребенка.
  • Методика    "Образец    и    правило" (разработана    А.Л.Венгером) направлена на выявление умения руководствоваться системой условия задачи, преодолевая отвлекающее влияние посторонних факторов. Результаты ее выполнения также отражают уровень развития наглядно-образного мышления.
  • Методика "Графический диктант" Д.Б.Эльконина направлена на выявление умения внимательно слушать и точно выполнять указания взрослого, правильно воспроизводить на листе бумаги заданное направление линий, самостоятельно действовать по заданию взрослого.
  • Методика "Вежливость" предназначена для диагностики произвольного внимания и  памяти при определении готовности детей к школе.
  • Методика "Лабиринт" предназначена для выявления уровня сформированности наглядно-схематического мышления (умения пользоваться схемами, условными изображениями при ориентировке в ситуациях).
  • Методика "Объяснение сюжетных картин" предназначена для диагностики мышления.
  • Методика "Последовательность событий" предназначена для диагностики мышления.
  • Методика интерпретации пословиц предложенный Б.В. Зейгарник предназначена для диагностики мышления.
  • Методика "Найди звук" служит для изучения развития речевой сферы (проверка фонематического слуха).

ПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ПОЗНАВАТЕЛЬНОЙ СФЕРЫ

Методика "Узнавание фигур" предназначена для диагностики особенностей восприятия.

Методика определения кратковременной памяти.

Методика "Оперативная память".

Методика "Образная память".

Методика А.Р.Лурии "Заучивание 10 слов" предназначена для определения состояния памяти, внимания, утомляемости.

Методика "Воспроизведение рассказа" предназначена для определения  уровня смысловой памяти, ее объема, а также способности к запоминанию текстов.

Методика "Опосредствованное запоминание" (предложена Л.С.Выготским и А.Р.Лурия, разработана А.Н.Леонтьевым) предназначена для определения особенностей опосредствованного запоминания, мышления.

Методика "Пиктограмма" предназначена для исследования особенностей опосредствованного запоминания и его продуктивности, а также характера мыслительной деятельности, уровня формирования понятийного мышления.

Методика "Корректурная проба" (тест Бурдона) предназначена для изучения степени концентрации и устойчивости внимания.

Методика "Таблицы Шульте" предназначена для определения устойчивости внимания и динамики работоспособности.

Методика Горбова "Красно-черная таблица" призвана оценить переключение и распределение внимания.

Методика изучения уровня внимания (предложена П.Я.Гальпериным и С.Л.Кабылицкой) направлена на изучения уровня внимания и самоконтроля школьников 3-5 классов.
Методика "Интеллектуальная лабильность" предназначена для диагностики переключения внимания.

Методика "Толкование пословиц" предназначения для исследования уровня  мышления.

Методика "Простые аналогии" позволяет выявить характер логических связей и отношений между понятиями у детей старше 10 лет.

Методика "Сложные аналогии" предназначена для диагностики мышления.

Методика "Сравнение понятий" направлена на исследование операций сравнения, анализа и синтеза в детском и подростковом возрасте.

Методика "Выделение существенных признаков" позволяет выявить особенности мышления.

ПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ИНТЕЛЛЕКТА И УМСТВЕННОГО РАЗВИТИЯ

Методика для определения уровня умственного развития детей 7-9 лет Э.Ф.Замбицявичене.

Вербальный тест Г.Айзенка предназначен для оценки интеллектуальных способностей лиц в возрасте от 18 до 50 лет, имеющих образование не ниже среднего.

Тест Д. Векслера предназначен для исследования умственного развития. В настоящее время имеются три формы шкал Векслера, предназначенные для разных возрастов. Считается, что тест может быть использован для диагностики готовности к школе и оценки причин неуспеваемости. В нашей стране тест Век­слера был адаптирован А. Ю. Панасюком (1973) и позднее опубликован в обновленной редакции в Санкт-Петербурге (Ю.И. Филимоненко, В. И. Тимофеев,  1992).

Тест Дж. Равена предназначен для исследования умственного развития.  "Прогрессивные матрицы Равена" - это невербальный тест, разработанный Л. Пенроузом и Дж. Равеном в 1936 году в черно-белом варианте и в 1949 году в цветном. Черно-белый вариант теста предназначен для обследования детей, начиная с 8 лет и взрослых до 65 лет. Тест состоит из 60 матриц или композиций с пропущенным элементом.

Культурно-свободный тест на интеллект Р.Кеттелла предназначен для измерения уровня интеллектуального развития независимо от влияния факторов окружающей социальной среды.

Групповой интеллектуальный тест (ГИТ) Дж. Ванды. Тест переведен и адаптирован для выборки российских школьников в ЛПИ (М. К. Акимова, Е. М. Борисова и др., 1993). Предназначен для диагностики умственного развития учащихся 3—6-х классов. Тест выявляет, насколько испытуемый к моменту обследования овладел предлагаемыми ему в заданиях словами и терминами, а также умениями выполнять с ними некоторые логические действия — все это характеризует уровень умственного развития испытуемого, существенный для успешного прохождения школьного курса. ГИТ содержит 7 субтестов: исполнение инструкций, арифметические задачи, дополнение предложений, определение сходства и различия понятий, числовые ряды, аналогии, символы.

Школьный Тест Умственного Развития (ШТУР) разработан коллективом К.М.Гуревича для диагностики умственного развития учащихся 7—9-х классов. В задания ШТУР включены понятия, подлежащие обязательному усвоению, в учебных пред­метах трех циклов: математического, гуманитарного и естественно-научного.

Тест структуры интеллекта Р. Амтхауэра. Он создан в 1953 г. (последняя редакция осуществлена в 1973 г.). Тест предназначен для измерения уровня интеллектуального развития лиц в возрасте от 13 до 61 года. Тест состоит из девяти субтестов, каждый из которых направлен на измерение различных функций интеллекта. Шесть субтестов диагностируют вербальную сферу, два — пространственное воображение, один — память. Тест содержит 9 субтестов: осведомленность, классификации, аналогии, обобщения, арифметические задачи, числовые ряды, пространственные представления (2 субтеста), запоминание вербального материала.

АСТУР (для Абитуриентов и Старшеклассников Тест Умственного Развития).

Тест включает 8 субтестов: 1. Осведомленность. 2. Двойные аналогии. 3. Лабильность. 4. Классификации. 5. Обобщение. 6. Логические схемы. 7. Числовые ряды. 8. Геометрические фигуры.

ПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЭМОЦИОНАЛЬНЫХ СОСТОЯНИЙ

  • Опросник для оценки синдрома психического выгорания предназначен  для диагностики проявлений синдрома эмоционального выгорания: эмоциональное истощение, деперсонализация, редукция личных достижений.
  • Шкала депрессии (по Т.И.Балашовой, О.П.Елисееву) предназначена для диагностики наличия и степени выраженности депрессии.
  • Опросник Бека предназначен для диагностики депрессивных состояний.
  • Шкала депрессии Цунга.
  • Тест "Определение типового состояния" Э. Э.Эйдемиллера, В.В.Юстицкого предназначен для измерения профессионально-обусловленных состояний: общей неудовлетворенности, нервно-психического напряжения, тревожности.
  • Цветовой тест Люшера предназначен для исследования особенностей эмоционального состояния. Суть процедуры тестирования представляет собой ранжирование цветов испытуемым по степени их субъективной приятности (симпатичности).
  • Метод рисуночной фрустрации Розенцвейга предназначен для исследования реакций на неудачу и способов выхода из ситуаций, препятствующих деятельности или удовлетворению потребностей личности.
  • Методика оценки психологической активации, интереса, эмоционального тонуса, напряжения и комфортности (по Н.А. Курганскому и Т.А. Немчину) предназначена для диагностики состояний психической активации, интереса, эмоционального тонуса, напряжения и комфортности.
  • Тест тревожности Ч. Д. Спилбергера - Ю.Л. Ханина. Этот тест является надежным и информативным способом самооценки уровня тревожности в данный момент – реактивная тревожность и личностной тревожности как устойчивой характеристики человека.
  • Методика измерения уровня тревожности Тейлора.
  • Тест тревожности по В.М.Астапову предназначен для исследования уровня тревожности у дошкольников.
  • Тест школьной тревожности Филлипса позволяет выявить характер и уровень тревожности у школьников.
  • Торонтская алекситимическая шкала (ТАШ) предназначена для измерения уровня алекситимии личности.
  • Методика эмоционально-цветовой аналогии (цветописи) А.Н.Лутошкина предназначена для изучения особенностей эмоционального состояния испытуемого.
  • Методика диагностики невротизма (опросник Т.Ташева) предназначена для определения наличия и степени нев­ротического расстройства личности и его вида.
  • Методика измерения выраженности состояния нервно-психического напряжения" (по Т.А.Немчину) позволяет выявить уровень нервно-психического напряжения.
  • Методика выявления степени выраженности сниженного настроения – субдепрессии (по В.Зунгу-Т.Н.Балашовой).
  • Рисуночный тест Дж.Бука "Дом. Дерево.Человек" позволяет выявить степень выраженности незащищенности, тревожности, недоверия к себе, чувства неполноценности, враждебности, конфликтности, трудностей в общении, депрессивности.
  • Тест "Сказка". Данная методика представляет собой разновидность проективного теста. Процедура исследования заключается в следующем: ребенку читают сказку, а он должен придумать ее продолжение. В зависимости от ответов ребенка можно сделать вывод об особенностях эмоциональных переживаний (прежде всего, тревожность, агрессивность) и источниках, которые вызывают данные переживания.
  • САН – методика, позволяющая уточнить особенности самочувствия, активности, настроения.
  • Цветовой тест отношений (А.Эткинд). Это невербальный компактный диагностический метод, отражающий как сознательный, так и частично неосознаваемый уровни отношений человека. Методической основой данного метода является цветоассоциативный эксперимент. В ходе эксперимента испытуемому предлагается при помощи цвета выразить свое отношение к партнеру.
  • Методика "Кактус" М.А.Панфиловой предназначена для определения состояния эмоциональной сферы дошкольника, наличие агрессивности, ее направленность, интенсивность.
  • Методика диагностики уровня эмоционального выгорания В.В.Бойко, которая позволяет установить ведущие симптомы, фазы эмоционального выгорания ("напряжение", "резистенция" и "истощение").
  • Методика "Дифференциальные шкалы эмоций" (по К. Изарду) предназначена для выявления доминирующих эмоций, позволяющих качественно описать самочувствие обследуемого.

 

ПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ МЕЖЛИЧНОСТНЫХ ОТНОШЕНИЙ

  • Социометрическая игра "Секрет" (Т.А. Репина) выявляет систему существующих между детьми избирательных предпочтений.
  • Методика "Капитан корабля" предназначена для диагностики статуса дошкольников и младших школьников в коллективе сверстников.
  • Методика "Мозаика" - естественный эксперимент, в котором изучаются особенности межличностных отношений между детьми в группе сверстников, в том числе:  степень эмоциональной вовлеченности ребенка в действия сверстника; характер участия в действиях сверстника, характер и степень выраженности сопереживания сверстнику, характер и степень проявления просоциальных форм поведения в ситуации, когда ребенок стоит перед выбором действовать "в пользу другого" или "в свою пользу".
  • Методика Рене Жиля позволяет исследовать социальную приспособленность ребенка, сферу его межличностных отношений и ее особенности, восприятие ребенком семейных отношений.
  • Социометрический тест предназначен для диагностики эмоциональных связей, т.е. взаимных симпатий между членами группы.
  • Методика диагностики межличностных отношений Т.Лири предназначена для изучения стиля и структуры межличностных отношений и их особенностей, а также исследования представлений испытуемого о себе, о своем идеальном Я, отношения к самому себе.
  • Методика изучения взаимных отношений "ученик-преподаватель" (по Ханину-Стамбулову).
  • Методика изучения психологической атмосферы  в группе (шкала-опросник Ф.Фидлера). Методика предназначена для исследования особенностей психологической (эмоциональной) атмосферы в трудовом коллективе.
  • Методика изучения психологического климата в коллективе А.Н.Лутошкина.
  • Тест "Психологический климатический круг" предназначен для диагностики психологического климата, измеряемого посредством деловой и эмоциональной составляющей
  • Методика "Стиль управления коллективом" предназначена для диагностики стиля, который реализует руководитель при управлении трудовым коллективом (либеральный, демократический или авторитарный).
  • Тест К.Томаса предназначен для определения стратегий поведения испытуемого в конфликтных ситуациях.
  • Методика "Конструктивная ссора" С.Кратохвила направлена на определение степени конструктивности хода конфликта и его результатов (применяется в семейной психологии).
  • Методика "Изучение сплоченности коллектива" (показатели ценностно-ориентационного единства) Р. С.Немова позволяет выявить уровень сплоченности и ценностно-ориентационного единства коллектива посредством определения частоты распространения положительных положительных и отрицательных характеристик значимого для группы явления
  • Методика "Анализ семейных взаимоотношений" (АСВ) Э.Эйдемиллера, В.Юстицкого предназначена для диагностики особенностей взаимоотношений родителей с ребенком, степени удовлетворения его потребностей, уровня и адекватности применяемых требований
  • Тест-опросник удовлетворенности браком В.Столина, Т.Л. Романовой, Т.Бутенко. Назначение методики - определение уровня удовлетворенности — неудовлетворенности супругов браком.
  • Методика  "Конфликтность в разных сферах жизнедеятельности семьи". В методике использовано преимущественное распространение конфликтов в 8 сферах семейной жизни, а именно: а) проблемы отношений с родственниками и друзьями;  б) вопросы, связанные с воспитанием детей;  в) проявление супругами стремления к автономии; г) ситуации нарушения ролевых ожиданий;  д) ситуации рассогласования норм поведения;  е) проявление доминирования супругами;  ж) проявление ревности супругами; з) расхождения в отношении к деньгам.
  • Методика "Распределение ролей в семье" предназначена для определения сложившейся в молодой семье практики распределения ролей.
  • Методика "Диагностика родительского отношения" А.Я.Варга и В.В. Столина позволяет выявить особенности отношения родителей к ребенку, описываемые в ракурсе следующих пяти шкал:  1) Принятие — отвержение ребенка. 2) Кооперация. 3) Симбиоз. 4) Авторитарная гиперсоциализация. 5) "Маленький неудачник". Эта, последняя шкала показывает, как взрослые относятся к способностям ребенка, к его достоинствам и недостаткам, успехам и неудачам. Родитель видит ребенка младшим по сравнению с реальным возрастом. Ребенок  представляется не приспособленным, неуспешным, открытым для дурных влияний.
  • Рисуночный тест "Рисунок семьи" (Т. Г. Хоментаускас) позволяет выявить особенности внутрисемейного общения.

ПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ОСОБЕННОСТЕЙ ЛИЧНОСТИ

Шестнадцатифакторный личностный опросник Кеттелла -  позволяет получить многогранную информацию о личностных чертах, которые называют конституциональными факторами. Под фактором понимается глубинная личностная характеристика, определяющая группу устойчивых поведенческих проявлений, относительно независимая от других характеристик того же ряда. Опросник содержит 187 вопросов, на которые предлагается ответить испытуемым.

Личностный опросник Г.Айзенка предназначен для выявления особенностей характера, которые получили название "экстраверсия", "интроверсия" и "нейротизм".

Опросник Мини-мульт (сокращенный вариант опросника MMPI) предназначен для исследования следующих личностных особенностей: ипохондрия, депрессия, истерия, психопатия, паранойяльность, психастения, шизоидность, гипомания.

Тест-опросник Шмишека предназначен для диагностики типа акцентуации личности. Теоретической основой опросника является концепция акцентуированных личностей К.Леонгарда.

Опросник Басса – Дарки – предназначен для диагностики вида и уровня агрессивности, в том числе: 1. Физическая агрессия — использование физической силы против другого лица. 2. Косвенная — агрессия, окольным путем направленная на другое лицо или ни на кого не направленная. 3. Раздражение — готовность к проявлению негативных чувств при малейшем возбуждении (вспыльчивость, грубость). 4. Негативизм — оппозиционная манера в поведении от пассивного сопротивления до активной борьбы против установившихся обычаев и законов. 5. Обида — зависть и ненависть к окружающим за действительные и вымышленные действия. 6. Подозрительность — в диапазоне от недоверия и осторожности по отношению к людям до убеждения в том, что другие люди планируют и приносят вред. 7. Вербальная агрессия — выражение негативных чувств как через форму (крик, визг), так и через содержание словесных ответов (проклятия, угрозы). 8. Чувство вины — выражает возможное убеждение субъекта, что он является плохим человеком, что поступает зло, а также ощущаемые им угрызения совести.

Методика "Q-сортировки" предназначен для диагностики испытуемого о себе, а также для определения идеального Я индивида.

Многоуровневый личностный опросник "Адаптивность" предназначен для оценки адаптационных возможностей личности с учетом социально-психологических и некоторых психофизиологических характеристик, отражающих обобщенные особенности нервно-психического и социального развития.

Тест Кейрси для диагностики коммуникативных особенностей личности.

Опросник уровня субъективного контроля Роттера предназначен для определения экстернального или интернального типов личности.

Методика "Мотивация к успеху" Т.Элерса.
Мотивация успеха и боязнь неудачи (опросник А.А.Реана).
Методика "Цель-средство-результат" предназначен для исследования особенностей структуры деятельности.
Методика определения направленности личности призвана оценить приоритетные сферы для личности посредством направленности на себя, на  общение или на дело.
Методика исследования эмпатических особенностей личности В.В.Бойко.
Методика определения самооценки дошкольника (В.Г.Щур).

ПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ В ПСИХОСОМАТИКЕ

  • Гиссенский опросник соматических жалоб выявляет интенсивность эмоционально окрашенных жалоб по поводу состояния физического здоровья.
  • Опросник Сердюка для изучения самооценки социальной значимости болезни.
  • Опросник Келлермана-Плутчика предназначен для определения защитных механизмов.
  • Методика незаконченных предложений Сакса-Сиднея, модифицированная для психосоматических больных, направлена на изучение следующих параметров: отношение к матери, отношение к отцу, отношение к семье, отношение к женщинам (мужчинам), отношение к половой жизни, отношение к друзьям, отношение к вышестоящим лицам, отношение к подчиненным, отношение к товарищам по работе, страхи и опасения, сознание вины, отношение к себе, отношение к прошлому, отношение к будущему, отношение к болезни, цели.
  • Опросник Гарбузова для выявления доминирующего инстинкта.
  • Тест К.Маховера "Нарисуй человека" предназначен для исследования представлений о прошлом, настоящем, будущем, специфике взаимоотношений человека с окружающими.
  • Клинический опросник для выявления и оценки невротических состояний.
  • Тест Роршаха направлен на исследование личностных особенностей испытуемого в ходе ассоциативного теста.
  • Содни-тест позволяет выявить удовлетворенные и неудовлетворенные потребности испытуемого.
  • ТАТ – тематический тест апперцепции предназначен для диагностики стремлений, потребностей обследуемого, воздействий, оказываемых на него, конфликтов, возникающих во взаимоотношениях с окружающими.
  • Проективный тест "Образ себя" предназначен для исследования особенностей восприятия испытуемым своих физических параметров и образа себя.

