Тест несуществующее животное расшифровка: Несуществующее животное

тест несуществующее животное — 25 рекомендаций на Babyblog.ru

УЗИ: МИФЫ И РЕАЛЬНОСТЬ.

За последний десяток лет ультразвуковое обследование беременной женщины стало обычной рутинной процедурой. Как правило стандартное обследование включает в себя три УЗИ мониторинга на разных сроках. Если беременность протекает с какими либо осложнениями врач назначает дополнительно УЗИ обследования,в некоторых случаях кол-во такого мониторнига может достигать 20-30 раз за весь срок! Женщина приходя к врачу, как правило даже не задумывается о том, насколько необходима та или иная процедура, полностью доверяя ему.

Если Вы спросите обычного районного гинеколога в женской консультации о том, безопасен ли метод ультразвуковой диагности для развивающегося плода, то вероятнее всего услышите о полной безопасности данного метода. Давайте попробуем разобраться в этом вопросе.

На сегодняшний день во всём мире врачи уже давно с осторожностью говорят о полной безопасности УЗИ волн. За последнее время проведено достаточное кол-во исследований,которые говорят что УЗИ не так уж безопасно, как принято было считать.

Ультразвуковые волны могут негативно воздействовать на развивающегося ребёнка. Чем дольше и чаще проводиться эта процедура, тем больше риск.

Новое научное исследование показало, что ультразвуковое обследование, проводимое у беременных женщин, может помешать развитию клеток головного мозга плода. Исследование подорвало блестящую репутацию этого обследования. Ученые из Йельского университета доказали, что ультразвуковые волны оказывают негативное воздействие на не рожденного ребенка — а именно, на его нервные клетки, сообщает немецкая газета Die Zeit.

Группа под руководством авторитетного нейробиолога Паско Ракича подвергала беременных мышей в течение последних трех дней их беременности ультразвуковому обследованию различной протяженности — при помощи прибора, который обычно используется для ультразвукового обследования людей. Затем в мозге новорожденных мышей ученые искали маркированные нейроны, которые в течение трех дней перед рождением обычно перемещаются в определенные части мозга.

В целом мозг новорожденных мышат не имел никаких видимых отклонений, его размеры были стандартными. Но у всех животных, которые перед рождением подверглись ультразвуковому обследованию в течение 30 минут и более, так называемые нейроны E16 после рождения не переместились в соответствующее место коры головного мозга. Они как будто «заблудились» в более глубоких слоях серого вещества. Число «заблудившихся» клеток росло вместе с ультразвуковой нагрузкой, некоторые нейроны позже обнаружились даже в нижерасположенном белом веществе. У этих клеток также отсутствовали определенные химические характеристики правильно позиционированных нейронов, а такие нервные клетки уже не могут выполнять функцию, предназначенную им природой.

Ультразвуковое исследование использует звуковые волны высокой частоты, которые, проходя через жидкую среду, отражаются от плотного объекта, в данном случае ребенка. Отраженные волны преобразуются датчиком, и изображение скелет и внутренние органы ребенка появляются на экране монитора. УЗИ не требует специальной подготовки беременной. Только на ранних сроках, когда околоплодных вод еще мало, женщину просят приходить на обследование с наполненным мочевым пузырем, чтобы изображение было достаточно четким. Женщина ложится на кушетку, обнажает живот, его смазывают звукопроводящим гелем и водят по нему датчиком прибора. Вся процедура длится около десяти минут. По желанию мамы, она может смотреть на экран, но без объяснения хорошего специалиста понять, что изображено на экране, очень сложно.

Никто не говорит о факте, что дети, находящиеся в утробе матери, бурно реагируют на это обследование, отвечая на него интенсивным движением. Эта особенность даже многие «умники» используют как тест во время беременности, когда мама вдруг пугается, что ее ребенок долго не шевелится. УЗИ стимулирует движение плода и вызывает ускорение его сердцебиения.

Ребенок чувствует негативное воздействие и рефлекторно реагирует на излучение, пытаясь защититься. Любопытство недостаточно веская причина для того, чтобы подвергнуть малыша потенциальной опасности в сомнительных целях, например, узнавания пола ребенка.

В США Национальный институт здоровья не одобрил обязательное УЗИ для всех беременных.

Вот отрывок из интервью Российского учёного П.П.Гаряева.

…Считавшийся безвредный ультразвук может повреждать генетический аппарат. К такому выводу пришли московские исследователи под руководством старшего научного сотрудника Отдела теоретических проблем Российской академии наук Петра Петровича Гаряева. Кандидат биологических наук Петр Петрович Гаряев и кандидат физико-математических наук Андрей Александрович Березин поставили перед собой цель: проникнуть в святая святых живой материи волновой геном, который управляет развитием организма. Природа старательно защищает геном от любых вторжений, чтобы сохранить для будущих поколений наследственные программы. Но ученые решили внести в них свои поправки вписать новую информацию в «тексты ДНК».Известно, что выделенные из клеток молекулы ДНК «издают» самые разные сигналы. Это настоящая симфония жизни, где, наверное, есть «мелодии» всех тканей, органов и систем, которые могут развиться по команде ДНК.

Но ученые пока могут определять только спектр этих акустических колебаний. Их так много и они настолько слабые, что различить их способна лишь сверхчувствительная аппаратура.

Гаряев и Березин налили в кювету водный раствор молекул ДНК и обработали его генератором ультразвука. Они отказались назвать частоты акустических колебаний, лишь заметили, что некоторые обертона можно было услышать ухом, как тонкий свист. Но результаты эксперимента исследователи не скрывают наоборот, считают своим долгом рассказать о них как можно большему количеству людей. Работу ДНК, объясняет Гаряев, можно сравнить с быстродействующим компьютером, который мгновенно принимает огромное количество решений. Но представьте себе, что по компьютеру ударили кувалдой, и в результате на все-все вопросы он выдает один и тот же ответ. Нечто подобное произошло в волновом геноме, когда мы оглушили его ультразвуковом. Его волновые матрицы так исказились, что в них резко усилилась одна частота. Дальнейшие исследования показали, что во время ультразвукового облучения двойные спирали ДНК расплетаются и даже разрываются, как бывает при сильном нагревании этих молекул.

Во время таких механических повреждений образуются электромагнитные волны, которые создают фантом. Он сам способен разрушать ДНК подобно высокой температуре и ультразвуку. Эти эксперименты показывают, говорит Гаряев, что ультразвук вызывает не только механические, но и полевые искажения ДНК. Это значит, что в наследственной программе может происходить сбой: искажение поля будет формировать поврежденные ткани из них не сможет развиться здоровый организм.

Но ведь это ужасно! — прервал я ученого. Сейчас во всем мире очень модно ультразвуковое сканирование. Метод считается совершенно безвредным, поэтому его широко применяют для диагностики беременности и детей. «Просвечивают» ультразвуком беременных женщин, чтобы узнать пол будущего ребенка. Другое дело, если это особые медицинские показания! Легкомыслие и самонадеянность «царей природы» просто поразительны. Многие знают, что некоторые животные используют ультразвук как оружие: дельфины глушат им рыбу, кашалоты кальмаров и так далее.

Но медики предложили больным подвергнуться такому воздействию, и они охотно согласились, даже отдали своих детей на эксперимент с ультразвуком.

А наши исследования показали, что ультразвук может быть чрезвычайно вреден для живых систем. Чего только мы не делали, чтобы снять искажающий фантомный эффект в ДНК новыми, но на месте озвучивания все равно возникали аномальные волновые структуры. Эта волновая матрица сохранялась и формировала новые сбои в наследственных программах. Страшно даже подумать, что подобный эффект возникает в человеческих клетках после ультразвуковой диагностики. Ультразвук мог исказить их волновой геном…»

Ещё одни исследования говорят о возможном повреждении клеток плода за счёт нагревания.

Одна из проблем, с которой сталкивается оператор ультразвуковой диагностики, вызвана тем, что он держит датчик над той частью тела зародыша, которую пытается визуализировать. Когда зародыши отодвигаются от потока высокочастотных звуковых волн, они могут чувствовать колебания, высокую температуру или и то, и другое. Управление контроля пищевых продуктов и лекарств (FDA) предупредило в 2004 г.: «Ультразвук — форма энергии, и даже при низких его уровнях лабораторные исследования показывают, что он может оказать физическое влияние на ткани, такое как резкие колебания и повышение температуры»9. Это согласуется с исследованием, проведенным в 2001 г., в котором ультразвуковой датчик, нацеленный непосредственно на миниатюрный гидротелефон, помещенный в матку женщины, зарегистрировал звук, «такой же громкий, как гудок поезда метро, прибывающего на станцию»10.

Факт повышения температуры эмбриональной ткани (тем более, что будущая мать не может даже чувствовать этого) не вызвал бы нашу тревогу, если бы не данные исследования, согласно которым повышение температуры может вызывать значительное повреждение центральной нервной системы развивающегося зародыша. Показано, что у различных видов млекопитающих повышение температуры тела матери или эмбриона приводит к врожденным дефектам у потомства. Обширный спектр литературы по материнской гипертермии у различных млекопитающих демонстрирует нам, что «дефекты центральной нервной системы — самое распространенное последствие гипертермии у всех видов, и смерть клетки или задержка пролиферации нейробластов [эмбриональных клеток, которые развиваются в клетки нервной системы) считаются основным объяснением этих эффектов».

Почему дефекты формирования нервных тканей у крыс или других животных должны беспокоить женщин, ожидающих ребенка? А потому, что исследователи Корнуэлльского университета доказали в 2001 г.: развитие мозга «многих видов млекопитающих, включая человеческих младенцев» происходит сходным образом. Группа исследователей обнаружила «95 вех в развитии нервной системы», которые помогли им точно определить последовательность этапов роста мозга у разных видов. Следовательно, если повторные эксперименты показывают, что высокая температура, вызванная ультразвуком, повреждает мозг эмбрионов крыс и других млекопитающих, логично предположить, что это может вредить также и человеческому мозгу.

Управление контроля пищевых продуктов и лекарств и профессиональные медицинские ассоциации в действительности знают, что предродовый ультразвук может быть опасен для человека, иначе они настойчиво не предостерегали бы против немедицинского студийного ультразвукового портрета, «подарка на память» — услуги, неожиданно возникшей в торговых центрах по всей стране (в США).

Использование ультразвука в коммерческих целях несет с собой для ребенка потенциально больший риск из-за более высокой акустической нагрузки, требуемой для получения высококачественных изображений, более длительной «охоты» технического персонала за подходящим ракурсом и использования персонала, который может не иметь никакого базового медицинского образования или должной подготовки. Эти факторы, наряду с кавитацией (эффект «пузырения» ультразвука, при котором возможно повреждение клеток) и индикаторами безопасности на экране, которые могут быть неточными в широких пределах, от 2 до 617, делают неясными последствия использования ультразвука даже в опытных руках. Действительно, если ультразвук может вредить младенцам, он может вызывать одни и те же повреждения при использовании как для развлечения, так и для диагностики. Идея, что предродовой ультразвук может быть опасным, не нова. Ранее упоминвавшийся отчет ВОЗ в своем резюме «Воздействие ультразвука на биологические системы» (1982) заявляет, что «исследования на животных наводят на мысль, что воздействие ультразвука может повлечь за собой неврологические, поведенческие, иммунологические, гематологические изменения, нарушения развития и уменьшение эмбрионального веса».

Два года спустя, когда Национальный институт здоровья (NIH) проводил конференцию, призванную оценить риски ультразвука, он сообщил, что при возникновении врожденных дефектов акустическая нагрузка было достаточно интенсивной, чтобы вызвать образование значительного тепла. Хотя Институт здоровья с тех пор заявляет, что данное сообщение «больше не рассматривается… как руководство для современной медицинской практики», факты остаются неизменными.

Несмотря на результаты этих двух обширных научных работ, в 1993 г. Управления контроля пищевых продуктов и лекарств одобрило восьмикратное увеличение потенциальной акустической нагрузки, производимой ультразвуковым оборудованием, намного увеличивая возможность пагубных исходов беременности, вызванных перегревом. Может ли быть случайным тот факт, что это увеличение потенциальных тепловых эффектов случилось во время того же промежутка времени, когда уровень аутизма увеличился 60-кратно?

Особенно опасно ультразвуковое воздействие на раннем сроке беременности. В первые 12 недель происходит закладка и формирование всех органов и систем организма плода. В этот период активного роста любое воздействие на формирующийся плод может пагубно отразиться и вызвать различные отклонения в развитии. Мы не призываем Вас полностью отказаться от этого вида обследования. Однако для него должны быть медицинские показания, как и для любой продедуры и манипуляции врачебного характера. Ещё не так давно всем женщинам делали рентгенологическое обследование во время беременности, считая что это безопасно..Тысячи женщин подвергались радиационному облучению! И только когда связь рентгена с грубыми врождёнными пороками развития уже невозможно было не заметить и тем более отрицать, врачи перестали использовать его в повсеместной практике. Сейчас похожая ситуация происходит и с УЗИ обследованием. В рамках нового проекта Правительства РФ планируется и уже вводиться дополнительное увеличение различных анализов, скриннингов и обследований, в том числе кол-во УЗИ за беременность стремительно возрастает. К сожалению наши врачи не знают или не считают нужным учитывать все исследования, которые говорят о вреде, наносимым ультразвуком внутриутробно. Если же беременной необходимо сделать УЗИ по тем или иным причинам, то советую делать это не ранее второго триместра. Это позволит уменьшить риски для ребёнка. Нужно хорошо взвесить необходимость УЗИ по сравнению с его возможным вредом. «Достоверность этого метода составляет всего 25-30%»- признаёт директор департамента по развитию медицинской помощи детям и родовспоможения Минздравсоцразвития Валентина Широкова. Количество ошибок в работе «узи-специалистов» в России поражает. Чаще всего беременной ставятся несуществующие диагнозы, выявляются страшные пороки в развитии ребёнка, которых нет. Бывает и наоборот, врачи не видят отклонения, говорят маме что всё хорошо, а в итоге ребёнок рождается нездоровым. С такими ошибками наших медиков сталкивается каждая шестая женщина посещающая рутинно женскую консультацию. На данный момент даже если УЗИ выявляет какие то отклонения, то повлиять или вылечить их современная медицина не в состоянии. Хотя сейчас известны случаи операций на внутриутробном ребёнке, это пока ещё на уровне эксперимента. Поэтому врачи могут просто констатировать факт, но ничем помочь не они не в состоянии. В подавляющем большинстве случаев женщине просто предлагают прервать беременность не зависимо от срока. 

Бывают ситуации когда УЗИ может действительно помочь определить определённые проблемы. Важно чтобы это обследование было назначено по медицинским показаниям, так как оно не является безопасным. Если у врача есть подозрения на какие то осложнения беременности, то кратковременное единичное УЗИ обследование будет оправдано. Ещё важно помнить один момент. К сожалению в районной консультации часто квалификация врачей-узистов оставляет желать лучшего. Поэтому лучше всего обратиться к специалистам высокого уровня. в этом случае результат будет гораздо достовернее и вам не придётся подвергать ребёнка лишнему воздействию ультразвуковых волн. Если беременная женщина всё же не может отказаться от УЗИ из за переживаний всё ли в порядке с малышом, то важно помнить два момента. Делать УЗИ не ранее второго триместра и обязательно искать хорошего специалиста.

Алла Амерова,

Инструктор дородовой подготовки, консультант по грудному вскармливанию.  
По материалам Майорской М.Б.

Определение тревожности и низкой самооценки у ребенка

Тест «Несуществующее животное» на

определение тревожности и низкой самооценки у ребёнка

Для определения тревожности и низкой самооценки у ребёнка родители могут самостоятельно использовать известный психологический тест «Несуществующее животное». Для этого вам понадобятся чистый белый лист бумаги и цветные карандаши. Попросите ребёнка нарисовать животное, которого на самом деле не существует ни в природе, ни в книгах, ни в мультфильмах. Объясните ребёнку, что вы не оцениваете его умение рисовать, главное – кто будет нарисован, а не как.

Если ребёнок не хочет рисовать – не настаивайте. Возможно, он согласится это сделать в другой раз. Время рисования не ограничивают. Во время выполнения этого задания ничего не должно отвлекать ребёнка: ни телевизор, ни другие дети и т.п.

Когда рисунок будет готов, пусть ребёнок придумает животному имя, а потом поспрашивайте его, где живёт животное, чем питается, с кем дружит, кого боится, что любит делать и др. Проводить данную методику лучше после 4-х лет, когда у ребёнка уже расширился кругозор и развито воображение. Чем старше ребёнок, тем информативнее рисунок.
Помните, что ребёнок изображает себя!

Тест «Несуществующее животное» относится к проективным методикам, потому что человек, рисуя кого-то или что-то, бессознательно проецирует (переносит) свои чувства, переживания, эмоциональные проблемы на лист бумаги. И если правильно «прочитать» рисунок, то можно лучше узнать своего ребёнка, получить его психологический портрет.

Интерпретация рисунка

Прежде всего, обратите внимание не внешность несуществующего животного. Если он похож на существующих в природе животных, то ваш малыш выбирает стандартные пути решения, он довольно дисциплинирован или у него слабо развито воображение. Также то, что ребёнок отходит от инструкций и рисует что-то хорошо ему знакомое, может служить признаком тревожности. Тревожному ребёнку трудно выполнять неопределённые задания. Не понимая критерии оценки задания, он может ожидать отрицательный отзыв, и это не даёт ему возможности фантазировать. Тревожный ребёнок упрощает задание, подменяет поставленную задачу более знакомой и соответственно безопасной. То есть страх неопределённости и высокая тревожность блокируют фантазию ребёнка. Если животное ни на что не похоже, то ваш ребёнок обладает хорошо развитым воображением и он из породы изобретателей, первооткрывателей.

1. Размер рисунка.

Размер рисунка говорит о самооценке ребёнка. Слишком маленький рисунок говорит о заниженной самооценке. Рисунок средних размеров – об адекватной, а рисунок животного слишком больших размеров (на весь лист) – о завышенной самооценке.

2. Цвет.

О благоприятном эмоциональном состоянии ребёнка свидетельствует наличие в рисунке ярких основных цветов (красный, синий, жёлтый, зелёный), если рисунок выполнен одним цветом к тому же тёмным (коричневый, чёрный, серый), то эмоциональное состояние ребёнка нарушено. Тёмные цвета говорят о тревогах, страхах, агрессии.

3. Расположение рисунка на листе бумаги.

Разделите альбомный лист на четыре части и посмотрите, в какой части сосредоточен рисунок.

Если рисунок расположен в верхней части, то малыш самоуверен, нередко переоценивает собственные силы, пытается охватить всё и сразу. Приучайте ребёнка доводить начатое дело до конца.

Рисунок внизу. У ребёнка занижена самооценка. Такого малыша надо чаще хвалить и не заострять внимание на его ошибках.  Подавленность, нерешительность, не заинтересованность в своем социальном положении, признании, отсутствие тенденции к самоутверждению, склонность к фиксации на проблемах; часто это «отверженные», «изгои».

Изображение в центре листа. Ребёнок правильно оценивает свои возможности, адекватно относится к успехам и поражениям, он не слишком упрям, но если уверен, что прав, то своё мнение будет отстаивать. Поощряйте в ребёнке эти полезные склонности.

Справа — экстравертированность, акцентированность на будущем, подчеркивание мужских черт характера, стремление к контролю над ситуацией, ориентация на окружающих, агрессивная сексуальность.

Крайне справа — склонность к неподчинению, непредсказуемость, чрезмерная конфликтность, в экстремальных ситуациях — аутоагрессивность.

Если рисунок расположен слева на листе, для обследуемого характерны интровертированность, акцентированность на прошлом, выраженное чувство вины, застенчивость.
Обследуемые, у которых проявилась данная характеристика, практически всегда уходили от конфликтных ситуаций.

Маленький рисунок в верхнем левом углу — высокая тревожность; часто встречается у личностей, склонных к суициду.

4. Наличие штриховки.

Чем больше в рисунке линий, заштрихованности разных частей туловища животного, вплоть до зачернения, тем выше тревожность.

5. Присутствие когтей, шипов, рогов и пр.

Это признаки агрессии, но у тревожных детей эти признаки говорят о защитных формах агрессии. Тревожные дети могут нарисовать колючки, шипы, например, показывая, что они боятся окружающего мира, представляют его угрожающим для себя.

6. Глаза.

Пустые глазницы и акцентировано большие глаза говорят о страхах. Необычно большое количество глаз, ушей и прочих органах чувств (например, локаторы или антенны) призвано напряжённо следить за миром, чтобы не пропустить никакой опасности или угрозы. Соответствующая тематика отражается и в описании образа жизни животного. Признаком тревожности служит и описании различных способов предохранения от возможной опасности (нападения хищников, стихийных бедствий, холода, жары, недостатка еды и т.п.). Страхи проявляются в зачернении глаз. О полном бесстрашии животного чаще говорят дети, испытывающие страхи.

7. Нажим.

Слабый нажим говорит о низкой самооценке и неуверенности в себе, сильный — наоборот, об уверенности.
При боязни агрессии очень характерны гигантские размеры животного. Если животное очень большое, а ребёнок постоянно говорит о том, что главное в жизни животного – защищаться от хищников, то о боязни агрессии можно говорить с уверенностью. При боязни агрессии часто ещё дети указывают на труднодоступность жилища – «живёт в пещере», «высоко-высоко в дупле» и пр. На вопрос: «Есть ли враги у животного?» дети отвечают со страхом, либо однозначно отрицательно, либо начинают долго их перечислять.

Другие признаки в рисунке, раскрывающие более детально характер ребёнка.

Обратите внимание на ноги животного. Если зверь стоит на устойчивых конечностях, то ребёнок реально смотрит на окружающую действительность. Если ноги широко расставлены, то у малыша к тому же развито рациональное мышление.

Если изображение стоит на тонких лапках, то ребёнок – мечтатель и фантазёр. А если туловище и конечности расположены отдельно друг от друга, то ребёнку свойственны импульсивные поступки. Оцените пропорции головы и туловища.

Голова явно больше всего остального: ребёнку интересно узнавать новое, он любит развивающие игры. Голова маленькая по сравнению с туловищем: наличие физической силы и умения дать отпор кажутся ребёнку наиболее важными, ему не хватает чувства защищённости.

Если все пропорции выдержаны, то ваш малыш развивается гармонично, как интеллектуально, так и физически.
Теперь рассмотрим морду животного. Если черты лица не нарисованы, то ребёнок не стремится выражать свои мысли, плохо воспринимает информацию.

Рот без языка и зубов – страх и недоверие к окружающим. Если есть зубы, то это признак скрытой агрессии, язык – потребность в общении. Уши – ребёнок прислушивается к окружающим, слишком большие уши указывают, что ему очень важно чужое мнение.

Ребёнок нарисовал крылья. Ему хочется всё успеть, ему многое интересно. Такой ребёнок может добиться в дальнейшем больших успехов.
Хвост направленный вверх, указывает на оптимизм и дружелюбие, вниз – страх и подавленность.

Бантики, серьги, украшения говорят о заинтересованности ребёнка своим внешним видом, что более выражено у девочек.
Необычные детали в образе животного могут говорить как о психологических проблемах, так и о нестандартном мышлении.

Литература:

• Захарова А.И. Происхождение и психотерапия детсхих неврозов. – СПб., Изд-во «КАРО», 2006г.
• Шапиро Е. И. Если у ребенка страхи — Изд-во «Детство-пресс», 2011г.

 

Рисуночный тест «Несуществующее животное».

Рисуночный тест «Несуществующее животное».

Предлагается нарисовать «несуществующее животное» и назвать его несуществующим названием. Тест проводится в форме индивидуального исследования. Рисунок выполняется простым карандашом на стандартном листе белой бумаги.
Интерпретация теста.

✔1. Положение рисунка на листе.

В норме рисунок расположен на средней линии (вертикально). Положение рисунка ближе к верхнему краю листа (чем ближе, тем более выражено) трактуется как высокая самооценка и недовольство собственным положением в социуме, недостаточностью признания со стороны окружающих. Тенденция к самоутверждению, признанию. Положение рисунка в нижней части листа – обратный показатель: неуверенность в себе, низкая самооценка, подавленность, нерешительность, потребность в признании. Отсутствие тенденции к самоутверждению.

✔2. Центральная смысловая часть фигуры (голова, уши).

Голова повернута вправо – устойчивая тенденция к действительности. Почти все, что обдумывается, планируется – осуществляется или, по крайней мере, начинает реализовываться (хотя и не доводится до конца). Человек активно переходит к реализации своих намерений. Голова повернута влево – тенденция к рефлексии, размышлениям, лишь незначительная часть замыслов реализуется. Нередко это страх, нерешительность, боязнь перед активным действием (что именно, надо выяснить дополнительно). Положение «фас» (голова направлена на рисующего) трактуется как эгоцентризм.

Глазам придается особое значение. Если радужка особенно резко прорисована – это переживание страха человеком. Обратить внимание на наличие ресниц. Ресницы обозначают заинтересованность человека в восхищении окружающих, а также истероидно-демонстративные манеры в его поведении.

Уши. Прямое значение – заинтересованность в информации, значимость и мнение окружающих о себе.

Открытый рот без прорисовки языка и губ, особенно зачерненный, трактуется как легкость возникновения страхов, опасения, недоверия. Для тревожных детей и подростков характерен рисунок зачерненного рта округлой формы. Приоткрытый рот в сочетании с языком при отсутствии губ трактуется как большая речевая активность, в сочетании с прорисованной губой – чувственность. Рот с зубами – вербальная агрессия, в большинстве случаев защитная. Увеличенный (по отношению к фигуре в целом) размер головы, говорит о том, что испытуемый ценит рациональное начало, а возможно и эрудицию в себе и окружающих.