ПРОЧИЕ ТЕСТЫ

  • Методика определения стрессоустойчивости и социальной адаптации Холма и Рея
  • Методика исследования уровня социальной фрустрированности Л.И. Вассермана направлена на изучение уровня удовлетворенности различными факторами социальной среды.
  • Опросник психологических затруднений предназначен для экспресс-диагностики уровня переживания собственного неблагополучия в сфере межличностных отношений.
  • Методика диагностики согласованности семейных ценностей и ролевых установок в супружеской паре  в обеих группах А.Н.Волковой. Методика позволяет определить: 1. Представления супругов о значимости в семейной жизни сексуальных отношений, личностной общности мужа и жены, родительских обязанностей, профессиональных интересов каждого из супругов, хозяйственно-бытового обслуживания, моральной и эмоциональной поддержки, внешней привлекательности партнеров. 2. Представления супругов о желаемом распределении ролей между мужем и женой при реализации семейных функций, объединенные шкалой ролевых ожиданий и притязаний.
  • Тест "Уровень удовлетворенности жизнью" Э.Голизека.
  • Шкала одиночества Д.Рассела, Л.Пепло, М.Фергюсона предназначена для исследования уровня субъективного ощущения человеком своего одиночества.
  • Шкала поиска ощущений предназначена для исследования уровня потребностей в ощущениях различного рода применительно к подросткам и взрослым людям.
  • Методика "Ценностные ориентации" М. Рокича основана на прямом ранжировании списка ценностей и позволяет исследовать индивидуальный ранг ценностей. М.Рокич различает два класса ценностей: 1) терминальные – убеждения в том, что какая-то конечная цель индивидуального существования стоит, того чтобы к ней стремится; 2) инструментальные – убеждения в том, что какой-то образ действий или свойство личности является предпочтительным в любой ситуации.

ПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО САМООПРЕДЕЛЕНИЯ

  • Методика "Мотивы выбора профессии" предназначена для определения, какие мотивы являются ведущими при выборе профессии: внутренние индивидуально значимые или внутренние социально значимые.
  • Тест Д.Голланда предназначен для диагностики типа личности в зависимости от способностей, желаний, увлечений, интересов.
  • Дифференциально-диагностический опросник Е.А.Климова "Я предпочту" направлен на определение типа профессиональной области деятельности оптанта.
  • Опросник для исследования познавательной сферы личности в контексте профессиональной ориентации.
  • Определение склонностей по методике Л.А. Йовайши.

Начало

(PDF) Методика диагностики диспозиций насильственного экстремизма

94 www. psydiagnostic.ru Психологическая диагностика, 2017. Том 14, № 1

ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ Давыдов Д.Г., Хломов К.Д.

ИНСТРУМЕНТАРИЙ Методика диагностики диспозиций...

Таблица 2. Кросскорреляция шкал методики

Культ

силы

Инто-

лерант-

ность

Кон-

венци-

ональ-

ное

при-

нужде-

ние

Соци-

альный

песси-

мизм

Ми-

стич-

ность

Де-

струк-

тив-

ностъ и

цинизм

Про-

тестная

актив-

ность

Право-

вой

ниги-

лизм

Анти-

интра-

цепция.

Допу-

сти-

мость

агрес-

сии

Кон-

фор-

мизм

Культ силы 0,557** 0,248** 0,180*0,181*0,385** 0,105 0,355** 0,203*0,389** 0,165

Интолерантность 0,557** 0,280** 0,183*0,206*0,373** 0,016 0,290** 0,252** 0,373** -0,011

Конвенциональное

принуждение 0,248** 0,280** 0,212*0,355** 0,104 0,487** -0,023 0,131 0,239** 0,144

Социальный песси-

мизм 0,180*0,183*0,212*0,312** 0,301** 0,144 0,339** 0,091 0,380** 0,207*

Мистичность 0,181*0,206*0,355** 0,312** 0,113 0,237** -0,026 0,090 0,184*0,183*

Деструктивностъ и

цинизм 0,385** 0,373** 0,104 0,301** 0,113 -0,058 0,273** 0,085 0,400** -0,043

Протестная актив-

ность 0,105 0,016 0,487** 0,144 0,237** -0,058 -0,075 0,231** 0,102 0,344**

Правовой нигилизм 0,355** 0,290** -0,023 0,339** -0,026 0,273** -0,075 0,174 0,194*0,055

Антиинтрацепция 0,203*0,252** 0,131 0,091 0,090 0,085 0,231** 0,174 0,126 0,135

Допустимость

агрессии 0,389** 0,373** 0,239** 0,380** 0,184*0,400** 0,102 0,194*0,126 0,052

Конформизм 0,165 -0,011 0,144 0,207*0,183*-0,043 0,344** 0,055 0,135 0,052

Общая оценка 0,679** 0,663** 0,587** 0,572** 0,520** 0,528** 0,400** 0,424** 0,353** 0,631** 0,319**

Примечание. * — p≤0,05; ** — p≤0,01.

Методика диагностики пространственного мышления и моделирующей деятельности детей О.А. Вялых

Занятия по развитию конструктивной деятельности полезны для развития любого ребёнка:

  • стимуляция развития потенциальных возможностей моделирующей деятельности,
  • изобразительная деятельность,
  • техническое моделирование и пр.
  • при конструировании текстов во время написания изложений и сочинений,
  • нормально развивающимся детям, имеющим незначительные трудности в сенсорном развитии, в пространственной ориентировке,
  • детям с недостатками в интеллектуальном развитии, поскольку они могут осваивать умственный способ действий через решение практических задач,
  • детям с нарушениями зрения занятия конструктивной деятельностью помогут решать задачи развития ориентировочной деятельности в целом,
  • детям с нарушениями речи - будут способствовать развитию моделирования речевого высказывания, коррекции нарушения последовательности формирования фонетической и слоговой структуры слова,
  • детям с нарушениями опорно-двигательного аппарата – развитию координации движений, мелкой моторики и психомоторики.

Методика позволяет определить уровень развития:

  • сформированности познавательных действий, являющихся необходимым компонентом практических форм мыслительной деятельности
  • пространственных представлений, определяющих способность устанавливать взаиморасположение элементов
  • образов-представлений о моделируемых объектах в плане отражения их внешних свойств и функциональных особенностей
  • психомоторики, обусловливающей точность выполнения задуманной модели и её устойчивость
  • планирующей функции речи, осуществляющей планирование действий и контроль конечного результата деятельности.

 

Качественный анализ полученных данных позволяет выявить причины несовершенства конструктивной деятельности, пространственных представлений, установить характер выявленных нарушений в соответствии с возрастными нормами развития, что даёт основание для осуществления целенаправленной индивидуализированной коррекционной работы по устранению выявленных недостатков.

Программное обеспечение содержит базу клиентов, хранит результаты проведённых занятий, содержит раздел знакомства с геометрическими фигурами, их формой и объёмом, что даёт возможность рассмотреть фигуры в интерактивной форме. Видеоролики с вращающимися фигурами позволяют сосредоточить внимание ребёнка на осмысленном анализе фигур, сознательно выделяя в них структурные элементы (стороны, углы, вершины и пр.). Основная задача, решаемая с помощью компьютерной программы, это проведение диагностической процедуры с фиксацией результатов, комментариев специалиста и автоматический расчёт результатов. Результаты представлены в виде количественной (таблицы, графики) и качественной (словесной) интерпретации с возможностью отслеживания индивидуальной и групповой динамики коррекционной работы.

Анализ продуктивности основных видов конструктивной деятельности

(снимок экрана компьютерной программы, пример результата исследования).

Применение методики:

Современный комплексный инструментарий для практических психологов, специальных психологов, патопсихологов, дефектологов в образовательных учреждениях общего, коррекционного и компенсирующего вида, психолого-педагогических консультациях, центрах психолого-педагогического развития, детских домах, реабилитационных центрах.

Методики «Диагностика и коррекция конструктивной деятельности» и «Диагностика пространственного мышления и моделирующей деятельности детей» и «Игры с тенями» обеспечивают комплексную диагностику пространственного мышления и могут быть использованы в работе с нормально развивающимися детьми или имеющими парциальные трудности развития, детьми с умственной отсталостью, задержанным психическим развитием, сенсорными нарушениями в развитии и ранним детским аутизмом как для диагностики недостатков конструктивной деятельности, так и для его развития, прогнозирования обучаемости и коррекции.

Об авторе методики:

Ольга Антольевна Вялых - кандидат психологический наук, доцент кафедры основ коррекционной педагогики ФГБОУ ВПО «Российский государственный педагогический университет им. А. И. Герцена», доцент кафедры специальной педагогики и психологии ГАОУ ДПО Ленинградского областного института развития образования, педагог-психолог высшей категории, имеющая стаж работы практическим психологом в общеобразовательных и специальных (коррекционных) образовательных учреждениях более 10 лет.  Основное направление её научных исследований дифференциальная диагностика нарушений развития у детей. Автор методики развития и коррекции пространственного мышления "Игры с тенями".

Методика диагностики мотивации учения Андреевой — REPIT Блог

Методика диагностики мотивации учения Андреевой — не просто набор слов из пособий для педагогов, но реальный инструмент работы с учениками. О том, как методика может помочь в преподавании — в этой статье.

Методика диагностики мотивации учения Андреевой

Как устроена методика диагностики мотивации учения Андреевой?

Методика диагностики мотивации учения Андреевой — это инструмент, направленный на оценку мотивации ученика средней и старшей школы на учебу, а также эмоционального отношения к учебе.

Методика выглядит как специальный опросник из 40 утверждений, которые учащемуся предлагается оценить по шкале от 1 до 4. К шкале дается дополнительная расшифровка. Так, цифра «1» предполагает, что учащийся «почти всегда» испытывает ощущение или оказывается в ситуации, указанной в утверждении, цифра «2» — «часто», цифра «3» — «иногда» и цифра «4» — «почти никогда». 

Утверждения приведены разнообразные. Несколько примеров: «я спокоен», «я стараюсь получить только хорошие и отличные оценки», «мне нравится думать, решать». 

К опроснику приложена инструкция по обработке результатов, а также объясняется, как можно интерпретировать результаты. 

Предполагается, что такой инструмент может быть использован школьным психологом, который должен рассказать ученикам, как заполнять опросник и ответить на их вопросы. Заполнение самого опросника занимает 10-15 минут.

Материалы с данной методикой и ее подробной расшифровкой находятся в открытом доступе, их легко можно скачать и разобраться подробнее.

Зачем проводить диагностику мотивации учения? 

Расшифровывая результаты методики, можно получить большой пласт информации:

  • К примеру, у ученика низкие оценки по параметрам «познавательная активность», «тревожность» и «гнев», и это может означать, что ученику скучно в школе. А вы как учитель можете замечать это по внешним факторам — ученик отвлекается на уроках, занимается посторонними делами, не вовлечен в процесс.
  • Или же по результатам мы видим высокую «познавательную активность» или «гнев» и «среднюю тревожность». В качестве интерпретации нам предложено подумать, что какие-то значимые потребности ученика (возможно, потребность в отдыхе и сне) не реализуются, и именно поэтому ученику не удается быть успешным в учебе при всех способностях. 
  • В результатах также можно увидеть, что если у ученика высокая «познавательная активность», «тревожность» и «гнев», то, скорее всего, не находят выход его социальные потребности — одной из них может быть общение со сверстниками, и именно поэтому он постоянно нарушает школьную дисциплину и болтает в процессе обучения.
  • Кроме того, в опроснике могут прослеживаться и подтверждаться высокое проявление тех эмоций, которые у ученика выплескиваются на уроке, к примеру, ученик очень нервничает, выходя к доске, у него высокий уровень тревоги или вы видите, что он конфликтует с одноклассниками или даже учителями, и это триггер высокой проявленности гнева.
  • Наконец, тест может показать повышенную чувствительность к оценочному аспекту, что для учителя знать принципиально.

Как можно применять результаты?

Учитель вместе с психологом может проанализировать результаты диагностики мотивации учения и выделить группы учеников, которым требуется дополнительное внимание учителей и/или родителей:

  • Это могут быть ученики, которым скучно в школе. В таком случае учителю важно подумать над индивидуальным подходом к такому ученику — как его вовлечь.
  • Это могут быть ученики, которым нужна помощь с распределением их времени и нагрузки.
  • Это могут быть ученики, которым не хватает общения. Возможно, они загружены дополнительными занятиями или их забирают сразу после уроков — об этом можно и нужно поговорить с родителями. 
  • Возможно, это ученики, у которых высокая тревожность или гнев, и тогда на это стоит обратить внимание родителей для дополнительной проработки с психологом.
  • Это могут быть ученики, которые очень чувствительно относятся к оценке. Возможно, здесь учитель может дополнительно объяснять критерии выставления оценки или подсказывать, как ученик может ее исправить.

Таким образом, методика выступает некой «лакмусовой бумажкой», проявляющей или подтверждающей некоторые существующие сложности или, наоборот, стабильность ситуации и дает возможность прояснить вектор действия.

Практическое мышление - методика диагностики направленности мышления Урванцева-Володиной




Методика диагностики практической направленности мышления Л.П. Урванцева - Н.В. Володиной

скачать в формате *.doc (56 kb) Практическая направленность мышления определяется нами как свойство познавательной активности, характеризующее её подчинённость предметно-преобразовательным целям и ориентацию на результат. При разработке данного теоретического конструкта были использованы работы Б. М.Теплова, К.А.Абульхановой-Славской, М.А.Холодной. В результате конкретизации исследуемое понятие было описано в нескольких группах признаков, на основе которых формулировались вопросы методики. Группы признаков: мотивация личности (интересы, предпочтения, цели, отношения), особенности интеллектуальной деятельности (мышления, памяти, внимания, восприятия), характеристики поведения, особенности воспитания и среды развития личности, специфика эмоциональных переживаний и их проявлений. Окончательный вариант методики для диагностики практической направленности мышления содержит 33 вопроса, отобранных из первоначальных 80 вопросов на основе анализа пунктов по индексам трудности и дискримнативности и прошедших ряд психометрических проверок. Психометрические проверки готовой методики проводились на выборке 150 человек (учащиеся старших классов школ г.Углича и студенты ярославских ВУЗов (ЯРГУ, МУБиНТ). Вторым этапом разработки опросника являлась проверка его надёжности. Этот этап включал определение показателя надёжности по однородности (согласованность частей теста между собой) с помощью коэффициентов корреляции Спирмена-Брауна (0,899, значимость на 5% уровне), Кьюдера-Ричардсона (0,67, значимость на 10% уровне), а также ретестовой надёжности (временной устойчивости результатов теста). Повторное проведение теста на группе 46 человек через 3 недели после первого замера дало корреляцию 0,902, значимую на 5% уровне. Измерение валидности предполагало проверку конструктной валидности (места и права существования методики в системе существующих теоретических разработок и используемых понятий). Был применён метод экспертных оценок (группа 37 человек). На основе сопоставления тестовых результатов и экспертных оценок мы можем говорить о значимом на 1% уровне коэффициенте ранговой корреляции (0,66) между ними. Процедура нормирования (унификации, регламентация, и приведения к единым нормативам процедуры и оценок теста) являлась заключительным этапом разработки методики. Нормирование проводилось по методу сигмальных оценок, использовалась стандартная психометрическая шкала от 1 до 10. Методика диагностики направленности мышления (у старших школьников и студентов) Инструкция: Продолжите пожалуйста приведённые ниже высказывания одним, соответствующим именно Вам вариантом ( А или Б – вариантов "не знаю" или "и то, и другое" быть не должно). Отвечайте по порядку, не пропуская вопросов. Помните: "правильных" и "неправильных" ответов не бывает.
1.Вам больше подходит работа, заключающаяся в :
А) рассмотрении интересных явлений, выяснении новых закономерностей
Б) создании полезных продуктов- удобных и надёжных
2.Ваше хобби больше связано:
А) с получением знаний, открытием чего-либо нового (чтение, путешествия …)
Б) с созданием определённых продуктов (сочинение стихов, песен,рисование…).
3.При столкновении с проблемой Вы:
А) действуете не сразу, так как знания и варианты решения приходят после того как Вы поймёте, в чём именно проблема.
Б) начинаете действовать в некотором направлении сразу, ещё не имея чёткого плана- понимание причин противоречия приходит через некоторое время.
4. По-вашему, учёба в ВУЗе должна быть направлена на:
А) знания в определённой сфере
Б) компетентность в работе.
5. В Вашей семье больше поощрялись:
А) знания в разных сферах, эрудиция, успехи в учёбе.
Б) самостоятельное разрешение проблем, находчивость, прикладные умения.
6. Чтобы хорошо изучить предмет, Вам важнее:
А) потрогать его руками, проверить в действии
Б) понаблюдать за ним, узнать о происхождении, свойствах, строении.
7. Когда родители занимались чем-то с Вами, это чаще было:
А) совместное изучение чего-либо нового и интересного (посещение музеев и зоопарков, чтение, просмотр телепередач)
Б) совместное преобразование или создание чего-либо нового ( конструирование, починка, готовка)
8. Когда какое-либо бытовое устройство выходит из строя, Ваше ощущение растерянности:
А) длится несколько дольше, чем хотелось бы
Б) будет минимальным, даже, если Вы впервые оказались в данной ситуации.
9. Что преобладает у Вас в критической ситуации?
А) желание сначала обдумать всё, найти одно верное решение
Б) немедленное включение в ситуацию, фиксация всех её особенностей, роли, интуитивное ощущение решения.
10. Если бы всё определялось Вашим желанием, Вы начали бы работать:
А) ещё во время учёбы- чем раньше, тем лучше
Б) после учёбы (сначала нужно получать знания, а потом применять их)
11. Вы решительный человек? А) да Б) нет 12. В школьном возрасте Вам больше нравилось посещать: А) кружки, в которых занимались созданием чего-либо Б) факультативы 13. Выберите понравившееся утверждение: А) "теория без практики мертва" Б) "практика без теории слепа" 14. В организации школьных праздников, покупке коллективных подарков Вы: А) с удовольствием принимали участие как организатор или помощник Б) активно не участвовали, хотя, возможно и посещали праздники, присоединялись к поздравлениям 15. Необходимость сделать что-то сложное и важное: А) часто тяготит Вас, Вы не знаете, с какой стороны подступиться к проблеме Б) редко вызывает отрицательные эмоции- Вы просто начинаете делать, что считаете нужным 16. В школе чтобы лучше понять материал, Вам требовалось: А) привести примеры его появления в жизни Б) повторить, из чего он состоит и почему так организован 17. Вам более интересны люди: А) имеющие широкий кругозор Б) применяющие свои знания на практике 18. В школе Вам больше нравились: А) те предметы, которые связаны с реальной жизнью и могут изучаться с опорой на неё ( труд, ОБЖ, информатика, психология…) Б) предметы, описывающие незнакомые стороны жизни, требующие представление картины мира (история, геометрия, химия, астрономия..) 19. У Вас чаще возникают вопросы: А) об устройстве мира, взаимосвязи вещей, вопросы, на которые порой нет одного ответа Б) вопросы о средствах и способах реализации конкретных действий 20. Вы склонны восхищаться: А) уникальностью явления, стройностью и точностью природного закона. Б) оригинальностью задумки, смелостью и простотой воплощения сложной идеи, прогнозами 21. Ваши проблемы: А) имеют конкретный характер- в своём истинном виде присущи только Вам. Обычно Вы знаете, что сделать, чтобы их решить Б) обычно носят глобальный характер, по-разному описываются классиками литературы (безответная любовь, одиночество, непонимание), они сложно решаемы. 22. Вы скорей всего назвали бы себя: А) любознательным человеком Б) находчивым человеком 23. Вы задумываетесь о Ваших особенностях: А) потому что Вам нравится познавать себя, интересно открывать новые качества и возможности Б) чтобы понять, что Вам мешает, а что помогает эффективной деятельности. 24. По-вашему, важнее: А) разобраться с проблемой- решить её Б) выяснить, почему она возникла 25. В школе Вас больше поощряли (отмечали): А) за понимание материала, любознательность, хорошую ориентацию в нём Б) за находчивость и сообразительность 26. При необходимости ознакомиться с правилами какой-либо игры Вы: А) предпочитаете понаблюдать со стороны, выслушать чьё-нибудь объяснение- так лучше видны все роли и законы игры Б) предпочитаете быстрее включиться в игру, освоить правила в процессе- даже, если сначала будет ничего не понятно 27. Вы обычно читаете: А) для извлечения конкретной пользы из материала Б) для удовольствия или развития кругозора 28. Когда долго нет никакого занятия, Вы: А) скучаете, ищете, что можно сделать Б) размышляете о различных вещах, напрямую не связанных с реальной жизнью. 29. В ситуации нехватки времени: А) Вам трудно сосредоточиться на проблеме и применить имеющиеся у Вас знания Б) Вы не затрудняетесь- легко ускоряетесь, информация и нужные действия сами приходят в голову 30. Собираясь провести каникулы (отпуск) в другой стране, Вы: А) предварительно узнали бы её историю, культуру, памятники, родившихся там известных людей Б) заранее выяснили бы, какие там обычаи и нравы, отношение к туристам; где можно остановиться и как провести время, что лучше купить 31. Вы предпочли бы: А) знать один иностранный язык, но глубоко, во всех тонкостях- как родной Б) знать несколько языков не полностью, а на уровне примерного понимания и передачи мыслей 32 Услышав новое, неизвестное слово, Вы: А) почти всегда смотрите его значение в словаре или спрашиваете у кого-либо Б) интересуетесь значением, но посмотреть в словаре обычно не получается. 33. По-вашему, удобней готовиться к экзамену: А) по учебникам и конспектам, улавливая суть предмета, организацию знания, основные понятия Б) по предложенным преподавателем вопросам, составляя полный ответ на каждый из них. Обработка результатов: Ключ: "А"-6,10,11,12,13,14,16,18,21,24,27,28. "Б"-1,2,3,4,5,7,8,9,15,17,19,20,22,23,25,26,29,30,31,32,33. Нормы: низкая выраженность 1-14баллов средняя выраженность 14-28баллов высокая выраженность 28-33 балла Испытуемый с низкой выраженностью практической направленности мышления: Любознательный; получает наслаждение от интеллектуальной деятельности как таковой; ценит обоснованность, доказательность, логичность; увлечённо читает; восхищается устройством вещей; при выполнении новой работы отмечает в ней закономерности, интересные моменты; воплощение замыслов в жизнь составляет скорее трудность, чем удовольствие; любит объяснять происходящие событие, рассуждать; знания, неудачи воспринимает эмоционально; знания, приобретённые в процессе обучения и самообразования играют большую роль, чем опыт; при необходимости действовать быстро может придти в замешательство; при столкновении с проблемой прежде чем действовать стремиться определить её причину; порой труднее других приспосабливается к окружающим изменениям; любит и стремиться узнавать новое о себе. При высокой выраженности практической направленности мышления: Предприимчив и самостоятелен; идеи всегда реализуемы; ценит свободу и удобство; легко приспосабливается к новому; экономично и быстро разрешает проблемы; в решениях стремиться учесть все элементы ситуации и возможные результаты; соотносит происходящее со своей деятельностью и интересами; бывает трудно доходчиво объяснить свои знания другому человеку; хранит в памяти в основном ту информацию, которой сможет потом воспользоваться; столкнувшись с проблемой, сразу начинает решительно действовать; неудачи воспринимает как проблемы, которые нужно решить; основной источник информации- личный опыт; без замешательства соглашается участвовать в новых для него видах деятельности.

Методика диагностики стресс-совладающего поведения (копинг-поведение в стрессовых ситуациях)

 Методика диагностики стресс-совладающего поведения (копинг-поведение в стрессовых ситуациях)

Методика исследования базисных копинг-стратегий - "Индикатор стратегий преодоления стресса" создан Д. Амирханом в 1990 году. Методика представляет собой краткий самооценочный опросник состоящий из 33 утверждений, определяющий базисные копинг-стратегии, их выраженность в структуре совладающего со стрессом поведения. Трехстадийный факторный анализ разнообразных ситуационно-специфических копинг-ответов на стресс, позволил Д. Амирхану определить три базисные копинг-стратегии: разрешение проблем, поиск социальной поддержки, избегание (уклонение). Опросник может применяться для исследования лиц подросткового и юношеского возрастов и взрослых.

Экспериментальный материал

Бланк методики, содержащий инструкцию и текст опросника

Фамилия, имя______________________________________________________

Возраст______________________________________________________________

Класс________________________________________________________________

Мы интересуемся, как люди справляются с проблемами, трудностями и неприятностями в их жизни. На бланке представлено несколько возможных вариантов преодоления неприятностей. Познакомившись с утверждениями, вы можете определить, какие из предложенных вариантов обычно вами используются. Все ваши ответы останутся неизвестными посторонним. Попытайтесь вспомнить об одной из серьезных проблем, с которыми вы столкнулись за последние 6 месяцев, которые заставили вас изрядно беспокоиться, и опишите эту проблему в скольких словах. Теперь, читая нижеприведенные утверждения, берите один из трех наиболее приемлемых ответов для каждого.

 

Да

Скорее да, чем нет

Нет

1. Позволяю себе поделиться чувством с другом

1

2

3

2.Стараюсь все сделать так, чтобы иметь возможность наилучшим образом решить проблему

3

2

1

3. Осуществляю поиск всех возможных решений, прежде чем что-то предпринять

3

2

1

4. Пытаюсь отвлечься от проблемы

3

2

1

5. Принимаю сочувствие и понимание от кого-либо

3

2

1

6. Делаю все возможное, чтобы не дать окружающим увидеть, что мои дела плохи

3

2

1

7. Обсуждаю ситуацию с людьми, так как обсуждение помогает мне чувствовать себя лучше

3

2

1

8. Ставлю для себя ряд целей, позволяющих постепенно справляться с ситуацией

3

2

1

9. Очень тщательно взвешиваю возможности выбора

3

2

1

10. Мечтаю, фантазирую о лучших временах

3

2

1

11. Пытаюсь различными способами решать проблему, пока не найду подходящий

3

2

1

12. Доверяю свои страхи родственнику или другу

3

2

1

13. Больше времени, чем обычно, провожу один

3

2

1

14. Рассказываю другим людям о ситуации, так как только ее обсуждение помогает мне прийти к ее разрешению

3

2

1

15. Думаю о том, что нужно сделать, чтобы исправить положение

3

2

1

16. Сосредотачиваюсь полностью на решении проблемы

3

2

1

17. Обдумываю про себя план действий

3

2

1

18. Смотрю телевизор дольше, чем обычно

3

2

1

19. Иду к кому-нибудь (другу или специалисту), чтобы он помог мне чувствовать себя лучше

3

2

1

20. Стою твердо и борюсь за то, что мне нужно в этой ситуации

3

2

1

21. Избегаю общения с людьми

3

2

1

22. Переключаюсь на хобби или занимаюсь спортом, чтобы избежать . проблем

3

2

1

23. Иду к другу за советом - как исправить ситуацию

3

2

1

24. Иду к другу, чтобы он помог мне лучше почувствовать проблему

3

2

1

25. Принимаю сочувствие, взаимопонимание друзей

3

2

1

26. Сплю больше обычного

3

2

1

27. Фантазирую о том, что все могло бы быть иначе

3

2

1

28. Представляю себя героем книги или кино

3

2

1

29. Пытаюсь решить проблему

3

2

1

30. Хочу, чтобы люди оставили меня одного

3

2

1

31. Принимаю помощь от друзей или родственников

3

2

1

32. Ищу успокоения у тех, кто знает меня лучше

3

2

1

33. Пытаюсь тщательно планировать свои действия, а не действовать импульсивно под влиянием внешнего побуждения

3

2

1

Порядок проведения

Методика проводится фронтально - с целым классом или группой учащихся. После раздачи бланков школьникам предлагается прочесть инструкцию, затем психолог должен ответить на все задаваемые ими вопросы. После этого учащиеся работают самостоятельно, и психолог ни на какие вопросы не отвечает.

Обработка и интерпретация результатов

Ответы испытуемого сопоставляются с ключом

Ключ

Базисная копинг-стратегия

Пункты опросника, номер

Разрешение проблем

2,3,8,9, 11, 15, 16, 17,20,29,33

Поиск социальной поддержки

1,5,7, 12, 14, 19,24,23,25,31,32

Избегание

4,6, 10, 13, 18,21,22,26,27,28,30

Для получения общего балла по соответствующей стратеги" подсчитывается сумма баллов по всем 11 пунктам, относящимся к этой стратегии. Минимальная оценка по каждой шкале - 11 баллов, максимальная - 33 балла.

Если пропущен 1 пункт из 11, можно сделать следующее: подсчитать среднюю оценку по тем 10 пунктам, на которые испытуемый ответил, затем умножить это число на 11; общий балл по шкале будет выражаться следующим за этим результатом целым числом. (Например, средний балл по шкале 2,12, умножить на 11 = 23,32, общий балл - 24.)

При пропуске двух и более пунктов обработка данных испытуемого не производится.

Преобладающей считается стратегия, сумма баллов по которой выше остальных более чем на три балла.

Методика диагностики стиля поведения в конфликте (К.Томас)

Методика служит для диагностики выраженности у испытуемых стратегий поведения в конфликтной ситуации.

Для описания типов поведения людей в конфликтах К.Томас применяет двумерную модель, основополагающими измерениями, в которой являются кооперация, связанная со вниманием человека к интересам других людей, вовлеченных в ситуацию, и напористость, для которой характерен акцент на собственных интересах.

Соответственно этим двум измерениям Томас выделяет следующие способы регулирования конфликтов:

1) соревнование (конкуренция) как стремление к отстаиванию своих интересов в ущерб другому;

2) приспособление - принесение в жертву собственных интересов ради другого;

3) компромисс - уступка в ответ на уступку;

4) избегание – отсутствие стремления, как к кооперации, так и к достижению собственных целей;

5) сотрудничество - участники ситуации приходят к альтернативе, полностью удовлетворяющей интересы обеих сторон.

Опросник К.Томаса для выявления типа поведения в конфликтных ситуациях

Инструкция: «Вам предлагается 30 пар суждений. В каждой паре Вы должны выбрать то суждение, которое является наиболее типичным для характеристики Вашего поведения. Поставьте в регистрационном листе, в соответствующем месте буквы А или Б.»

1.

А. Иногда я предоставляю возможность другим взять на себя ответственность за решение спорного вопроса.

Б. Чем обсуждать то, в чем мы расходимся, я стараюсь обратить внимание на то, с чем мы оба не согласны.

2.

А. Я стараюсь найти компромиссное решение.

Б. Я пытаюсь уладить дело с учетом интересов другого и моих собственных.

3.

А. Обычно я настойчиво стремлюсь добиться своего.

Б. Я стараюсь успокоить другого и главным образом сохранить наши отношения.

4.

А. Я стараюсь найти компромиссное решение.

Б. Иногда я жертвую своими собственными интересами ради интересов другого человека.

5.

А. Улаживая спорную ситуацию, я все время стараюсь найти поддержку у другого.

Б. Я стараюсь сделать все, чтобы избежать бесполезной напряженности.

6.

А. Я пытаюсь избежать возникновения неприятностей для себя.

Б. Я стараюсь добиться своего.

7.

А. Я стараюсь отложить решение спорного вопроса с тем, чтобы со временем решить его окончательно.

Б. Я считаю возможным в чем-то уступить, чтобы добиться другого.

8.

А. Обычно я настойчиво стремлюсь добиться своего.

Б. Я первым делом стараюсь ясно определить то, в чем состоят все затронутые интересы и вопросы.

9.

А. Думаю, что не всегда стоит волноваться из-за каких-то возникающих разногласий.

Б. Я предпринимаю усилия, чтобы добиться своего.

10.

А. Я твердо стремлюсь достичь своего.

Б. Я пытаюсь найти компромиссное решение.

11.

А. Первым делом я стараюсь ясно определить то, в чем состоят все затронутые интересы и вопросы.

Б. Я стараюсь успокоить другого и главным образом сохранить наши отношения.

12.

А. Зачастую я избегаю занимать позицию, которая может вызвать споры.

Б. Я даю возможность другому в чем-то остаться при своем мнении, если он также идет мне навстречу.

13.

А. Я предлагаю среднюю позицию.

Б. Я настаиваю, чтобы было сделано по-моему.

14.

А. Я сообщаю другому свою точку зрения и спрашиваю о его взглядах.

Б. Я пытаюсь показать другому логику и преимущества моих взглядов.

15.

А. Я стараюсь успокоить другого и главным образом сохранить наши отношения.

Б. Я стараюсь сделать все необходимое, чтобы избежать напряженности.

16.

А. Я стараюсь не задеть чувств другого.

Б. Я пытаюсь убедить другого в преимуществах моей позиции.

17.

А. Обычно я настойчиво стараюсь добиться своего.

Б. Я стараюсь сделать все, чтобы избежать бесполезной напряженности.

18.

А. Если это сделает другого счастливым, я дам ему возможность настоять на своем.

Б.  Я даю возможность другому в чем-то остаться при своем мнении, если он также идет мне навстречу.

19.

А. Первым делом я стараюсь ясно определить то, в чем состоят все затронутые интересы и спорные вопросы.

Б. Я стараюсь отложить решение спорного вопроса с тем, чтобы со временем решить его окончательно.

20.

А. Я пытаюсь немедленно преодолеть наши разногласия.

Б. Я стараюсь найти наилучшее сочетание выгод и потерь для нас обоих.

21.

А. Ведя переговоры, я стараюсь быть внимательным к желаниям другого.

Б. Я всегда склоняюсь к прямому обсуждению проблемы.

22.

А. Я пытаюсь найти позицию, которая находится посредине между моей позицией и точкой зрения другого человека.

Б. Я отстаиваю свои желания.

23.

А. Как правило, я озабочен тем, чтобы удовлетворить желания каждого из нас.

Б.  Иногда я представляю возможность другим взять на себя ответственность за решение спорного вопроса.

24.

А. Если позиция другого кажется ему очень важной, я постараюсь пойти навстречу его желаниям.

Б. Я стараюсь убедить другого прийти к компромиссу.

25.

А. Я пытаюсь показать другому логику и преимущества моих взглядов.

Б. Ведя переговоры, я стараюсь быть внимательным к желаниям другого.

26.

А. Я предлагаю среднюю позицию.

Б. Я почти всегда озабочен тем, чтобы удовлетворить желания каждого из нас.

27.

А. Зачастую я избегаю занимать позицию, которая может вызвать споры.

Б. Если это сделает другого счастливым, я дам ему возможность настоять на своем.

28.

А. Обычно я настойчиво стремлюсь добиться своего.

Б. Улаживая ситуацию, я обычно стараюсь найти поддержку у другого.

29.

А. Я предлагаю среднюю позицию.

Б. Думаю, что не всегда стоит волноваться из-за каких-то возникающих разногласий.

30.

А. Я стараюсь не задеть чувств другого.

Б. Я всегда занимаю такую позицию в спорном вопросе, чтобы мы совместно с другим заинтересованным человеком могли добиться успеха.

 

Ключ к методике диагностики стилей поведения в конфликте К.Томаса

 

Соперничество (соревнование):

А: 3, 8, 10, 17, 25, 28;

Б: 6, 9, 13, 14, 16, 22.

Сотрудничество:

А: 5, 11, 14, 19, 20, 23;

Б: 2, 8, 21, 26, 28, 30.

Компромисс:

А: 2, 4, 13, 22, 26, 29;

Б: 7, 10, 12, 18, 20, 24.

Избегание:

А: 1, 6, 7, 9, 12, 27;

Б: 5, 15, 17, 19, 23, 29.

Приспособление:

А: 15, 16, 18, 21, 24, 30;

Б: 1, 3, 4, 11, 25, 27.

Интерпретация результатов теста К.Томаса для выявления выраженности стратегий поведения в конфликте

 

Количество баллов, набранных индивидом по каждой шкале, дает представление о выраженности у него тенденции к проявлению соответствующих форм поведения в конфликтных ситуациях. Доминирующим считается тип (типы) набравшие максимальное количество баллов.

  • Соперничество: наименее эффективный, но наиболее часто используемый способ поведения в конфликтах, выражается в стремлении добиться удовлетворения своих интересов в ущерб другому.
  • Приспособление: означает, в противоположность соперничеству, принесение в жертву собственных интересов ради другого.
  • Компромисс: компромисс как соглашение между участниками конфликта, достигнутое путем взаимных уступок.
  • Уклонение (избегание): для которого характерно как отсутствие стремления к кооперации, так и отсутствие тенденции к достижению собственных целей
  • Сотрудничество: когда участники ситуации приходят к альтернативе, полностью удовлетворяющей интересы обеих сторон.

Надеюсь, этот материал поможет вам написать работу по психологии самостоятельно. Если понадобится помощь, обращайтесь (дипломные, курсовые, магистерские и др. работы по психологии; статистические расчеты).

Диагностические методы | Отделение патологии инфекционных болезней | DHCPP | NCEZID

IDPB использует различные диагностические методы при оценке образцов тканей, включая морфологические, антигенные и нуклеиновые кислоты. Эти тесты используются по мере необходимости на основе анализа данных случая и гистопатологии.

Иммуногистохимия (ИГХ)

IHC предлагает несколько явных преимуществ по сравнению с традиционными методами идентификации. Этот метод быстро расширяет диагностические возможности патолога.

IHC позволяет быстро идентифицировать агентов. В методе используются специфические антитела, которые локализуются к антигенам интересующего этиологического агента. Поскольку в этом методе используются ткани, фиксированные формалином, транспортировка образцов упрощается, что позволяет проводить ретроспективные исследования и сводить к минимуму воздействие инфекционных агентов на лабораторных работников.