На голове часто бывают расположены дополнительные детали: рога – защита; ногти, щетина, иглы – агрессия.

Крылья и перья – тенденция к самоукрашению и самооправданию.

Грива, шерсть, подобие прически – чувственность, подчеркивание своего пола и иногда ориентировка на свою сексуальную роль.

✔3. Несущая, опорная часть фигуры (ноги, лапы, постамент).

Отсутствие лап рассматривается как поверхностность, неосновательность суждений, легкомыслие в выводах, иногда импульсивность в принятии решений.

Разнообразие положения этих деталей – свидетельство самостоятельности творческого начала.

✔4. Части возвышающиеся над уровнем фигуры (крылья, дополнительные ноги, щупальца, перья, бантики).

Части, возвышающиеся над уровнем фигуры, трактуются как уверенность в себе, любознательность, увлеченность своей деятельностью, смелость. Крылья, перья, бантики – показатель демонстративности, склонность обращать на себя внимание.

Хвосты – выражают отношение к собственным действиям и поступкам. Положительная или отрицательная оценка своих действий выражается направленностью нарисованного хвоста. Хвост направлен влево – трактуется как размышление об упущенном моменте из-за собственной нерешительности. Хвост, направленный вправо, трактуется как размышление о своих действиях, поступках в настоящее время. Хвост, направленный вверх, трактуется как уверенность, положительная оценка своих действий, поступков. Падающий вниз – сожаление о содеянном, раскаяние.

✔5. Контур фигуры.

Контур фигуры, выполненный в острых углах, выступах,

шипах, панцире – трактуется как агрессивная защита от окружающих.

Запачкивание контурной линии фигуры – тревога, страх. Линии удвоены, поставлены шипы, заслоны – опасение, подозрительность. Верхний контур – трактуется как защита против людей, реально имеющих возможность наложить запреты, ограничения, т.е. старших по возрасту людей: родителей, учителей, руководителей.

Нижний контур – протест против насмешек, боязнь осуждения.

Боковые – готовность к защите и самозащите.

✔ 6) Название может выражать рациональное соединение смысловых частей (летающий заяц, бегокот). Другой вариант словообразования с книжно-научным, иногда латинским окончанием (раболепиус, наплеомалярия).
Первое название трактуется как рациональность. Второе – демонстративность, направленная на демонстрацию собственного разума, эрудиции. Встречаются названия поверхностно-звуковые без всякого осмысления (гляктер, ламю), трактующиеся как легкомысленность отношения к окружающему. Инфантильные названия имеют обычно повторяющиеся элементы (тру-тру). Склонность к фантазированию (чаще всего защитного порядка) выражена обычно непомерно длинными названиями.

Забронировать билет

Какие рисуночные тесты можно провести с ребенком? Тест «Злое, Счастливое и Несчастное животное» | Психология

Эти тесты позволяют выявить скрытые агрессивные или депрессивные тенденции, типичную для ребенка реакцию на угрозу (тест «Злое животное»), его ценности и стремления («Счастливое животное»), характер имеющихся опасений, сознаваемые и неосознанные представления малыша о его наиболее острых проблемах («Несчастное животное»). Задания «Злое животное» и «Несчастное животное» хорошо выявляют степень устойчивости ребенка к стрессам и проясняют ситуацию текущего эмоционального благополучия.

Почему это работает? Да потому, что рисунок животного — штука чрезвычайно богатая информацией. Если рисуя человека, малыш и может что-то приукрасить или «не показать», то изображения животных, тем более — несуществующих, являющихся полностью продуктом воображения маленького художника, и раскрывают его внутренний мир во всей полноте.

Конечно, с малышом-трехлеткой этот способ использовать рановато, поскольку в этом возрасте и колобок, и человек, и котик выглядят на рисунках примерно одинаково — а тем более сложно выделить нюансы «настроений». Но вот уже со старшими дошкольниками и младшими школьниками (то есть с 6−7 лет) поиграть в «рисование зверушек» — милое дело.

Как правильно организовать тест, говорилось в предыдущей статье. Если ребенок не устал после рисования своего Несуществующего животного, дайте ему еще листочек и попросите изобразить теперь уже другое существо — «Злое животное». Все происходит аналогично первому сюжету. Потом так же выполняются задания о «Счастливом» и «Несчастном животном».

Так же, как и в прошлый раз, попросите назвать животное и рассказать о нем — о его характере, привычках, друзьях и врагах, мечтах, образе жизни.

Как интерпретировать полученные картинки — мы уже говорили.

А теперь сравните Злое животное и обычное. Если Злое животное лишено признаков агрессивности, описанных ранее — это говорит об их отсутствии и у ребенка (ну или о стремлении их скрыть).

Если таких знаков, напротив, очень много — склонность и готовность к агрессии высока. Смотрите, как она локализована: когтистые лапы — агрессия физическая, огромные клыки — вербальная.

Оцените, боится ли сам ребенок своего Злого животного: четкая уверенная линия рисунка говорит о высокой стрессоустойчивости, а «распадающаяся» форма — о низкой.

Сравнение Счастливого животного с обычным скажет, насколько благополучным ощущает себя ребенок и чего ему не хватает.

Если подчеркивается, что Счастливчик всегда обеспечен едой и всякими материальными благами — ребенок ощущает ненадежность своего материального положения.

Если говорится, что «оно защищено от любых врагов» — ребенок настороженно относится к окружающим и, возможно, не ждет от них добра.

А если животное «дружит со всеми», «его все любят» — для него очень ценны эмоциональные связи (а возможно, он даже испытывает недостаток в общении, любви). Если животное «красивое и умное» — эти качества ценны для художника.

О высокой ценности свободы и стремлении к самостоятельности говорит способность животного «летать, куда захочется» или «жить повсюду».

Если Счастливчик «живет вечно» — это может свидетельствовать о страхе смерти.

Ну, а сравнение Несчастного животного с обычным расскажет, о чем ребенок тревожится и печалится.

Если оно нарисовано очень маленьким или рисунок содержит признаки тревожности — многократные исправления, нечеткий контур, обильную заштриховку — ребенок склонен к депрессивной реакции на неблагоприятные обстоятельства.

Если Несчастненький зверь страдает от того, что «его никто не любит» — ребенку, возможно, не хватает тепла и приятия.

Если он «совсем один, без друзей» — не хватает общения.

Если «болеет и умирает» — ребенок, возможно, чувствует себя слабым или боится смерти. Если Несчастному «тяжело живется» — нет еды, воды, дома и так далее — может быть, ребенок ощущает материальное неблагополучие.

Если же ребенок не может объяснить, почему именно животное можно считать счастливым или несчастным, это говорит о его не слишком хорошем понимании себя самого.

Думаю, на основании всего, что вы уже прочли о рисуночных тестах, вам станет легче «читать» произведения своего ребенка. А самое главное — надеюсь, вы станете обращать больше внимания на его внутренний мир.

Сайт школы №30 Архангельск — Психологический тест для детей

Поиск по сайту

РОДИТЕЛЯМ БУДУЩИХ ПЕРВОКЛАССНИКОВ Психологический тесты для детей 6 -7 лет Тест «Несуществующее животное»   Увлечение ребенка рисованием можно использовать в «корыстных» целях. Проведите   психологический рисуночный тест «Несуществующее животное». Дайте ребенку простой карандаш, лист бумаги размером А4 и задание — нарисовать удивительное живое существо, которого еще никто никогда не встречал. Кстати, попробуйте нарисовать свое животное, и вы узнаете много интересного о себе. РАСШИФРОВКА ТЕСТА. После того как ребенок представит вам свой шедевр, обсудите образ животного: как его зовут (несуществующее имя), какой у него характер, повадки, где оно живет, чем питается, особенности строения. Также уточните, есть ли у этого зверя семья и друзья, какого он пола, что любит больше всего на свете, а чего ужасно боится. Ребенок на подсознательном уровне рисует себя, свои отношения с людьми, страхи и проблемы. Идентификация ребенка с рисунком поможет вам узнать о его душевном состоянии, самооценке, темпераменте и адаптации к социуму. Расположение рисунка на листе.  Об адекватной самооценке говорит расположение рисунка в центральной части листа. Чем выше расположено изображение, тем больше у ребенка запросов и, возможно, недовольства окружением — неосознанная претензия «я стою большего». Ему важно, чтобы его признали, заметили, похвалили. Соответственно, чем ниже расположен рисунок на листе, тем ниже уровень самооценки. Неуверенность в себе, страх перед негативным опытом заставляют такого ребенка сидеть тише воды, ниже травы. Если рисунок сдвинут вправо, это говорит об излишнем контроле своих действий. Правая сторона указывает также на то, что «художник» является экстравертом, ему интересны люди и отношения. Правый верхний угол указывает на явные или скрытые лидерские качества, склонность к конфликтам. Сдвиг рисунка влево отражает замкнутость, застенчивость, концентрацию на своих внутренних переживаниях, то есть характер интроверта. Линии. Слабые, штриховые линии говорят не только о неуверенности и сомнении, но и чувствительности, быстрой утомляемости ребенка. Возможно, что такому малышу не хватает жизненной энергии. Нужно пересмотреть его режим дня, питания, увеличить или наоборот уменьшить физические нагрузки. Жирные, заштрихованные, несколько раз обведенные линии указывают на внутреннее напряжение, агрессию, высокую степень тревожности. Психологи рекомендуют обращать внимание на детали рисунка, которые выделяются своей четкой прорисовкой. Они указывают, где спрятана причина проблемы. Если же ваш ребенок занимается художественным творчеством в студии, возможно, он всего лишь пользуется определенной техникой, и это не имеет прямого отношения к его внутреннему состоянию. На этот момент следует обратить внимание. Имя животного. Название животного несет важную информацию, это ключ к раскрытию и пониманию характера ребенка. Названия животных можно разделить на такие категории: ❀ Длинные названия, в которых сливаются сразу несколько слов или словосочетаний («злопастный и зубастый Брандашмыг»). Это свидетельствует о неуемной детской фантазии, которая является способом самозащиты и ухода от мира. ❀ Повторяющиеся элементы в словах («мур-мур», «бум-бум») говорят о страхе брать на себя ответственность. ❀ Ироничные названия отражают ироничное отношение к действительности («шушапничек», «шуршало», «бу- бяш»), ❀ Рациональные названия, новые словообразования, которые получаются путем урезания и присоединения смысловых частей («крокозябл», «поющая рыба»). ❀ Научные, книжные названия («зайцезабр», «топтыгиус») подчеркивают желание продемонстрировать свой ум, знания.  ❀ Звуки, не несущие смысла («ш-ш-ш», «го») говорят о поверхностном отношении к миру. Голова. Нужно учитывать то, что вместо головы мог быть нарисованы другие элементы, которые условно все- таки считаются таковой. Голова — одна из самых важных деталей рисунка. Ее размер отражает отношение ребенка, точнее его оценку своих умственных способностей и интеллекта других людей. Если голова нарисована в анфас, это говорит о высокой степени эгоцентризма (он присущ практически всем детям), спонтанности действий. Если голова повернута вправо, «художнику» свойственны такие черты, как решительность, упорство, смелость. Если голова повернута влево, это свидетельствует о неуверенности, склонности к фантазированию, уходу от реальности. Глаза. Крупные, четко прорисованные глаза расскажут о детских страхах. Не зря говорят: «У страха глаза велики». Ресницы на глазах обычно рисуют те «художники», которые хотят приукрасить себя, произвести впечатление на окружающих. Рот. Большой открытый рот (без губ) говорит о настороженности и страхах. Зубы являются выражением агрессии. Наличие языка указывает на потребность ребенка в общении, возможно, его излишнюю болтливость. Если рот отсутствует или нарисован в виде маленькой черточки (точки), это может свидетельствовать о запрете на выражение своих эмоций, их подавленность. Уши. Эта деталь говорит о том, насколько ребенок мнителен по отношению к чужому мнению, как он переносит критику. Чем больше уши, тем большее влияние на него имеет чужая оценка. Отсутствие ушей может указывать на «глухоту» как закрытость, форму самозащиты. Детали. Если фигуру животного дополняют какие-то детали (крылья, перья, панцирь, чешуя), необходимо уточнить у ребенка, зачем ему нужны эти элементы. Если для того, чтобы осуществлять какие-то действия (летать, защищаться, переносить тяжести, спасаться от холода и т. п.), значит, ребенок способен реализовывать свои замыслы. Если эти атрибуты нужны для красоты, значит, и в жизни «художник» стремится себя украсить, то есть хочет быть хорошим в глазах других людей. Рога, колючки символизируют агрессию, а грива, шерсть, кудряшки — чувствительность. Фигура. Мягкие, обтекаемые, круглые очертания фигуры говорят о миролюбивом характере ребенка. Если фигура угловатая, если на ней есть различные выступы, колючки, шипы, это говорит о том, что ребенок склонен к самозащите. Причем, важно отследить, куда направлены выступы. Если они смотрят вверх, ребенка подавляют взрослые (родители, родственники, воспитатели). Если выступы направлены вниз, ребенка волнует то, как его воспринимают сверстники. Если выступы направлены в стороны, возможно, ребенок все время находится в состоянии «боевой готовности» и намерен отразить любые нападения извне. Лапы. Это существенная деталь рисунка, которая говорит о степени рациональности, «заземленности» ребенка. Если лапы мощные, крупные, хорошо стоят, у ребенка рациональный, здравый подход к жизни, он уверен в своих силах. Если лапы тонкие, маленькие, повисают в воздухе, это знак того, что «художнику» не хватает практической хватки, он мечтатель, парящий в облаках. Обратите внимание на то, как соединяются лапы с туловищем. Если соединение четкое, это говорит о внутреннем контроле, ответственности. Если соединение небрежное, ребенок склонен к необдуманным действиям. Хвост. Эта деталь символизирует самооценку человека. Если хвост направлен вправо, ребенок склонен к решительным действиям, ему важно, получить опыт, что-то делать, выполнять, чем-то увлекаться, Если хвост смотрит влево, ребенок больше склонен к размышлениям, умозаключениям без действия. Если хвост направлен вверх, это говорит об адекватной самооценке: «художник» реально оценивает свои мысли и поведение, он всегда активен, полон идей, знает способы их воплощения. Опущенный вниз хвост говорит сам за себя. Достаточно взглянуть на собаку, поджавшую хвост, чтобы прочитать ее внутреннее состояние. Существо с опущенным хвостом всегда о чем-то беспокоится, чем-то недовольно, склонно к рефлексии и все время сомневается.

Навигатор Год науки Календарь событий

Психология: Тест «Несуществующее животное»

Метод исследования личности с помощью проективного теста «Несуществующее животное» построен на теории психомоторной связи. Для регистрации состояния психики используется исследование моторики (в частности, моторики рисующей доминантной правой руки, зафиксированной в виде графического следа движения, рисунка) По И. М. Сеченову, всякое представление, возникающее в психике, любая тенденция, связанная с этим представлением, заканчивается движением (буквально- “Всякая мысль заканчивается движением”).

Если реальное движение, интенция по какой-то причине не осуществляется, то в соответствующих группах мышц суммируется определенное напряжение энергии, необходимой для осуществления ответного движения (на представление — мысль). Так например, образы и мысли-представления, вызывающие страх, стимулируют напряжение в группах ножной мускулатуры и в мышцах рук, что оказалось бы необходимым в случае ответа на страх бегством или защитой с помощью рук — ударить, заслониться. Тенденция движения имеет направление в пространстве:

— удаление,

— приближение,

— наклон,

— выпрямление,

— подъем,

— падение.

При выполнении рисунка лист бумаги (либо полотно картины) представляет собой модель пространства и, кроме состояния мышц, фиксирует отношение к пространству, т.е. возникающую тенденцию. Пространство, в свою очередь, связано с эмоциональной окраской переживания и временным периодом: настоящим, прошлым, будущим. Связано оно также с действенностью или идеально-мыслительным планом работы психики. Пространство, расположенное сзади и слева от субъекта, связано с прошлым периодом и бездеятельностью (отсутствием активной связи между мыслью-представлением, планированием и его осуществлением). Правая сторона, пространство спереди и вверху связаны с будущим периодом и действенностью. На листе (модели пространства) левая сторона и низ связаны с отрицательно окрашенными и депрессивными эмоциями, с неуверенностью и пассивностью. Правая сторона (соответствующая доминантной правой руке) – с положительно окрашенными эмоциями, энергией, активностью, конкретностью действия.

Помимо общих закономерностей психомоторной связи и отношения к пространству при толковании материала теста используются теоретические нормы оперирования с символами и символическими геометрическими элементами и фигурами.

По своему характеру тест “Несуществующее животное” относится к числу проективных. Для статистической проверки или стандартизации результат анализа может быть представлен в описательных формах. По составу данный тест – ориентировочный и как единственный метод исследования обычно не используется и требует объединения с другими методами в качестве батарейного инструмента исследования.

Инструкция

   Придумайте и нарисуйте НЕСУЩЕСТВУЮЩЕЕ животное и назовите его НЕСУЩЕСТВУЮЩИМ названием.

Показатели и интерпретация

Положение рисунка на листе

   В норме рисунок расположен по средней линии вертикально поставленного листа. Лист бумаги лучше всего взять белый или слегка кремовый, неглянцевый. Пользоваться карандашом средней мягкости; ручкой и фломастером рисовать нельзя.

Расположение рисунка ближе к верхнему краю листа (чем ближе, тем более выражено) трактуется как высокая самооценка, как недовольство своим положением в социуме, недостаточностью признания со стороны окружающих, как претензия на продвижение и признание, тенденция к самоутверждению.

Положение рисунка в нижней части – обратная тенденция: неуверенность в себе, низкая самооценка, подавленность, нерешительность, незаинтересованность в своем положении в социуме, в признании, отсутствие тенденции к самоутверждению.

Центральная смысловая часть фигуры (голова или замещающая ее деталь).

   Голова повернута вправо – устойчивая тенденция к деятельности, действенности: почти все, что обдумывается, планируется – осуществляется или, по крайней мере, начинает осуществляться (если даже и не доводится до конца). Испытуемый активно переходит к реализации своих планов, наклонностей.

Голова повернута влево – тенденция к рефлексии, к размышлениям. Это не человек действия: лишь незначительная часть замыслов реализуется или хотя бы начинает реализоваться. Нередко также боязнь перед активным действием и нерешительность. (Вариант: отсутствие тенденции к действию или боязнь активности – следует решить дополнительно.)

Положение “анфас”, т.е. голова направлена на рисующего (на себя), трактуется как эгоцентризм.

На голове расположены детали, соответствующие органам чувств – уши, рот, глаза. Значение детали “уши” – прямое: заинтересованность в информации, значимость мнения окружающих о себе. Дополнительно по другим показателям и их сочетанию определяется, предпринимает ли испытуемый что-либо для завоевания положительной оценки или только продуцирует на оценки окружающих соответствующие эмоциональные реакции (радость, гордость, обида, огорчение), не изменяя своего поведения. Приоткрытый рот в сочетании с языком при отсутствии прорисовки губ трактуется как большая речевая активность (болтливость), в сочетании с прорисовкой губ – как чувственность; иногда и то и другое вместе. Открытый рот без прорисовки языка и губ, особенно – зачерченный, трактуется как легкость возникновения опасений и страхов, недоверия.

Рот с зубами – вербальная агрессия, в большинстве случаев – защитная (огрызается, задирается, грубит в ответ на обращение к нему отрицательного свойства, осуждение, порицание). Для детей и подростков характерен рисунок зачерченного рта округлой формы (боязливость, тревожность).

Особое значение придают глазам. Это символ присущего человеку переживания страха: подчеркивается резкой прорисовкой радужки. Обратить внимание на наличие или отсутствие ресниц. Ресницы – истероидно-демонстративные манеры поведения; для мужчин: женственные черты характера с прорисовкой зрачка и радужки совпадают редко. Ресницы – также заинтересованность в восхищении окружающих внешней красотой и манерой одеваться, придание этому большого значения.

Увеличенный (в соответствии с фигурой в целом) размер головы говорит о том, что испытуемой ценит рациональное начало (возможно, и эрудицию) в себе и окружающих.

На голове также бывают расположены дополнительные детали: например, рога – защита, агрессия. Определить по сочетанию с другими признаками – когтями, щетиной, иглами – характер этой агрессии: спонтанная или защитно-ответная. Перья – тенденция к самоукрашению и самооправданию, к демонстративности. Грива, шерсть, подобие прически – чувственность, подчеркивание своего пола и, иногда, ориентировка на свою сексуальную роль.

Несущая, опорная часть фигуры (ноги, лапы, иногда – постамент)

   Рассматривается основательность этой части по отношению к размерам всей фигуры и по форме:

а) основательность, обдуманность, рациональность принятия решения, пути к выводам, формированияе-суждения, опора на существенные положения и значимую информацию;

б) поверхностность суждений, легкомыслие в выводах и неосновательность суждений, иногда импульсивность принятия решения (особенно при отсутствии или почти отсутствии ног).

Обратить внимание на характер соединения ног с корпусом: соединение точно, тщательно или небрежно, слабо соединены или не соединены вовсе – это характер контроля за своими рассуждениями, выводами, решениями. Однотипность и однонаправленность формы ног, лап, любых элементов опорной части – конформность суждений и установок в принятии решений, их стандартность, банальность. Разнообразие в форме и положении этих деталей – своеобразие установок и суждений, самостоятельность и небаналыюсть; иногда даже творческое начало (соответственно необычности формы) или инакомыслие (ближе к патологии).

Части, поднимающиеся над уровнем фигуры

   Могут быть функциональными или украшающими:

— крылья, дополнительные ноги, щупальца, детали панциря, перья, бантики вроде завитушек-кудрей, цветково-функциональные детали – энергия охвата разных областей человеческой деятельности, уверенность в себе, “самораспространение” с неделикатным и неразборчивым притеснением окружающих, либо любознательность, желание соучаствовать как можно в большем числе дел окружающих, завоевание себе места под солнцем, увлеченность своей деятельностью, смелость предприятий (соответственно значению детали-символа – крылья или щупальца и т.д.). Украшающие детали – демонстративность, склонность обращать на себя внимание окружающих, манерность (например, лошадь или ее несуществующее подобие в султане из павлиньих перьев).

Хвосты

   Выражают отношение к собственным действиям, решениям, выводам, к своей вербальной продукции – судя по тому, повернуты ли эти хвосты вправо (на листе) или влево. Хвосты повернуты вправо – отношение к своим действиям и поведению. Влево – отношение к своим мыслям, решениям; к упущенным возможностям, к собственной нерешительности. Положительная или отрицательная окраска этого отношения выражена направлением хвостов вверх (уверенно, положительно, бодро) или падающим движением вниз (недовольство собой, сомнение в собственной правоте, сожаление о сделанном, сказанном, раскаяние и т.п.). Обратить внимание на хвосты, состоящие из нескольких, иногда повторяющихся, звеньев, на особенно пышные хвосты, особенно длинные и иногда разветвленные.

Контуры фигуры

   Анализируются по наличию или отсутствию выступов (типа щитов, панцирей, игл), прорисовки и затемнения линии контура. Это защита от окружающих, агрессивная – если она выполнена в острых углах; со страхом и тревогой – если имеет место затемнение, “запачкивание” контурной линии; с опасением, подозрительностью – если поставлены щиты, “заслоны”, линия удвоена. Направленность такой защиты – соответственно пространственному расположению: верхний контур фигуры – против вышестоящих, против лиц, имеющих возможность наложить запрет, ограничение, осуществить принуждение, т.е. против старших по возрасту, родителей, учителей, начальников, руководителей; нижний контур – защита против насмешек, непризнания, отсутствия авторитета у нижестоящих подчиненных, младших, боязнь осуждения; боковые контуры – недифференцированная опасливость и готовность к самозащите любого порядка и в разных ситуациях; то же самое – элементы “защиты”, расположенные не по контуру, а внутри контура, на самом корпусе животного. Справа – больше в процессе деятельности (реальной), слева – больше защита своих мнений, убеждений, вкусов.

Общая энергия

   Оценивается количество изображенных деталей – только ли необходимое количество, чтобы дать представление о придуманном несуществующем животном (тело, голова, конечности или тело, хвост, крылья и т.п.): с заполненным контуром, без штриховки и дополнительных линий и частей, просто примитивный контур, – или имеет место щедрое изображение не только необходимых, но “ усложняющих конструкцию дополнительных деталей. Соответственно, чем больше составных частей и элементов (помимо самых необходимых), тем выше энергия. В обратном случае – экономия энергии, астеничность организма, хроническое соматическое заболевание. (То же самое подтверждается характером линии – слабая паутинообразная линия, “возит карандашом по бумаге”, не нажимая на него.) Обратный же характер линий – жирная с нажимом – не является полярным: это не энергия, а тревожность. Следует обратить внимание на резко продавленные линии, видимые даже на обратной стороне листа (судорожный, высокий тонус мышц рисующей руки) – резкая тревожность. Обратить внимание также на то, какая деталь, какой символ , выполнен таким образом (т.е. к чему привязана тревога).

Оценка характера линии

   Здесь следует обратить внимание на дубляж линии, небрежность, неаккуратность соединений, “островки” из находящих друг на друга линий, зачернение частей рисунка, “запачкивание”, отклонение от вертикальной оси, стереотипности линий и т.д.). Оценка осуществляется так же, как и при анализе пиктограммы. То же – фрагментарность линий и форм, незаконченность, оборванность рисунка.

Характер животного

   Тематически животные делятся на угрожаемых, угрожающих, нейтральных (подобия льва, бегемота, волка или птицы, улитки, муравья, либо белки, собаки, кошки). Это отношение к собственной персоне и к своему “Я”, представление о своем положении в мире, как бы идентификация себя по значимости (с зайцем, букашкой, слоном, собакой и т.д.). В данном случае рисуемое животное – представитель самого рисующего.Уподобление рисуемого животного человеку, начиная с постановки животного в положение прямохож-дения на две лапы, вместо четырех или более, и заканчивая одеванием животного в человеческую одежду (штаны, юбки, банты, пояса, платье), включая похожесть морды на лицо, ног и лап на руки, – свидетельствует об инфантильности, эмоциональной незрелости, соответственно степени выраженности “очеловечивания” животного. Механизм сходен (и параллелен) аллегорическому значению животных и их характеров в сказках, притчах и т.п.

Разное

   Степень агрессивности выражена количеством, расположением и характером углов в рисунке, независимо от их связи с той или иной деталью изображения. Особенно весомы в этом отношении прямые символы агрессии – когти, зубы, клювы.. Следует обратить внимание также на акцентировку сексуальных признаков – вымени, сосков, груди при человекоподобной фигуре и др. Это отношение к полу, вплоть до фиксации на проблеме секса.

Фигура круга (особенно – ничем не заполненного) символизирует и выражает тенденцию к скрытности, замкнутость, закрытость своего внутреннего мира, нежелание давать сведения о себе окружающим, наконец, нежелание подвергаться тестированию. Такие рисунки обычно дают очень ограниченное количество данных для анализа.

Обратить внимание на случаи вмонтирования механических частей в тело “животного” – постановка животного на постамент, тракторные или танковые гусеницы, треножник; прикрепление к голове пропеллера, винта; вмонтирование в глаз электролампы, в тело и конечности животного – рукояток, клавиш и антенн. Это наблюдается чаще у больных шизофренией и глубоких шизоидов.

Творческие возможности выражены обычно количеством сочетающихся в фигуре элементов: банальность, отсутствие творческого начала принимают форму “готового”, существующего животного (люди, лошади, собаки, свиньи, рыбы), к которому лишь приделывается “готовая” существующая деталь, чтобы нарисованное животное стало несуществующим – кошка с крыльями, рыба с перьями, собака с ластами и т.п. Оригинальность выражается в форме построения фигуры из элементов, а не целых заготовок.

Название

   Название может выражать рациональное соединение смысловых частей (летающий заяц, “бегекот”, “мухожер” и т.п.). Другой вариант – словообразование с книжно-научным, иногда латинским суффиксом или окончанием (“ратолетиус” и т.п.). Первое – рациональность, конкретная установка при ориентировке и адаптации; второе – демонстративность, направленная главным образом на демонстрацию собственного разума, эрудиции, знаний. Встречаются названия поверхностно-звуковые без всякого осмысления (“лялие”, “лиошана”, “гратекер” и т.п.), знаменующие легкомысленное отношение к окружающим, неумение учитывать сигнал опасности, наличие аффективных критериев в основе мышления, перевес эстетических элементов в суждениях над рациональными.

Наблюдаются иронически-юмористические названия (“риночурка”, “пузыренд” и т.п.) – при соответственно иронически-снисходительном отношении к окружающим. Инфантильные названия имеют обычно повторяющиеся элементы (“тру-тру”, лю-лю”, “кускус” и т.п.). Склонность к фантазированию (чаще защитного порядка) выражена обычно удлиненными названиями (“аберосинотиклирон”, “гулобарниклета-миешиния” и т.п.).

Стенограмма

— Движение Доминиона — Документальный фильм о правах животных DOMINION

Скачать в формате PDF

Ссылки доступны на странице «Факты и ссылки».

ВВЕДЕНИЕ
Рассказывает Хоакин Феникс

Большинство людей считают себя любителями животных.

Мы узнаем их не как объекты, а как сложные существа, с которыми мы разделяем планету, нашу жизнь, наши дома. Мы получаем удовольствие от их удовольствия, мы мучаемся из-за их боли, прославляя их интеллект и индивидуальность, приветствуя их в наших семьях или почитая их в их естественной природе.

Мысль о необоснованном причинении им вреда или страданий для многих невыносима.

Итак, для тех, кто кормит, одевает или развлекает нас, мы выбираем повествование, которое минимизирует или полностью устраняет их страдания. Живописная семейная ферма и знаменитый любящий фермер. Гуманный и безболезненный конец, небольшая цена, которую мы с радостью заплатили за хорошо прожитую жизнь. Договоренность о взаимной выгоде.

Скрытые этим повествованием, вне поля зрения, вне разума, они перестают быть личностями, более известными как домашний скот, безликими единицами производства в системе непостижимого масштаба, освобожденными от законов жестокости, которые защищают наших домашних животных.

Их страдания невидимые и неслыханные. Их ценность определяется только их полезностью для человечества, обоснованной верой в наше собственное превосходство и представлением о том, что могущество равняется правде.

Понятие, которое следует подвергнуть сомнению.

PIGS
Рассказывает Руни Мара

В 1960-х годах в Австралии насчитывалось около 50 000 свиноферм. Сегодня их меньше 1400, однако общее количество свиней, разводимых и забитых на пищу, увеличилось.По состоянию на 2015 год на 49 ферм приходилось 60% всего поголовья свиней в стране.

Большинство свиней, выращиваемых для кормления, начинают свою жизнь в стойле для опороса, небольшом загоне с центральной клеткой, предназначенном для того, чтобы поросята могли кормиться от своей матери — свиноматки, не позволяя ей передвигаться.

Частота появления мертворожденных или мумифицированных поросят обычно увеличивается с каждым пометом, так как тела свиноматок становятся менее способными выдерживать большие размеры подстилки, поощряемые отраслью.

10–18% рожденных живыми поросят не доживают до отъемного возраста, умирают от болезней, голода или обезвоживания, или случайно оказываются раздавленными матерями, попавшими в ловушку.

В список погибших включены корни помета, которые считаются экономически нежизнеспособными и убиты персоналом.

Тех, кто выживает в первые несколько дней, калечат без обезболивания, им вырезают хвосты и зубы, чтобы уменьшить каннибализм … и вырезают куски из ушей или вставляют метки для идентификации.

Их берут от матерей в возрасте 3-5 недель. Большинство из них предназначены для убоя примерно через 5 месяцев.

По мере старения их переводят в загоны, где они собираются вместе в собственном мусоре.

Сидя в этих маленьких загонах на несколько месяцев, они обращаются к каннибализму.

Некоторых свиней оставляют на замену свиноматкам в племенном цикле, тщательно отбирая их с учетом их предполагаемой способности производить большие пометы.

Большинство свиноводческих хозяйств используют искусственное осеменение, а не естественное спаривание, поскольку оно позволяет им оплодотворить до 30-40 свиней от одного хряка. Рабочие собирают сперму, мастурбируя хряков, а затем вводят ее свиноматкам через приподнятый катетер, известный как свиной аист.

Хряков по-прежнему используют для физического возбуждения самок перед осеменением, но им мешают на самом деле спариваться.

При подтверждении беременности свиноматку переводят в один из двух типов закрытых помещений на весь срок ее 16-недельной беременности.

Стойки для свиноматок представляют собой индивидуальные клетки, в которых, как и в стойлах для опороса, свиноматки могут сделать только один или два шага вперед или назад и не могут развернуться. Хотя большинство свинарников в Австралии постепенно отказываются от содержания свиноматок, стойла для свиноматок остаются полностью законными без каких-либо штрафов за содержание свиноматок в них дольше, чем добровольно установленный предел в 5 дней.Это похоже на очевидный «запрет» на стойла для свиноматок в Европейском Союзе, который фактически разрешает содержание в них до 4 недель на одну беременность.

Если у свиней есть выбор, они могут облегчиться подальше от места, где они спят и едят.

Чрезвычайное заключение уносит тяжелый психологический урон.

В альтернативном варианте, групповом содержании, беременных свиней запаковывают в небольшие бетонные загоны. Недостаток места и раздражителей может привести к тому, что свиньи станут агрессивными.

Тех, кто попадает в канализационную систему через щели в полу, оставляют голодать или тонуть в реке отходов.

За неделю до родов их переводят в клетки для опороса, где они будут оставаться в течение следующих 4-6 недель.

Невозможность упражнений приводит к ослаблению мускулов свиноматки до такой степени, что ей становится трудно вставать или лежать…

Чтобы свести к минимуму потерю мышечной массы, рабочие заставляют ее вставать хотя бы раз в день.

У нее пролежни от твердых поверхностей…

Или пролапсы и инфекции в результате физического напряжения повторных опороса и плохих условий содержания…

… что также может привести к частичному параличу, не позволяя ей дотянуться до еды и воды перед ее клеткой…

… или даже может привести к смерти в клетке.

Она будет беспомощно смотреть, как ее поросята заболевают и умирают, или как рабочие будут калечить и оскорблять их, пока их не заберут у нее.

Она выдержит этот цикл четыре раза в течение двух лет, прежде чем ее заменит и отправят на убой или убьют и выбросят на место.

Термин «выращивание на свободном выгуле» просто означает, что свиньи рождаются на улице в небольших хижинах, но затем проводят остаток своей жизни в сараях, сталкиваясь с теми же проблемами перенаселенности, здоровья и поведения, что и на любой свиноферме, при этом оставаясь по колено в сараях. собственные отходы.

Способных прожить 10–12 лет, большинство свиней забивают в возрасте 5–6 месяцев, упаковывают в грузовики на свиноферме и часто перевозят на большие расстояния до бойни без еды, воды и защиты от сильной жары или холода.

На бойне они будут ждать в небольших бетонных или металлических загонах, как правило, всю ночь, все еще без еды и с ограниченным доступом к воде или без него.

Утром их насильно загоняют на площадку для уничтожения, часто с помощью электрического толкателя.

Самый распространенный метод оглушения и умерщвления свиней в Австралии, используемый на всех крупных свиноводческих скотобойнях и рекламируемый как наиболее «гуманный» и эффективный вариант, — это камера с углекислотным газом. Система вращающихся клеток опускает полностью находящихся в сознании свиней по две или три за раз в сильно концентрированный газ, который начинает обжигать им глаза, ноздри, пазухи, горло и легкие, задыхая их.

Более низкая концентрация углекислого газа вызовет меньше боли и стресса, но потребует гораздо больше времени, чтобы привести свиней в бессознательное состояние, что сделает это экономически невыгодным.

Свиноматок отправляют в кабины камер по одной. Из-за их размера газ менее эффективен, некоторые выходят частично в сознании, и в этом случае они также могут быть впоследствии оглушены электрическим током.

С другой стороны камеры свиньям перерезают глотки и выкачивают кровь.

Электрическое оглушение, используемое на небольших бойнях, имеет гораздо более высокую вероятность отказа. Неправильная сила тока, расположение парализатора или длительность применения, или неспособность перерезать горло достаточно быстро может привести к тому, что свинья будет просто парализована и не сможет двигаться, но при этом будет чувствовать боль, или придет в сознание во время кровотечения.Мигание и ритмичное дыхание — сильные индикаторы сознания.

Один за другим они снимаются друг напротив друга.

Пистолеты с несъемным болтом — еще один вариант, используемый на небольших бойнях. Проникающая разновидность стреляет стержнем через череп животного, чтобы навсегда повредить его мозг, не давая ему прийти в сознание, в то время как непробивные болт-пистолеты наносят травмы тупым предметом, очень похожие на молоток. Для эффективного оглушения необходимо, чтобы ружье было расположено под углом и расположено в нужной части головы, что часто бывает затруднительно, если голова не ограничена.

Наблюдая за тем, как убивают своих однопометников раньше, или почувствовав запах крови на полу, они не хотят заходить в бокс.

Пистолет для болтов еще менее эффективен для крупных свиней, например свиноматок. Для них в качестве альтернативы может быть использована винтовка — в этом случае точность еще сложнее.

На некоторых бойнях можно просто использовать кувалду.

После обескровливания свиней опускают в резервуары с кипящей водой, чтобы смягчить кожу и удалить щетину и волосы.

Те, кого не оглушили и не убили должным образом, в конце концов утонули.

Отходы — шкуры, кости, копыта, кишки и жир — доставляются на перерабатывающий завод, где они превращаются в сало (или свиной жир) для использования в пищевых продуктах, мыле, смазочных материалах и биотопливе или в других продуктах, таких как желатин.

Дикие свиньи были завезены в Австралию с Первым флотом и сейчас занимают около 40 процентов территории страны, в основном в Квинсленде и Новом Южном Уэльсе.Практика «преследования свиней» предполагает, что охотники выпускают агрессивно обученных собак, чтобы выслеживать, преследовать и забивать живых свиней, удерживая их прижатыми до тех пор, пока охотники не смогут догнать и прикончить их ножом.

Несмотря на то, что дикие свиньи объявлены животными-вредителями, охотники нередко выпускают молодых поросят в национальные парки, чтобы те могли вернуться позже, чтобы поохотиться.

КУРИЦЫ-КУРАЧКИ
Рассказывает Хоакин Феникс

У кур-несушек жизнь начинается в инкубатории.

Яйца, собранные от родительских птиц, хранятся, инкубируются и вылупляются в течение 31 дня.

Цыплята-самцы и самки сортируются на отдельные конвейерные ленты. Здесь, в крупнейшем инкубатории Австралии, они были генетически модифицированы, чтобы сделать самцов другого цвета, чем самок, что позволяет быстро сортировать.

Не имея возможности производить яйца сами и являясь совершенно другой породой по сравнению с цыплятами, используемыми для мяса, цыплята-самцы считаются отходами, как и любые самки, воспринимаемые как уродливые или слабые.Они сортируются на отдельной конвейерной ленте от здоровых самок в первый день их жизни и отправляются в промышленный блендер, называемый мацератором. Эта практика является законной и называется гуманной в RSPCA. В небольших инкубаториях можно использовать углекислый газ или просто задушить цыплят в полиэтиленовых пакетах.

Все коммерческие фермы по выращиванию яиц — клеточные, сарайные, свободные, органические, одобренные RSPCA — предусматривают умерщвление цыплят-самцов, в общей сложности около 12 миллионов цыплят в год в Австралии.

Тем временем здоровые самки продолжают мучительные машины для снятия клювов. Куры очищают от клюва, чтобы свести к минимуму вред, который они могут нанести друг другу в условиях птицефермы.

Затем цыплят складывают в лотки и перевозят грузовиками на фермы по выращиванию молодняка, где они остаются в течение 4 месяцев, пока не начнут откладывать яйца.

Небольшое количество самцов будет избавлено от мацератора, чтобы они могли служить с отобранными курицами в качестве родительских птиц, откладывая и оплодотворяя яйца для инкубатория.

Остальные куры отправлены на яичные фермы по всей стране.

Около двух третей из 18 миллионов кур-несушек в Австралии в любой момент времени содержатся в аккумуляторных клетках. В каждом загоне может содержаться до 100 000 кур, от 4 до 20 кур на клетку, каждая курица имеет пространство меньше листа бумаги формата А4.

Они не могут расправить крылья или проявить какое-либо естественное поведение, такое как купание в пыли, сидение на насесте или поиск пищи.

Благодаря десятилетиям генетических манипуляций и селекционного разведения, они откладывают яйца почти каждый день, в общей сложности до 330 яиц в год, по сравнению с 10-15, которые откладывает дикая курица.

С возрастом плохие условия окружающей среды и физический стресс из-за частой откладки яиц сказываются на их здоровье, о чем свидетельствует постепенная потеря всех их перьев и все более бледный гребешок, свидетельствующий об анемии.

Смерть внутри клеток является обычным явлением, и из-за размера помещений их можно легко пропустить в течение длительного периода времени, что заставляет выживших кур жить на гниющих тушах.

Более новые системы клеток собирают фекалии на конвейерные ленты под клетками, тогда как более старые системы позволяют им скапливаться под ними.Птицы, которым удается выбраться из клеток, остаются умирать в этих навозных ямах.

В возрасте 18 месяцев, после того как они прожили в клетке более года, их яйценоскость замедлится достаточно значительно, чтобы их можно было считать «потраченными». Их «обезлюдели» — их вытаскивают из клеток и запихивают в ящики, что часто приводит к переломам костей из-за грубого обращения. Их либо умерщвляют газом, а затем закапывают или перерабатывают, либо отправляют на бойню и заменяют новыми 4-месячными курами.

До 2016 г. не существовало национальных стандартов в отношении того, что может считаться яйцом от кур свободного выгула. Теперь фермы свободного выгула ограничены максимальной плотностью на открытом воздухе в 10 000 кур на гектар — одна курица на квадратный метр, — хотя они по-прежнему проводят большую часть своего времени в больших сараях.

Куры естественным образом образуют и живут в социальной иерархии, называемой иерархией, но способны распознать только около 100 других кур. В сараях или загонах с тысячами других птиц их неспособность поддерживать эту иерархию приводит к хаосу.На слабых птиц придирают, и у них нет возможности спастись. Заболевание быстро распространяется. Вспышка птичьего гриппа на яичной ферме в Новом Южном Уэльсе в 2013 году, предположительно заразившаяся от диких уток, привела к выбраковке более 400 000 кур, выращиваемых на ферме.

Многие из более крупных ферм свободного выгула также имеют садковые фермы на одном участке, где яйца от обоих попадают в один и тот же упаковочный цех. Анализ данных Egg Corporation за 2009 год показал, что каждое шестое яйцо, проданное на «свободном выгуле», было снесено курицей в клетке или стойле.

Как и на клеточных фермах, кур на свободном выгуле отправляют на убой с 18-месячного возраста, что намного меньше их 10-летней естественной продолжительности жизни. На бойне кур сковывают вверх ногами на движущейся веревке. Их опускают в ванну с наэлектризованной водой, чтобы оглушить их, прежде чем им перережут горло автоматическим лезвием, но если они поднимут голову, они могут пропустить оглушающую ванну, повернувшись лицом к лезвию в полном сознании и в конечном итоге утонув в кипящей воде ниже. процесс.

Забитые куры в основном превращаются в низкосортные куриные мясные продукты, такие как фарш, или перерабатываются в муку из птицы для использования в кормах для домашних животных или для повторного скармливания животным на фермах.

БРОЙЛЕР (МЯСО) КУРИЦЫ
Передал Крис Делфорс

Куры, разводимые на мясо, известные как бройлеры, крупнее яичных несушек и созданы благодаря вмешательству человека для быстрого роста до огромных размеров.

Их короткая жизнь начинается в инкубатории для бройлеров.Хотя в этой отрасли используются как самцы, так и самки, в этих инкубаториях также используются мацераторы… или газовые камеры для слабых или деформированных птиц, которые, как ожидается, не доживут до убойного веса.

Выживших суточных цыплят доставляют на бройлерные фермы.

По состоянию на 2016 год в Австралии насчитывалось 530 бройлерных ферм, на которых в любой момент времени содержалась общая популяция около 90 миллионов птиц.

Каждый сарай вмещает от сорока до шестидесяти тысяч.

В течение первой недели жизни нормальный уровень смертности составляет 4-6%, что соответствует от 1600 до 3600 мертвых цыплят на птичник, примерно 200-500 цыплят в день.Большинство из них будут найдены мертвыми рабочими, другие, которые кажутся слабыми или ранеными, будут убиты или выброшены живыми.

По мере роста они быстро заполняют доступное пространство в сарае, живя среди скоплений собственных фекалий. Смертность снижается, но смертельные случаи по-прежнему происходят регулярно.

Недалеко от сараев тела складывают и компостируют.

Селективное разведение, отсутствие физических упражнений из-за перенаселенности, искусственное освещение и интенсивное использование антибиотиков, улучшающих усвояемость корма, привели к тому, что современные цыплята-бройлеры достигли готового к убою веса 3 кг всего за 35 дней, что значительно выше естественного пика. 2кг за 96 дней.

Их телам очень трудно справляться с этим экстремальным физическим давлением, что делает скелетные, сердечные и метаболические нарушения обычным явлением.

Из тех, кто попадает на бойню, 90% имеют заметную ненормальную походку.

Навесы не моются в течение всего 5-7-недельного цикла, что вызывает высокую концентрацию аммиака, который может вызвать раздражение и ожог кожи и затруднить дыхательную систему.

Цыплятам, продаваемым под этикеткой, одобренной RSPCA, дают одну жердочку, идущую по центру птичника, но в остальном условия и процесс идентичны.

Депопуляция происходит в условиях низкой освещенности посреди ночи, когда птицы наиболее спокойны и не видят происходящего. Обычно бригады по контракту ловят их вручную и помещают в пластиковые ящики, а затем ящики грузят на грузовики для транспортировки на бойню.

Как и кур-несушек, их подвешивают грубо за ноги на автоматизированную стропу…

… затем окунуться в электрошоковую ванну, и все птицы, которые поднимут голову, продолжат движение в полном сознании…

… до того, как им перерезали глотку вращающимся лезвием.

Рабочий с ножом стоит рядом с птицами, которые не успевают по первому лезвию.

ТУРЦИЯ
Передал Kat Von D

Выращенные на фермах индейки были селективно выращены для того, чтобы вырасти настолько большими, что они не могут спариваться естественным путем, поэтому индустрия индейки полагается на искусственное осеменение, показанное здесь на ферме свободного выгула в Виктории, хотя и считается стандартной практикой в ​​небольшом количестве австралийских инкубаториев для индейки.

Очень любознательные птицы, их выращивают почти так же, как и бройлеров, из расчета 10-14000 на птичник, что соответствует шести индюшатам на квадратный метр.

Генетические изменения и искусственное освещение для максимального кормления способствуют увеличению скорости роста вдвое по сравнению с их дикими собратьями. Они быстро достигают веса, который их ноги не могут выдержать.

Живя в собственном мусоре, раны могут быстро инфицироваться. Частота смертей увеличивается с возрастом до 3-5% для женщин ближе к концу их 12-недельной продолжительности жизни в сараях и 10-12% для мужчин ближе к концу их 16-недельной продолжительности жизни.

Мертвых птиц собирают и выбрасывают как мусор.

Остальных доставляют на бойню, где их бьют кулаками, ногами и избивают, приковывая их вверх ногами к линии убоя.

На бойнях меньшего размера можно использовать отдельные конусы для убоя.

Ежегодно в Австралии убивают от 4 до 5 миллионов человек, большая часть которых покупается и потребляется перед Рождеством. В остальное время года или даже на годы они замораживаются.

УТКИ
Рассказывает Сэди Синк

Как и в случае с цыплятами-бройлерами, мацераторы по-прежнему используются в инкубаториях для уток для слабых или деформированных утят, которые, как ожидается, не выживут в период выращивания.

Утиное разведение во многом схоже с выращиванием бройлеров и индюшат. Утята, доставленные из инкубатория в первый день их жизни, растут ускоренными темпами всего за 7 недель и размещаются вместе с тысячами других в редко очищаемых сараях, где болезни и смертельные случаи являются обычным явлением.

Утки — водные животные, поэтому у них от природы слабые суставы ног и бедер, поскольку им обычно не нужно удерживать вес тела в течение длительного периода времени. Там, где есть поверхностная вода, утки будут плавать в течение длительного времени, снижая нагрузку на их мускульную и скелетную систему.Однако при отказе от поверхностных вод, как на большинстве австралийских ферм, включая те, которые помечены как свободные выгулы, утки должны удерживать весь вес своего тела на ногах до 7 недель — часто намного дольше для уток, содержащихся для разведения, — что приводит к хромоте и вывихам. суставы и сломанные кости.

Селективное разведение, направленное на более быстрое и тяжелое выращивание уток, в сочетании с недостаточным образованием костной ткани их ювенильной скелетной системы, еще больше увеличивает нагрузку на их и без того слабые суставы ног и бедер.

Без воды, даже для того, чтобы окунуть голову, утки не могут содержать в чистоте глаза, ноздри и перья, что увеличивает риск заболеваний или слепоты. Жизнь в собственных отходах и связанный с этим высокий уровень аммиака может вызвать болезненные ожоги на ногах и усугубить раны и травмы. Эти плохие условия окружающей среды и перенаселенность обычно приводят к неврологическим заболеваниям, когда нарушение координации движений, тремор головы и шеи сменяются параличом, судорогами, комой и смертью.

Когда рабочие находят больных или раненых уток, их убивают, сломав им шеи.

Через 49 дней их собирают в ящики и грузят вилочным погрузчиком на грузовики для отправки на бойню.

Многие из них не выживают.

Так же, как цыплят и индюков, уток подвешивают за ноги на линии убоя.

Типичная электрошоковая ванна, опять же, не всегда эффективна, так как многим птицам перерезают горло, когда они находятся в сознании, и в конечном итоге умирают от потери крови или утопления в резервуаре для ожогов.

По состоянию на 2018 год три штата Австралии запретили рекреационную стрельбу диких уток из соображений жестокости, но в Виктории, Южной Австралии и Тасмании эта практика остается законной в течение открытого сезона каждый год.

Популяция водоплавающих птиц в Виктории неуклонно сокращается, достигнув в 2017 году самого низкого показателя за 34 года, однако охота продолжается под оправданием расширения бизнеса в сельских общинах, окружающих водно-болотные угодья, и общего удовольствия и удовлетворения, которое испытывают охотники.

Оценки компьютерного моделирования и наблюдения спасателей на заболоченных территориях показывают, что охотники на уток оставляют ранеными и непойманными, по крайней мере, столько же птиц, сколько они убивают и ловят, что составляет многие тысячи уток, которые страдают или умирают от невылеченных травм.