IHC - это чувствительная и специфическая методология тестирования многих микроорганизмов, и в отличие от некоторых традиционных методов окрашивания, они дают прямые, хорошо интерпретируемые визуальные свидетельства присутствия инфекционного агента в тканях.Кроме того, IHC выявляет организмы, которые трудно культивировать, и те, которые нельзя культивировать.

IHC предоставляет бесценную информацию для клинической диагностики, а также для изучения патогенеза. IDPB разработала множество специальных тестов IHC для выявления новых или повторно возникающих инфекционных заболеваний. В настоящее время IDPB предлагает диагностические тесты IHC для более чем 100 этиологических агентов, включая вирусные, бактериальные, паразитарные и грибковые организмы. Для ряда агентов тесты IHC могут быть единственными надежными методами обнаружения.

Особые пятна

Специальные красители полезны для обнаружения бактерий, грибков и паразитов в тканях и культуральных материалах. Однако они могут не давать конкретного диагноза организма, и каждое пятно отличается по уровню чувствительности.

Молекулярный

IDPB в настоящее время располагает батареей тестов на основе ПЦР для обнаружения многих бактерий, вирусов, грибков и паразитов. Молекулярные тесты IDPB оптимизированы для фиксированных формалином и залитых парафином тканей.

Микробиология

В некоторых случаях необъяснимых заболеваний IDPB обладает ограниченными возможностями для вирусной культуры этиологических агентов. Этот метод зависит от свежезамороженных тканей или биологических жидкостей и позволяет проводить дополнительные исследования, такие как методы иммунофлуоресценции или электронная микроскопия.

Электронная микроскопия

Исследования с помощью электронной микроскопии (ЭМ) проводятся на культурах клеток, тканях и жидкостях организма. Доступны как тонкие срезы, так и отрицательные окрашенные ЭМ для помощи в диагностике и характеристике патогенов.ЭМ-исследование проводится на фиксированных глютаральдегидом тканях или жидкостях организма, фиксированных формалином блоках тканей, залитых парафином, подготовленных ЭМ-срезах, изображениях и сетках.

Диагностические методы: цель и методы

Диагностическая визуализация

Диагностическая визуализация - это наиболее распространенные типы процедур, используемых после скрининговых тестов. Ниже описаны типы тестов, которые используются для диагностики состояния пациента.

  • Рентгеновские лучи : Рентгеновские лучи используются для обнаружения проблем, относящихся к опорно-двигательной системе человека, что означает, что рентгеновские лучи используются для выявления проблем, связанных с нашими костями, мышцами, связками и сухожилиями. . Например, если человек упал с велосипеда и повредил руку, будет сделан рентгеновский снимок, чтобы подтвердить, была ли сломана кость. В некоторых случаях рентген можно использовать с контрастом. Пациент проглотит жидкость или таблетку или получит инъекцию вещества, которое выделит определенную область при рентгеновском снимке.
  • MRI : MRI обозначает магнитно-резонансную томографию . В этой процедуре вокруг пациента вращается мощный магнит, который передает информацию через сканер и создает изображение, на которое врачи могут смотреть. МРТ также используется для выявления проблем с опорно-двигательным аппаратом. Однако МРТ немного более специфичен, чем рентген, и может получить гораздо больше информации. С помощью МРТ мы можем просматривать органы и мягкие ткани человека. Вы даже можете сделать МРТ головного мозга.МРТ очень полезна для обнаружения и мониторинга болезненных процессов, таких как рак или проблемы с органами.
  • Ультразвук : Ультразвук - очень распространенная процедура, которую можно использовать для определения функций определенных органов. Это лучше всего подходит для тестирования и наблюдения во время беременности. Ультразвуковой инструмент посылает крошечные вибрации через исследуемую область. Когда эти вибрации достигают пораженного участка, они возвращаются к ультразвуковому инструменту, который затем создает изображение. Это изображение обрисовывает в общих чертах просматриваемую область.Если беременная женщина идет на УЗИ, инструмент покажет очертания малыша. Кроме того, он покажет сердцебиение и другие функции ребенка, чтобы убедиться, что он здоров. Изображение, созданное с помощью ультразвука, похоже на прямую трансляцию видео.
  • КТ / ПЭТ : КТ обозначает компьютерную томографию , а ПЭТ обозначает позитронно-эмиссионную томографию . КТ-сканирование сравнимо с рентгеновским снимком, за исключением того, что компьютерная томография берет множество рентгеновских изображений под разными углами. Затем все эти изображения объединяются с помощью компьютера, чтобы получить очень подробное изображение исследуемой области.При ПЭТ-сканировании в организм вводится радиоактивное вещество. Это вещество обнаруживается с помощью ПЭТ-сканирования, чтобы показать, как определенные органы работают внутри тела. Сканирование ПЭТ показывает не только изображения, но и прямую видеотрансляцию радиоактивного вещества, перемещающегося по проверяемым участкам.
  • Радионуклидное сканирование : Этот тип сканирования аналогичен ПЭТ-сканированию. Небольшое количество радиоактивного вещества попадает в тело и обнаруживается сканированием. Радиоактивное вещество может быть направлено прямо в конкретный орган, чтобы показать, насколько хорошо этот орган функционирует или что с ним что-то не так.Этот тип сканирования часто используется для обнаружения опухолей или раковых процессов. Он также известен как для ядерной медицины .

Биопсия ткани

Если у пациента подозревают заболевание кожи или внутренних органов, часто проводят биопсию ткани . При биопсии ткани из тела вырезается и исследуется небольшой кусочек подозрительной ткани. Биопсийную ткань можно просмотреть под микроскопом или пройти через определенные биохимические тесты, чтобы определить, что не так.Примером этого является подозрение на рак. Если пациент обратился к врачу со странной родинкой, будет проведена биопсия ткани, чтобы увидеть, злокачественная область или нет, и сузить диагноз.

Электрокардиография

Электрокардиография (ЭКГ) - это тест, который используется для получения дополнительной информации о сердце. Это очень распространенный диагностический тест, потому что сердечные заболевания являются главным убийцей в нашем обществе. Если у человека подозревают, что у него что-то не так с сердцем, выдается этот тест.ЭКГ проводится путем размещения электродов на определенных участках тела. Эти электроды подключены к аппарату, который будет измерять электропроводность и сердца. Это означает, что измеряется биение и функция сердца. Если измерения искажены, это дает врачу понять, что что-то не так.

Отбор проб жидкости организма

Отбор проб жидкости тела используется для анализа крови или мочи людей, страдающих определенными заболеваниями. Образцы крови или мочи, взятые у пациента, могут быть подвергнуты химическим тестам, чтобы определить, есть ли у человека заболевание или определенная дисфункция в организме.

Резюме урока

В этом уроке мы рассмотрели множество различных диагностических методов, и процедур, которые используются для выявления и мониторинга заболеваний и состояний. Большинство используемых тестов попадают в категорию диагностических изображений . К ним относятся рентгеновских лучей , MRI , ультразвук , CT / PET и радионуклидное сканирование . Другие тесты, которые могут быть более конкретными, включают биопсий ткани , электрокардиографию и отбор проб жидкости тела .Каждый из этих диагностических тестов используется для определения того, что не так с пациентом, чтобы он мог получить необходимую помощь и лечение. Важно помнить, что базовые скрининговые тесты, хотя и полезны, иногда не позволяют однозначно определить, что с человеком не так. Именно в это время мы обращаемся к дальнейшему диагностическому тестированию.

Диагностические методы для мониторинга и контроля фактического пламени

Реферат

Разработка диагностических методов, подходящих для мониторинга практического пламени, является важной задачей, которая привлекает все большее внимание и требует значительных исследовательских усилий.Это мотивировано необходимостью более точного описания процесса и, в конечном итоге, внедрения эффективных и надежных методов управления и оптимизации в качестве ключевого шага на пути к разработке более эффективных, гибких, надежных и чистых систем сжигания. Было предложено множество интересных попыток, включающих самые разные подходы с точки зрения используемых инструментов и концепций, предложенных для преобразования сенсорной информации в различные значимые параметры. В этой статье делается обзор методов, предлагаемых в литературе для мониторинга пламени, применяемых или задуманных для мониторинга практического оборудования для сжигания.Он разделен на четыре раздела, посвященных оптическим датчикам, методам визуализации, датчикам давления и методам зондирования. Подробный анализ опубликованных работ показывает, что, вероятно, основной проблемой в этой области является определение наиболее репрезентативных сигналов пламени и их последующая обработка для получения значимой информации, необходимой для диагностики состояния пламени или управления контроллером в эффективный и безопасный способ. Это вместе с широким спектром диагностических потребностей и ограничений, налагаемых различными ситуациями сгорания, вероятно, объясняет заметную неоднородность, наблюдаемую среди опубликованных работ.Несмотря на приложенные огромные усилия, методы, предлагаемые для расширенного мониторинга практического пламени, все еще находятся на стадии разработки. Однако в ближайшем будущем ожидается значительный прогресс в этой области, чему способствуют насущные потребности отрасли сжигания и постоянный прогресс в сенсорной технологии, технологиях обработки сигналов и, что немаловажно, в понимании процессов горения.

Ключевые слова

Мониторинг пламени

Диагностика пламени

Контроль горения

Оптические датчики

Визуализация пламени

Колебания давления

Датчики газа

Датчики ионизации

Рекомендуемые статьи 2009 г., Elsevier Ltd.Все права защищены.

Рекомендуемые статьи

Цитирующие статьи

Методы молекулярной и иммунологической диагностики медицинских вирусов

Вирусные инфекции вызывают серьезные проблемы у населения во всем мире. Недавняя вспышка коронавирусного заболевания 2019 года, вызванная SARS-CoV-2, является прекрасным примером того, как вирусная инфекция может представлять большую угрозу для глобального общественного здравоохранения и секторов экономики. Поэтому первым шагом в борьбе с вирусными возбудителями является своевременная и точная диагностика.Раннее и точное обнаружение вирусного присутствия в образце пациента имеет решающее значение для надлежащего лечения, контроля и предотвращения эпидемий. Здесь мы суммируем некоторые из молекулярных и иммунологических диагностических подходов, доступных для обнаружения вирусных инфекций человека. Методы молекулярной диагностики обеспечивают быстрое обнаружение вирусов в образце пациента. Это также относительно недорогие, высокочувствительные и специфические методы диагностики. Иммунологические методы широко используются для обнаружения и эпидемиологических исследований вирусных инфекций человека.Они могут обнаруживать противовирусные антитела или вирусные антигены в клинических образцах. Существует несколько коммерчески доступных наборов для молекулярной и иммунологической диагностики, которые облегчают использование этих методов в большинстве клинических лабораторий по всему миру. В развивающихся странах, включая Эфиопию, где большинство вирусных инфекций являются эндемическими, использование улучшенных или новых методов очень ограничено, поскольку эти методы очень дороги в использовании и также требуют технических навыков. Поскольку исследователи и врачи во всех уголках земного шара усердно работают, есть надежда, что в ближайшем будущем они разработают тесты хорошего качества, которые будут доступны в странах с низким уровнем доходов.

1. Введение

Вирусы представляют собой небольшие сегменты нуклеиновой кислоты, дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) или рибонуклеиновой кислоты (РНК) внутри белковой оболочки или липопротеиновой оболочки (оболочки). Вирусы требуют ресурсов хозяина для их репликации, потому что они являются облигатными внутриклеточными паразитами. Как только вирусы проникают в клетки-хозяева, они захватывают или захватывают биосинтетические механизмы клеток для репликации их геномов и других компонентов [1, 2].

Вирусные инфекции - наиболее частая причина болезней человека.Миллионы людей по-прежнему умирают из-за вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) и вирусов гепатита во всем мире. Возникающие вирусы также вызывают серьезные проблемы у населения. Например, птичий грипп A (H5N1) в 1997 г., тяжелый острый респираторный синдром - коронавирус (SARS-CoV) в 2002–2003 гг., Вирус пандемического гриппа свиней A (h2N1) в 2009 г., вирус Эбола в 2014 г., вирус Зика (ZIKV) в 2015 г. и недавно пандемия SARS-CoV-2, среди прочего, вызвали несколько вспышек в разных странах [3–9].

Показатели заболеваемости и смертности от вирусных инфекций человека очень высоки [10]. Например, пандемическая инфекция свиного гриппа A (h2N1) в 2009 г. произошла в 214 странах, в результате чего погибло более 18 036 человек [5]. Только в 2010 году число человеческих смертей от бешенства во всем мире оценивалось в 61 000 человек, при этом 84% смертей приходились на сельские районы [11]. В 2013 г. во всем мире ВИЧ инфицировано примерно 35 000 000 человек [10]. Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) сообщила 1.34 миллиона случаев смерти от вирусного гепатита в 2015 г. [12]. По состоянию на 6 -го января 2015 года вирусы H5N1 убили 402 человека из 694 лабораторно подтвержденных инфекций в 16 странах [13], при этом уровень смертности составил около 58%. Недавно мир столкнулся с новой коронавирусной болезнью 2019 года (COVID-19). Заболевание вызвано новым коронавирусом (SARS-CoV-2). Возбудитель впервые появился в городе Ухань, провинция Хубэй, Китай, и теперь быстро распространился по всему миру [9, 14]. 11 -го числа марта 2020 года ВОЗ объявила вспышку COVID-19 глобальной пандемией.По данным ВОЗ, во всем мире зарегистрировано 9 129 146 подтвержденных случаев COVID-19, в том числе 473 797 смертельных случаев с 31 -го декабря 2019 года и по состоянию на 24 -го июня 2020 года [15]. Следовательно, для раннего и точного выявления этих вирусных инфекций требуются хорошие диагностические методы. Раннее и точное обнаружение вирусных заболеваний играет важную роль в своевременном выборе подходящей терапии, минимизации затрат на лечение, минимизации ненужных человеческих жизней и контроле над заболеванием.Это также помогает разработать соответствующие стратегии профилактики и лечения заболеваний, такие как разработка противовирусных вакцин и новых терапевтических агентов [14, 16, 17].

Традиционно лабораторная диагностика медицинских вирусов проводится путем выделения вирусов в куриных яйцах с эмбрионами, в культуре тканей или у лабораторных животных и визуального исследования вирусных частиц в образце, в том числе с использованием электронной микроскопии [16]. Многие традиционные диагностические инструменты имеют тенденцию быть громоздкими, трудоемкими, дорогими и плохо воспроизводимыми [18, 19].Напротив, молекулярные методы произвели революцию в диагностической вирусологии, обнаружив присутствие или отсутствие вирусных нуклеиновых кислот в образце пациента [18]. Иммуно-методические методы все еще играют большую роль для выявления и серологического надзора за вирусными инфекциями человека, несмотря на то, что многие традиционные методы заменены методами, основанными на нуклеиновых кислотах [20]. Иммунологические методы обнаруживают вирусные инфекции путем выявления противовирусных антител или вирусных антигенов в клинических образцах [21, 22].Здесь мы описываем некоторые молекулярные и иммунологические диагностические подходы к обнаружению медицинских вирусов.

2. Методы молекулярной диагностики медицинских вирусов

Методы молекулярной диагностики на основе нуклеиновых кислот произвели революцию в диагностической вирусологии благодаря ее более быстрой, высокочувствительной и высокоспецифичной диагностике [14, 23, 24]. Поскольку эти методы обнаруживают специфические последовательности нуклеиновых кислот, диагностические тесты на основе нуклеиновых кислот могут применяться для обнаружения практически любого вируса, поражающего человека [1].

2.1. Методы амплификации на основе нуклеиновых кислот

Молекулярные методы, включающие амплификацию вирусного геномного материала, чрезвычайно чувствительны и специфичны, обеспечивают быструю диагностику и позволяют обнаруживать несколько вирусов одновременно [16]. Методы амплификации нуклеиновых кислот очень полезны для обнаружения вирусов, которые нельзя культивировать или трудно и вредно для культивирования, медленно растущих вирусов в культуре и вирусов, которые проявляют антигенные вариации [1, 25].Тесты амплификации нуклеиновых кислот очень популярны при диагностике вирусных инфекций, вызванных несколькими вирусами, включая вирус гепатита С (HCV), вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), вирус денге, вирус Эпштейна-Барра (EBV), вирусы гриппа, вирус Зика. (ZIKV), вирус Эбола и коронавирус [26–32]. В настоящее время во всем мире доступно несколько методов амплификации нуклеиновых кислот для лабораторной диагностики вирусных инфекций, и их преимущества и ограничения будут обобщены в таблице 1.

2.1.1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

ПЦР является типичным примером анализа амплификации нуклеиновых кислот. С тех пор, как он был разработан Маллисом и Фалуной [50], он произвел революцию в области молекулярной диагностики. ПЦР основана на экстракции и очистке молекулы ДНК и экспоненциальной амплификации целевой последовательности с использованием термостабильной ДНК-полимеразы и двух специфических олигонуклеотидных праймеров. После реакции ПЦР амплифицированный продукт может быть обнаружен несколькими методами, включая гель-электрофорез, колориметрические методы и секвенирование [10, 51, 52].С момента своего создания ПЦР использовалась для выявления вирусных инфекций человека с общей клинической чувствительностью от 77,8% до 100% и клинической специфичностью от 89% до 100% [28, 53–55]. Эти отчеты предполагают, что ПЦР может использоваться для обнаружения медицинских вирусов в различных типах образцов. Обычная ПЦР все еще используется некоторыми клиническими лабораториями по всему миру, но ее быстро заменяют более совершенные варианты этого метода.

ПЦР - очень универсальный метод.Разработан ряд вариантов общепринятой ПЦР, но наиболее важными из них являются ПЦР с обратной транскрипцией и ПЦР в реальном времени [1, 10]. Первый метод был разработан для амплификации мишеней рибонуклеиновой кислоты (РНК) [1]; второй метод был введен для количественного определения дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) в реальном времени в ходе реакций ПЦР [56].

2.1.2. ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР)

ОТ-ПЦР была разработана для амплификации мишеней РНК. В этом методе обратная транскриптаза (RT) используется для преобразования вирусных РНК-мишеней в комплементарную ДНК (кДНК), а затем полученная кДНК амплифицируется с помощью стандартной ПЦР.С момента своего создания ОТ-ПЦР использовалась для диагностики заражения человека РНК-вирусами. Обычная ОТ-ПЦР продемонстрировала общую чувствительность от 73% до 100% и специфичность от 99% до 100% при обнаружении вирусной инфекции [29, 57, 58]. Эти данные показывают, что ОТ-ПЦР - превосходный метод диагностики заражения человека РНК-вирусами. Однако в настоящее время этот метод обычно не используется в клинических образцах из-за его высокой стоимости и длительности процесса [14].