Кроме того, тела многих охраняемых законом видов, таких как редкая и находящаяся под угрозой исчезновения веснушчатая утка, были извлечены из водно-болотных угодий во время сезона охоты, при этом стрелки либо не могли идентифицировать вид перед стрельбой, либо просто стреляли в любом случае.

Около 80% мирового пуха и перьев, используемых для изготовления курток, спальных мешков и постельного белья, поступает из Китая, где живое ощипывание уток и гусей остается обычной практикой. Это включает в себя болезненное выдергивание перьев из кожи птиц, оставляющее открытые и кровоточащие раны, процесс повторяется несколько раз, прежде чем их окончательно зарежут. Даже поставщики, претендующие на сертификацию по Стандарту ответственного пуха, занимались сбором урожая. В конце концов, невозможно узнать, поступают ли те или иные пуховые продукты в Австралии или где-либо еще с этих ферм.

COWS
Рассказывает Хоакин Феникс

Как и люди, коровы — существа по материнской линии, которые образуют тесные связи со своими детенышами и должны рожать, чтобы давать молоко.

На молочных фермах их ежегодно насильственно оплодотворяют, чтобы молоко продолжало течь, обычно путем искусственного осеменения, а не естественного спаривания, которое требует, чтобы работники вставляли руку в задний проход коровы, чтобы удерживать ее шейку матки, одновременно вводя ей сперму, собранную из бык.

Их телят забирают через несколько часов после рождения, чтобы молоко, предназначенное для них, можно было собрать и продать для употребления в пищу.

В течение нескольких дней после разлуки матери день и ночь рычат в поисках телят. Известно, что они скорбят несколько дней или даже недель.

Телята-самцы, называемые телятами, считаются бесполезными для молочной промышленности, потому что они никогда не смогут давать молоко. Их держат в изоляции в течение пяти дней, а затем загоняют в грузовик и отправляют сначала на скотобойню, либо прямо на бойню.Им могут отказывать в еде в течение последних 30 часов их жизни.

Голодные, сбитые с толку и отчаянно нуждающиеся в любви, они плачут о своих матерях из загонов скотобойни, где их убьют на следующее утро.

Тех, кто избегает оглушения или кого-то неправильно оглушают, убивают, пока они находятся в сознании.

Около 700 000 телят мужского пола ежегодно забивают как отходы молочной промышленности только в Австралии.

Небольшое количество телят-самцов выращивают на более длительный срок, до 20 недель, для забоя на телятину.

Телят также держат изолированно, кормят заменителем сухого молока, чтобы в конечном итоге присоединиться к циклу после оплодотворения.

2-3 раза в день кормящих коров загоняют в доильный зал и подключают к промышленным доильным аппаратам.

В естественных условиях могут жить до 20 лет. На молочных фермах они служат всего от 4 до 8 лет, некоторые из них, известные как депрессанты, поддаются давлению непрерывной пропитки и производят в 10 раз больше молока, чем обычно, а остальное отправляют на убой, когда их производство молока начинает снижаться. или они становятся слишком раненными, чтобы продолжать.

Искусственное осеменение предпочтительнее естественного спаривания и в мясной промышленности,

Телята, выращенные на говядину, подвергаются различным болезненным хирургическим процедурам без анестезии, в том числе отслаиванию сои или обезглавливанию…

… ушные бирки…

… кастрация, либо с помощью лезвия, либо с помощью практики, называемой кольцом, когда резинка плотно зажимается вокруг основания яичек, ограничивая кровавый удар, пока в конечном итоге они не сгниют и не отпадут.

… и клеймение горячим утюгом.

Заболевшие, как правило, не имеют ветеринарной помощи, и их состояние быстро ухудшается.

Лекарства, включая антибиотики, гормоны роста, витамины и пищевые добавки, а также прогестерон для поддержания беременности, вводятся… или вводятся вагинально… или перорально.

Эти и другие регулярные процедуры, такие как сортировка или проверка на беременность, показывают, что скот насильно загоняют через систему двора в ограничительный ящик, называемый раздавливанием для индивидуального внимания.

Около 40% от общего объема поставок говядины в Австралии и 80% говядины, продаваемой в крупных местных супермаркетах, приходится на крупный рогатый скот, который последние 10-15% своей жизни провел в бесплодных откормочных площадках, где его откармливают зерном перед убоем в 18 лет. месяцев возраста.

Их загоняют в бокс, из которого они отчаянно пытаются сбежать.

Пистолет с неволей — самый распространенный метод оглушения коров, но более мелкие пистолеты особенно часто неэффективны против таких крупных животных, вызывая только боль и ограниченную подвижность, но не потерю сознания.

Винтовка — менее распространенная альтернатива.

После оглушения их сковывают за ногу и подвешивают вверх ногами, перерезав горло.

Помимо того, что они стали свидетелями оглушения, убийства и иногда даже обработки животных, в большинстве случаев они также вынуждены слышать свою судьбу из соседней комнаты.

Для коров, забитых во время стельности, кровь их еще не родившихся телят, известная как эмбриональная телячья сыворотка или эмбриональная бычья сыворотка, имеет большое значение для фармацевтической промышленности и стоит около 600 долларов за литр.

Шкуры коров и телят отправляются на кожевенные заводы для переработки в кожу, большая часть которой затем экспортируется за границу. Существует распространенное заблуждение, что кожа — это побочный продукт мясной промышленности, предназначенный для сокращения отходов; гораздо точнее сказать, что это побочный продукт, иногда более экономически ценный, чем мясо, до такой степени, что все больше и больше животных убивают из-за их кожи, а не из-за их плоти.

Дешевая кожа для обуви, сумок и других аксессуаров также импортируется в Австралию, США и Европу из развивающихся стран, таких как Индия и Бангладеш.

Поскольку коровы считаются священными в индуистской религии, их забой запрещен в 24 из 29 штатов Индии. Для законного забоя кожи на кожу их сначала необходимо перевезти за сотни или тысячи километров в одно из пяти освобожденных штатов или через границу в Бангладеш.

В зависимости от маршрута и количества животных, иногда исчисляемых тысячами, большая часть этого транспорта может перемещаться пешком. В процессе подготовки многим прибивают к ногам туфли и туго продевают веревки через носы.

Измученные, голодные и испытывающие жажду, многие падают в обморок по пути, вынуждены стоять из-за того, что им натягивают веревки для носа или ломают хвосты… бьют палками или втирают им глаза в перца чили.

Всю оставшуюся часть пути они толпятся в грузовики и выходят из них, их рога пронзают и протыкают друг друга, а кости часто ломаются.

Тех, кто попадает на бойню, убивают на глазах у друг друга без предварительного оглушения, с некоторых даже снимают шкуру заживо.

Шкуры пропитаны токсичными химическими веществами, которые, как известно, вызывают рак или хронические кожные заболевания, часто у детей.

Фундаментальная концепция родео — это физический контроль и господство над более слабыми и уязвимыми существами. Телят, быков и быков провоцируют физически для развлечения зрителей примерно на 240 родео-мероприятиях, проводимых по всей Австралии каждый год.

Обычно довольно послушные животные, они за кулисами терпят скручивание хвоста, удары током и другое физическое насилие, а также использование металлических шпор и ремней, затянутых вокруг их живота, чтобы они «вздрагивали» и казались дикими.

Учитывая интегральные факторы интенсивности и риска развлекательного шоу, травмы неизбежны.

Веревка теленка и бычка включает в себя арканирование напуганных животных, когда они пытаются убежать, с их резким рывком, заставляющим их остановиться, что обычно приводит к синякам, сломанным конечностям, рогам и даже шее, разрыву связок, внутреннему кровотечению и повреждению подкожной ткани.

ОВЦА
Рассказывает Руни Мара

«Зимний окот» — это практика оплодотворения овец, чтобы они рожали в зимние месяцы, то есть их ягнят отнимают от груди весной, когда пастбища наиболее плодородны.Хотя это позволяет ягнятам расти быстрее, это приводит к тому, что 10-15 миллионов новорожденных ягнят — примерно каждый четвертый — умирают в течение 48 часов после рождения от воздействия резкого холода. Для овцеводов это по-прежнему предпочтительнее, чем более высокая стоимость кормов при ягнении в теплые месяцы.

Чтобы уменьшить загрязнение и риск забастовки ягнят, доживающих до лета, их хвосты купируют или полностью отрезают, и их часто одновременно закрывают муфтой, что включает срезание кожи вокруг ягодиц и основания ягодиц. их хвост с металлическими ножницами.Если ягнята моложе 6 месяцев, можно делать это без обезболивания. Порода мериносов, на долю которой приходится около 80% шерсти, производимой в Австралии, была выведена выборочно, чтобы иметь морщинистую кожу, что приводит к чрезмерному количеству шерсти, что делает их более склонными к ударам мух и, следовательно, более часто подвергаются мулезированию.

Порода мериносов, на долю которых приходится около 80% шерсти, производимой в Австралии, была выведена выборочно, чтобы иметь морщинистую кожу, что приводит к чрезмерному количеству шерсти, что делает их более склонными к ударам мух.Чтобы уменьшить загрязнение и риск забастовки ягнят, которые доживают до лета, их хвосты купируют или полностью отрезают, и их часто одновременно обрезают, что включает в себя срезание кожи вокруг ягодиц и у основания их ягодиц. хвост с ножницами по металлу. Если ягнята моложе 6 месяцев, можно делать это без обезболивания.

Стрижки овец оплачиваются по количеству стриженных овец, а не по часам, поэтому скорость важнее точности, и нет требований к формальному обучению или аккредитации.

Через несколько лет, когда они больше не могут производить достаточно шерсти, чтобы считаться прибыльными, овец отправляют на убой и продают как баранину, в то время как ягнят, выращенных на мясо, забивают в возрасте от 4 до 12 месяцев, что намного меньше естественного Срок службы 12-14 лет.

19 миллионов из 32 миллионов овец, ежегодно убиваемых в Австралии, проходят через салоярды, посредников между фермами и бойнями или частными покупателями, где животные, включая крупный рогатый скот, телят, лошадей, птицу и свиней, продаются с аукциона.

Тепловой стресс, обезвоживание, истощение или ранее существовавшие условия — частые причины смерти на складах.

Большая часть овец покупается на бойнях на мясо.

Ни одно животное на бойне не идет добровольно на смерть.

Опять же, электрическое оглушение обычно оказывается неэффективным, причиняя только боль и еще больше пугая животных в последние минуты их жизни.

Болт ружья для оглушения ничем не лучше.

Независимо от того, насколько эффективным может показаться оглушение, невозможно с уверенностью сказать, было ли животное полностью лишено сознания и нечувствительности к боли, или оно просто парализовано и не может двигаться, при этом все еще чувствуя все.

В своем страхе и отчаянии некоторым удается ненадолго сбежать, прямо сталкиваясь с телами тех, кто был перед ними, прежде чем их заставляют вернуться в гонку, зная, что они будут следующими.

КОЗЫ
Рассказывает Хоакин Феникс

Коз разводят для производства молока так же, как и коров, их многократно оплодотворяют для обеспечения непрерывного производства молока. Козье молоко является нишевой отраслью в Австралии, насчитывающей всего около 65 ферм, и продается как более легкоусвояемая альтернатива, подходящая для людей с аллергией на коровье молоко.Во всем мире козье молоко пьет больше людей, чем любое другое животное.

Мальчики, неспособные давать молоко, обычно считаются отходами и убиваются на ферме вскоре после рождения, в то время как девочки выращиваются, чтобы сами стать производителями молока, хотя некоторые фермы выращивают и продают лишних коз на мясо.

Кормящих матерей до забоя доят дважды в день в течение десяти лет, при этом на пике их продуктивности вырабатывается 4 литра молока в день, которое продается свежим или превращается в сыр, масло, мороженое, йогурт и мыло.

Австралия — крупнейший экспортер козьего мяса в мире, большая часть которого идет в Соединенные Штаты. Только 10% приходится на коз, разводимых и выращиваемых для производства мяса, остальное — от коз пастбищных угодий, дикой породы, происходящей от сбежавших домашних коз, завезенных в Австралию европейскими поселенцами. Этих козлов отлавливают и транспортируют на откормочные площадки, известные как козьи базы, где их откармливают перед убоем.

Беременных животных, отправляемых на убой, не редкость, и некоторые из них неизбежно рожают в транспортных средствах или загонах незадолго до того, как их отправят на место убоя, а их детенышей оставляют умирать от голода или разоблачения. для своих мертвых матерей.

В тот же день загон заполняется новой тележкой коз.

РЫБА
Передал Крис Делфорс

Лосось — самая популярная рыба в Австралии, которую ежегодно потребляют почти 40 000 тонн. Их разводят в подводных садках в море, в основном в заливах на южном и западном побережьях Тасмании из-за более прохладной воды.

Каждая садка вмещает до 60 000 рыб, перемещаемых из внутреннего инкубатория в возрасте 12-18 месяцев.

По мере роста их пространство в клетках уменьшается до тех пор, пока они не собираются плотно вместе, большинство из них плавают повторяющимися кругами.

Исследование 2017 года лосося, выращенного на фермах в Австралии, Норвегии, Чили, Шотландии и Канаде, показало, что около половины рыбы на этих фермах глухие из-за ускоренного роста, деформирующего их звуковые рецепторы.

В гавани Маккуори на западном побережье Тасмании, внесенной в список всемирного наследия, сосредоточено самое большое количество рыбоводных хозяйств в стране. Три ключевых игрока лососевой отрасли — Тассал, Хуон и Петуна — владеют несколькими фермами, содержащими до двух десятков садков.

За год до сентября 2016 года в гавани оказалось более 21 000 тонн несъеденного корма для рыб и несметное количество экскрементов. Такие высокие уровни загрязнения приводят к опасно низким уровням кислорода в воде и повышенному риску заболеваний, что способствует большому количеству смертей на фермах.

В мае 2015 года уровень кислорода в гавани внезапно упал после шторма, в результате чего около 85 000 лососей задохнулись. В декабре 2017 года в Окхэмптон-Бей к северо-востоку от Хобарта произошел еще один инцидент с массовой смертностью, в результате которого погибло 30000 человек.

Многочисленные случаи массовой смертности с 2015 по 2018 годы были связаны с удушьем из-за недостатка кислорода, человеческой ошибкой и болезнями. Крупнейшая из трех компаний, Tassal, может похвастаться приемлемым показателем выживаемости в 83% на всех своих фермах.

Через 15–18 месяцев в этих океанских садках, когда они достигают веса около 7 кг каждая, лосось всасывается через трубу в промысловое судно, где их либо сразу убивают, либо перевозят живыми в резервуарах на береговые перерабатывающие предприятия.

Баррамунди выращивают во всех штатах Австралии, кроме Тасмании. В более холодных южных штатах они выращиваются вместе с тысячами других в небольших закрытых резервуарах.

…. В северных штатах их выращивают либо в морских садках, похожих на лососевые фермы, либо в открытых прудах, используемых также для выращивания форели.

Предполагаемый гуманный метод добычи и умерщвления выращиваемой рыбы — засасывать ее в ледяную воду, чтобы заморозить до смерти. Отнюдь не гуманная, это медленная и мучительная смерть, иногда на убийство уходит полчаса.

Рыбу, убитую для сашими, японского деликатеса, предпочитающего свежесть, наносят удар ножом в голову перед тем, как разрезать яремную вену, а затем снова помещают в ледяную кашицу, чтобы она истекла кровью.

Магазины и рестораны, в которых выставлена ​​живая рыба, позволяют покупателям, стремящимся к свежести, выбирать, каких особей они хотели бы убить.

Три четверти морепродуктов, потребляемых в Австралии, импортируется из других стран, наиболее значительными из которых являются креветки, лосось и тунец.

Коммерческие рыболовные траулеры тянут за собой большие сети через воду, без разбора захватывая все виды на своем пути.

Около 85% мировых рыбных запасов в настоящее время вылавливаются на полную мощность или истощаются. Ожидается, что при нынешних темпах развития рыбы в наших океанах не будет рыбы к 2048 году.

КРОЛИКИ
Рассказывает Хоакин Феникс

Кролиководство в Австралии находится в тяжелом состоянии.Очень заразные болезни, введенные для искоренения диких кроликов, переносимые насекомыми, могут быстро уничтожить целые фермы, в то время как другие изо всех сил пытаются конкурировать с более дешевой ценой диких кроликов, пойманных и убитых охотниками.

Разведанные на ферме мясные кролики проводят всю свою жизнь в проволочных клетках, подвешенных над полом, и не могут проявлять естественное поведение, например, копать, прятаться или прыгать.

Скопление мочи и фекалий на полу под ними создает высокий уровень аммиака, который может раздражать их дыхательную систему, в то время как проволока обжигает хрупкие скакательные суставы их ног.

Самок кроликов, содержащихся для разведения, можно заставить жить в этих условиях до 56 недель, пока они производят 7 пометов.

Большинство кроликов, способных прожить 8-12 лет, погибают в 12-недельном возрасте.

Ежегодно в Австралии для научных исследований и испытаний используются от 3 до 4 тысяч кроликов, многие из которых поступают с этого предприятия в Виктории.

Большая часть меховых изделий, продаваемых в Австралии, импортируется из-за границы, большая часть которых добывается от кроликов.В 2015 году бренд одежды Akubra закрыл свои операции в Австралии и начал импортировать кроличий мех из Европы.

Австралия также импортирует мех из Китая, крупнейшего в мире экспортера меха. Из десяти кролиководческих ферм, которые посетил тайный следователь, половина занималась выщипыванием меха живых кроликов, процесс повторялся каждые 3 месяца, между тем кролики живут в проволочных клетках. Выщипывание приводит к получению более длинных и прибыльных волос по сравнению со стрижкой или стрижкой.

С возрастом кролики вырастают меньше меха, и в конечном итоге их подвешивают и снимают шкуру для окончательного сбора урожая — иногда еще живыми.

Убито 12 кроликов, чтобы сделать войлок только для одной шляпы Акубра.

Ежегодно во всем мире убивают из-за меха более одного миллиарда кроликов.

MINKS
Передал Руни Мара

Норки — распространенный источник меха для одежды, аксессуаров и даже для наращивания ресниц.Поскольку в Австралии нет норковых ферм, их мех импортируется из-за границы.

В дикой природе они по отдельности занимают до 2500 акров водно-болотных угодий. Несмотря на то, что на протяжении многих поколений их разводили ради меха, эти любознательные и одинокие животные сильно страдали в неволе, теснясь с другими в небольших проволочных клетках, где хроническая скука и стресс приводят к неистовым шагам и членовредительству.

Норки, используемые для разведения, содержатся в этих вольерах от четырех до пяти лет, при этом каждый год рождается помет из 3 или 4 выживших котят, которых забивают и снимают шкуру в возрасте 6 месяцев.

Газовые камеры или закрытые коробки, заполненные выхлопными газами двигателя, являются обычным способом умерщвления норок, но не всегда смертельны, так как некоторые просыпаются, когда их снимают с кожи. Распространенными альтернативами являются анальное поражение электрическим током или просто перелом шеи.

FOXES
Передал Kat Von D

После норки лисы являются вторым животным по выращиванию меха, сталкиваясь со многими из тех же проблем.

Китайские звероводы утверждают, что их маржа настолько мала, что они не могут позволить себе убивать лис, кроме самых жестоких и эффективных методов, когда многих лисиц снимают заживо, чтобы сэкономить время и силы.

Завезенные в Австралию британскими поселенцами для их традиционного вида спорта — охоты на лис, а затем для борьбы с распространением завезенных кроликов, лисы теперь классифицируются как вредители по всей стране, и их численность оценивается более чем в 7 миллионов.

Охота и отстрел лисиц на личных землях законны во всех штатах.

Часто случайно употребляется местными дикими животными или домашними животными, такими как собаки, наиболее распространенным методом сокращения численности является использование 1080 ядовитых приманок.1080 не имеет цвета, запаха и вкуса, вызывая медленную мучительную смерть всех своих жертв.

СОБАКИ
Рассказывает Sia

Хотя Австралия, ЕС и США запретили импорт меха собак и кошек, исследования показывают, что мех китайских собак и кошек часто ошибочно обозначается как лисий, кроличий или норковый. Ежегодно в Китае разводят, крадут из домов или забирают с улицы около 2 миллионов собак и кошек, сжимают их в проволочных клетках и иногда перевозят в течение нескольких дней без еды и воды, где их повешают, обливают кровью, избивают или задушивают до смерти или даже содрали кожу заживо.

Ежегодно в Австралии продается около 450 000 щенков. Около 85% происходят от незарегистрированных заводчиков, но при минимальном контроле даже зарегистрированные заводчики могут управлять фабриками по производству щенков, производя щенков как чистых, так и смешанных пород для продажи в зоомагазинах или в Интернете.

На этих фабриках может быть совершенно законным содержание собаки-матери в бесплодной бетонной камере в сарае в течение 23 часов в день, непрерывно оплодотворяя.

Им отказано в любви и общении, вместо этого они рассматриваются как машины для разведения.

Эти милые щенки, проданные за тысячи долларов, часто страдают от болезней или других состояний здоровья или поведенческих трудностей в результате условий, в которых они находились на ферме, и нескольких поколений селекционного разведения.

Между тем, около 200-250 000 брошенных или бездомных собак и кошек ежегодно подвергаются эвтаназии в приютах и ​​фунтах по всей стране, подавляющее большинство из них здоровые, но нежелательные.

Несмотря на многочисленные широко разрекламированные скандалы последних лет, собачьи бега продолжают оставаться крупной и мощной индустрией азартных игр и развлечений в Австралии и во всем мире.

Быстрое ускорение и экстремальная скорость, с которой эти большие собаки преследуют приманку по трассе, неизбежно приводят к столкновениям, падениям и травмам, наиболее частыми из которых являются разрывы мышц, разрывы связок и переломы предплюсны. Каждую неделю на австралийских следах сообщается о травмах до 200 собак, при этом примерно от 6 до 10 борзых умирают на следе или после этого становятся жертвами.

Грейхаунды имеют естественную продолжительность жизни 12-14 лет. Гоночные борзые начинают свою «карьеру» примерно в 18 месяцев и заканчивают к тому времени, когда им исполняется 4 с половиной года.В Новом Южном Уэльсе их карьера длится в среднем всего 363 дня.

Просочившийся внутренний документ борзых Австралазии показывает, что ежегодно в Австралии убивают от 13 000 до 17 000 молодых борзых. Кроме того, данные свидетельствуют о том, что из 97000 борзых, выведенных в Новом Южном Уэльсе за 12-летний период до 2016 года, 50-70% или более были убиты, потому что считались слишком медленными или непригодными для гонок.

Появляется все больше свидетельств того, что борзых часто убивают бесчеловечными способами, при этом дрессировщики предпочитают более дешевый вариант — выстрелы или дубинки, а не оплату услуг ветеринара для эвтаназии.Затем тела собак могут быть выброшены в ямы на частных владениях или разбросаны в зарослях кустарников.

Использование живых животных в качестве наживки при дрессировке борзых для преследования приманки, хотя и незаконно, было широко распространено: по данным опроса Нового Южного Уэльса 2015 года, от 85 до 90 процентов дрессировщиков участвуют в этой практике. Неисчислимое количество напуганных поросят, кроликов, опоссумов, кур и котят были разорваны на части, чтобы научить в остальном нежных, сонных животных бегать по дорожке.

ЛОШАДИ
Рассказывает Сэди Синк

Лошади не достигают зрелого скелета примерно до 5-летнего возраста, но обычно их карьера в гонках начинается, когда им всего 2 года, из-за соблазна более высоких призовых и более быстрой окупаемости инвестиций. Это резко увеличивает риск травм, при этом до 80% страдают болезненностью голени или заболеванием тыльной части пястной кости.

Исследователи из Мельбурнского университета обнаружили, что после забега 56% лошадей имеют кровь в дыхательном горле, а у 90% кровь находится глубже в легких.Другое исследование обнаружило кровотечение в легких у 95% лошадей, проверенных во время двух послеконковых осмотров, в то время как другое исследование обнаружило язву желудка у 86%, частота и тяжесть которых увеличивалась по мере развития тренировок и скачек. Примерно у трети молодых скаковых лошадей на тренировках развивается воспаление нижних дыхательных путей в результате неестественных условий жизни в небольших конюшнях на срок до 22 часов в день, где они подвергаются воздействию высоких уровней пыли, аллергенов и эндотоксинов.

Обследование после забега выявило высокую распространенность крови в дыхательных путях и легких лошадей, а также увеличение частоты и тяжести язв желудка по мере развития тренировок и скачек.

На трассе их мучительно бьют, чтобы подбодрить более высокие скорости. Правила соревнований ограничивают порку на ранних этапах забега, но на последних ста метрах, когда лошади утомлены и менее способны реагировать, ограничений нет, и их часто безжалостно бьют до финиша.

Прыжки в прыжках по статистике в 19 раз опаснее плоских, часто случаются сильные падения. Примерно половина лошадей, участвующих в скачках каждый год в Австралии, исчезает, незаметно покидая индустрию при неизвестных обстоятельствах, никогда не участвуя в гонках и о них больше не слышно, или убиваясь на трассе, с зелеными экранами, возведенными, чтобы скрыть взгляд посетителей скачек.

На национальном уровне ежегодно регистрируется 11–12 000 скаковых лошадей, в то время как примерно столько же покидает отрасль, в основном из-за плохой работы, неподходящего темперамента или травм. Многие из них попадают в мясные лавки, где их убивают ради корма для домашних животных или для кормления гоночных борзых.

Остальные попадают на одну из двух лицензированных конных бойней, которые экспортируют конину для употребления в пищу.

Лошадей также используют на родео.

КАМЕЛЫ
Передал Кэт фон Д

верблюдов были привезены в Австралию в 1800-х годах для использования в качестве транспорта, а затем выпущены в дикую природу после появления автомобилей.К 2008 году их население оценивалось примерно в 600 000 человек, что привело к тому, что правительство разработало проект по выбраковке, который фактически сократил их численность вдвое, в первую очередь за счет отстрела их с вертолетов, а также за счет их сбора и перевозки на скотобойни для экспорта в Соединенные Штаты и Ближний Восток. Восток, практика, которая продолжается и сегодня.

Всю свою жизнь они свободно бродили без контакта с людьми, поэтому внезапное заключение и насильственное обращение с ними совершенно чужды им.

Все большее количество верблюдов, пойманных в дикой природе, направляется на верблюжьи молочные фермы — развивающуюся отрасль, которая позиционирует себя как более здоровую альтернативу продуктам из коровьего молока и менее расточительную альтернативу выбраковке с воздуха.

MICE
Рассказывает Сэди Синк

Ежегодно в Австралии для исследований и испытаний используется от 6 до 10 миллионов животных, в том числе 1-2 миллиона мышей. Многие из этих экспериментов включают живые хирургические процедуры без обезболивания, воздействия токсинов или болезней.

В конечном итоге все мыши, подвергшиеся исследованию или тестированию, будут убиты, поскольку их нельзя выпустить из лаборатории по закону. Выделение углекислого газа или передозировка анестезирующего изофлурана посредством газа или инъекции — два распространенных способа умерщвления мышей, когда они выполнили свою задачу.

В наши дни научные исследования и открытия связаны с нюансами физиологии человека, для которых животные не являются подходящими моделями. Исследование, проведенное Национальным институтом здравоохранения США в 2015 году, показало, что ошеломляющие 95% всех лекарств, которые были признаны безопасными и эффективными при испытаниях на животных, не проходят испытания на людях.Некритическое использование результатов испытаний на животных без учета потенциально более точных альтернатив, использующих человеческие ткани и клетки, трупы, симуляторы и вычислительные модели, могло стоить здоровья и жизней десятков тысяч людей… и миллиардов животных.

ЭКЗОТИЧЕСКИЕ ЖИВОТНЫЕ
Рассказывает Хоакин Феникс

Сотни макак, мартышек и бабуинов ежегодно поставляются австралийским исследовательским лабораториям тремя учреждениями по разведению, финансируемыми государством.Скрытые от глаз общественности за усиленной охраной, эти лаборатории проводят различные биомедицинские эксперименты над этими очень умными животными, прежде чем выбросить их.

Другие приматы содержатся в неволе в цирках, где их освобождают от крайней скуки в клетке только для того, чтобы выступать перед зрителями…

… или в зоопарках.

Пленные львы и тигры в Австралии служат той же цели, живя жизнью скуки и разочарования для развлечения платных посетителей.Хотя на поверхности экспонаты, демонстрирующие этих и других экзотических животных, могут вызывать удивление и волнение, немногие посетители наблюдают достаточно долго, чтобы распознать повторяемость их поведения, признаки психологического состояния, общего для всех животных в неволе, получившего название зоохоз.

В тропической жаре Квинсленда Sea World является местом обитания единственных в Австралии белых медведей. Эти животные естественным образом приспособлены к морозным арктическим условиям и, как было установлено, в дикой природе могут проплыть более 70 км всего за 24 часа при средней дальности путешествия 3000 км в год.Здесь они всю жизнь содержатся в вольере шириной примерно 30 на 40 метров.

ПЕЧАТИ И ДЕЛЬФИНЫ
Рассказано Sia

Шоу тюленей — популярное развлечение в зоопарках, где тюленей учат выполнять трюки с едой перед большой аудиторией.

Вне сцены они томятся в маленьких загонах, как и любое другое животное в зоопарке, постоянно плавая в повторяющихся кругах или крича в отчаянии.

В дикой природе дельфины, как известно, преодолевают расстояние до 65 км — 40 миль — в день и постоянно находятся в движении — добывают пищу, играют и сражаются в своих стаях.Как и только у людей и человекообразных обезьян, они обладают чертой самосознания, проявляющей интуицию и сочувствие. Не существует условий содержания в неволе, которые могли бы удовлетворить все поведенческие потребности этих очень умных и когнитивно сложных животных.

Около 80% дельфинов Sea World Australia были выведены в неволе и никогда не могут быть выпущены на свободу, всю свою жизнь они проводят ежедневно в поисках пищи в качестве награды. Достижение нужного уровня голода перед представлениями — это решающий фактор для хорошего выступления на том, что, возможно, является самым популярным аттракционом парка.При ежегодных вступительных взносах более 133 миллионов долларов менее одного процента тратится на их активно продвигаемые инициативы в области исследований, спасения и реабилитации.

Федеральное правительство Австралии в 1985 году постановило, что дельфинарии больше не будут открываться и что существующие должны быть постепенно ликвидированы после получения доказательств того, что китообразные в неволе страдают от стресса, поведенческих аномалий, проблем с размножением, высокого уровня смертности и более короткой продолжительности жизни, даже если они находятся в неволе. На первый взгляд они могут показаться довольными своими условиями.

Сегодня осталось всего два объекта, которые могут продолжать работу из-за лазейки, которая позволила им содержать и выставлять животных, рожденных в неволе, в том числе выведенных из спасенных диких дельфинов, которые сами должны быть реабилитированы и освобождены. Эта практика спасения, разведения и выпуска позволяет этим паркам поддерживать сильный генофонд, чтобы их шоу могли продолжаться, а ворота оставались открытыми.

В то время как австралийские дельфинопарки не в состоянии отловить и импортировать здоровых диких дельфинов, это остается реальностью индустрии развлечений для животных во всем мире, а прибрежный японский город Тайджи является обычным местом отлова.Ежегодно с сентября по март тысячи дельфинов и других мелких китообразных загоняются в тихую бухту Тайцзи и жестоко убиты местными рыбаками, которые видят в них источник дохода или вредителей. Было замечено, что дрессировщики дельфинов помогают рыбакам пасти дельфинов, выбирая нескольких избранных, которых нужно уберечь от убоя и вместо этого перевозить в аквариумы и парки дельфинов по всему миру.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

JP: Если о величии нации и ее моральном прогрессе можно судить по тому, как обращаются с ее животными… что это говорит об Австралии?

RM: Что это говорит о Новой Зеландии?

JP: Соединенные Штаты?

RM: Канада?

JP: Мексика?

RM: Соединенное Королевство?

JP: Израиль?

RM: Испания?

JP: Что это говорит о нас как о виде?

RM : За всю нашу зарегистрированную историю в результате войны погибло 619 миллионов человек.Мы убиваем одинаковое количество животных каждые 3 дня, и это даже не считая рыб и других морских существ, гибель которых настолько велика, что измеряется только тоннами.

JP: Но прежде чем мы их убьем, мы должны вывести их…

JP: Сдерживайте и используйте их для еды… развлечений… одежды… и исследований.

JP: Всю их жизнь, от рождения до смерти, контролируют отрасли, которые заботятся только о прибыли. Империя страданий и крови.

JP: Оплачивается потребителями, которым сказали, что их лечение было этичным. Свободный выгул, местный, органический. Что их смерть была гуманной, что жестокости по отношению к животным не бывает здесь, в нашей стране, и если это произойдет, наше правительство, наши власти найдут это и искоренит.

RM: И у нас, как потребителей, мало причин думать иначе, потому что есть и использовать животных — это нормально, мы делали это навсегда.

JP: Потому что продукты, выставленные на продажу на полках супермаркетов, так далеки от людей, которые когда-то существовали, некоторые — недолго, некоторые — годами без отсрочки.

JP: Люди, которые разделяют с нами и нашими домашними животными, которых мы так сильно любим, нашу способность чувствовать любовь.

РМ: Счастье. Горе и траур.

JP: Кто разделяет с нами нашу способность страдать. Наше желание жить, быть свободным, чтобы нас воспринимали не как объекты, не ради нашей пользы для других, а ради того, кем мы являемся как личности. Существа в нашем собственном праве, а не единицы производства. Нет в наличии. Он, она и они, а не «оно».

JP: По правде говоря, не существует гуманного способа убить того, кто хочет жить.

RM: Это не вопрос лечения или лучших способов поступить неправильно. Большие клетки, меньшая плотность посадки или менее болезненный газ.

RM: Мы говорим себе, что они прожили хорошую жизнь, и, в конце концов, они не знают, что их ждет, и ничего не чувствуют. Но они это делают. В их последние часы, минуты и секунды всегда есть страх, всегда есть боль. Запах крови. Крик других представителей своего вида, с которыми они разделили свою жизнь.Никогда не желание или желание умереть, а скорее отчаяние жить, неистовая борьба до последнего вздоха. И никогда им не проявляют милосердие или доброту, вместо этого их высмеивают, смеются, пинают, бьют, бросают, как тряпичные куклы, или отправляют в мясорубку, потому что они родились не того пола.

JP: Берем своих детей.

JP: Мы забираем их свободу.

JP: Мы забираем их жизни, отправляя их здоровыми и целыми на бойню, чтобы они вышли упакованными частями на другой стороне, и мы говорим себе, что каким-то образом на этом пути произошло что-то гуманное и этичное.

RM: И в процессе мы вредим себе.

RM: Мы разрушаем окружающую среду, выделяя в результате животноводства больше парниковых газов, чем любая другая отрасль, вырубаем наши леса и забиваем местных животных, чтобы освободить место для ферм.

RM: Один только крупный рогатый скот в мире потребляет количество пищи, равное потребности в калориях 8,7 миллиарда человек, и тем не менее каждый девятый человек — 795 миллионов — страдает от хронического недоедания, а 844 миллиона не имеют чистой воды, а потребляется 1000 литров. для производства 1 литра молока и 15 000 литров на один килограмм говядины.

JP: И все же мы продолжаем оправдывать животноводство, утверждая, что это нормально, необходимо и естественно. Что царство животных или определенные виды в нем ниже нас, потому что им не хватает нашего особого интеллекта, потому что они слабее и не могут защитить себя. Мы полагаем, что благодаря нашему очевидному превосходству мы заслужили право осуществлять власть, авторитет и господство над теми, кого мы считаем нижестоящими, в наших собственных недальновидных целях.

JP: Это обоснование, которое использовалось раньше.

RM: Белым, чтобы поработить черных или забрать их землю и их детей.

RM: Нацистами, чтобы убивать евреев.

RM: Мужчины, чтобы заставить замолчать и угнетать женщин.

JP: Обречены ли мы повторять историю снова и снова? Определяет ли этот комплекс превосходства, этот чистый эгоизм, кто мы как вид? Или мы способны на большее?

Написано Крисом Делфорсом (Мельбурн, Австралия) 2018

Стенограмма обсуждения ведущими учеными NIH / EPA нового сотрудничества в области химических испытаний

14 февраля 2008 г. 10:00

Оператор: Итак, все сайты заблокированы, в настоящее время мы проверяем дополнительных участников для сегодняшней телеконференции.Благодарим вас за терпение и ждем вас. Ваш звонок должен начаться немедленно. Пожалуйста, ждите, ваша телеконференция вот-вот начнется. Пожалуйста, ждите, ваша телеконференция вот-вот начнется.

Мужской докладчик: Доброе утро, добро пожаловать на пресс-конференцию по тестированию токсичности, организованную Национальными институтами здравоохранения и Агентством по охране окружающей среды США. Эта пресс-конференция продлится 60 минут, будут четыре основных докладчика, которые сделают краткие замечания, а затем — а затем представители СМИ смогут задать вопросы.Чтобы задать вопросы, вы можете нажать «* и 1» на телефоне с тональным набором для входа в очередь, вы можете удалить себя из очереди, нажав клавишу #. Этот звонок будет записан, расшифрован и доступен на веб-сайтах трех спонсирующих организаций, EPA, а затем от NIH, у нас есть два спонсора. Национальный институт исследования генома человека и Национальный институт наук об окружающей среде. Теперь я передам программу модератору Ларри Томпсону, начальнику отдела коммуникаций Национального института исследования генома человека.

Ларри Томпсон: Всем доброе утро, это Ларри Томпсон, от имени Национального института здравоохранения и Агентства по охране окружающей среды США. Я рад приветствовать всех вас, репортеров, которые присоединились к нам на этом теле-брифинге. Напоминаю, что это связано с сегодняшним запретом на публикацию в научном журнале в 15:00. Я хотел бы поприветствовать всех людей в Бостоне, которые участвуют в собрании AAAS, принять участие в этом теле-брифинге, здорово, что вы все здесь.После 2 часов на веб-сайтах соответствующих институтов будут размещены фоновые и визуальные материалы, связанные с этим объявлением, конечно, вы можете перейти на genome.gov, и вы найдете все материалы в нашем пресс-центре, а также в Национальном институте Науки об окружающей среде и здоровье и в пресс-центре EPA.

Итак, нашей экспертной группой в порядке выступления будет доктор Элиас Зерхуни, директор Национальных институтов здравоохранения. Д-р Фрэнсис Коллинз, директор Национального института исследования генома человека, входящего в состав NIH, д-р.Роберт Кавлок, директор Национального центра вычислительной токсикологии при Агентстве по охране окружающей среды, д-р Сэмюэл Уилсон, исполняющий обязанности директора Национального института гигиены окружающей среды и Национальной программы токсикологии, которая также является частью NIH. а затем у нас будет куча дополнительных экспертов из агентств, которые помогут ответить на ваши вопросы, особенно технические, так что у нас есть доктор Кристофер Остин, который является директором Центра химической геномики NIH, Dr.Джон Бучер, заместитель директора Национальной токсикологической программы, доктор Раймонд Тайс, исполняющий обязанности начальника отделения бимолекулярного скрининга Национальной токсикологической программы. Итак, позвольте мне представить д-ра Зерхуни, у которого есть несколько кратких вступительных замечаний. Доктор Зерхуни.

Доктор Элиас Зерхуни: О, спасибо, Ларри, спасибо, что присоединились к нам. Я думаю, что это очень захватывающее время, и сегодня мы наблюдаем рождение того, что я бы назвал новым подходом к важной проблеме общественного здравоохранения, вытекающим из дорожной карты NIH для медицинских исследований.Очевидно, что нам уже давно нужен способ исследования токсичных веществ — область токсикологии, если хотите, в системах, отличных от животных. И дорожная карта (неразборчиво), представленная пять лет назад, на самом деле была местом для … исследования и апробирования новых подходов, и тогда это на самом деле не было целью изначально думать о токсикологии, но когда мы представляем себе эти проекты и сотрудничество, идея заключалась в том, что с текущей потребностью в более масштабных, более сложных, более масштабных экспериментах, которые больше, чем то, что может поддержать любой отдельный ученый или даже институт.Мы думали, что это приведет к научным проектам, которые в то время нельзя было предсказать, и ясно, что это сегодняшнее объявление демонстрирует результат, который был совершенно неожиданным три четыре года назад.

Мы действительно планировали, что дорожная карта будет стратегической, чтобы сформировать проекты с высоким риском, которые потенциально могли бы принести большую прибыль, и мы выбрали молекулярные библиотеки и компоненты визуализации в то время, и когда мы это сделали, мы предполагали создать библиотеку химических веществ, которые могли бы использоваться отдельными учеными для исследования сложности биологических систем.Чтобы помочь нам понять и улучшить здоровье и болезнь и, надеюсь, провести скрининг на соединения, которые могут обеспечить только лечение и, что более важно, дать ключи к разгадке сложности биологии, лежащей в основе заболевания. Мы явно находимся на ранней стадии разработки этого, но уже наблюдаем значительный прогресс в том смысле, что теперь у нас есть новые технологии, масштабы которых были увеличены до такой степени, что вы фактически можете представить себе способность теперь полностью проверять токсичность. новый путь.

У нас есть десять высокопроизводительных скрининговых центров, работающих в сети от Нью-Йорка до Пенсильвании и от Филадельфии до Университета Эмори в Атланте, научно-исследовательский институт Скриппса, и все полученные данные публикуются в общедоступной базе данных под названием (pubcam ).Я считаю, что это основной арендатор стратегии NIH, включая объявление, сделанное сегодня в сотрудничестве с EPA, NIEHS и NHERI. Мы думаем, что для всей общественности во всем мире очень важно иметь доступ к этим очень ценным экспериментальным результатам, чтобы можно было получить больше информации. Системы, исследования были нацелены на разработку нового лечения, например, на следующей неделе будет объявлено о прорыве, впервые за 45 лет, в лечении шистосомоза, редкого заболевания, которое не представляет интереса для — в с точки зрения финансового интереса или болезни Гоше, которая также находится в стадии разработки.

Но я думаю, что сегодня мы действительно хотим сообщить вам об этом удивительно уникальном сотрудничестве, которое я не мог предвидеть, когда увидел инициативы дорожной карты с моим коллегой доктором Фрэнсисом Коллинзом и доктором Томом Инселем и В некотором смысле это пример того, как мы можем двигаться вперед, когда видим, как технологии возникают из совершенно — совершенно неожиданных уголков области науки и имеют приложение, которое я лично не представлял всего несколько лет назад.Итак, с этим я, я думаю, что передам это моему коллеге доктору Фрэнсису Коллинзу, который будет … который проинформирует вас больше в этом сотрудничестве.

Доктор Фрэнсис Коллинз: Спасибо Элиасу и доброе утро всем вам. Сотрудничество в области исследований, о котором мы объявляем сегодня, действительно может революционизировать способ идентификации токсичных химикатов. Как вы знаете, исторически такая токсичность часто определялась путем введения химикатов лабораторным животным, наблюдения за тем, отбирают ли животных, а затем изучения их тканей под микроскопом, и хотя этот подход дал нам ценную информацию, это явно довольно дорого. , на это уходит много времени, в нем используются животные в большом количестве, и он не всегда предсказывает, какие химические вещества могут быть вредными для человека, корреляция не так точна, как хотелось бы.Итак, то, что предлагается сегодня и изложено в статье, которая будет опубликована завтра в научном журнале, на которую обращено ваше внимание и снова обратите внимание на эмбарго на это, упомянутое Ларри Томпсоном, состоит в том, чтобы объединить навыки трех авторитетных научных организаций из двух разных стран. Федеральные агентства в целом, безусловно, сильнее, чем какие-либо другие части по отдельности.

Итак, что это за три компонента? Прежде всего, вы уже слышали от Элиаса о проекте дорожной карты Национальных институтов здравоохранения по малым молекулам как химическому геномному центру в NIH, NCGC — это компонент сегодняшнего объявления, который приносит максимальную пользу. пропускная способность грохочения на стол.Его персонал возглавляет Крис Остин, и многие другие действительно талантливые коллеги знают, как быстро и экономично тестировать миллионы соединений. Ученый из Национальной токсикологической программы, входящей в состав Национального института гигиены окружающей среды, ученые знают о химической токсичности больше, чем любая другая группа на Земле, и десятилетиями работают с опытом исследований на животных, чтобы руководить этим проектом. И отдел исследований и разработок природоохранных агентств заполнен настоящими экспертами в области химической информатики, чьи вычислительные навыки позволят сопоставить все эти данные с историческими данными о животных и сделать выводы о том, какие новые подходы мы могли бы использовать для высокопроизводительной идентификации токсичность, связанная с соединениями, которые ранее не тестировались.

Таким образом, вместе эта информация поможет NTP и EPA выполнить свою работу по защите всех нас и окружающей среды от вредных химикатов. Однако я должен быть ясен, что, несмотря на обещания, это сотрудничество все еще является исследовательской работой, нам нужно многому научиться, и поэтому был подписан Меморандум о взаимопонимании для пятилетнего проекта здесь для исследования, разработки и проверки этих новые и инновационные методы тестирования токсичности. Мы подозреваем, что, хотя это и на пять лет, это сотрудничество, вероятно, продлится еще много лет в будущем.Идея состоит в том, чтобы ввести токсикологический скрининг действительно в 21 век, обеспечивая тот потенциал, который был предусмотрен в недавнем отчете национального исследовательского совета, который стоил бы за счет развития систем систематического скрининга справедливости, которые в конечном итоге могли бы занять место на животных. обозначение химической токсичности.

Теперь позвольте мне рассказать вам несколько подробностей о том, как это будет работать. Химический геномный центр NIH предоставляет этому общественному сектору возможности промышленных масштабных технологий для высокопроизводительного скрининга и химии.Центр уже способен определять небольшие молекулы, которые еще предстоит использовать в качестве химиков для изучения функций генных клеток и биохимических путей. Возможно даже, что некоторые из этих химических веществ, подобные тому, что Элиас упомянул для лечения шистосомоза, могут в конечном итоге стать новыми лекарствами от редких заболеваний, что является отличным поставщиком медицинских услуг. Но, конечно, у этого есть и обратная сторона, если вы можете использовать ту же систему скрининга для выявления полезных соединений, вы также можете применить те же технологии, чтобы увидеть, обладают ли определенные соединения токсическим действием.Это в основном та же стратегия, но с другим результатом мы можем использовать роботизированное покрытие Линкольна, количественный высокопроизводительный скрининг, что действительно удивительно, если у вас есть возможность приехать и посетить этот центр, вы были бы, я думаю, весьма увлечены роботизированные возможности, которые сейчас существуют здесь.

Итак, поскольку NCGC может тестировать очень много химикатов одновременно, он также может тестировать одно химическое вещество при 15 различных концентрациях, что действительно важно для токсикологии. Вы хотите знать не только то, что это соединение может быть вредным, но и то, при каких концентрациях может быть причинен этот вред, потому что почти все, если давать в очень высоких концентрациях, может быть токсичным, и вы хотите знать, как выглядит эта доза-реакция, и именно здесь NCGC обладает огромным опытом и делает его прекрасным партнером для этого предприятия.

Наконец, позвольте мне сказать, что ученые, участвовавшие в этом сотрудничестве, не просто решили собраться сегодня утром, чтобы сделать это объявление, и они довольно долго работали друг с другом, проверяя свои идеи, уже NCGC проанализировали что-то вроде 2800 соединения, включая пестициды и промышленные химические вещества, и на самом деле в журнале «Перспектива экологического здоровья» есть публикация, в которой сообщается о результате около 1400 соединений, которые были предоставлены национальной программой токсикологии и были протестированы на 13 различных типах клеток, чтобы увидеть, какими будут их последствия. в этом диапазоне концентраций.Так что это ранняя публикация того, что, несомненно, станет очень большим результатом этих совместных усилий.

Итак, наконец, я хотел бы сказать о достоинствах этой технологии химического геномного центра с экспертами из нас, сотрудничающих с учреждениями в NTP и EPA, является действительно мощным и многообещающим достижением, и я думаю, что это и хорошая наука, и замечательный пример того, как федеральные агентства, видя реальную возможность, могут собраться вместе и сделать что-то совместно, чтобы попытаться принести пользу обществу.Итак, позвольте мне передать это моему хорошему коллеге из EPA Бобу Кавлоку, Бобу.

Д-р Роберт Кавлок: Позвольте мне прежде всего выразить свое сожаление д-ру Джорджу Грею, помощнику администратора по исследованиям и развитию EPA, который должен был участвовать в этом брифинге, но в то же время был вызван для дачи показаний в Конгрессе. период. Агентство по охране окружающей среды и регулирующие органы во всем мире сталкиваются с растущим разрывом между количеством химических веществ, токсичность которых нам необходима, и способностью традиционных лабораторных исследований на животных предоставить необходимую информацию.EPA признало возможности, предоставляемые достижениями в области молекулярной биологии и информатики, предлагая более быстрые и эффективные процедуры химической оценки, когда три года назад оно основало Национальный центр вычислительной токсикологии. NCCT возглавляет отдел исследований и разработок по внедрению этих новых инструментов в защиту окружающей среды. Исследовательская компания тесно сотрудничает со своими клиентами в регулирующих органах, чтобы предоставить решения о том, как определить, какие химические вещества вместе с кандидатами, за которые они несут ответственность, являются для нас наиболее важными для изучения.

Подходы также могут использоваться для подтверждения или изменения существующих подходов, таких как категориальный подход к химическим веществам в рамках химической программы с большим объемом производства. Наша программа ToxTest, запущенная в 2007 году, приближается к завершению своей первой фазы разработки, и она оценивает эффекты более 300 химических веществ и почти 400 различных анализов in vitro для разработки прогнозов результатов испытаний на традиционных моделях животных. Мы ожидаем, что к концу этого года мы перейдем к следующему этапу расширения и проверки прогнозов.Возможность взаимодействия с Национальной программой токсикологии и Центром химической геномики NIH позволит нам двигаться быстрее, объединив дополнительные знания трех партнеров.

Мы уже работаем вместе, чтобы координировать химические вещества, которые мы изучаем, пути токсичности, которые будут изучаться, данные, которые мы получаем, и методы интерпретации и понимания этой информации. Международное сообщество также заинтересовано в этом вопросе, о чем свидетельствует создание рабочей группы по молекулярному скринингу в рамках организации — по сотрудничеству и развитию, в которой EPA в настоящее время возглавляет.Мы приветствуем новых партнеров, которые присоединятся к нам, поскольку мы движемся к интеграции более эффективных и действенных методов в оценку рисков для человека и окружающей среды, связанных с химическими веществами, и с нетерпением ждем вопросов от средств массовой информации.

Ларри Томпсон: Спасибо. Хорошо. И доктор Уилсон из Национального института наук об окружающей среде, пожалуйста, продолжайте.