2.1.3. ПЦР в реальном времени

В системе ПЦР в реальном времени этапы амплификации и обнаружения вирусных нуклеиновых кислот выполняются одновременно. Обнаружение продукта амплификации зависит от количества флуоресцентного излучения образца. Эмиссия флуоресценции образца контролируется специальным термоциклером. Компьютер с соответствующим программным обеспечением, подключенным к термоциклеру, записывает данные и строит график амплификации для каждого цикла реакции [51, 59].Обнаружение и количественное определение продуктов амплификации может быть выполнено с использованием SYBR green, TaqMan и химии молекулярных маяков. Зеленый краситель SYBR связывается с малой бороздкой продукта двухцепочечной ДНК (дцДНК) и при возбуждении соответствующим светом проявляет улучшенную флуоресценцию, которая прямо пропорциональна накопленному продукту дцДНК. Зонд TaqMan представляет собой олигонуклеотид ДНК с флуоресцентным красителем, называемым репортером, прикрепленным к одному концу (5'-основание) и гасителем на другом (3'-основание) (рис. 1).Зонды TaqMan предназначены для гибридизации с внутренней областью продукта ПЦР. Во время стадии отжига ПЦР и праймер, и зонд TaqMan связываются с цепью матрицы. Когда ДНК-полимераза Taq удлиняет праймер, полимераза расщепляет зонд за счет своей 5'-3'-экзонуклеазной активности. Расщепление зонда приводит к высвобождению флуоресцентного красителя (рис. 1), что приводит к испусканию флуоресценции. Количество флуоресценции прямо пропорционально продукту ПЦР. Молекулярный маяк - это небольшая молекула ДНК с флуоресцентным красителем на 5'-конце и гасителем на 3'-конце.Последовательности на самых концах 3 'и 5' дополняют друг друга. Внутренняя часть молекулы должна быть комплементарной целевой последовательности продукта ПЦР. Когда молекулярный маяк находится в свободном состоянии в растворе, он принимает структуру шпильки. Это приводит к тому, что флуорофор и гаситель находятся в непосредственной близости, что приводит к поглощению испускаемого света флуоресцентного красителя гасителем и, следовательно, флуоресценция не обнаруживается (рис. 2 A). Однако, когда молекулярный маяк гибридизуется с целевой последовательностью, флуорофор и гаситель разделяются, что приводит к испусканию флуоресценции (рис. 2 B).Количество флуоресценции прямо пропорционально продукту ПЦР [16, 42, 51, 60].



Благодаря высокой чувствительности и специфичности, короткому времени обработки результатов и простоте выполнения [33, 61], большинство лабораторий по всему миру используют ПЦР в реальном времени для обнаружения и количественной оценки медицинских ДНК и РНК-вирусов. в клинических образцах. Например, Boppana et al. [39] использовали ПЦР в реальном времени для обнаружения цитомегаловируса (ЦМВ) в жидкой слюне с общей чувствительностью 100% и специфичностью 99.9% по сравнению со стандартной быстрой культурой. Этот метод также использовался для диагностики первичной инфекции EBV с общей чувствительностью 95,7% и специфичностью 100% по сравнению с серологическими анализами [62]. ПЦР в реальном времени также использовалась для определения вирусной нагрузки у пациентов с герпетическим энцефалитом [40]. Определение вирусной нагрузки в образцах от пациентов имеет решающее значение, поскольку дает прогностическую и прогностическую информацию. В этом исследовании у пациентов с более высокой вирусной нагрузкой в ​​спинномозговой жидкости (ЦСЖ) было обнаружено, что терапия ацикловиром требуется в течение более длительного времени, и у них был худший клинический результат, чем у пациентов с более низкой вирусной нагрузкой в ​​ЦСЖ [40].Анализ также можно использовать для множественной идентификации различных вирусов. И зонд TaqMan, и молекулярный маяк играют решающую роль для множественной идентификации различных вирусов в одной реакции ПЦР. В мультиплексных анализах разные зонды / маяки метят разными флуоресцентными красителями [41]. В мультиплексном анализе сообщалось о чувствительности 100% и специфичности 99,6% по сравнению с иммунофлуоресцентным анализом для ПЦР в реальном времени при обнаружении аденовируса B, C и E человека в образцах мазков из зева [63].Рамамурти и его коллеги [33] сравнили мультиплексную ПЦР в реальном времени с мультиплексной традиционной ПЦР для обнаружения нейротропных вирусов (CMV, EBV, вируса простого герпеса типов 1 и 2 (HSV-1 и HSV-2), вируса японского энцефалита (JEV). и вирус ветряной оспы (VZV)) в спинномозговой жидкости. Из 147 образцов спинномозговой жидкости, собранных у пациентов с неврологическими расстройствами, ПЦР в реальном времени выявила вирусные патогены в 88 образцах, в то время как обычная ПЦР могла обнаружить вирусы только в шести образцах, что позволяет предположить, что ПЦР в реальном времени имеет более высокую чувствительность, чем обычная ПЦР.Qiu et al. [64] разработали тройной количественный анализ ПЦР в реальном времени для быстрого и дифференциального обнаружения серотипов 2, 3 и 7 аденовируса человека (hAdV) для потенциального клинического использования. Аналитическая чувствительность (предел обнаружения; LoD) этого анализа составляла 10 2 копий ДНК на реакцию для каждого из серотипов и отсутствовала перекрестная реакция с другими респираторными патогенами. Авторы пришли к выводу, что анализ чувствителен и специфичен и имеет потенциал для клинического использования для быстрого и дифференциального обнаружения и количественного определения серотипов 2, 3 и 7 hAdV в образцах человека.

Благодаря включению этапа обратной транскрипции, ПЦР в реальном времени может быть объединена с обычной ПЦР с обратной транскрипцией (RT-PCR) для формирования количественной ПЦР с обратной транскрипцией в реальном времени (RT-qPCR). RT-qPCR имеет ряд преимуществ по сравнению с традиционным методом RT-PCR, включая снижение контаминации, возможность количественного определения ампликонов и быстрое время анализа, так как нет операций обработки после ПЦР [14, 51]. В результате RT-qPCR широко применяется для обнаружения и количественной оценки нескольких РНК-вирусов в клинических образцах, включая ZIKV, вирус Эбола, коронавирус, HCV, респираторно-синцитиальный вирус (RSV), вирус денге, ВИЧ-1 и грипп A. вирус [30–32, 65–69].Недавно Corman et al. [32] разработали RT-qPCR для обнаружения SARS-CoV-2. Анализ направлен на ген белка оболочки (E) и ген РНК-зависимой РНК-полимеразы (RdRp) SARS-CoV-2. Были продемонстрированы высокие значения LoD в 5,2 копий на реакцию для гена E и 3,8 копий на реакцию для гена RdRp и отсутствие перекрестной реакции с другими коронавирусами, что свидетельствует о полезности метода для чувствительной и специфической диагностики COVID-19. Анализ RT-qPCR (Quanty ZEBOV FAST assay) оценивали на предмет обнаружения вируса Эбола в клинических образцах.CLONIT Srl (Италия) разработала тест во время вспышки лихорадки Эбола в Сьерра-Леоне, и он имел общую чувствительность 100% и специфичность 98,63% по сравнению с RealStar® Filovirus Screen RT-qPCR Kit 1.0 (Altona Diagnostics) [31]. Gueudin et al. [68] использовали RT-qPCR для диагностики и мониторинга инфекции группы O ВИЧ-1 с LoD 40 копий / мл и специфичностью 100%. Этот метод применялся для обнаружения ZIKV в сыворотке и моче человека, и он имел LoD 2,5 БОЕ / мл и 250 БОЕ / мл в моче и сыворотке соответственно [30].Júnior et al. [70] использовали RT-qPCR для обнаружения респираторных вирусов у амбулаторных больных с острой респираторной инфекцией. Они также сравнили эффективность RT-qPCR с непрямым иммунофлуоресцентным анализом (IFA). Соответственно, с помощью RT-qPCR удалось обнаружить вирусные патогены в 88 (88/162) носоглоточных аспиратах, но IFA выявила вирусные патогены только в 33 (33/162) образцах. Данные показали, что использование RT-qPCR увеличило обнаружение вирусов на 33,9%. Сегодня коммерчески доступно несколько наборов ОТ-ПЦР в реальном времени.Например, тест qPCR в реальном времени, разработанный Cepheid AB (Саннивейл, Калифорния, США), коммерчески доступен для качественного обнаружения вируса Эбола в цельной венозной крови с ЭДТА или буккальных мазках. Анализ нацелен на гены вирусных нуклеопротеинов и гликопротеинов вируса Эбола Заир. Анализ имеет LoD 82 копий РНК / реакцию с временем обработки 98 минут. Анализ Simplexa ™ Dengue RT-PCR, разработанный Focus Diagnostics (Cypress, CA, USA), представляет собой коммерческий набор для обнаружения и типирования серотипов вируса денге 1, 2, 3 и 4 в сыворотке крови человека.Анализ нацелен на четыре области, специфичные для серотипа, а именно денге 1 (неструктурный (NS) 5 ген), денге 2 (ген NS3), денге 3 (ген NS5) и денге 4 (ген капсида). LoD анализа составляет 0,16 БОЕ / мл, 2,0 БОЕ / мл, 0,2 БОЕ / мл и 0,2 БОЕ / мл для денге 1, денге 2, денге 3 и денге 4 соответственно. Доступен набор 1.0 для ОТ-ПЦР вируса Зика Real-Star, разработанный компанией Altona Diagnostics (Гамбург, Германия), для качественного обнаружения ZIKV-специфической РНК в сыворотке или моче человека. LoD анализа составляет 0.61 копия РНК / мк л. Количественный анализ Abbott RealTime HCV, разработанный Abbott Laboratories (Rungis, Франция), коммерчески доступен для количественного определения РНК HCV в сыворотке и плазме человека. Целевая последовательность для анализа находится в высококонсервативной 5'-нетранслируемой области (UTR) генома HCV. LoD анализа составляет 12 МЕ / мл при тестировании плазмы или сыворотки человека. Тест COBAS TaqMan на ВИЧ-1, разработанный Roche Diagnostics (Бранчбург, США), коммерчески доступен для количественного определения ВИЧ-1 в плазме крови человека.ОТ-ПЦР в реальном времени нацелена на две высококонсервативные области генома ВИЧ-1, а именно на gag и длинный концевой повтор (LTR). Анализ имеет LoD 20 копий РНК ВИЧ-1 / мл. Недавно несколько разработчиков диагностических тестов разработали наборы для ОТ-ПЦР в реальном времени для COVID-19, и теперь они запрашивают разрешение на маркировку и экстренное использование (EUA) от регулирующих органов. Например, компания Co-Diagnostics (Солт-Лейк-Сити, США) разработала набор для ОТ-ПЦР в реальном времени (тест Logix Smart COVID-19) для качественного определения нуклеиновой кислоты SARS-CoV-2 в образцах нижних дыхательных путей (например,g., бронхоальвеолярный лаваж, мокрота и трахеальный аспират) и образцы из верхних дыхательных путей (например, мазки из ротоглотки, мазки из носа и мазки из носоглотки). Набор получил маркировку EUA от Управления по контролю за продуктами и лекарствами США (US FDA) и CE-IVD. Анализ нацелен на ген RdRp SARS-CoV-2. LoD анализа составляет 9,35 × 10 3 копий РНК / мл при времени работы термоциклера 63–90 минут, в зависимости от оборудования для ПЦР. Центры США по контролю и профилактике заболеваний (CDC) разработали три анализа ОТ-ПЦР в реальном времени для обнаружения генетического материала SARS-CoV-2 в образцах верхних и нижних дыхательных путей, и эта панель получила EUA от FDA США.Панель ОТ-ПЦР CDC в реальном времени нацелена на 3 кандидатные области гена нуклеокапсида (N) SARS-CoV-2. LoD всех анализов составляет 5 копий РНК на реакцию. Агентство по науке, технологиям и исследованиям (A ∗ STAR) и больница Tan Tock Seng (TTSH) (Сингапур) разработали тест RT-PCR в реальном времени (Fortitude Kit 2.0) для качественного обнаружения генетического материала SARS-CoV-2 в мазки из ротоглотки. Набор получил предварительное разрешение от Управления здравоохранения Сингапура (HAS) для клинического использования. FDA США еще не одобрило набор для клинического использования.Анализ имеет LoD 1000 копий РНК / мл в мазках из ротоглотки. Разработчики набора еще не раскрыли целевой ген для этого анализа. BGI Group (Пекин, Китай) разработала набор флуоресцентной ОТ-ПЦР в реальном времени для качественного определения нуклеиновой кислоты SARS-CoV-2 в мазках из горла (ротоглотки), мазках из носа, мазках из носоглотки и других респираторных образцах. Компания получила сертификат EUA от Национального управления медицинской продукции Китая и FDA США на свой набор для тестирования.Анализ нацелен на открытую рамку считывания 1a и b (ORF1ab) гены SARS-CoV-2. Он имеет LoD 150 копий / мл в образцах из горла с временем обработки 4 часа. Набор для ПЦР в реальном времени RADI COVID-19, разработанный KH Medical (Корея), имеет маркировку CE-IVD и используется для качественного обнаружения SARS-CoV-2 в мазках из носа или мокроте человека. Анализ нацелен на два гена, а именно на ген спайкового белка (S) и ген RdRP SARS-CoV-2. Его объем составляет 0,66 копий / мкм, л, время обработки 80 минут.

2.1.4. Способы амплификации на основе транскрипции

Метод амплификации на основе транскрипции включает амплификацию на основе последовательностей нуклеиновых кислот (NASBA) и амплификацию, опосредованную транскрипцией (TMA). NASBA и TMA похожи друг на друга. Это изотермические методы усиления. Весь процесс амплификации проводится при температуре 41 ° C. В обоих случаях вирусная РНК-мишень сначала преобразуется в кДНК с помощью ОТ, а затем РНК-полимераза синтезирует множественные копии вирусного РНК-продукта.Единственное различие между TMA и NASBA в процессе амплификации заключается в том, что в случае TMA используются два фермента (RT и РНК-полимераза), в то время как NASBA использует три фермента (обратная транскриптаза вируса миелобластоза птиц (AMV-RT), РНКаза H и РНК-полимераза T7. ) [42, 51].

Как показано на рисунке 3, в процессе NASBA три фермента и два праймера работают вместе для экспоненциальной амплификации целевой вирусной РНК. Праймер 1 (P1) несет на своем 5'-конце промоторную область РНК-полимеразы Т7, а на своем 3'-конце P1 несет последовательность, комплементарную последовательности целевой вирусной РНК.Праймер 2 (P2) несет последовательность, комплементарную цепи кДНК. Реакция амплификации начинается с получения кДНК-копии вирусной РНК путем ОТ с использованием P1. РНКаза H разрушает вирусную РНК из гибридных молекул РНК-ДНК. Затем RT синтезирует молекулы дцДНК с использованием P2 и высвободившейся цепи ДНК. Наконец, РНК-полимераза Т7 использует молекулы дцДНК в качестве матриц для транскрипции многих копий вирусной РНК. Вышеупомянутый цикл повторяется несколько раз, в результате чего накапливается множество копий вирусной РНК и дц-молекул ДНК.Амплифицированный продукт можно обнаружить либо с помощью гель-электрофореза в конце анализа, либо в реальном времени с помощью молекулярного маяка [16, 42, 43, 71]. Методы амплификации, основанные на транскрипции, имеют несколько преимуществ, например, они не требуют термоциклера, поэтому развивающиеся страны и лаборатории с ограниченным бюджетом могут позволить себе проведение анализов, у них быстрая кинетика (требуется меньше циклов), и они производят один -цепочечный продукт РНК, пригодный для обнаружения различными методами [42, 51, 71, 72].Методы амплификации на основе транскрипции подходят для диагностики вирусных инфекций человека, вызываемых РНК-вирусами. Они могут амплифицировать вирусную геномную РНК, информационную РНК или рибосомную РНК [51, 71, 73]. Ayele et al. [44] разработали анализ NASBA, в котором используются молекулярные маяки на основе gag для различения ВИЧ-1 подтипа C (C и C '), циркулирующего в Эфиопии. Анализ продемонстрировал высокие уровни чувствительности и специфичности для обоих маяков (чувствительность 90,5%, специфичность 100% для маяка C и чувствительность 100% и 95.2% специфичность для маяка C '), рассматривая секвенирование как золотой стандарт для генотипирования. Мур и др. [74] также использовали NSABA для обнаружения вируса гриппа A H5N1 в клинических образцах с LoD 10 копий РНК / мк мкл наряду с такой же чувствительностью, как ОТ-ПЦР, и средним временем обработки 4 часа. Анализ NASBA также использовался для обнаружения РНК вируса денге с LoD 1 БОЕ / мл для всех 4 серотипов вируса денге, без перекрестной реакции с JEV и временем обработки 3 часа [27].Ender et al. [26] использовали ТМА для скрининга донорской крови на РНК ВИЧ-1 и ВГС. Анализ ТМА имел LoD 16,2 МЕ / мл для ВИЧ-1 и 3,5 МЕ / мл для ВГС. Мультиплексный анализ NASBA использовался для одновременного обнаружения ВИЧ-1 и HCV в образцах плазмы. Было определено, что LoD анализа как для ВИЧ-1, так и для HCV составляет 1000 копий / мл и не вызывает перекрестных реакций с другими выбранными вирусами [45]. Свенсон и его коллеги [75] использовали ТМА в реальном времени для обнаружения ВПГ-1 и ВПГ-2 в образцах мазков с поражений с общей чувствительностью 98.2% и 99,4% соответственно, а специфичность 97,8% и 94,5% соответственно по сравнению с культурой. В одном исследовании анализ NASBA в реальном времени оказался более чувствительным, чем обычная ОТ-ПЦР при обнаружении норовируса. В этом исследовании ОТ-ПЦР выявила 10 мкг стандартной вирусной РНК, в то время как анализ NASBA в реальном времени может выявить 100 мкг стандартной вирусной РНК [76]. Эти данные указывают на то, что эти анализы чувствительны, специфичны и экономически эффективны для обнаружения инфекции человека РНК-вирусами.


Анализы на основе ТМА для обнаружения ВГС и ВИЧ-1 коммерчески доступны, разработаны Hologic (Сан-Диего, Калифорния, США).Качественный анализ Aptima HCV RNA используется для обнаружения РНК HCV в плазме или сыворотке человека. В анализе используется ТМА для амплификации консервативных областей в 5'-UTR генома HCV. Анализ имеет LoD 7,5 МЕ / мл со специфичностью 99,6%. Наборы на основе NASBA для обнаружения ВИЧ-1, ЦМВ, энтеровируса и RSV также коммерчески доступны и разработаны компанией bioMérieux Clinical Diagnostics. Анализ NucliSens Easy Q RSV A и B разработан компанией bioMérieux (Марси л'Этуаль, Франция) и используется для качественного определения RSV в респираторных образцах различных типов.Анализ основан на NASBA в реальном времени и нацелен на ген F RSV. Мур и др. [77] оценили эффективность коммерческого тестового набора с использованием 508 респираторных образцов, которые были протестированы методом прямой иммунофлуоресценции и культивирования. Было обнаружено, что анализ более чувствителен, чем анализ культуры и иммунофлуоресценции. Было определено, что чувствительность и специфичность анализа составили 99% и 87%, соответственно, по сравнению с иммунофлуоресцентным анализом со временем обработки <4 часов.