Доктор Сэмюэл Уилсон: Ларри, большое спасибо. Мы, в NIEHS и NTP, очень рады участвовать в этом сотрудничестве с EPA и NCGC.Сила сотрудничества заключается в объединении новых стратегий и технологий для решения важных задач токсикологии. Сотрудничество происходит в то время, когда биохимические пути, лежащие в основе реакции на токсичные вещества, становятся все более понятными. Использование этой информации в рамках сотрудничества приведет к новой парадигме токсикологии, которая изменит токсикологию и испытания на токсичность и предоставит путь к лучшей защите здоровья населения в том, что касается химических веществ в окружающей среде.

Теперь Национальная программа токсикологии взяла на себя обязательство охарактеризовать токсичность химикатов с помощью своей программы биологических анализов, чтобы разработать методы, улучшающие нашу способность определять опасности в окружающей среде. В качестве межведомственной программы NTP сотрудничает со многими группами для получения информации, необходимой для принятия регулирующих решений. Наша приверженность биопробам NTP и удовлетворению потребностей регулирующих органов в области общественного здравоохранения будет продолжена. В 2004 году НПТ опубликовала свое видение и дорожную карту на XXI век.И это включало инициативы по интеграции высокопроизводительного скрининга химических веществ в программу тестирования NTP. Опыт NTP в токсикологии и его большая база данных о химических воздействиях на животных сыграют решающую роль в оценке процесса высокопроизводительного тестирования, о котором мы объявляем сегодня.

Мы осознаем, что полное внедрение новой парадигмы токсикологии потребует значительных усилий в течение многих лет, но в конечном итоге позволит нам генерировать данные, более актуальные для людей, как сказал доктор Др.Коллинз ранее заявлял и о сокращении использования животных при испытаниях на токсичность. В заключение, мы надеемся на сотрудничество с EPA и NCGC в этих совместных усилиях, которые принесут большую пользу общественному здравоохранению.

Ларри Томпсон: Отлично. Большое спасибо, доктор Уилсон. Итак, что мы хотели бы сделать сейчас, это открыть это для ваших вопросов. Итак, я прошу вас присоединиться к очереди в соответствии с инструкциями нашего оператора и, пожалуйста, представьте себя и свою новостную организацию, чтобы мы знали, с кем мы разговариваем.Напоминаю своим коллегам, что когда … вы не видите наших лиц. Итак, вы знаете, скажите — скажите, кто вы, когда вы начнете свой ответ, чтобы репортеры цитировали нужного человека, и у нас также собрались некоторые из наших экспертов, чтобы помочь ответить на любые ваши действительно технические вопросы. Итак, почему бы нам не начать с первого вопроса?

Оператор: Наш первый вопрос будет от (Пэт Лучидо), ваша линия открыта.

Пэт Лучидо: Привет.Уточнение, а затем вопрос. Доктор Кавлок, не могли бы вы повторить количество анализов in vitro, которые, как вы сказали, были частью фазы I?

Доктор Роберт Кавлок: Это Боб Кавлок. В рамках фазы I, в зависимости от того, как вы их считать, сейчас у нас есть где-то от 350 до 400 анализов. За последние несколько месяцев мы добавили еще несколько партнеров. Итак, количество выросло.

Пэт Лучидо: И затем, мой второй вопрос к кому бы то ни было, есть большой интерес к альтернативным тестам в мире нано.Есть ли в этом компонент, который поможет определить, могут ли эти альтернативные тесты также предсказать токсичность специально созданных наноматериалов?

Доктор Роберт Кавлок: Это Боб Кавлок из EPA. Мы определенно думаем, что некоторые из этих технологий будут использоваться для изучения наноматериалов на следующем этапе нашей программы ToxTest. Мы планируем протестировать около 10 химикатов, по которым у нас уже есть данные о животных. Но мы надеемся, что это будет им полезно.

Пэт Лучидо: И сколько лет, по вашему мнению, пройдет, прежде чем вы будете уверены в своих прогнозах для обычных химикатов?

Доктор Фрэнсис Коллинз: Это Фрэнсис Коллинз. Позвольте мне сказать, что это все-таки объявлено как исследовательское предприятие, и нам нужно точно выяснить, какие корреляции будут между результатами испытаний на животных и этим новым подходом с высокой пропускной способностью, который будет включать как клеточные анализы, так и некоторые Например, анализы модельных организмов, таких как рыбки данио.Конечно, у нас есть замечательная устаревшая база данных с информацией, в которой вы знаете, каков ответ, и которую затем нужно будет использовать, чтобы настроить систему, чтобы попытаться оценить, какие из этих новых анализов наиболее предсказуемы для результатов, если эти токсичности верить в людей. Но именно время, которое потребуется на его разработку, — вот почему это исследования. Я думаю, нам было довольно сложно предсказать, как именно будет выглядеть этот путь. Я думаю, что сегодня новости заключаются в том, что у нас есть все необходимое, чтобы задать этот вопрос и дать эффективный ответ.

Пэт Лучидо: Спасибо.

Ларри Томпсон: Еще один ответ доктора Уилсона, а затем мы перейдем к следующему вопросу. Доктор Уилсон?

Доктор Сэмюэл Уилсон: Ага. Я думаю, что ответ на ваш вопрос на самом деле будет зависеть от типа исследуемого химического вещества или типа воздействия, так что в некоторых случаях пути достаточно хорошо проработаны с соответствующими моделями в самокультивированных системах и системах животных, чтобы мы могли очень быстро провести межвидовую и межсистемную валидацию, необходимую для документирования информации, полученной с помощью подхода с высокой пропускной способностью.Итак, мы думаем, что в относительно краткосрочной перспективе, то есть в ближайшие два или три года, появятся некоторые примеры, когда информация о высокой пропускной способности может дать очень значимую информацию о настройках приоритета или тестировании модели ячеек, а затем, для использования моделей на животных, чтобы подтвердить информацию, которую мы почерпнули из этих других подходов. Позвольте мне также попросить моего коллегу по Национальной токсикологической программе Джона Бухера прокомментировать этот момент.

Доктор Джон Бучер: Хорошо.Это Джон Букер. Мы действительно рассматриваем это как итеративный процесс, потому что мы собираемся многому научиться в самом начале, это будет — это действительно будет направлять нас в дальнейшем развитии этой программы. Просто точно предсказать, сколько времени это займет на данном этапе, очень и очень сложно. Но этот процесс будет включать в себя этапы убеждения в первую очередь мысли и научного сообщества в целом в том, что предсказания и результаты этих анализов действительно имеют смысл в биологическом смысле.Затем наступит этап убеждения научного сообщества в целом в том, что это правильный подход, и затем, наконец, регулирующие сообщества, которым они должны будут участвовать в этих шагах с самого начала и исследовать с нами, пока мы идем.

Ларри Томпсон: Хорошо. Пожалуйста, переходите к следующему вопросу.

Оператор: Едем рядом с сайтом Мэгги Фокс из Рейтер. Ваша линия открыта.

Мэгги Фокс: Привет. Мне очень жаль, у вас есть — теперь у вас есть я, и я просто хотел сказать, можете ли вы, ребята, начать все сначала и сделать это на языке коктейльной вечеринки, потому что я не совсем понимаю, о чем вы говорите. Вы хотите сказать, что переходите к тестированию без использования животных и думаете, что оно будет более точным? Прошу прощения, но мне нужны односложные слова.

Доктор Фрэнсис Коллинз: Привет, Мэгги, это Фрэнсис Коллинз, и я полагаю, что я избранный участник коктейльной вечеринки здесь.Итак, позвольте мне попробовать еще раз. Прошу прощения, если это было слишком техническим. По сути, нам действительно нужно знать по разным причинам, может ли конкретное соединение нанести вред людям. Мы все согласны с этим, правда? Это наука токсикология. То, как это делалось на протяжении многих десятилетий, в значительной степени зависело от использования животных, когда вы в основном решаете, хорошо, я собираюсь взять конкретный вид животных или более одного и применить это соединение в различных концентрациях, и я собираюсь посмотреть, заболеет ли животное.И если кажется, что он заболел, а иногда и нет, тогда вы смотрите на ткани животного и пытаетесь определить, какой именно ущерб был нанесен здесь, какая система органов была затронута.

Это было нашей опорой для попыток делать прогнозы о токсикологии человека, но я не думаю, что кто-то скажет, что мы полностью довольны этим. Он медленный, дорогой, и его точные предсказательные способности часто оказываются не такими хорошими, как хотелось бы.Есть различия между видами. Мы не крысы и даже не другие приматы, и поэтому я хочу попытаться понять, сможем ли мы лучше. Сейчас было много дискуссий, в том числе недавний отчет Национального исследовательского совета о переносе токсикологических испытаний в новую эпоху 21-го века, когда мы воспользуемся преимуществами многих вещей, которые мы теперь можем делать на основе технологий, пришедших из другого направления. Я с радостью расскажу вам о многих из них из проекта генома, что для того, чтобы сделать его осуществимым, нужно представить себе токсикологию совершенно по-новому.

В конце концов, вы ищете, действительно ли это соединение наносит ущерб клеткам, так что мы могли бы фактически вместо того, чтобы смотреть на все животное в качестве нашей первой линии анализа, смотреть на отдельные клетки из разных органов разных животных с помощью различные концентрации соединения и пользуясь также тем, что мы узнаем о том, что вы знаете, что микробиология приближается. У нас есть лучшее представление о путях, вовлеченных в клетку, к которым мы привыкли, и вы могли бы начать делать выводы о том, что происходит, воспользовавшись этой информацией о так называемой системной биологии.

Итак, предложение Мэгги и это предложение, которое сейчас будет протестировано в условиях строгих исследований, состоит в том, что, по крайней мере, в некоторых случаях в долгосрочной перспективе мы могли бы лучше прогнозировать токсичность, используя используя эти высокопроизводительные анализы на основе клеток, где вы в основном испытываете соединение в лабораторных условиях на клетках, растущих в небольшой лунке планшета, и в этой ситуации сможете оценить, повредит ли это — вероятно, повредит ли печень или почки или мозг человека, потому что вы собрали эти данные с высокой пропускной способностью, низкими затратами и гораздо менее низким риском, и гораздо более изменяемой ситуацией риска, чем то, что мы сделали в настоящее время.

Но мы не знаем, будет ли это так хорошо, как мы хотели бы, поэтому цель этого сотрудничества — проверить это, особенно сейчас, используя ситуации, когда мы знаем ответ, потому что у нас есть список соединения, которые, как мы знаем, действительно токсичны для человека. Если бы мы еще не знали этих ответов, могли бы мы действительно разработать систему, которая могла бы их точно предсказать? Это то, к чему мы стремимся: вам нужно настроить весь процесс, прежде чем вы сможете просто предположить, что он будет обладать той предсказательной силой, которую мы хотим.Теперь это поможет, или вы хотите ответить на один-два вопроса?

Мэгги Фокс: Нет, это … это помогает. Значит, вы не собираетесь использовать человеческие клетки ни с одной из этих клеток животных?

Доктор Фрэнсис Коллинз: О нет, мы определенно используем человеческие клетки.

Мэгги Фокс: Ой, прости.

Д-р Фрэнсис Коллинз: И снова у нас есть доступ к множеству различных человеческих клеток, растущих в культуре в наши дни, и, вероятно, цель здесь будет состоять в том, чтобы протестировать как можно больше различных клеток, чтобы увидеть, какие из них наиболее предсказуемая из того, что мы действительно хотим знать, что является токсичным для людей.

Мэгги Фокс: Спасибо.

Ларри Томпсон: Хорошо. Еще один короткий ответ от доктора Уилсона, прежде чем мы продолжим?

Д-р Сэмюэл Уилсон: Да, я думаю, я постараюсь ответить на этот вопрос. Мэгги, также это Сэм Уилсон. В токсикологическом сообществе давно известно, что нам необходимо повысить производительность нашего тестирования, чтобы можно было тестировать многие тысячи соединений, но сегодня мы не можем тестировать, потому что у нас просто нет достаточной производительности.Во-вторых, межвидовая экстраполяция информации, которую мы получаем из исследований на животных моделях, на людей не всегда так эффективна и точна, как должна быть. Итак, у нас есть большая признанная потребность в области токсикологии в более точных способах прогнозирования токсичности для человека.

Это сотрудничество, о котором мы объявляем сегодня, действительно является важной вехой, потому что впервые оно дает нам силу, исследовательскую мощь и возможность применить совершенно новое поколение подходов к этому вопросу токсичности.Как я уже сказал в своих комментариях ранее в видении или стратегических планах Национальной токсикологической программы несколько лет назад, мы осознали возможность или необходимость принятия этого вещества. Но сегодня мы впервые официально оформили сотрудничество, по крайней мере здесь, в Соединенных Штатах, что даст нам шанс реализовать это видение, которое мы изложили в нашем стратегическом плане и о котором говорили сегодня.

Доктор Элиас Зерхуни: Cool.Я был — я был на многих коктейлях -.

Мужской Спикер: Это доктор Зерхуни?

Доктор Элиас Зерхуни: Да, это доктор Зерхуни. Я думаю, вы задаете фундаментальный вопрос, я думаю, что вы здесь говорите о том, что как обществу мы должны иметь возможность тестировать тысячи соединений в тысячах состояний, во многих — гораздо быстрее, чем мы. до. Эти технологии, которые появились благодаря технологии геномики, химические геномные технологии, которые мы действительно разработали для проверки, например, трехсот тысяч потенциальных лекарств менее чем за пару дней.Это где — это заняло бы три года, пять лет назад. И из-за расширения естественной идеи, я думаю, здесь предлагается сдвинуть парадигму 20-го века тестирования одного компонента за раз на многих животных к парадигме 21-го века, проверяющей пять — 10 000 соединений против 5, 10, 20 000 состояний в клетках, которые очень специфичны для токсикологии человека.

И благодаря этому мы надеемся накопить достаточно знаний, основанных на том, что мы уже знаем, чтобы перейти от методов 20-го века, если хотите, надежно переходить проверенным способом к тому, что мы бы назвали высокой пропускной способностью 21-го века. токсикология века.И это то, о чем весь этот проект, поэтому я думаю, что мы взволнованы тем, чтобы двигаться вперед темпами и темпами, которые будут соответствовать токсикологическому риску, который мы наблюдаем в человеческом обществе, включая новые соединения.

Ларри Томпсон: Итак, я хотел бы заметить, что это Ларри Томпсон, я собираюсь заметить, что у нас есть около 20 минут с нашими друзьями в обоих в Бостоне, а затем — как вы можете выйти из редакции? Итак, когда мы сначала перейдем к вопросу в Бостоне, и давайте — позвольте мне попросить одного из коллег отвечать как можно короче, чтобы мы могли получить как можно больше заданных вопросов.Итак, мы получили второй вопрос из Бостона, а затем вернулись в общую очередь.

Мужской Спикер: У нас есть пара вопросов из Бостона, и я попрошу репортера назвать имя и место работы.

Мужской динамик: Хорошо, спасибо.

Рэйчел Аронберг: Меня зовут Рэйчел Аронберг, я из Times News, и у меня есть пара вопросов. Один из них — высокая пропускная способность, вы просто имеете в виду сразу много, и если вы также можете, просто приведите пример: хорошо, есть химическое вещество, которое вы хотите проверить.У вас есть маленькая тарелка с клетками, как они достигают различных концентраций, как часто вы можете проверять ее, как вы затем определяете, был ли нанесен ущерб, а также как вы расставляете приоритеты, какие соединения должны быть первыми?

Ларри Томпсон: Итак, хорошо, доктор Остин, представьтесь, пожалуйста.

Доктор Кристофер Остин: Это Крис Остин; Я директор Центра химической геномики NIH. Отличный вопрос. На самом деле это работает: мы берем блюдо примерно трех штук.5 — 3 дюйма на пять дюймов, в котором находится 1536 различных маленьких колодцев. Эти маленькие (лунки) составляют доли миллиметра в поперечнике, и мы помещаем одни и те же клетки в каждый из этих 1536 маленьких — маленьких контейнеров, которые находятся внутри этой чашки, внутри этого лотка. Затем мы берем 1536 различных химикатов и помещаем их поверх этих ячеек, и мы делаем это на нескольких разных лотках, поэтому поместите следы клеток, и все соединения будут одинаковыми в этих 1536 маленьких — маленьких контейнерах в этом лотке, но их Концентрация колеблется в пределах примерно 100 000 для диапазона концентраций, поэтому очень — очень широкие концентрации.

И есть множество способов взглянуть на то, как на клетки влияют с технической точки зрения, и что каждый делает, это сводится к обнаружению белого цвета того или иного типа, по сути, на какие из них смотрят больше всего. Пример роста: если вы — если вы спросите машину, если вы попросите читателя сказать вам, сколько клеток осталось в планшете, если вы уничтожили половину клеток, если в одной маленькой лунке тот лоток на 1536 лунок, который тогда в … в контейнере, что означает, что вы уничтожили половину клеток соединения, был токсичен, это самый большой пример роста.

В других примерах вы можете посмотреть на конкретные пути, пометив эти пути маркерами, которые используются для определения того, увеличивает ли конкретный путь активность или снижает активность. Это довольно обычное дело в мире химической геномики и открытия лекарств, и мы можем использовать это также для тестирования токсичности. Что касается того, сколько времени мы тратим, — это одна из вещей, которую мы не проверяли в эксперименте, но мы тестировали разные концентрации, но мы также тестировали одну и ту же концентрацию в разное время.И поэтому иногда мы ждем пять минут, иногда мы ждем один день, иногда мы ждем два дня, иногда даже дольше. И, конечно, эффекты, которые вы видите, в несколько раз различаются в зависимости от того, насколько токсично соединение.

Итак, ответ заключается в том, что для того, чтобы получить нужные вам ответы, вы должны постоянно выполнять все условия, все различные концентрации, и именно поэтому нам нужна такая высокопроизводительная система. Я должен сказать, что мы — мы говорили об этом теоретически до сих пор, но вы упомянули ранее, что мы работали над этим в течение последних двух лет и — показали, что позволяет нам объявить об этом. Cегодня.Технически процесс работает. Мы знаем, что можем генерировать надежные данные, и поэтому мы чувствуем, что можем объявить об этом сегодня, чтобы масштабировать до большего количества соединений, где-то от 10 000 до, возможно, 100 000 соединений, это несколько сотен различных условий анализа.

Ларри Томпсон: Может ли доктор Бухер сделать комментарий от NIEHS?

Доктор Джон Бучер: Да. Я собираюсь обратиться к вопросам, связанным с тем, как вы расставляете приоритеты и что это такое, мы собираемся провести дальнейшее тестирование.А также дать вам некоторое представление о масштабе проблемы. NTP действует около 30 лет, и мы очень подробно протестировали около 2500 химических веществ. Говоря о химическом веществе, мы говорим о том, что количество химических веществ, которые мы здесь тестируем, очень и очень мало. Но мы начнем с этих 2500 химических веществ в качестве нашей первоочередной задачи, потому что у нас есть очень богатая база данных с информацией об этих химических веществах, и мы можем сравнить результаты этих клеточных анализов с точки зрения того, вызывают ли эти химические вещества рак, репродуктивные эффекты и эффекты развития. неврологические эффекты, иммунотоксические эффекты и различные другие виды токсичности

Ларри Томпсон: Доктор, другой вопрос из Бостона.

Мужской Спикер: У нас есть еще два вопроса из Бостона; мы постараемся сделать их быстрыми.

Мужской Спикер: Спасибо. Пожалуйста, продолжайте идентифицировать себя.

(Хелен Бриггс): Привет, Хелен Бриггс из BBC. Могу я еще немного рассказать вам о временных рамках, а также, если это станет реальностью, сколько животных и я могли бы спасти за год?

Мужской спикер: Кто-нибудь действительно делал такие — я не знаю, проводил ли кто-нибудь такие вычисления?

Мужской спикер: Так что это, я думаю, было бы достаточно гипотетическим, что, вероятно, с нашей стороны неразумно пытаться дать конкретные временные рамки или прогнозы относительно изменений в тестировании на животных, которые произойдут, надеюсь, вы понимаете то, о чем здесь идет речь, — это оценка совершенно нового подхода к попыткам проведения высокопроизводительных скринингов, испытаний на токсичность, очень большого количества соединений и в точности с траекторией того, что наука продвигается вперед, для нас действительно невозможно сказать В данный момент.Я думаю, что, сказав это, справедливо будет сказать, что вовлеченные в это организации не заинтересованы в медленной гонке. Мы заинтересованы в том, чтобы обозначить эту повестку дня как можно быстрее, и, безусловно, одной из надежд на результат этого будет как можно скорее сокращение и количество животных, необходимых для тестирования.

Д-р Роберт Кавлок: Это доктор Кавлок из EPA, и я хотел бы повторить срочность, с которой мы работаем, и я знаю, что группы планируют встречу в марте, чтобы приступить к планированию в установленные сроки для реальной работы через это памятку о понимании.

Доктор Элиас Зерхуни: Это доктор Зерхуни. Хочу обратить внимание на то, что работа уже началась. Другими словами, это не теоретически, если вы перейдете к проблемам, лежащим в основе проблемы экологического здоровья от 22 ноября 2007 года, поскольку вы обнаружите, что работа, которая была опробована на самом деле, за всем этим предложением о тестировании более чем 2800 соединений NTP и EPA, которые были протестированы или содержат более 50 биохимических веществ в клеточных анализах.Я думаю, если вы … если вы перейдете к этому документу, вы увидите именно формат как то, что нужно масштабировать, но в том, что касается запуска, тестирования и дорожного тестирования концепций, которые уже были выполнены.

Ларри Томпсон: Следующий вопрос.

Доктор Элиас Зерхуни: (неразборчиво), пожалуйста.

Фил МакКенна: Привет, это (Фил МакКенна) из New Scientist. Мне интересно, можете ли вы повторить еще раз, насколько быстрее по сравнению с вашим тестом на животных, или, если это сработает, есть ли приложения помимо токсикологии, и опять же, какое разрешение регулирующих органов необходимо для этого?

Др.Кристофер Остин: Хорошо, я вам скажу, это снова Крис Остин. Я дам вам представление о времени. Пример, который мы часто используем, заключается в том, что на тестирование 100 000 соединений в 15 различных концентрациях у нас уходит два дня. Мы подсчитали — мы возьмем человека, если бы вы собирались делать то же самое, одному человеку пришлось бы работать восемь часов в день, семь дней в неделю в течение шести месяцев, чтобы получить это — чтобы сделать это и делаем это за два дня. И так это — это намного — намного быстрее.Что касается тестирования на животных 100 000 соединений, то это было бы физически невозможно.

Мужской динамик: Да. Что ж, мы знаем, что это будет примерно 2500 за 30 лет.

Доктор Кристофер Остин: Справа.

Мужской спикер: И чтобы выполнить 2500, мы проводим 2515 концентраций за один день. Итак, один день против 30 лет.

Мужской динамик: Привет, вы можете упомянуть -.

Мужской динамик: Ага.

Мужской динамик: — отснятый материал доступен, люди хотят увидеть, как выглядит система.

Мужской спикер: Так что да, мы (неразборчиво) .gov сегодня в 2 часа разместим на нашем веб-сайте (неразборчиво) кадры высокопроизводительной экранной системы, это серия роботов и инкубаторов и (cara клетки), в химической библиотеке которых есть эти вопросы о химических веществах.Это химический материал, на который нужно смотреть, так что вы можете посмотреть его прямо на веб-сайте во Flash. А для вещателей вы сможете загружать быстрые фильмы в полном разрешении, которые можно импортировать непосредственно в нелинейный видеоредактор для использования вещательного фрагмента. Там около 15 или 20 клипов, я не могу вспомнить, сколько, и вы знаете, пара звуковых фрагментов от доктора Остина, который является директором центра. Так что, если вы хотите просто увидеть эту вещь и увидеть, что это за… система, о которой мы говорим, должна иметь возможность взглянуть на нее примерно через два часа.Еще один вопрос или давайте вернемся к обычной очереди, мы закончили в Бостоне, верно?

Мужской спикер: Да, Бостон готов.

Ларри Томпсон: Хорошо.

Доктор Роберт Кавлок: Это доктор Кавлок из Агентства по охране окружающей среды, у меня — последний вопрос, я имею в виду, что мы не дошли до приложения за пределами тестирования токсичности.

Мужской динамик: Хорошо.

Др.Роберт Кавлок: На самом деле они находятся в рамках испытаний на токсичность, но вы можете подумать о применении этого, например, к смесям, что является очень сложной проблемой в токсикологии. Вы можете справиться с большим количеством различий в химических веществах и понять, есть ли различия в загрязнителях между ними. Или вы можете разработать высокопроизводительные скрининговые анализы для поиска генетической восприимчивости, которые могут быть полезны для обнаружения восприимчивых популяций крови. И затем, что касается регулирующих корректировок, я думаю, что это зависит от использования с точки зрения отбора и приоритезации, такого рода принятие, я думаю, произойдет довольно рано, поскольку мы только что определили те химические вещества, которые наиболее важны для изучения.Если мы говорим о фактической замене тестов на животных этими in vitros, это будет гораздо более длительный путь и, возможно, потребует даже другого законодательства, с которым мы имеем дело прямо сейчас.

Доктор Кристофер Остин: Да, это Крис Остин, и очень кратко, это один из основных моментов по этому поводу, просто чтобы повторить это, но если он действительно использовал технологию, используйте. Фактически, эта технология была разработана, и мы используем ее каждый день для разработки химических зондов, понимания генома и отправных точек для разработки новых терапевтических средств, особенно для редких и часто встречающихся заболеваний, представляющих интерес для NIH.По сути, та же технология, но с некоторыми важными модификациями, которая используется в фармацевтике. Итак, мы взяли эту технологию и применили ее для совершенно другого использования. Итак, это уже многоразовая технология, которая была разработана в другом месте и применена к новому приложению.