2.1.5. Петлевая изотермическая амплификация (LAMP)

LAMP - еще один метод изотермической амплификации нуклеиновых кислот, который широко используется для чувствительного, специфичного, быстрого и экономичного обнаружения вирусов ДНК и РНК в образцах человека. Метод был впервые разработан Notomi et al. [78] и быстро завоевали популярность в диагностической вирусологии. В методе используются от четырех до шести уникальных праймеров и ДНК-полимеразы с активностью замещения цепи для амплификации целевой ДНК [78, 79]. Добавление RT в реакцию LAMP (RT-LAMP) позволяет амплифицировать РНК-мишень [80].Наборы праймеров для LAMP, о которых первоначально сообщили Notomi et al. [78] включают прямой внутренний праймер (FIP), задний внутренний праймер (BIP), прямой внешний праймер (F3) и задний внешний праймер (B3). Праймеры специально разработаны для распознавания шести точных областей из целевой последовательности нуклеиновой кислоты. Нагамин и др. [79] позже добавили два праймера петли, а именно праймер прямой петли (LF) и праймер обратной петли (LB), чтобы ускорить анализ LAMP. Благодаря использованию от четырех до шести специфических праймеров, анализ LAMP обладает выдающейся чувствительностью и специфичностью при обнаружении нуклеиновых кислот-мишеней [79, 81].Подробное описание механизма реакции LAMP доступно в обзорах Becherer et al. [81], Tomita et al. [82], а также Silva et al. [83], которые используют иллюстрации для объяснения механизма. Реакция LAMP осуществляется при постоянной температуре от 60 до 65 ° C, что устраняет необходимость в дорогостоящем специализированном оборудовании. Для этого метода требуется только недорогой нагревательный блок или водяная баня, что делает его очень полезным в плохих лабораторных условиях [84]. Реакция LAMP занимает менее 1 часа, и амплифицированный продукт может быть обнаружен несколькими методами, включая измерение в реальном времени мутности, вызванной осажденным пирофосфатом магния, с использованием турбидиметра, визуальное обнаружение осаждения пирофосфата магния после завершения реакции. , обнаружение флуоресценции в ультрафиолетовом или естественном свете путем добавления интеркалирующего флуоресцентного красителя к конечной реакционной смеси и визуализация полос различного размера с помощью электрофореза в агарозном геле [84–87].

Анализ LAMP

был успешно использован для быстрого обнаружения ряда ДНК-вирусов в образцах человека, таких как ВПГ-1 с LoD 10 копий ДНК ВПГ-1/ мк мкл и отсутствие перекрестных реакций с другими выбранными вирусы [85], hAdV40 и hAdV41 с LoD от 50 до 100 копий ДНК / реакция, отсутствие перекрестных реакций с другими выбранными вирусами и время обработки 60 минут [88], EBV с чувствительностью 86,4%, специфичностью 100 %, по сравнению с серологическим анализом, и всего 45 минут амплификации целевых последовательностей [89], и ЦМВ с LoD 10 копий ДНК / мк мкл, отсутствие перекрестной реактивности с другими вирусами и время обработки 1 час после Экстракция РНК [90].

Возможности LAMP расширяются за счет слияния его с обратной транскрипцией (RT) в RT-LAMP, что позволяет быстро обнаруживать РНК-вирусы в клинических образцах. Недавно, например, Huang et al. [91] разработали экспресс-анализ RT-LAMP для диагностики SARS-CoV-2 с LoD 80 копий вирусной РНК / мл в образце в течение 30-минутной реакции. Этот анализ был подтвержден с использованием 16 клинических образцов (8 положительных и 8 отрицательных), которые также были протестированы методом RT-qPCR. Результаты тестирования соответствовали методу RT-qPCR, предполагая, что анализ RT-LAMP можно использовать для быстрого, простого, экономичного и чувствительного обнаружения SARS-CoV-2 в респираторных образцах.Аналогичным образом Lu et al. [92] разработали метод RT-LAMP для быстрого обнаружения SARS-CoV-2 с LoD 30 копий РНК на реакцию и временем обработки 40 минут. Кроме того, Baek et al. [93] разработали экспресс-анализ RT-LAMP для раннего обнаружения SARS-CoV-2. Анализ имеет LoD, равный 100 копий РНК / реакцию, что близко к таковому для RT-qPCR с периодом быстрого обнаружения 30 минут. Анализ RT-LAMP также был разработан для выявления коронавируса ближневосточного респираторного синдрома (MERS-CoV) с LoD 3,4 копий РНК MERS-CoV / реакция наряду с такой же чувствительностью, как и RT-qPCR MERS-CoV, без перекрестной реакции на другие респираторные вирусы, и результаты доступны в течение <1 часа [87].Куросаки и др. [94] обнаружили острую инфекцию вируса Эбола с помощью RT-LAMP в сочетании с портативным устройством. Чувствительность и специфичность каждого анализа составляли 100% по сравнению с RT-qPCR и временем обработки 35 минут. В одном исследовании RT-LAMP был более чувствительным, чем обычная RT-PCR и NASBA [95]. Анализ также был разработан для быстрого обнаружения вируса денге [84], вируса гриппа A (h2N1) pdm09 [96], вируса птичьего гриппа H5N1 [97], HCV [98], ВИЧ-1 [99], RSV [46] ] и ЗИКВ [100] в клинических образцах.Доступны коммерческие тест-наборы на основе RT-LAMP для обнаружения SARS-CoV-2 в респираторных образцах. Анализ разработан Color Genomics (США) и использует три набора праймеров, специфичных для SARS-CoV-2, нацеленных на ген N, ген E и область ORF1a, соответственно, и четвертый контрольный набор праймеров, нацеленных на человеческую рибонуклеазу P (RNaseP). Он имеет LoD 0,75 копий вирусной РНК / мк мкл с 70-минутной реакцией. Тест получил EUA от FDA США в респираторных образцах. Abbott Diagnostic Scarborough, Inc.(США) также разработали тест на основе RT-LAMP (анализ ID NOW ™ COVID-19) для прямого обнаружения SARS-CoV-2 в мазках из носа, носоглотки или горла. Набор получил EUA от FDA США. Анализ нацелен на ген RdRp SARS-CoV-2. LoD теста составляет 125 эквивалентов генома (GE) / мл с положительными результатами через <5 минут и отрицательными результатами через 13 минут. Наборы праймеров LAMP, такие как набор праймеров Loopamp для птичьего гриппа H5 и H7 и FluA, коммерчески доступны от Eiken Chemical Co., Ltd.(Япония).

2.2. ДНК-микрочипы

ДНК-микрочипы позволяют идентифицировать медицинские вирусы [101]. При диагностике микроматрицы ДНК флуоресцентно меченные вирусные нуклеиновые кислоты в тестируемом образце используются для скрининга массива олигонуклеотидных зондов, иммобилизованных на твердой поверхности (например, на предметном стекле). Используемые здесь олигонуклеотидные зонды специфичны для генома целевого вируса. Результаты гибридизации между иммобилизованными зондами и последовательностями-мишенями, меченными флуоресцентными красителями, выявляются и количественно оцениваются с помощью детекции на основе флуоресценции [16, 51, 72].

Существует обширная литература, демонстрирующая полезность микроматрицы ДНК для обнаружения медицинских вирусов в образцах человека. Чиу и др. [102] использовали микроматрицу ДНК для высокопроизводительного множественного обнаружения вирусов в образцах носоглоточного аспирата, полученных от детей, инфицированных респираторными вирусами. Анализ продемонстрировал общую чувствительность от 87% до 90% и специфичность ≥99% при обнаружении RSV, вируса гриппа A и риновируса / энтеровируса по сравнению с RT-PCR. В одном исследовании ДНК-микрочип использовался для одновременного обнаружения HSV-1/2, VZV, EBV, CMV, вируса герпеса человека 6 типов A и B (HHV-6 A / B) и аденовируса в клинических образцах с LoD 10. ГЭ / реакция для каждого вируса без перекрестной реактивности [103].ДНК-микрочип также использовался для выявления вирусных причин менингита и энцефалита с общей чувствительностью 93% и специфичностью 100% по сравнению с моновирусной ПЦР [104]. ДНК-микрочип также использовался для высокопроизводительного множественного обнаружения желудочно-кишечных вирусов [105], вирусов, передаваемых мелкими млекопитающими и членистоногими [106], вирусов герпеса, энтеровирусов и флавивирусов [107], вирусов ВИЧ-1, ВИЧ-2 и гепатита [ 108] и двойное инфицирование двумя серотипами вируса денге [109] в образцах человека.ДНК-микрочип использовался для идентификации и генотипирования лекарственно-устойчивых мутаций ВИЧ [110, 111] для обнаружения и генотипирования лекарственно-устойчивых мутаций вируса гепатита B (HBV) [112], для обнаружения и генотипирования коронавируса SARS [113], а также для обнаружения и определить происхождение вирусов гриппа B [114]. Во время вспышки атипичной пневмонии в Китае в 2002 году микроматрица ДНК также послужила для обнаружения нового члена семейства коронавирусов [115].

Технология микрочипов ДНК - это высокопроизводительный инструмент, поскольку он позволяет множественное обнаружение большого количества потенциальных вирусных патогенов в клинических образцах [102–105].Тем не менее, этот метод имеет ряд ограничений, в том числе слишком дорогое использование для рутинной клинической диагностики, трудоемкость и длительность (процесс гибридизации может занять от нескольких часов до нескольких дней). Неспецифическая гибридизация между исследуемыми материалами и иммобилизованными зондами может повлиять на чувствительность анализа. Кроме того, создание конкретных зондов требует почти полной информации о генетическом составе интересующего вируса. Анализ выявляет только те вирусные патогены, у которых есть зонды-мишени на матрице [72, 116, 117].

2.3. Секвенирование следующего поколения (NGS)

NGS очень полезно в диагностической вирусологии, поскольку может непосредственно анализировать фрагменты вирусных нуклеиновых кислот, выделенные из клинических образцов [118, 119]. Как правило, NGS включает подготовку тестового образца, секвенирование целевых фрагментов нуклеиновой кислоты с использованием одной из доступных платформ NGS и анализ данных о последовательности с использованием подходящих биоинформатических инструментов [10, 120]. Несколько компаний производят разные машины NGS, в которых используются разные методы секвенирования, реагенты и инструменты анализа данных [119].Например, пиросеквенирование (Roche 454) обнаруживает высвобождение пирофосфата после включения нуклеотидов в процесс полимеризации ДНК. Платформы NGS компании Illumina обнаруживают высвобождение флуоресцентных меток из включенных нуклеотидов в процессе полимеризации ДНК. Новые технологии, такие как платформа Oxford nanopore (MinIon), упорядочивают нуклеиновую кислоту-мишень, ощущая ионный ток молекул ДНК / РНК, которые проходят через нанопоры [10, 119, 120]. Несмотря на высокую частоту ошибок последовательности (до 38.2%) [121], секвенатор нанопор MinION имеет преимущества перед другими платформами NGS. Во-первых, он может генерировать более длинные считывания (до 882 kb) в реальном времени [122], что делает его пригодным для полногеномного секвенирования вирусных патогенов с коротким временем обработки [123, 124]. Во-вторых, он портативен и не требует доступа в Интернет для анализа, что позволяет использовать его в полевых условиях во время вспышек вирусных инфекций [125]. В-третьих, он имеет низкие капитальные затраты, что делает его доступным в странах с низким уровнем доходов и лабораториях с ограниченным бюджетом по всему миру [121].

NGS использовался в диагностической вирусологии для нескольких приложений. Недавно Кустин и соавт. [126] использовали NGS для быстрой и надежной идентификации респираторных вирусов в клинических образцах. Его применяли для отслеживания вируса гриппа A (h2N1) pdm09 [127]. Дессилли и др. [128] использовали NGS для обнаружения мутаций лекарственной устойчивости ВИЧ-1. NGS также была проведена для обнаружения нового вируса Эбола [129].

В отличие от методов ПЦР и ДНК-микрочипов, NGS не требует предварительного знания геномных последовательностей вирусных патогенов.Также не требуются специфические для мишени праймеры ПЦР и олигонуклеотидные зонды [126, 130]. Однако использование NGS в клинических лабораториях ограничено по следующим причинам: время обработки, количество образцов за цикл, стоимость секвенсоров и необходимость навыков в биоинформатике [10, 128, 131].

3. Иммунологические методы диагностики медицинских вирусов

Гуморальная ветвь иммунной системы вырабатывает антитела в ответ на вирусные инфекции. Этот естественный ответ человеческого организма на вирусную инфекцию используется для разработки методов иммунологической диагностики.Для обнаружения вирусных инфекций человека в клинических образцах доступно несколько методов иммунологической диагностики, включая иммуноферментный анализ, вестерн-блоттинг, иммунофлуоресцентный анализ и анализ ингибирования гемагглютинации. Принципы этих анализов основаны на образовании комплекса антиген-антитело и состоят из клинических образцов, целого вируса или вирусного антигена и индикатора [10, 19, 20].

3.1. Иммуноферментный анализ (ELISA)

В ELISA конъюгированные с ферментом антитела используются для обнаружения присутствия специфического противовирусного антитела или вирусного антигена в образцах человека.В положительном образце реакция между ферментом, конъюгированным с антителом, и бесцветным хромогенным субстратом приводит к образованию цветного продукта. В отсутствие антигена / антитела в клиническом образце окраска не проявляется. Интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству образовавшегося комплекса антиген-антитело. Изменение цвета можно наблюдать невооруженным глазом или считывать с помощью спектрофотометра, который может измерять оптическую плотность. Для ELISA использовали несколько ферментов, включая щелочную фосфатазу, пероксидазу хрена (HRP) и β -галактозидазу.Существует несколько вариантов ELISA, но двумя основными типами являются ELISA с захватом антигена (также называемый сэндвич-ELISA) и ELISA с захватом антител (также называемый непрямым ELISA) [19, 132]. Как показано на рисунке 4, первый метод обнаруживает вирусный антиген путем иммобилизации антитела, специфичного для интересующего вирусного белка, на лунке для микротитрования [22]; второй метод позволяет обнаруживать противовирусные антитела в образце пациента путем нанесения целого вируса или вирусного белка на лунку для микротитрования [133].


ELISA чувствителен и специфичен, прост в выполнении и имеет короткое время обработки результатов.Следовательно, анализ был разработан и широко используется для обнаружения и серологического надзора за вирусными патогенами человека. Недавно Адамс и др. [134] разработали ИФА с захватом антител для обнаружения IgM или IgG к SARS-CoV-2 в образцах плазмы человека. Анализ был протестирован с использованием 40 образцов плазмы от подтвержденных ОТ-ПЦР пациентов, инфицированных SARS-CoV-2, и 50 образцов плазмы от здоровых людей. Он продемонстрировал общую чувствительность 85% по сравнению с ОТ-ПЦР и специфичность 100% при обнаружении IgG или IgM к SARS-CoV-2 в образцах плазмы.Этот анализ обнаруживал уровни IgG у всех людей, положительных по ОТ-ПЦР, через ≥10 дней после появления симптомов с чувствительностью 100%. Аналогичным образом Colavita et al. [135] разработали ИФА с захватом антител для обнаружения IgG, IgM и IgA к SARS-CoV-2 в образцах сыворотки. Анализ был подтвержден с использованием 553 образцов сыворотки, собранных у предполагаемых и подтвержденных случаев заражения SARS-CoV-2, у здоровых доноров и пациентов, положительных на другие инфекции или аутоиммунные состояния. Анализ показал общую чувствительность 91.7% и 97,9% для обнаружения IgG и IgA в образце сыворотки, соответственно, и специфичность> 96% для всех типов антител по сравнению с эталонным тестом IFA. Chen et al. [22] также разработали ИФА с захватом антигена для обнаружения БВРС-КоВ в клинических образцах. Анализ продемонстрировал LoD <1 нг рекомбинантного белка нуклеокапсида БВРС-КоВ / мл и специфичность 100%. ELISA с захватом антигена был разработан для быстрого обнаружения NS1 вируса денге и дифференциации серотипов DENV в образцах человека.Общая чувствительность и специфичность теста составляли 84,85% и 100% соответственно по сравнению с RT-qPCR, а уровни чувствительности для серотипирования составляли 88,2%, 94,7%, 75% и 66,6% для серотипа 1 DENV (DENV1), DENV2, DENV3 и DENV4, соответственно, без перекрестной реактивности среди серотипов [136]. ELISA также использовался для обнаружения нескольких других медицинских вирусов, включая вирус Эбола [133], HSV-2 [137], SARS-CoV [138], вирусы гепатита [139], вирус гриппа H5N1 [140] и ZIKV [ 141].

Для серодиагностики острых и перенесенных ZIKV-инфекций доступен коммерческий набор для тестов на основе ELISA (Anti-ZIKV IgA, IgG или IgM ELISA), разработанный Euroimmun AG (Германия). В анализе используется ZIKV-специфический рекомбинантный антиген NS1. Общая чувствительность и специфичность анализа составляют 100% и 94% соответственно по сравнению с ОТ-ПЦР. Компания Creative Diagnostics (США) также разработала коммерческий набор на основе сэндвич-ELISA (набор для ELISA HIV 1 и 2 Ag / Ab) для качественного определения антигенов или антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в образцах сыворотки или плазмы человека.В анализе используются рекомбинантные антигены ВИЧ (гликопротеин ВИЧ-1 (gp) 41, gp120 и gp36 ВИЧ-2) и антитела к вирусному белку р24 gag. LoD теста для обнаружения антигена p24 ВИЧ составляет около 1 пг / мл. Кроме того, компания Bio-Rad (Франция) разработала коммерческий набор на основе ELISA для захвата NS1 Ag (Platelia Dengue NS1 Ag) для качественного или полуколичественного обнаружения антигена NS1 вируса денге в образцах сыворотки или плазмы человека. В анализе используют моноклональное антитело против NS1 (Mab) в качестве захватывающего антитела и конъюгат анти-NS1 Mab-HRP в качестве детектирующего антитела.Уровни чувствительности анализа, связанные с серотипом вируса, составляют 88,9%, 87,1%, 100% и 93,3% для DENV1, DENV2, DENV3 и DENV4 соответственно по сравнению с ОТ-ПЦР, а специфичность анализа составляет 100% для все серотипы. Недавно компания Euroimmun AG (Германия) разработала набор на основе ELISA для захвата антител (Anti-SARS-Cov-2 ELISA IgG) для качественного определения IgG к SARS-CoV-2 в образцах сыворотки или плазмы человека. В анализе используется рекомбинантный белок S1 SARS-CoV-2 в качестве захватывающего антигена. Тест получил EUA от FDA США для использования в авторизованных лабораториях.Предполагаемая чувствительность и специфичность анализа составляют 90% и 100% соответственно по сравнению с тестом амплификации нуклеиновых кислот. Компания Epitope Diagnostics, Inc. (США) также разработала два типа наборов для ELISA (COVID-19 IgG ELISA и COVID-19 IgM ELISA) для обнаружения IgG и IgM к SARS-CoV-2 в образцах сыворотки человека, соответственно. . В наборе для ИФА COVID-19 IgG используется рекомбинантный антиген SARS-CoV-2 и меченные HRP антитела против IgG человека. COVID-19 IgM ELISA использует антитела против человеческого IgM и рекомбинантный антиген SARS-CoV-2, меченный HRP.Анализы имеют LoD 5 МЕ / мл. Наборы одобрены FDA для клинического и исследовательского использования.