Мужской динамик: Давайте перейдем к следующему вопросу, пожалуйста.

Ларри Томпсон: Мы пойдем рядом с Лорен (Неаргард) из Ассошиэйтед Пресс, ваша линия открыта.

Лорен: Привет, я хотел бы также это в более глобальном контексте. Насколько я понимаю, Европейский союз собирается ввести запрет на тестирование косметики на животных. И похоже, что из того, что вы нам здесь рассказываете, вы знаете, что все вы находитесь в самом начале этого с точки зрения того, насколько воспроизводимым было бы использование этого вместо этого. Итак, не могли бы вы немного прокомментировать, что происходит в мире и как ваша работа будет применима к этому? И тогда мне бы хотелось, чтобы сегодня вы узнали несколько конкретных примеров химических веществ; испытания на животных не смогли ответить на те определенные вопросы, на которые это, возможно, ответило бы.

Мужской динамик: Хорошо. Доктор Уилсон пойдет первым, доктор Кавлок ответит, а Лорен оставит это — продолжайте следить.

Д-р Роберт Кавлок: Да, поэтому по поводу первой части вашего вопроса о некоторых тенденциях и мышлении в этом использовании E. Это правда, что они рассматривают возможность прекращения испытаний на животных. И это шире, чем косметическая промышленность; фактически оно распространяется на всю химическую промышленность и инициативы под аббревиатурой «досягаемость».Сейчас они планируют, и исследования альтернативных подходов, помимо испытаний на животных, или способов оценки опасности и токсичности, находятся на очень, очень ранней стадии. Возможно, даже раньше, чем наше исследование здесь, в Соединенных Штатах. Альтернативный подход, о котором мы сегодня говорим, на самом деле является шагом в правильном направлении к более надежному методу или технологии для оценки целого ряда химических веществ, как мы уже говорили. Но я думаю, что наш подход здесь, в США, на самом деле немного более зрелый, чем в ЕС.Позвольте мне теперь попросить Джона Бухера сказать несколько слов о конкретном примере ограничений, которые у нас есть при тестировании на животных.

John Bucher: Что ж, во многих случаях мы говорим, что различная реакция животных и людей связана со скоростью метаболизма, которую различные организмы имеют для различных химических веществ. Итак, в одном случае у вас будут особи чувствительных штаммов и видов животных, особенно химические вещества, а в другом случае близкие к ним химические вещества, похоже, не оказывают такого же воздействия на человека.Там — и некоторые исторические примеры, когда люди давным-давно доказали, что они более чувствительны к веществу, чем животные (неразборчиво) в более ранних примерах. Это классические примеры, которые заставили нас действительно осознать, что животные не всегда дают нам правильный ответ, но тогда мы, очевидно, должны использовать всю информацию, которую мы можем получить из самых разных систем, для генерации данных, которые будут прогнозирование здоровья человека.

Мужской спикер: And Dr.Кавлок, мы просили вас как бы обратиться к международному регулированию, доктор Кавлок, вы все еще с нами?

Доктор Роберт Кавлок: Да, я. Извините, мы просто отключили звук. Это доктор Кавлок из EPA. Вот почему мы работаем с организацией по экономике, сотрудничеству и развитию в Париже, чтобы внести в это международную перспективу. Мы представили им этот молекулярный скрининг, начатый около двух лет назад. И теперь существует форма рабочей группы, в которую входят представители из Канады, Японии, Нидерландов, Англии, Германии и ряда других стран, которые встречаются, чтобы — начать понимать, как мы можем внедрить этот вид технологий в международное поле.Мы также обсуждали с Европейским химическим агентством и Европейской комиссией в Бразилии поддержку исследований в Европе, которые дополняли бы те исследования, которые мы проводим здесь, в Соединенных Штатах, и эти обсуждения продолжаются.

Ларри Томпсон: Верно, доктор Зерхуни?

Доктор Элиас Зерхуни: Это доктор Зерхуни, однако, я хотел бы отметить, Лорен, очень важно также заявить, что нельзя отказываться от испытаний на животных в одночасье.Как я уже сказал, необходимо провести очень важный переход между технологиями на основе животных и технологиями, не основанными на животных, и на данный момент, я не думаю, что можно было бы сказать, и вы могли бы утвердить новые технологии и отказаться от грубых испытаний на животных. ее придется переплетать в течение многих лет, пока мы полностью не поймем масштаб и масштаб проблемы.

Ларри Томпсон: Мы перейдем к следующему вопросу, пожалуйста.

Мужской Спикер: Сегодня мы пойдем на сайт Элизабет Вайс из США, ваша линия открыта.

Элизабет Вайс: Да, я хотела спросить, можете ли вы вернуться к началу, потому что вы были — это звучало так, как если бы это был (неразборчиво) результат исследования, к которому вы не ожидали это. И снова я попрошу … слова из одного слога не будут стоить партийного обсуждения того, как именно это произошло?

Доктор Элиас Зерхуни: Это снова доктор Зерхуни. Я думаю, что первоначальная цель заключалась в том, чтобы на самом деле иметь возможность анализировать биологические пути в здоровье и болезни с целью разработки терапевтических или диагностических средств.Мы действительно не видели парадигмы рассмотрения этого подхода в то время для токсикологических исследований. Однако по мере того, как мы прогрессируем, что действительно удивительно, так это тот факт, что мы понимаем, что на самом деле можем протестировать многие сотни тысяч соединений в течение недели для терапевтических целей, мы показали, что это можно надежно сделать в любой момент. разные дозы, которыми и была работа Криса Остина, и внезапно Эврика, момент наступил, потому что здесь у вас был союз интересов.

Национальный совет по ресурсам рассматривал вопрос токсикологии, NIEHS рассматривал вопрос расширения наших возможностей по изучению многих соединений, как вы знаете, глобализация ведет к производству многих, многих сотен тысяч соединений. и один плюс один превратился в три.И мы можем делать логику над его головой, и вместо того, чтобы тестировать соединения с терапевтической практикой, как насчет их тестирования, чтобы они могли нарушить — нарушить нормальную физиологию аналитическим способом, который был бы совершенно другим. Это был неожиданный характер, потому что вы действительно не … не можете предсказать в сети, где будут прорывы, потому что вы видите прогресс во многих направлениях, которые внезапно создают новый горизонт.

Женский спикер: А когда вы скажете, что это произошло два года назад?

Др.Элиас Зерхуни: Я бы сказал три года назад. Доктор Бухер и доктор Кавлок?

Мужской динамик: Ага.

Д-р Фрэнсис Коллинз: Это Фрэнсис Коллинз, и разве это не прекрасный пример того, что, как вы надеетесь, произойдет в науке, когда вы разрабатываете технологию для одной цели с надеждой, что она там сработает. и это начинает работать, и тогда вы понимаете, боже, что мы могли бы воспользоваться этим подходом и применить, это совершенно другая проблема, о которой мы изначально не думали.Это происходило снова и снова, я имею в виду, кто думал, когда (неразборчиво) пытались обработать небольшой объем данных, которые необходимо было передать из одного места в другое. Я работал в оборонной промышленности, а потом у нас была бы всемирная паутина и знания об Интернете, которые были от нее не связаны. Опять же, я думаю, что это то, что мы пытаемся сделать, объединив технологии и научные потребности, которые вы не могли бы предсказать, хотя несколько коротких лет назад они подошли бы вместе, понимая, что они это делают, а затем пытаемся создать соответствующую структуру, как можно быстрее продвигать науку вперед.

Женский динамик: Большое спасибо.

Ларри Томпсон: Следующий вопрос.

Оператор: Мы пойдем на сайт Роберта Стивенсона из International Scientific Communications, ваша линия открыта.

Роберт Стивенсон: Спасибо. Меня поразила очевидная параллель между проектом «Геном человека», который предполагал конкуренцию между частным сектором и государственным сектором, и доктором.Коллинз был замешан в этом. И то, что мы здесь делаем, я имею в виду, что фармацевтические компании, например, Novartis, — это 350 экранов, сделанных за последние три года, генерируя экраны против миллиона соединений, и снова во второй половине дня или около того. Просто кажется, что мы заново изобретаем здесь реальное, эта информация, как вы знаете, уже собрана обществом и обрабатывается ежедневно, я просто … я действительно не так впечатлен.

Доктор Фрэнсис Коллинз: Что ж, извините, это Фрэнсис Коллинз, позвольте мне попытаться произвести на вас впечатление или немного прояснить это, я думаю, вы упускаете здесь пару вещей.То, что Novartis делает со своими экранами, что мы все отмечаем и надеемся, что они сделают больше и улучшат более прекрасную работу при распространенных заболеваниях, — это поиск соединений, которые оказывают положительное влияние на потенциальное заболевание. Мы говорим здесь о том, чтобы изменить это, чтобы попытаться определить соединения, которые могут быть токсичными в окружающей среде, воздухе, воде, это не то, что Novartis считает своим бизнес-планом, я могу вам это обещать. И даже с другой стороны, Dr.Остин упомянул о том факте, что у нас в NCGC есть возможности для проведения такого рода высокопроизводительного скрининга для поиска соединений, которые в конечном итоге могут оказаться ценными в долгосрочной перспективе.

Это много, много шагов, и основное внимание будет уделяться редким заболеваниям, которые действительно не интересуют Novartis и другие фармацевтические компании. Итак, я думаю, вы неправильно поняли, здесь есть обстоятельства, мы полностью осознаем и Мы считаем очень ценной нашу возможность работать с частным сектором в этой и многих других областях, и то, о чем вы здесь слышите, — это создание ниши, в которую частный сектор действительно не был бы заинтересован вкладывать свои ресурсы.

Доктор Роберт Кавлок: это Боб Кавлок из EPA, я просто хотел бы добавить, что я думаю, что одна из уникальных вещей в нашем партнерстве, которое мы развиваем, это то, что будет сделано в открытом доступе. . Вся наша информация будет обнародована, чтобы ученые могли на нее взглянуть, публика — на нее, а регулирующие органы — на нее. И я думаю, что это большая разница между тем, что происходит в частном секторе фармацевтической промышленности, и тем, что мы пытаемся здесь делать.И я думаю, что у Рэя Тайса тоже есть заявление.

Доктор Рэймонд Тайс: Ну, на самом деле ты сказал это, Боб. Это Рэй Тайс; Единственное, что я хотел бы отметить, это то, что они не собираются тестировать те же типы соединений, которые мы тестируем. И поэтому мы сосредоточены на вещах, представляющих опасность для окружающей среды для человека, они обращаются к определенному классу лекарств, которые могут быть полезными. И снова они сохраняют конфиденциальность этих данных. Одна из самых больших проблем — это попытка получить доступ к имеющейся у них информации, чтобы мы могли использовать ее как часть нашего процесса продвижения вперед.

Мужской спикер: Я думаю, что это настоящая проблема, вот когда вам действительно стоит заняться.

Мужской динамик: Да, мы -.

Мужской спикер: И я думаю, что в их огромных библиотеках есть много интересующих вас соединений.

Мужской спикер: У нас заканчивается время, давайте перейдем к следующему вопросу, пожалуйста .

Оператор: Мы пойдем рядом с (Ларри Гринмайром) из Scientific American, ваша линия открыта.

Ларри Гринмайр: Привет, я надеялся, что вы немного больше расскажете о технологии, лежащей в основе этого, были сообщения об использованных мета-чипах и чипах данных — есть ли какие-либо прорывы в области технологий которые позволяют это сделать, или это просто объявление о том, что эта работа выполняется?

Ларри Томпсон: Доктор Остин хотел бы ответить, сэр

Доктор Кристофер Остин: Да.Я думаю, что Боб Кавлок упомянул … упомянул всего минуту назад. Есть много способов подойти к этой проблеме и множество различных типов анализов — и мы собираемся использовать их все, да, мета-чип, о котором вы говорите, — это то, с чем мы на самом деле хорошо знакомы и в чем заинтересованы. в использовании в этом сотрудничестве. Итак, да, мы всегда ищем новые технологии, всегда ищем новые способы решения этой проблемы. Проблема со многими из этих технологий, таких как мета-чип, заключается в том, что они просто не обладают достаточной пропускной способностью, что в принципе часто бывает.

Ларри Гринмайр: Спасибо.

Ларри Томпсон: Давайте перейдем к следующему вопросу.

Оператор: Мы пойдем рядом с (Лизой Баффи) из Pesticide & and Toxic Chemical News, ваша линия открыта.

Лиза: Привет, у меня два вопроса, если можно, прежде всего -.

Мужской динамик: Пока они короткие.

Лиза: Это позволяет мне, но берите все, что можете.

Мужской динамик: Хорошо. Пожалуйста, продолжайте.

Лиза: Прежде всего, если есть ограничения на испытания на животных и существующие данные, с которыми мы будем сравнивать новые результаты испытаний, которые вы сделали, и модели на животных, как вы устраните эти неопределенности. И мой второй вопрос заключается в том, что у меня есть какой-то токсиколог, который критикует некоторые из этих тестов, говоря, что токсичность — это не факт, это просто клетка или клетки, а все животное, так как вы планируете решать эти проблемы?

Др.Джон Бучер: Что ж, это Джон Бучер, я думаю, что то, что было частью этого прорыва, если вы хотите, — это правильное признание того, что пути токсичности, как — как определено национальным исследовательским советом, действительно сохраняются для межвидового взаимодействия, и теперь мы знаем достаточно о том, как реагируют продажи, как организации реагируют на токсичные агенты, мы можем попытаться разработать системы, которые позволят нам исследовать эти конкретные пути, чтобы полученные нами данные были применимы как к животным, так и к людям.Вот как мы надеялись решить эту конкретную проблему.

Ларри Томпсон: Круто, мы можем перейти к следующему вопросу.

Оператор: Мы пойдем рядом с Бобом Грантом из The Scientist.

Ларри Томпсон: Хорошо.

Боб Грант: Привет, спасибо, я рад, что наконец-то смог задать свой вопрос. Кто угодно может ответить на этот вопрос, но доктор Коллинз вначале сказал, что вы, ребята, не собрались сегодня утром и решили продолжить эту линию расследования, и я знаю, что нет ничего особенного нового в том, поставили ли вы тестирование или вычислительную токсикологию и нет ничего нового в анализах in vitro.Так что мне интересно, учитывая тот факт, что я очень мало рассказываю конкретно об инфраструктуре этого нового сотрудничества, какие новости здесь на самом деле?

Ларри Томпсон: Доктор Уилсон хотел бы ответить на этот вопрос?

Д-р Сэмюэл Уилсон: Да, я думаю, что новость — это возможность тестировать многие тысячи соединений в широком диапазоне концентраций и против целого ряда клеток-мишеней или химических путей клеток-мишеней. И это способность, которой у нас действительно не было до этого сотрудничества.Я остановлюсь на этом.

Ларри Томпсон: Хорошо.

Доктор Роберт Кавлок: Это Боб Кавлок из EPA. Я бы сказал, что ново то, что мы действительно закладываем очень логичную основу для использования этих технологий, для их понимания и для того, чтобы привести их в ситуацию, когда они могут быть использованы в рамках нормативной базы. Это действительно требует систематического подхода к их изучению и сравнению с традиционными подходами и с пробелами в традиционном подходе.И я думаю, что действительно ново то, что три организации проявили твердую приверженность, вы изучаете это действительно глубоко и очень быстро добиваетесь прогресса.

Мужской спикер: Кому-нибудь интересно — извините, кто-нибудь хочет избавиться от этой структуры, я мало слышу о специфике того, как данные будут распределяться между агентствами или финансирование, что за нами, что-нибудь в этом роде?

Мужской динамик: Конечно.

Доктор Элиас Зерхуни: Я думаю — это доктор Зерхуни, я думаю, нет никаких сомнений в том, что вы видите комбинацию 30-летней истории Национальной токсикологической программы NTP, где есть 2500 очень хорошо задокументированных соединений с очень, очень специфическими фенотипами животных, которые были охарактеризованы на протяжении многих лет и которые нам хорошо известны. Затем у вас есть EPA, знания, которые затем объединяются с тем, что мы делаем лучше всего, а именно с проблемой использования нашего масштабного тестирования сотен тысяч соединений и, как вы знаете, 15 различных концентраций, сотни различных анализов объединили это в один и тот же формат. как у нас в pubcam.

Если мы пойдем и зайдем в pubcam, вы увидите, что все, что мы делаем для полезных исследований, другими словами, поиска терапевтических средств, становится достоянием общественности. То же самое и здесь, но в конце вот — вот мечта, мечта в том, что могли бы вы в результате серии тестов получить очень специфические молекулярные сигнатуры, которые будут предсказывать токсикологию человека разными способами. то, что вы просто не можете сделать в тестах на животных сегодня. Это значение, другими словами, как я уже сказал, один плюс один равняется трем, целое намного больше, чем некоторые из частей здесь.

Д-р Фрэнсис Коллинз: Итак, это Фрэнсис Коллинз, просто чтобы ответить на ваш вопрос, какие новости, я думаю, вы слышали, почему это благородная новая парадигма для проведения токсикологических тестов? Что особенного в сегодняшнем дне? Что ж, есть этот Меморандум о взаимопонимании, подписанный всеми тремя агентствами, который будет размещен в сети, и вы можете посмотреть его, в котором излагается соглашение между группами о совместной работе, это новость. Газета и научный журнал, которые будут опубликованы завтра, на самом деле изложат этот подход в такой манере, о которой, я вам обещаю, оба научного сообщества не слышали, и если они посмотрят на статью, которую, как я подозреваю, многие из них сделают, они буду в восторге от этого.

Я думаю, что это не то, что будет чем-то вроде, о да, мы знали, что, конечно, если какое-либо новое объявление такого рода вы соберетесь и выясните, каковы научные возможности, так что да, мы были добавлены пару лет добираюсь до этой точки, но это запуск. Это момент, когда вы можете сказать, что мы официально начинаем что-то, что действительно может изменить способ оценки токсикологии и соединений в 21 веке, мы думали, что это ново.

Ларри Томпсон: Итак, это Ларри Томпсон, я боюсь, что мы … мы подошли к концу нашего часа. Хочу поблагодарить всех за то, что присоединились к сегодняшнему брифингу. Я хочу напомнить вам, что на этот материал наложено эмбарго до 2 часов сегодняшнего дня научным журналом и наложено эмбарго на газету. В то время и на всех веб-сайтах наших соответствующих организаций вы увидите множество материалов, включающих справочную информацию, Меморандум о взаимопонимании и научную статью или научную статью.И я хочу напомнить вам, что есть кадры, где вы можете пойти и посмотреть на систему, и вы получите немного больше ощущения физической инфраструктуры всего этого, что очень и очень круто. На этом я хотел бы завершить этот брифинг и поблагодарить вас всех за участие.

Оператор: На этом сегодняшняя телеконференция завершается. Хорошего дня. Вы можете отключиться в любой момент.

Функциональные преимущества интронов в геномах

Abstract

Интрон был большой биологической загадкой с тех пор, как он был впервые обнаружен в нескольких аспектах.Во-первых, все полностью секвенированные эукариоты несут интроны в геномной структуре, тогда как ни один из идентифицированных прокариот не несет интроны. Во-вторых, количество общих интронов варьируется у разных видов. В-третьих, длина и количество интронов различаются в разных генах, даже в пределах генома одного и того же вида. В-четвертых, все интроны копируются в РНК посредством транскрипции, а ДНК — за счет процессов репликации, но последовательности интронов не участвуют в последовательностях, кодирующих белок. Существование интронов в геноме должно быть бременем для некоторых клеток, потому что клетки должны потреблять много энергии, чтобы скопировать и вырезать их точно в нужных местах с помощью сложных сплайсосомных механизмов.Существование на протяжении долгой эволюционной истории объясняется только в том случае, если предполагается, что селективные преимущества переноса интронов предоставляются клеткам для преодоления негативного воздействия интронов. В этой связи мы резюмируем предыдущие исследования о функциональной роли или преимуществах интронов. Кроме того, будут представлены несколько других исследований, убедительно доказывающих, что интроны не должны быть мусором.

Ключевые слова: первый интрон, функциональные роли интронов, интроны, селективное преимущество

Введение

Все эукариотические геномы несут интроны как части некоторых генных структур, и интроны должны быть удалены с помощью сложного молекулярного механизма, называемого сплайсосомой, состоящей из пять мяРНК и более 150 белков [1,2].Хотя дебаты о происхождении интронов, то есть гипотеза о том, что интрон-ранний или интрон-поздний, все еще не завершены, очевидно, что большинство сплайсосомных интронов было получено после расхождения между прокариотами и эукариотами [3,4,5], и до сих пор не было обнаружено сплайсосомных интронов в клонах прокариот. Интрон все еще распространяется в некоторых эукариотических линиях [6], тогда как другие линии испытали значительную потерю интронов в течение эволюционной истории жизни [2]. Приматы имеют более высокую плотность интронных последовательностей, чем примитивные эукариоты, которые расходились раньше в истории эукариотической жизни, такие как дрожжи, Drosophila и Caenorhabditis elegans .Последовательности интронов составляют примерно 25% генома человека, что в 4-5 раз превышает размер экзонов [7]. Было замечено, что количество генов мало различается между этими эукариотическими видами, варьируя менее чем в 2 раза от 14000 до 25000 генов, тогда как размер интронов сильно варьируется в несколько раз, подразумевая, что интроны могут играть роль в определении видов: специфические характеристики и сложности [8].

Интроны, безусловно, создают огромную энергетическую нагрузку на клетку, учитывая, что плотность интронов (т.е., генные области, потребляющие большое количество энергии даром с точки зрения синтеза белка) больше, чем у экзонов в геномах. Причины, по которым интроны размножаются в некоторых эукариотических геномах, несмотря на этот энергетический недостаток, еще предстоит объяснить. Согласно Линчу [9], интроны — это просто эгоистичные ДНК, которые вторгаются в гены, кодирующие белки, в геномах эукариот, и вредные интроны могут поддерживаться из-за серьезных узких мест в популяции. Во многих исследованиях обсуждались селективные преимущества, которые интроны приносят клетке у эукариот, способствуя преодолению энергетического недостатка [2,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20].Однако результаты, полученные в различных исследованиях, до сих пор остаются противоречивыми [13,21,22,23,24,25].

Недавние мультиомные исследования с использованием крупномасштабных данных генома, транскриптома и эпигенома, полученных с помощью методов массового параллельного секвенирования или методов секвенирования следующего поколения, дают нам возможность исследовать новые территории в геномах и привести к новому функциональному пониманию некодирующих ДНК , межгенные области и интроны. В настоящем обзоре мы сначала представляем некоторые исследования, показывающие, какие молекулярные характеристики интронов нельзя объяснить простым случайным мутационным процессом, которому, возможно, подверглась настоящая мусорная ДНК.Затем мы суммируем функциональные характеристики интронов, которые были изучены, что дает ключ к разгадке адаптивного значения интронов в геномах. Мы разделяем функциональные роли интронов на две разные категории: прямые и косвенные роли в [15,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35,36,37,38,39 , 40,41,42,43,44,45,46] и продемонстрируйте подробности в разделе результатов.

Таблица 1

Резюме прямых и непрямых функций интронов

Тем не менее проблематично то, что «функция» генов в молекулярной биологии обычно ограничивается концепцией «функции белка».Как недавно активно обсуждается, «биологическая функция» должна быть расширена до регуляции экспрессии с помощью цис-действующих элементов, расположенных во внешних регионах кодирующих белок частей генов [47], и это то, что мы имеем в виду при обсуждении функции интронов.

Обсуждение

Существование интронов в геноме — настоящая загадка, учитывая дорогостоящие затраты энергии, которые клетка должна платить за копирование всей длины нескольких интронов в гене и вырезание их в точном месте, контролируемое большой РНК и белковые комплексы после транскрипции.Тем не менее, наиболее полно геномы эукариотических клеток пока несут интроны в своих геномах [69,70], и некоторые исследования даже показали, что интроны размножались в ходе эволюции эукариотических клонов [3,9,71,72,73]. Происхождение сплайсосомных интронов в эукариотической линии было предпринято для объяснения массивной инвазии самосплайсинговых интронов группы II от бактерий к эукариотам [3,5]. Очень трудно понять, как и почему интроны размножаются в эукариотических клонах и каково положительное влияние интронов на выживаемость клеток.

Мы рассмотрели здесь предполагаемую функциональную роль интронов в различных клеточных процессах, таких как сплайсинг, транспорт мРНК, NMD и регуляция экспрессии. Кроме того, интроны могут дать некоторые преимущества в качестве мутационного буфера в геномах эукариот, защищая кодирующие последовательности от воздействия случайно возникающих вредных мутаций. Интроны занимают в среднем около 40% от общей длины генов, а это означает, что большинство случайно возникающих мутаций попадают в области интронов и не влияют на последовательности и функции белков.Однако неясно, насколько широко и сильно этот буферный эффект интронных областей может иметь эволюционные преимущества для удержания интронов против давления удаления клеточной нагрузки.

Взятые вместе, интроны явно не являются мусором, и они обеспечивают селективные преимущества для клеток, которые должны поддерживаться эволюционно, тем не менее, это требует больших энергетических затрат. Новые передовые методы молекулярной биологии в ближайшем будущем приведут к более детальному изучению функциональных территорий интронов.

Стенограмма виртуальной пресс-конференции COVID-19

Обзор

Клавиша спикера:

MF Mi Feng

LW Профессор Лян Ваннян

PE Г-н Питер Бен Эмбарек

MK Госпожа Мэрион Купманс

QU Вопросники

00:00:23

MF Дамы и господа, уважаемые дамы и господа. после полудня. Добро пожаловать на пресс-конференцию совместной группы экспертов по исследованию происхождения SARS-CoV-2 в Китае.Это Ми Фэн, представитель Китайского национального здравоохранения. Комиссия.