3.2. Вестерн-блоттинг

Вестерн-блоттинг (также известный как иммуноблоттинг) позволяет выявлять вирусные белки или противовирусные антитела. Для обнаружения вирусных белков денатурированные цельные вирусные белки сначала разделяют электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE). Затем вирусные белки переносятся электропереносом на нитроцеллюлозную мембрану. Затем мембрану инкубируют с конъюгированными с ферментом антителами, специфичными для вирусных белков.Если вирусные белки связываются меченным ферментом антителом, добавление хромогенного субстрата приводит к образованию окрашенных полос на участках вирусных антигенов (рис. 5) [19, 132]. Для обнаружения противовирусных антител специфичные для вирусов денатурированные белки электрофоретически наносят на нитроцеллюлозную мембрану после проведения SDS-PAGE. Затем мембрану инкубируют с сывороткой пациента. Если сыворотка пациента содержит антитела против вирусных белков, они будут связываться со своими специфическими вирусными белками.Добавление конъюгированного с ферментом вторичного антитела против человека и хромогенного субстрата приводит к образованию окрашенных полос в местах расположения вирусных белков [142].


Иммуноблоттинг используется в клинической диагностике для серологического надзора и в качестве подтверждающих тестов на вирусную инфекцию человека. He et al. [143] разработали метод вестерн-блоттинга для обнаружения антител против SARS-CoV в образцах сыворотки крови человека. Анализ продемонстрировал чувствительность 98,3% и специфичность 90.9% по сравнению с IFA. Вестерн-блоттинг также использовали для обнаружения антител против вируса чикунгунья в сыворотке крови человека. Чувствительность 83,3% и специфичность 96,7% были продемонстрированы анализом с использованием 30 сывороток от подтвержденного пациента, инфицированного вирусом чикунгунья, и 30 нормальных сывороток [144]. В одном исследовании вестерн-блоттинг был многообещающим методом наблюдения за инфекцией ВИЧ-1 в регионах с ограниченными ресурсами [145]. Анализ также использовался для выявления и подтверждения инфекций ВГС и ВИЧ [146–148].Также имеется в продаже метод вестерн-блоттинга. Например, компания J. Mitra and Co. Pvt. Ltd (Мумбаи, Индия) разработала коммерческий набор (Вестерн-блоттинг на ВИЧ 1 и ВИЧ 2) для обнаружения антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в образцах сыворотки или плазмы человека. В анализе используются предварительно промазанные полоски нитроцеллюлозной мембраны с выделенным вирусным лизатом ВИЧ-1 и антигеном ВИЧ-2 (gp36). Анализ имеет 100% чувствительность и 100% специфичность по сравнению с лицензированным вестерн-блоттингом. Также доступен набор GS HIV-1 Western Blot для обнаружения антител к ВИЧ-1 в сыворотке, плазме или сухих пятнах крови человека, разработанный Bio-Rad Laboratories (Редмонд, США).В анализе используются предварительно промаркированные полоски нитроцеллюлозной мембраны с выделенными вирусными белками ВИЧ-1. Тест имеет 100% чувствительность и 87,2% специфичность по сравнению с лицензированным тестом вестерн-блоттинга на ВИЧ-1.

3.3. Иммунофлуоресцентный анализ

Иммунофлуоресцентный анализ обычно проводится для обнаружения вирусных антигенов или противовирусных антител в клинических образцах. Анализ проводится в двух форматах: прямой иммунофлуоресцентный анализ (DFA), выявляющий вирусные антигены в образце пациента [149], и непрямой иммунофлуоресцентный анализ (IFA), который выявляет противовирусные антитела [150] или вирусный антиген [151] в клиническом образце.В DFA антитело, распознающее вирусный антиген, напрямую конъюгировано с флуоресцентным красителем. В IFA вирусные антиген-специфические антитела немеченые и выявляются вторым флуоресцентно меченным антителом против человека (фиг. 6). IFA более чувствителен, чем DFA, потому что несколько флуоресцентно меченых антииммуноглобулиновых антител связываются с каждым противовирусным антителом, увеличивая интенсивность флуоресценции на участке каждого противовирусного антитела. Наиболее широко используемым флуоресцентным красителем в диагностической вирусологии является флуоресцеина изотиоцианат (FITC), который излучает интенсивную желто-зеленую флуоресценцию, но также доступен родамин, который излучает темно-красную флуоресценцию.После окрашивания препарат исследуют под флуоресцентным микроскопом с источником падающего УФ-света [1, 16, 132].


IFA использовался для диагностики SARS. Анализ показал 100% чувствительность и 100% специфичность в обнаружении IgG к SARS-CoV в образцах сыворотки человека по сравнению с ОТ-ПЦР [150]. Мадхусудана и др. [152] разработали IFA для обнаружения антител к вирусу бешенства в сыворотке крови человека и спинномозговой жидкости. По сравнению с тестом нейтрализации на мышах, анализ показал чувствительность 97.2% и специфичность 97,9%. IFA также использовался для прямого обнаружения антигена HSV в клинических образцах с чувствительностью 84,6% и специфичностью 95,7% по сравнению с методом культивирования тканей [151]. Более того, ИФА применяли для определения субтипов вируса гриппа А со 100% согласием с ОТ-ПЦР [153]. IFA также использовался для выявления EBV [21] и в качестве подтверждающего теста на ВИЧ-1 [154]. Что касается DFA, в одном исследовании он показал 60% чувствительность и 96% специфичность в обнаружении пандемического гриппа A (h2N1) pdm09 у детей по сравнению с RT-qPCR [149].В другом исследовании DFA показала высокую специфичность (99–100%) по сравнению с RT-qPCR для выявления RSV у детей [155]. Доступен коммерческий тестовый набор на основе IFA (Anti-ZIKV IIFT), разработанный Euroimmun AG (Германия) для выявления инфекции ZIKV. В тесте в качестве антигена используются полные частицы ZIKV. Следовательно, может иметь место перекрестная реактивность с антителами против вирусов семейства флавивирусов. Де Ори и др. [156] оценили эффективность анализа с использованием 126 положительных и 102 отрицательных образцов.Анализ показал чувствительность 96,8% и специфичность 72,5%. Компания OXOID Limited (Великобритания) разработала набор на основе DFA (тест IMAGEN на вирусы гриппа A и B) для обнаружения и дифференциации вируса гриппа A и вируса гриппа B в образцах человека. В анализе используются меченные FITC моноклональные антитела против вируса гриппа A или вируса гриппа B. Анализ имеет 100% чувствительность и 100% специфичность по сравнению с методом культивирования клеток.

3.4. Анализ ингибирования гемагглютинации (HI)

Некоторые вирусы, такие как вирус денге, аденовирус, вирус краснухи, вирус кори и вирус гриппа, имеют на своей поверхности антиген гемагглютинина, который связывает и агглютинирует эритроциты, называемые гемагглютинацией (HA).Подавление способности вирусов агглютинировать эритроциты используется для разработки анализа HI. В анализе HI серийные разведения образца сыворотки готовят в планшете для микротитрования. Затем добавляется определенное количество вирусного гемагглютинина. Наконец, добавляются соответствующие эритроциты. Отсутствие ГК указывает на положительную реакцию. Об этом судят по наклону микротитрационного планшета, который позволяет свободным эритроцитам течь (рис. 7). Регистрируют скорость разведения, при которой происходит полное ингибирование агглютинации эритроцитов.Таким образом, титр HI является обратной величиной последнего разведения сыворотки, которое полностью ингибирует HA [10, 132, 157]. HI использовался для ряда приложений в диагностической вирусологии. Анализ был использован для серологического надзора за вирусом гриппа A (h2N1) pdm09 [158] и вирусом кори [159]. В одном исследовании HI-анализ применялся для оценки эффективности вакцины против пандемического гриппа [160]. В ходе валидационного исследования с использованием сывороток 79 случаев, подтвержденных методом RT-qPCR, и 176 сывороток из не подвергавшейся воздействию населения, анализ HI показал высокую чувствительность (92%) и специфичность (91%) для выявления инфекции человека пандемическим вирусом h2N1 2009 г. [161 ].


Иммунологические методы диагностики широко используются в рутинной клинической диагностике вирусных инфекций человека во всем мире. Эти методы обладают рядом преимуществ, таких как высокая чувствительность и специфичность, относительно простота проведения, быстрота и возможность тестирования нескольких образцов одновременно [10, 138]. Однако иммунологические анализы имеют несколько ограничений. Анализы подвержены помехам. Помехи в иммуноанализах могут быть результатом присутствия в образце (а) перекрестно-реактивных агентов, которые несут аналогичные или те же эпитопы, что и интересующий вирусный антиген, что приводит к ложноположительному результату [10, 162]; (b) эндогенные антитела, такие как аутоантитела, гетерофильные антитела или человеческие антитела против животных в образце.Несмотря на то, что вирусный антиген отсутствует в образце, эндогенные антитела могут взаимодействовать с противовирусными антителами или детектирующими антителами, что приводит к ложноположительному результату [162, 163]. Специфичность иммуноанализа может снизиться, если они используются в эндемичных по малярии районах. Как известно, Plasmodium индуцирует неспецифическую активацию поликлональных В-клеток, что приводит к образованию неспецифических антител [164]. Эти антитела с широкой специфичностью могут реагировать с различными антигенами, что приводит к ложноположительным результатам.В одном исследовании из 34 образцов от пациентов с малярией, подтвержденных методом ПЦР, 14 образцов были положительными или пограничными на антитела против ZIKV в коммерчески доступном наборе для тестирования ZIKV ELISA. Когда эти 14 образцов были протестированы с использованием анализа нейтрализации вирусов, инфекция ZIKV не была продемонстрирована в 11 образцах [165]. Анализ HI трудоемок и требует много времени. Интерпретация результатов анализа в разных лабораториях может отличаться, поскольку для анализа отсутствуют стандартные реагенты [153, 157, 166]. В случае анализа IF длительное воздействие ультрафиолетового света на образец приводит к исчезновению флуоресценции, что может привести к ложноотрицательному результату [167].Реагенты и оборудование, которые используются в некоторых иммуноанализах, дороги [10, 11].

4. Состояние методов диагностики медицинских вирусов в Эфиопии

Большинство вирусных заболеваний эндемичны для Эфиопии [168]. Серологические обследования показали высокую распространенность ВГВ [169, 170], ВГС [170], ВИЧ [171] и ВПГ-2 [137]. Население уязвимо к бешенству [172] и гриппу [173]. Ротавирусная диарея - основная причина заболеваемости и смертности детей [174]. В последнее время, как и другие страны мира, общественное здравоохранение и сектор экономики Эфиопии серьезно пострадали от пандемии COVID-19.

Иммунологические методы, в основном коммерческие тест-наборы ELISA [137, 169] и иммунохроматографические тест-наборы [170, 175], используются для выявления вирусных инфекций в большинстве клинических лабораторий страны. Технология IFA доступна только в Институте общественного здравоохранения Эфиопии для обнаружения инфекции вирусом бешенства у собак, укусивших людей, с подозрением на них [176]. Обычная ОТ-ПЦР используется для обнаружения вируса гриппа в образцах человека в Национальной лаборатории гриппа [173].В последнее время метод RT-qPCR широко используется в нескольких исследовательских институтах, университетах и ​​клинических лабораториях для обнаружения SARS-CoV-2 в клинических образцах. Как правило, в научно-исследовательских институтах и ​​университетах для исследовательских целей используется несколько молекулярных методов, таких как обычная ПЦР и ОТ-ПЦР. Поскольку большинство лабораторий имеют ограниченный бюджет и не имеют обученного лабораторного персонала, молекулярные методы не используются для рутинной клинической диагностики вирусных инфекций человека в стране.Общенациональное использование технологий RT-qPCR для диагностики COVID-19 и полученный опыт откроют дверь для внедрения молекулярных методов для рутинного лабораторного тестирования других вирусных инфекций человека.

5. Заключение

Внедрение диагностических тестов на основе нуклеиновых кислот в диагностическую вирусологию привело к огромным улучшениям в обнаружении вирусных инфекций человека. Поскольку диагностические тесты на основе нуклеиновых кислот очень чувствительны и специфичны, они играют решающую роль в диагностике медицинских вирусов и борьбе с ними.Методы молекулярной диагностики позволяют диагностировать вирусные инфекции путем обнаружения вирусной РНК или ДНК. Следовательно, с помощью этих методов можно выбрать инфицированных людей до того, как будет установлен ответ антител против рассматриваемого вируса. Это особенно важно для молодых, пожилых людей и пациентов с ослабленным иммунитетом. Однако они недоступны для стран с ограниченными ресурсами из-за их высокой стоимости, сложности измерительного оборудования и необходимости в технических знаниях. Иммуноанализы также играют важную роль в диагностике и серологическом надзоре за вирусными инфекциями во всем мире.Хотя иммунологические методы просты в применении и недороги по сравнению с молекулярными методами, они не широко доступны в странах с низким уровнем доходов. Следовательно, ученые упорно трудятся над разработкой недорогих качественных тестов в странах с низким уровнем доходов. Более того, большинство стран развивающегося мира обучают своих граждан за границей и внутри страны на уровне аспирантуры, открывая соответствующие факультеты и институты.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Самый быстрый словарь в мире: Vocabulary.com

  • метод диагностики процедура, применяемая при постановке медицинского диагноза

  • агностик человек, утверждающий, что существование Бога непознаваемо

  • метод десенсибилизации метод, используемый в поведенческой терапии для лечения фобий и других поведенческих проблем, связанных с тревогой; клиент находится в угрожающей ситуации в расслабленной обстановке до тех пор, пока тревожная реакция не исчезнет

  • метод десенсибилизации метод, используемый в поведенческой терапии для лечения фобий и других поведенческих проблем, связанных с тревогой; клиент находится в угрожающей ситуации в расслабленной обстановке до тех пор, пока тревожная реакция не исчезнет

  • диагностический тест тест, проводимый в диагностических целях

  • диагностическая программа Программа, которая распознает и объясняет неисправности в оборудовании или ошибки в компьютерной программе

  • диагностическая процедура процедура, применяемая при постановке медицинского диагноза

  • диагност врач, специализирующийся на медицинской диагностике

  • диагностика, касающаяся определения природы или причины чего-либо

  • главный герой главный герой художественного произведения

  • диагностика раздел медицинской науки, занимающийся классификацией болезней

  • проективный метод любой личностный тест, разработанный для получения информации о личности человека на основе его неограниченной реакции на неоднозначные объекты или ситуации

  • диагностическая проба проба, проводимая в диагностических целях

  • инвентаризация с составлением детализированного списка товаров или материалов в наличии

  • инвентаризационная переоценка ситуации, позиции или перспективы

  • диагностика с установлением природы или причины какого-либо явления

  • антагонист тот, кто предлагает оппозицию

  • порошковая техника процесс идентификации минералов или кристаллов

  • род Dictamnus двудольные род семейства Rutaceae

  • Hygrocybe acutoconica гриб с остроконической шляпкой и сухими стеблями

  • 9 0180 ) Мутация в праймерных областях ПЦР может происходить в некоторых РНК-вирусах, которые имеют высокую частоту мутаций, что приводит к снижению чувствительности (ii) Простота выполнения

    Методы обнаружения Преимущества Ограничения Ссылки

    Обычная ПЦР (i) Чувствительная и специфическая (i) Высокий риск контаминации [28, 33–35]
    (ii) Широко применяемая нуклеиновая кислота на основе формата обнаружения (ii) Склонность к ингибиторам
    (iii) Возможности множественного обнаружения (iii) Требует много времени и трудозатрат
    (iv) Качественный
    (v) Требуется термоциклер и аппарат для документирования геля

    Обычная ОТ-ПЦР (i) Чувствительная и специфическая (i) Работа с РНК может быть затруднена [10, 14, 36–40]
    (ii) Мультиплексный потенциал обнаружения (ii) ) Высокий риск заражения
    (iii) Трудоемкий и громоздкий
    (iv) Относительно дорогой
    (v) Склонен к ингибиторам

    ПЦР / RT-qPCR в реальном времени (i) Высокочувствительный и специфичный (i) Требуется дорогостоящее лабораторное оборудование и флуоресцентный зонд [33, 34, 39–41]
    (ii) Более низкий риск перекрестного загрязнения из-за работы с закрытой пробиркой (ii) Для конструирования зондов TaqMan требуется почти полная информация о последовательности нуклеиновой кислоты-мишени
    (iii) Быстрый и менее трудоемкий (iii) Артефакт димера праймера является проблемой в случае зеленого метода SYBR
    (iv ) Мультиплексное обнаружение (iv) Склонность к ингибиторам
    (v) Генотипирование
    (vi) Определение вирусной нагрузки (количественное)

    (i) Чувствительная и специфическая (i) Работа с РНК может быть сложной [36, 42–45]
    (ii) Просто и быстро (требуется меньше циклов) (ii) Требование три фермента в случае NASBA
    (iii) потенциал мультиплексирования (iii) Использование ферментов, которые не являются термостабильными
    (iv) Количественное определение, (iv) N специфические взаимодействия праймеров могут увеличиваться, поскольку процесс амплификации происходит при более низкой температуре (41 ° C)
    (v) Генотипирование
    (vi) Не требует термоциклера, поскольку реакция протекает изотермически при 41 ° C

    LAMP / LAMP-RT (i) Высокочувствительный и специфичный (i) Требуется шесть праймеров [35, 46–49]
    (ii) Высокий риск переходящего загрязнения
    (iii) Не требует дорогостоящего термоциклера (iii) Ограничение на мультиплексирование
    (iv) Быстрое (результаты <1 h) (iv) Визуальное обнаружение только невооруженным глазом является субъективным, поскольку зависит от восприятия цвета наблюдателем
    (v) Количественное
    (vi) Генотипирование 9 0179
    (vii) Простые системы обнаружения (невооруженным глазом)
    (viii) Относительно устойчивы к ингибиторам, присутствующим в образце

    диагностическая техника - английский перевод - Linguee

    Диагностическая техника : и alyse origine [...]

    de la panne / Identification des pannes rcurrentes et proposition d'amlioration

    dv-groupe.fr

    Technical dia gnostics: Anal ys из [...]

    источник неисправности / Выявление повторяющихся неисправностей и рекомендации по улучшению

    dv-groupe.co.uk

    Количество клиентов, учреждений, общественных и частных организаций, имя шрифта №

    [...]

    notre savoir-faire lorsqu'ils

    [...] Souhaitent connaîtr e l e метод диагностики e t l a valeur vénale [...]

    d? Un bien immobilier.

    schmidt-immobilier.ch

    Наши общественные и частные

    [...]

    институциональных клиентов доверяют нам

    [...] навыки wh en th ey nee d Technical d iag nostics и th e market [...]

    стоимости своего имущества.

    schmidt-immobilier.ch

    c) Справочник по вопросам, касающимся либерализации маршей природного газа и транспорта, примечания к методам вопросов и т. Д.

    [...]

    Conomiques Intressant для интресса для мужчин

    [...] Producteurs aux consommateurs telles qu e l e диагностическая техника d e s gazoducs et d'autres questions pertinentes

    daccess-ods.un.org

    (c) Переориентировал свою работу на вопросы либерализации рынков природного газа и

    [...]

    безопасность природного газа

    [...] transpo rt , включая технических и e co Номинальные вопросы от производителей к потребителю s такие как технические di agnos ti c of [.. .]

    трубопроводы и другие актуальные вопросы

    daccess-ods.un.org

    Le Comit du Sige qui a toujours partag les proccupations du Secrtariat Quant la dgradation des btiments de Miollis-Bonvin, апелляция

    [...]

    de ses voeux l'laboration par

    [...] M. J. Belmont d ' u n диагностическая техника s u r ce site dans le [...]

    mme esprit, que celui fait sur

    [...]

    le site de Fontenoy qui donne une vision claire de la globalit des travaux de repair et de valorisation entparendre et du chiffrage des besoins de financialment.

    unesdoc.unesco.org

    Комитет штаб-квартиры, который всегда разделял озабоченность Секретариата по поводу ухудшения состояния зданий Миоллис / Бонвэн, часто выражал пожелание, чтобы г-н

    [...]

    Доверить Бельмонту

    [...] k около rry ing из технической части dy из s it e, on [...]

    те же линии, что и

    [...]

    для участка Фонтенуа, что дало бы четкое представление обо всех работах по восстановлению и улучшению, которые должны быть выполнены, а также с разбивкой соответствующих финансовых потребностей.

    unesdoc.unesco.org

    Les Donnes Родственники la

    [...] rparation e t a u метод диагностики s o nt saisies dans [...]

    le systme au cours d'une second tape,

    [...]

    sous forme deizations apportes l'avis.

    help.sap.com

    Данные относятся к

    [...] к паре re и до технический ребро din GS - u sually [...]

    вводится только как второй шаг в системе, то есть

    [...]

    как изменения в уведомлении.

    help.sap.com

    D'autres documents doivent tre суставы до залога, com l'tat des lieux, l'engagement de

    [...] Осторожно, un dossie r d e диагностический метод

    bijperpignan66.org

    Другие документы должны быть приложены к договору аренды, например, согласованный

    [...]

    Состояние помещения, гарантия по залогу, дело

    [...] st at e of электрические и сантехника предметы

    bijperpignan66.org

    Le Plan d'Action sera prpar lors d'une Second Phase, en

    [...] se basant su r c e диагностическая техника e t u ne srie de [...] Участвовало

    смина.

    inbo-news.org

    На втором этапе План действий будет

    [...] подготовлено, ba sed on t hi s Technical d ia gnostics and o n a series [...]

    совместных семинаров.

    inbo-news.org

    A uc u n метод диагностики n e p eut lui seul garantir [...]

    de bons rsultats et mme si elles ne sont pas possibles, les prvisions

    [...]

    de bonne qualit sont toujours imprcises.

    unesdoc.unesco.org

    N o s ing le метод диагностики c an gua rante e хорошие результаты [...]

    и высокоуровневые прогнозы всегда неточны, хотя и возможны.

    unesdoc.unesco.org

    Compter de l'entre en vigueur des

    [...] диспозиции su r l e диагностическая техника , s i la концентрация [...]

    de plomb est infrieure aux

    [...]

    seuils rglementaires, il ne sera plus ncessaire d'tablir nouveau un Diagnostic lors d'une vente ultrieure.

    adomius.fr

    от пт и въезд и по

    [...] усилие p rovi sion s на техническом и al ysis , если t h e свинец [...] Уровень

    ниже нормативных порогов, там

    [...]

    не нужно будет заново ставить диагностику при последующей продаже.

    adomius.fr

    Залейте l'cra n d e диагностический метод

    westweigh.com

    Читать th e Engineering Diagnostic Scr ee n

    westweigh.com

    Des audits rguliers sont dsormais Obligatoires pour

    [...] les htels ave c u n диагностическая техника d e s установки.

    tec-conseil.com

    Регулярные проверки стали обязательными

    [...] для ho te ls, с a техническая диагностика o f t наследник в пунктах.

    tec-conseil.com

    En d'autres Termes, l'avis ne comprend, lors de sa cration, que les donnes Concerant la

    [...]

    panne. Les Donnes Родственники la

    [...] rparation e t a u метод диагностики s o nt saisies [...]

    dans le systme au Cours d'une Second

    [...]

    лента, sous forme deizations apportes l'avis.

    help.sap.com

    Данные относятся к

    [...] к re pa ir an d t o Technical f ind ings is обычно [...]

    вводится только как второй шаг в системе, то есть

    [...]

    как изменения в уведомлении.

    help.sap.com

    Окружающая среда 26,6% ont procd

    [...] la ralisation d ' u n метод диагностики d e l eurs quipements

    ambassade-algerie-cameroun.org

    около 26,6 на c ent имеют проводимость ted Technical Che ck s на на ir оборудовании; и

    ambassade-algerie-cameroun.org

    A la charge du vendeur, ce dernier devra les prsenter l'acqureur lors de la transaction dans

    [...] le dossie r d e диагностическая техника .

    sarrazac-immobilier.com

    Продавец должен представить покупателю в

    [...] транзакция, все r eq uired va li d диагностирует .

    sarrazac-immobilier.com

    Nous procdons au remplacement de systmes ultrasoniques sur

    [...] машины существует пр s диагностическая техника .

    sodevamerica.com

    Приступаем к замене УЗИ на

    [...] существующий m ac hine s af te r техническая диагностика .

    sodevamerica.com

    L e метод диагностики p o rt e constat [...]

    de l'tat visible de la solidit du clos et du couvert et de celui de l'tat des

    [...]

    коллектива проводников и канализаций несут ответственность за коммунальные услуги.

    chasles-expertise.com

    T его технический диаметр gn osis con ta внутри [...]

    кажущееся состояние прочности стен и кровли, а также всех коллективных трубопроводов и мест общего пользования.

    chasles-expertise.com

    Accompagnement de la Communaut de communes du Causse de Labastide-Murat dans l'laboration de son повестка дня 21 местный: Etablissement d'un Diagnostic Dveloppement Du Territoire de la communaut de communes, en s'appuyant sur la mthode

    [...]

    Устойчивое управление качеством

    [...] (SQM) D2MIP: p r - метод диагностики pa rtir des donnes [...]

    disponibles et d'une synthse

    [...]

    картографический; анимация участников перегруппировки местных действующих лиц для наблюдения за частью территории; консолидация восприятия partage par sondage d'opinion sur un chantillon statistique.

    marge.eu

    Содействие Сообществу Коммун Лабастид-Мюрат (Франция) в подготовке Местной Повестки дня на 21 век: Разработка анализа устойчивого развития территории сообщества Коммун, применение

    [...]

    Устойчивое качество

    [...] Управление (SQM ) method d D 2MI P: технический пр. e-a nal ysis fr om [...]

    имеющихся данных и картографический

    [...]

    синтез; организация семинаров с участием местных актеров для подготовки общего восприятия территории; закрепление единого мнения с помощью статистических опросов общественного мнения.

    marge.eu

    Ralis sur l'ensemble de l'installation lectrique privative des locaux usage d'habitation et de leurs dpendances, ce

    [...]

    диагностический doit dater

    [...] de moins de 3 и et tre совместное с досье r d e метод диагностики ( a nn ex la promesse de vente ou dfaut de [...]

    promesse, l'acte authentique).

    rivegauche-immo ... lier-annecy.com

    На основе всей электрической установки

    [...]

    Помещение с проживанием

    [...] цель s, this диагностика имеет t o быть не старше 3 лет и быть att ac hed t ot he технический re port ( ne , закрепленный на [...]

    акт купли-продажи от помолвки)

    rivegauche-immo ... lier-annecy.com

    Sa nouvelle offr e d e диагностическая техника a s so ci l'impact [...]

    Financier sur les valeurs locatives a trs bien accueillie

    [...]

    par les investisseurs institutenels car elle match aux exigences du Grenelle de l'environnement.

    creditfoncier.com

    Его новый s er тиски lin kin g Technical d iagnoses to t наследник f финансовый [...] Влияние

    на арендную плату было одобрено учреждением

    . [...]

    инвесторов, поскольку это соответствует требованиям Grenelle de l'environnement.

    creditfoncier.com

    Ces informations sont aujourd'hui перегруппировывается

    [...]

    в уникальном документе

    [...] intitul le dossie r d e диагностическая техника (C ode de la construction [...]

    et de l'habitation: арт.

    french-languages.com

    Эта информация теперь собрана в единый

    [...] документ e ntit led th e "технический fi le o f диагностика " (код e из c onstruction [...]

    и жилище: арт.

    french-languages.com

    Одежда для одежды r l e диагностическая техника d ' er reurs dans [...]

    un systme mdical, spcialement un systme de dentiste

    v3.espacenet.com

    p parat us для технической диагностики o f e rrors i n a medical [...] Система

    , в частности система стоматолога

    v3.espacenet.com

    Помощь PNUD и терминал в системе управления персоналом и управление CSLP, представляющий собой проект кадрового агентства по самостоятельной оценке различных инструментов CSLP и OMD; Программа публичных инвестиций, сформулированная по принципу принципа работы с таблицей

    [...]

    партнеры-финансисты

    [...] arabes de novembre 2005 ; l e метод диагностики e t i nstitutionnel du systme [...]

    национальная статистика

    [...]

    Таблицы разрешения на разработку и разработку плана развития статистического ассистента управления схваткой для приоритета 20062010 гг.

    daccess-ods.un.org

    Сформулированная программа государственных инвестиций стала основной темой круглого стола

    [...]

    Арабские финансовые партнеры

    [...] в № ve mber 200 5. Технический и в stit служебный диагностика из-за e национальный [...]

    статистическая система, которая

    [...] Создание

    позволило сформулировать план развития статистики вместе с генеральным планом на период 2006-2010 гг.

    daccess-ods.un.org

    Un investisseur, proccup par le devenir

    [...]

    d'un oprateur charter d'Europe de l'est qu'il contrle,

    [...] demande q u ' u n метод диагностики e t o prationnel [...]

    соит табл.

    aircomanagement.com

    Инвестор, обеспокоенный судьбой чартерного оператора в Восточной Европе по его

    [...] contro l, req uest s a Technical a nd ope rati при обследовании al.

    aircomanagement.com

    Propritaire de son rseau, Hub tlcom

    [...] prend en charg e l e диагностическая техника , l 'i nstallation et [...]

    - решение по надзору за решением tlcom de bout en bout.

    hubtelecom.com

    Собственная сеть, Hub tlcom

    [...] can t ak e cha rge из техническая диагностика , in stall at ion and [...]

    кураторство ваших телекомов

    [...]

    решение от начала до конца.

    hubtelecom.com

    Pour chaque action appele par la fonction de recherche ou par la fonction portefeuille, CE модуль

    [...] vous offr e u n диагностическая техника a u to matique

    keytradebank.com

    Для каждой акции, вызываемой инструментом поиска или функцией портфеля, этот модуль

    [...] предлагает a n au toma ti c техническую диагностику до yo u .

    keytradebank.com

    Cet tat ne devra porter que sur les party privatives et figurer

    [...] dans le "dossie r d e диагностическая техника " .

    raimbaut-parker.com

    Этот отчет относится только к жилым районам o f квартире b lo cks и показан в разделе

    [...] Право d 'doss ier d e диагностическая техника' .

    raimbaut-parker.com

    Le manuel ne traite pas de l'laboration pralable et незаменимый

    [...]

    du program, du projet,

    [...] du travail de релевантные , d u диагностическая техника e t a rchitectural et des prconisations [...]

    принцессы

    [...]

    chaque opration de rhabilitation.

    oldjeddah.org

    В данном руководстве не рассматривается предварительная разработка

    [...]

    программа, ни проект,

    [...] prelim in ary s urv eys , Technical a nd arc hitectur al диагностика an d pre li minary [...]

    рекомендаций на каждую операцию реабилитации.

    oldjeddah.org

    Lors de la vente ou de la location d'un bien immobilier, il est Obligatoire de faire raliser et de

    [...]

    fournir aux acheteurs ou

    [...] locataires un Dossie r d e Диагностическая техника , d t Дополнительная информация [...]

    родственников aux caractristiques et l'tat du bien.

    ima.eu

    Когда вы продаете или сдаете в аренду недвижимость, вам

    [...]

    требуется для получения и предоставления

    [...] покупатель s или te nan ts a Technical D iag nostic Fi le, de tailing [...]

    информации о состоянии и

    [...]

    характеристики здания.

    ima.eu

    Un dossie r d e МЕТОДИКА ДИАГНОСТИКИ c o mp renant , l e диагностическая d e p производительность [...]

    nergtique (compter du 1.7.2007), le constat

    [...]

    de risque d'exposition au plomb (compter du 12.8.2008), un tat des risques, dans les zone couvertes par un plan de prvention des risques technologiques ou naturels.

    oneyearinparis.fr

    a технический d ia gnosis, inc lu ding the energy выполнить и ce диагностика (s in ce 1/7/2007), [...]

    обнаружения любого риска воздействия

    [...]

    свинец (с 08.12.2008) - состояние риска в областях, охватываемых планом предотвращения техногенных или природных опасностей.

    oneyearinparis.com

    Seuls des related prcis permettront, avec l'observation et les sondages в

    [...] situ, d'tabli r u n метод диагностики .

    oldjeddah.org

    Крайне важно, чтобы обследования, а также наблюдение и зондирование на месте были точными и

    [...] compreh en sive in th e Техническая диагностика .

    oldjeddah.org

    Рамановская спектроскопия как неинвазивный метод диагностики эндометриоза

    Эндометриоз определяется как рост железы и стромы эндометрия за пределами полости эндометрия, вызванный оттоком в брюшную полость. Предыдущие отчеты показали, что каждая десятая женщина во всем мире обращалась за медицинской помощью из-за эндометриоза и связанных с ним симптомов, включая тазовую боль (38,7%), диспареунию (29.5%) и бесплодие (11,6%) 1 . Учитывая, что диагноз эндометриоза зависит от гистопатологического исследования после хирургического удаления, этот подход требует индукции анестезии и госпитализации. Следовательно, это существенно влияет на качество жизни пациентов. Таким образом, исследователи сосредотачиваются на новых неинвазивных методах диагностики эндометриоза, включая трансвагинальное ультразвуковое исследование, анализ биомаркеров крови и генетическую предрасположенность.

    Рамановская спектроскопия дает информацию о молекулярных структурах и химических связях веществ посредством обнаружения неупруго рассеянных фотонов 2 .В рамановской спектроскопии образец освещается лазерным лучом, и наблюдается неупруго рассеянный свет, состоящий из разных частот. Рассеянный свет содержит два типа рассеяния, а именно рэлеевское и комбинационное рассеяние. Интенсивность света при рэлеевском рассеянии велика, а частоты рассеянного и падающего света одинаковы, тогда как при комбинационном рассеянии интенсивность очень мала (около 10 −6 от интенсивности падающего луча), а частота рассеянного света отличается от частоты падающего света.Разницу между частотами рэлеевского рассеяния и неупруго рассеянных фотонов можно определить как рамановский сдвиг. Рамановские сдвиги соответствуют частотам колебаний молекул в целевом образце.

    Частоты колебаний каждой химической связи внутри молекулы (например, O-H, C-O) различны, поэтому их отпечатки пальцев можно однозначно увидеть в спектре. В исследовании сообщалось, что во время болезни количество белковых биомаркеров в крови варьировалось, и эти изменения можно было идентифицировать с помощью мультиплексных и одиночных технологий иммунологического тестирования 3 .В этом контексте рамановская спектроскопия является полезным инструментом для определения химического состава образца. Биологические образцы, такие как ткань, кровь и сыворотка, хорошо подходят для измерений для рамановской спектроскопии, поскольку химические изменения сопровождают прогрессирование большинства заболеваний. Таким образом, рамановская спектроскопия имеет значительный потенциал для предоставления врачам ценной информации в области медицинской диагностики 4 .

    Исследования показали, что диагностика заболеваний с помощью рамановской спектроскопии возможна как для образцов тканей, так и для образцов сыворотки крови.Рамановские спектры образцов сыворотки крови использовались для диагностики многих типов заболеваний, включая болезнь Альцгеймера 5 , рак ротовой полости 6 , рак носоглотки 7 , колоректальный рак 8 , инфекцию денге 9 , рак легких 10 , гепатит B 11 и рак груди 12 . Эндометриоз, однако, до сих пор изучался только с помощью рамановской спектроскопии через ткани. Lieber и др. . Указали, что спектроскопия комбинационного рассеяния может отличать ткани, диагностированные как нормальные или эндометриоидные, от тканей, которые были диагностированы как доброкачественные, кистозные или злокачественные 13 .Пател и др. . показали, что стадии рака эндометрия можно различить с помощью рамановской визуализации 14 . В другом исследовании, проведенном Notarstefano et al ., Лютеинизированные клетки гранулезы были измерены с помощью рамановской микроспектроскопии для отделения эндометриоза яичников от контрольных образцов 15 .

    В последнее время k-Nearest Neighbor (kNN) и машины опорных векторов (SVM) в сочетании с анализом главных компонентов (PCA) часто используются вместе со спектроскопией в диагностике заболеваний.kNN - это метод классификации, основанный на общности внутри групп; каждый отдельный спектр можно рассматривать как точку в многомерном пространстве. Этот метод вычисляет евклидово расстояние между каждой парой точек спектра. Затем, принимая во внимание большинство голосов ближайших соседей, выполняется классификация выборки 16 .

    Машинный алгоритм опорных векторов - это мощные алгоритмы контролируемого обучения, которые были представлены Vapnik 17 . Он используется в качестве метода классификации, в котором каждый элемент данных рассматривается как точка в n-мерном пространстве (n - количество функций), причем значение каждой функции является значением отдельной координаты.Классификация данных достигается путем определения гиперплоскости, которая максимизирует разницу между группами. Это элегантный подход к классификации спектральных данных 18,19,20,21 .

    В некоторых недавних исследованиях методы классификации и рамановская спектроскопия использовались вместе для диагностики заболеваний. Дингари и др. . сообщили, что рамановская спектроскопия и многомерная классификация могут различать поражения при стереотаксической биопсии молочной железы, независимо от статуса микрокальцификации 22 .Ли и др. . разработал метод неинвазивного обнаружения рака толстой кишки с использованием рамановской спектроскопии вместе с PCA и kNN 23 .

    В этой статье мы представляем первую классификационную модель на основе рамановской спектроскопии, которая может использоваться в качестве неинвазивного метода диагностики эндометриоза. Этот новый подход требует только сыворотки крови пациента с эндометриозом для диагностики заболевания.