С тех пор, как COVID-19 превратился в глобальную пандемию, ВОЗ активно продвигает международное сотрудничество в области ответных мер на COVID-19. Китай всегда оказывал твердую поддержку ВОЗ с точки зрения раскрытия роли ВОЗ в руководстве глобальный ответ на COVID-19.

00:01:55

На основе консенсуса, основанного на двусторонних переговорах, Китай и ВОЗ провели совместное исследование глобального поиска источников SARS-CoV-2, включая китайские компоненты, с момента прибытия международных групп экспертов в Ухань. с 14 января 2021 г.Сустав Команда экспертов работала из трех групп, соответственно, группы эпидемиологии, молекулярных исследований, животных и окружающей среды. Эксперты работали в формате видеоконференций, выездных интервью и визитов, а также дискуссий. Они провели систематические и полноценные исследования. Они уже завершили китайскую часть поиска источников в Ухане в соответствии с первоначальным планом.

В течение этого периода г-н Ма Сяовей, министр Национальной комиссии здравоохранения Китая, обсуждал и много общался с д-ром Тедросом, Генеральным директором ВОЗ, по телефону.Они полностью обменялись своими идеями с точки зрения научное сотрудничество в поиске источников происхождения.

00:03:47

На сегодняшнюю конференцию у нас есть участники из совместной группы экспертов, и это г-н Питер Бен Эмбарек, эксперт ВОЗ по продовольственной безопасности, а также г-жа Марион Купманс, член совместной группы экспертов, а также команда. лидер молекулярного группа эпидемиологических исследований, а также профессор Лян Ваннян из Университета Цинхуа. Он является руководителем китайской команды объединенной группы экспертов.

Участники совместной группы экспертов представят общественности и прессе актуальную ситуацию с отслеживанием происхождения SARS-CoV-2 в Китае, а также ответят на ваши вопросы. Эта пресс-конференция будет иметь последовательные устный перевод, чтобы пресса могла задать ваш вопрос на китайском или английском языках.

Сначала я хотел бы пригласить профессора Лян Ванняна, руководителя группы с китайской стороны, чтобы он представил соответствующие достижения в отслеживании источников в Ухане.

LW Дорогие друзья из прессы, добрый день. От имени руководителя группы с китайской стороны совместной группы экспертов Китая и ВОЗ по исследованию происхождения SARS-CoV-2 я хотел бы дать вам краткое введение. основного исследовательского процесса, а также основных результатов наших усилий в рамках нашей недавней миссии в отношении выводов, рекомендаций и планов на будущее. Эти две части будут представлены руководителем группы экспертов ВОЗ д-ром Питер Бен.

00:07:02

Эта миссия в Ухане с января по февраль 2021 года основана на первоначальной миссии, которая была подтверждена ВОЗ с точки зрения глобального исследования поиска источников SARS-CoV-2. Это первая часть, китайская часть, а также отчет о совместном исследовании. основан на кристаллизации соответствующих исследований китайских и зарубежных ученых в прошлом, а также на обзоре литературы по предыдущим исследованиям, а также анализ будет также включен в этот совместный отчет.

В мае 2020 года Всемирная ассамблея здравоохранения обратилась к Генеральному директору Всемирной организации здравоохранения с просьбой работать с партнерами над выявлением зоонозного источника SARS-CoV-2, вируса, вызывающего COVID-19, и пути его распространения. к человеку популяция, включая возможную роль промежуточных хозяев. Цель состояла в том, чтобы предотвратить повторное заражение вирусом у животных и людей и предотвратить создание новых зоонозных резервуаров, а также снизить дальнейший риск появления и передача зоонозов.

В июле 2020 года ВОЗ и Китай начали работу по гранту на исследования по определению происхождения вируса. Согласованное техническое задание или ТЗ определяют объем исследований, основные руководящие принципы и основные ожидаемые результаты. Эти ТЗ предусматривали начальная фаза краткосрочных исследований, чтобы лучше понять, как вирус мог быть занесен и начал циркулировать в Ухане. Секретариат ВОЗ и правительство Китая вместе создали международную многопрофильную команду для разрабатывать, поддерживать и проводить эти исследования, чтобы способствовать отслеживанию происхождения SARS-CoV-2 и путей его передачи людям.Работа совместной международной команды была выделена грантом для работы по отслеживанию происхождения в другом месте.

00:11:57

Таким образом, глобальная работа по отслеживанию происхождения не будет привязана к какому-либо месту и может развиваться географически по мере накопления доказательств и развития научных гипотез. Общие результаты и выводы будут способствовать повышению глобальной готовности и реагирования к SARS-CoV-2 и возникающим зоонозным заболеваниям аналогичного происхождения.

Объединенная международная команда состоит из 17 китайских экспертов и 17 международных экспертов из десяти других стран.Также они представляют ВОЗ, Всемирную организацию здравоохранения животных, партнеров в Глобальной сети оповещения о вспышках болезней и ответных мер. Совместная исследовательская группа было проведено в течение 28 периодов [sic] исследований с 14 января по 10 февраля 2021 года в Ухане с большим количеством исследований на местах.

Команда с помощью трех рабочих групп рассмотрела прогресс, достигнутый китайскими экспертами в исследованиях первого этапа в следующих трех областях: эпидемиология, животные и окружающая среда, а также молекулярная эпидемиология и биоинформатика.

В дополнение к трем рабочим группам, международная группа получила подробные презентации по актуальным темам для информирования о своей работе и провела серию визитов на места и интервью с ключевыми информаторами.

Теперь я хотел бы вкратце познакомить вас с основными выводами нашей совместной миссии. Первая часть моего введения будет результатами молекулярно-эпидемиологического исследования.

00:16:11

Поскольку большинство новых вирусов происходит от животных, понимание процесса, который может привести к распространению и глобальному распространению, требует глубокого анализа как разнообразия, так и эволюции вирусов в резервуаре животных, взаимодействий между животными, окружающая среда и люди, а также факторы, способствующие эффективной передаче от человека к человеку.

Вообще говоря, вирус, вызывающий глобальную пандемию, должен хорошо адаптироваться к среде обитания человека. Такая адаптация может произойти внезапно или пройти несколько этапов, каждый из которых обусловлен естественным отбором.

Поэтому поиск истоков SARS-CoV-2 необходимо сосредоточить на двух этапах. Первая фаза включает циркуляцию вируса в организме животных-хозяев до передачи зоонозов. В ходе этого эволюционного процесса различные виды животных могут служить резервуарными хозяевами.

Тестирование потомства SARS-CoV-2 могло повысить способность заражать людей во время их циркуляции. Открытие вирусных последовательностей с высокой гомологией с SARS-CoV-2 предполагает, что SARS-CoV-2 мог возникнуть в результате зоонозной передачи, но резервуарные хозяева еще предстоит идентифицировать.

00:20:11

Вторая фаза включает эволюцию SARS-CoV-2 во время его распространения среди людей после передачи зоонозов. Вероятность передачи инфекции между животными и людьми возрастает с увеличением частоты и интенсивности контактов между животными и людьми.Перелив может повторяться, если геном вируса в резервуаре требует дальнейшей адаптации для эффективной дальнейшей передачи. Такие ранние выбросы могут остаться незамеченными. Как только вирусы с пандемической популяцией разовьются или распространятся, это позволит их распространение, что привело к образованию значительных скоплений вирусов с адаптивными мутациями в различных географических популяциях человека и, следовательно, к пандемии COVID-19.

Данные исследований и целевых исследований на данный момент показали, что коронавирусы, наиболее связанные с SARS-CoV-2, можно найти у летучих мышей и ящеров, что позволяет предположить, что эти млекопитающие могут быть резервуаром вируса, вызывающего COVID-19. высокого сходство последовательностей между штампом вирусов и SARS-CoV-2.Однако вирусы, идентифицированные до сих пор ни от одного из этих видов, достаточно похожи на SARS-CoV-2, чтобы служить прямым предшественником SARS-CoV-2.

В дополнение к этим находкам высокая восприимчивость норок и кошек к SARS-CoV-2 предполагает, что могут существовать дополнительные виды животных, например, принадлежащие к семейству куньих или кошачьих, а также другие виды, которые действуют как потенциальные резервуары. Сравнение данных из последовательных баз данных с данными исследований потенциальных резервуарных видов показывает, что из этих возможных резервуаров проводится массовая недостаточная выборка или этого исследования недостаточно.

00:24:10

Совместная группа проанализировала данные, собранные Китайским национальным центром биоинформации в своей интегрированной базе данных, содержащей все доступные последовательности и метаданные коронавируса.

Для случаев, выявленных в Ухане, Китай, данные были связаны с эпидемиологическим фоном для отбора образцов из случаев заболевания, начавшегося до 31 декабря. Окончательный анализ показал, что несколько случаев, связанных с воздействием на рынок Хуанань, имели идентичные геномы вирусов, что позволяет предположить, что они могут быть частью кластера.

Однако данные о последовательностях также показывают, что некоторое разнообразие вирусов уже присутствовало на ранней стадии пандемии в Ухане, что позволяет предположить, что цепочки передачи без выборки выходят за пределы кластера рынка Хуанань. По эпидемиологическим показателям явной кластеризации не было. параметры выдержки сырого мяса или пушных зверей.

Наконец, согласно обзору соответствующей литературы, касающемуся исследования данных, предполагается, что ранняя циркуляция SARS-CoV-2 из неопубликованных исследований также была очень важной частью нашего обзора.Эти исследования из разных стран показывают, что что циркуляция SARS-CoV-2 на несколько недель опережает первоначальное выявление случаев заболевания. Некоторые из предполагаемых положительных проб были обнаружены даже раньше, чем был зарегистрирован первый случай. Это указывает на возможность пропуска заявленного тиража. в других регионах.

00:28:18

Таким образом, такое упущение или сообщение о случаях или занижение сведений о таких случаях в значительной степени связаны с течением болезни, а также с симптомами этой болезни.Итак, это основное суждение, которое мы можем сделать после обзора глобального данные и соответствующая литература мирового исследовательского сообщества.

Вторая часть моего введения будет посвящена поиску источников, проводимому эпидемиологической группой. Наблюдение за гриппоподобными заболеваниями или ГПЗ и тяжелыми острыми респираторными заболеваниями, ТОРИ, с соответствующим лабораторным подтверждением является стандартом. мера воздействия гриппа и других респираторных вирусов в обществе для определения возможного воздействия мобильности или возбудителя COVID-19 за месяц до вспышки COVID-19.

Были проанализированы данные дозорного эпиднадзора за ГПЗ из одной больницы в Ухане и данные эпиднадзора за ТОРИ из провинциальной больницы в провинции Хубэй. Полное название ТОРИ — тяжелое острое респираторное заболевание. Результаты показали, что нет существенных нераспознанная циркуляция SARS-CoV-2 в Ухане во второй половине 2019 года.

При ретроспективном тестировании удобного подмножества сохраненных образцов из более чем 4500 образцов исследовательских проектов со второй половины 2019 года, хранящихся в различных больницах Ухани, В остальной части провинции Хубэй и других провинциях SARS-CoV-2 выявлено не было.

Также был проведен анализ розничных аптек на предмет покупки жаропонижающих средств, препаратов от простуды и от кашля, и он не предоставил полезного индикатора ранней активности SARS-CoV-2 в сообществе.

00:32:47

Также в период с июля по декабрь 2019 года мы провели обзор данных эпиднадзора за смертностью от всех причин и смертностью от пневмонии в городе Ухань и остальной части провинции Хубэй. Он дал мало свидетельств существенных неожиданностей. колебания смертности, которые могут указывать на передачу SARS-CoV-2.

Нет никаких признаков передачи SARS-CoV-2 среди населения в период до декабря 2019 года. Также недостаточно доказательств, чтобы определить, распространилась ли инфекция SARS-CoV-2 в Ухане до декабря 2019 года.

Мы также провели исследование среди 233 [?] Медицинских учреждений в Ухане, изучив записи 76000 эпизодов, представляющих одно из четырех состояний, соответственно, лихорадку, острое респираторное заболевание, гриппоподобное заболевание и все неуточненные пневмонии, в период с 1 октября по 10 декабря 2019 г.

Мы также проверили анализ крови, полученной из соответствующего банка данных, а также проверили антитела в образцах крови. Все бездействовали. Кроме того, после этого был проведен мультидисциплинарный клинический обзор этих случаев, в результате которого были определены: что ни один из них не был совместим с инфекцией SARS-CoV-2.

Ретроспективный поиск потенциальных более ранних случаев заболевания в Ухане за два месяца до вспышки в декабре 2019 года не выявил четких доказательств возникновения клинических случаев инфекции SARS-CoV-2.На основе анализа этого и По другим данным эпиднадзора, маловероятно, что в Ухани в течение этих двух месяцев происходила какая-либо значительная передача инфекции SARS-CoV-2.

00:37:47

Значительная передача инфекции SARS-CoV-2 произошла среди населения Ухани в декабре 2019 года, при этом большинство случаев было зарегистрировано во второй половине того же месяца. Многие ранее зарегистрированные случаи были связаны с рынком Хуанань, что указывает на то, что это был один из фокус трансмиссии.Тем не менее, в то же время передача происходила и в другом месте Ухани.

На основании текущей эпидемиологической информации невозможно определить, как SARS-CoV-2 был введен на рынок Хуанань. Значительная передача инфекции SARS-CoV-2 произошла среди населения Уханя в декабре 2019 года.

Хотя некоторые из первых случаев были связаны с рынком морепродуктов Хуанань, другие были связаны с другими рынками, а другие случаи не имели рыночной связи на все.Вполне вероятно, что рынок морепродуктов Хуанань выступал в качестве центра передачи вирус, но есть также передачи, которые, по-видимому, произошли в другом месте в Ухане в то же время. Это наше основное суждение. На основании текущей информации невозможно определить, каким образом SARS-CoV-2 был введен в рынок Хуанань.

Третья часть моего введения будет посвящена исследованию группы среды обитания животных, третьей группы нашей совместной миссии.Коронавирусы, которые филогенетически связаны с SARS-CoV-2, были идентифицированы у разных животных, в том числе у подковообразных летучих мышей. и ящеры. Однако отбор образцов летучих мышей в провинции Хубэй не смог выявить доказательств наличия вирусов, связанных с SARS-CoV-2, а отбор образцов дикой природы в разных местах в Китае до сих пор не смог выявить присутствие SARS-CoV-2.

00:42:08

Отбор проб окружающей среды на рынке Хуанань справа в момент его закрытия выявил широко распространенное загрязнение поверхностей SARS-CoV-2, совместимое с проникновением вируса через инфицированных людей или зараженные продукты холодовой цепи, животных , и продукты животного происхождения.

Согласно этому исследованию, все пробы, относящиеся к продуктам животного происхождения или животным, были отрицательными. Что касается продуктов холодовой цепи и соответствующих испытаний, исследования находятся на постоянной стадии.

SARS-CoV-2 может сохраняться в условиях замороженных пищевых продуктов, упаковки и продуктов холодовой цепи. В этих случаях недавние вспышки в Китае были связаны с холодовой цепью. Исследования показали, что вирус может долго сохраняться не только при низких температурах. температуры, но также и при температуре холодильника, что указывает на то, что его можно переносить на большие расстояния с продуктами холодовой цепи.Поэтому дальнейшие исследования вируса с точки зрения его устойчивости в условиях низкой окружающей среды, а также во временной среде, где относительно высокая влажность подлежит дальнейшим исследованиям.

На рынке Хуанань значительное количество магазинов продают продукты холодовой цепи, но неясно, насколько хорошо первоначальные случаи у людей, связанных с рынком, могут быть сопоставлены или сопоставлены с магазинами, которые продают эти продукты. Нам нужны дальнейшие исследования в этой области.

00:45:07

Итак, это мое введение в наши основные выводы по трем группам совместной миссии.

MF Спасибо, профессор Лян Ваньнянь. Теперь я хотел бы пригласить доктора Питера выступить с введением.

PE Спасибо, доктор Ми Фенг и профессор Ваннян, за введение и представление наших результатов, а также за то, как мы проводили свою работу.

Сегодня днем ​​я здесь с Марион Купманс из Центра Эразмус в Нидерландах. Она одна из членов международной группы, которая приехала сюда месяц назад вместе с коллегами из ВОЗ и МЭБ.Она будет представлять здесь весь команда, которая, к сожалению, не может сидеть с нами в комнате, и мы поделимся вопросом позже вместе.

Вначале я хотел бы поблагодарить вас, тех, кто сегодня находится в зале, и тех, кто присоединяется к нам удаленно. Мы следили за многими из вас в последние несколько недель, и я хотел бы поприветствовать тех, кого мы видели каждый день, которые следовали за нами в холодные дни надолго. часов, в дождь и непогоду. На самом деле мы благодарим вас за то, что подписались на нас. Это дает нам постоянное напоминание о важности этой работы и о том внимании, которое весь мир уделяет этой работе.Так что спасибо, что подписались на нас.

00:48:26

Международная группа хотела бы признать влияние эпидемии на Ухань, на город Ухань, со стороны пострадавших людей, затронутых сообществ, как со стороны правительства, так и со стороны официальных лиц, ученых, и, в частности, медицинские работники кто боролся с болезнью в прошлом году. В частности, я благодарю и одобряю участие моего коллеги профессора Ванняна, который провел здесь несколько месяцев в прошлом году на передовой.Спасибо за это, профессор Ванниан.

Итак, вы слышали многие выводы, которые мы обнаружили в ходе наших исследований и работы за последние несколько недель, и они, конечно же, будут подробно описаны в отчете этой миссии, который будет выпущен позже. Я хотел бы сосредоточиться на некоторых из наших ключевых выводы из этих выводов. Мы пришли сюда с двумя целями, двумя задачами. Один из них — попытаться лучше понять, что произошло в начале мероприятия в декабре 2019 года.Это было отправной точкой для нашей работы, но также и отправной точкой точка начальной вспышки.

Итак, мы сосредоточились на том, чтобы попытаться понять, что произошло в этот период, и попытаться выяснить, была ли у этого периода предыстория. Можем ли мы перенести историю начала вспышки дальше в более ранние недели 2019 года? Затем параллельно мы также попытались понять, как это произошло. Как вирус появился, в какой-то момент распространился и попал в человеческую популяцию? Итак, это были две широкие, большие цели, которые у нас были, и все наши исследования, работа и обсуждения. и посещения были направлены на то, чтобы лучше понять эти две картинки.

00:52:17

Итак, с точки зрения понимания того, что произошло в первые дни декабря 2019 года, изменили ли мы кардинально ту картину, которая была у нас до этого? Я так не думаю. Улучшили ли мы наше понимание? Добавили ли мы детали к этой истории? Абсолютно, и вы слышали некоторые основных выводов профессора Ванниана на этой фотографии.

Пытаясь понять картину декабря 2019 года, мы приступили к очень подробному и глубокому поиску других дел, которые могли быть упущены, случаев в начале 2019 года, и вы слышали подробности от профессора Ванниана.Был сделан вывод, что мы сделали не найти доказательств крупных вспышек, которые могли быть связаны со случаями COVID-19 до 19 декабря в Ухане или где-либо еще.

Мы также можем согласиться с тем, что мы нашли доказательства более широкого распространения вируса в декабре. Это была не только кластерная вспышка на рынке Хуанань, но и вирус распространялся за пределы рынка.

Картина, которую мы видим, представляет собой очень классическую картину начала новой вспышки, когда мы начинаем с нескольких спорадических случаев в начале декабря, а затем мы начинаем видеть небольшие вспышки, когда болезнь начинает распространяться кластерами, и мы видели, среди прочего, что происходит на рынке Хуанань.

Эти ранние кластеры обычно, также и в этом случае, являются способом выявления первых случаев, первым признаком этих возникающих заболеваний. Это то, что произошло в декабре 2019 года.

00:56:15

При отображении всех начальных случаев времени в течение декабря, в сочетании с местоположением и отображением некоторых из них на рынках впереди [? ] часть рынков, и объединяя это с генетическими последовательностями и генетической информацией от некоторых В этих случаях мы могли видеть, что эта картина все более и более очищалась от спреда внутри рынка и за его пределами.Первоначально очень мало случаев, а затем все больше и больше случаев, когда мы переместились в январь 2020 года.

Данные и информация, которые мы получили в результате очень большого количества ретроспективных исследований с помощью различных исследований данных о смертности, данных эпиднадзора за болезнями и т. Д., А также повторный анализ большого количества исходных генетических последовательностей, идентифицированных в В первые дни события в начале января все эти данные прекрасно и очень хорошо утешают нас в картине, которую я только что описал.

Затем мы попытались лучше понять, как вирус был занесен в Ухань и откуда он появился.

Вся работа, которая была проделана с вирусом и попытки определить его происхождение, по-прежнему указывают на естественный резервуар этого вируса и подобных ему вирусов в популяции летучих мышей.

Но поскольку Ухань не является городом или окружающей средой, близкой к среде обитания летучих мышей, прямой прыжок с летучих мышей в город Ухань маловероятен. Поэтому мы попытались выяснить, какие другие виды животных были завезены в город и из него. которые потенциально могли внести или способствовать распространению вируса, в частности, на рынке Хуанань.

01:00:32

Рынок в основном имел дело с замороженными продуктами, в частности, замороженными продуктами животного происхождения и в основном морепродуктами, но были также продавцы, продающие продукты из одомашненных диких животных, выращиваемых диких животных и их продукты.

Итак, совместная группа в своих исследованиях определила поставщиков, которые продавали этот тип продуктов, определила поставщиков этих поставщиков, определила фермы, откуда эти продукты поступали, и они поступали из разных частей. страны, и некоторые продукты, конечно же, были импортными.Таким образом, есть потенциал, чтобы продолжить следовать этому примеру и продолжить изучение цепочки поставок и животных, которые были поставлены на рынок в замороженном и переработанном виде. и полуфабрикаты или сырые формы.

Также было проведено большое количество тестов на коронавирус, ответственный за COVID-19, у многих различных видов животных по всей стране на большом количестве образцов как домашних животных, так и сельскохозяйственных животных, а также диких животных во многих разных провинциях. Благодаря этим исследованиям не удалось определить какой-либо вид животных в качестве потенциального резервуара для этой болезни, и они показывают, что в настоящее время, а также в 2019 году не похоже, что вирус широко циркулировал ни в одном виды животных в стране.

Таким образом, поиск возможного пути проникновения вируса через виды животных и конкретный резервуар все еще продолжается. Итак, что мы сделали после изучения наших результатов и объединения информации, которую мы могли извлечь из этого открытия… Затем мы сели и сказали себе: «Хорошо, следующий шаг — давайте посмотрим в будущее». О чем говорят нам эти выводы и как мы собираемся двигаться вперед в поисках начала истории? Итак, мы рассмотрели все возможные пути для внедрения вируса в человеческую популяцию, и вы будете иметь подробности в отчете, но, по сути, это очень простая иллюстрация различных путей проникновения от диких животных в различные среды, где человек и животные и продукты могут взаимодействовать.

01:06:01

Затем мы определили четыре основные гипотезы или группы гипотез о том, как вирус мог быть занесен в человеческую популяцию. Мы решили применить этот подход, чтобы изначально действительно охватить все возможные пути без каких-либо ценность и без какой-либо оценки или суждения, но исключительно для того, чтобы убедиться, что мы охватим все возможные пути проникновения вируса в человеческую популяцию.

После того, как мы определили эти четыре ключевые гипотезы, мы также провели поиск литературы, чтобы убедиться, что мы не пропустили некоторые ценные варианты, которые могли бы предложить другие.Затем мы сели и рассмотрели эти разные гипотезы одну за другой. и оценили их вероятность, выдвинув аргументы и аргументы против таких гипотез, а затем оценив вероятность каждой из них систематическим образом, рациональным способом, используя научные аргументы и объединяя всю информацию. которые мы коллективно собрали за последние четыре недели, а также, конечно, с помощью обширного поиска в литературе полезных научных аргументов.

Итак, четыре основные гипотезы, которые мы определили и оценили, — это, во-первых, прямой перенос зоонозов, то есть прямая передача от животного резервуара или вида животных в человеческую популяцию, так что прямой переход от животного к человеку. .

01:09:37

Вторая гипотеза заключалась в проникновении вируса через промежуточный вид-хозяин, что означает другой вид животных, потенциально более близкий к человеку, где вирус потенциально может адаптироваться или циркулировать, а затем снова переходить к людям.

Третий — это пищевая цепь, в частности, потенциальная пища, в частности, замороженные продукты, действующая как поверхность для передачи вируса населению и / или путь передачи, связанный с пищевыми продуктами.

Последней была возможность инцидента, связанного с лабораторией.

Как я уже сказал, мы применили систематический подход к рассмотрению всех этих гипотез, выдвигая аргументы за и против и оценивая вероятность с использованием стандартизованного набора параметров. Затем каждый из них использовался, чтобы помочь нам определить приоритеты будущих исследований в полезной направление, которое поможет нам продолжить наш путь к лучшему пониманию происхождения вируса.

Наши первоначальные результаты показывают, что интродукция через промежуточный вид-хозяин является наиболее вероятным путем, который потребует дополнительных исследований и более конкретных целевых исследований.

Аналогичным образом и связана с этой гипотезой, включая возможность передачи через торговлю замороженными продуктами холодовой цепи.

01:13:18

Здесь мы делаем разницу между проникновением вируса в человеческую популяцию и возможностью распространения вируса на большие расстояния и в различных условиях или проникновением вируса в человеческую популяцию. специфический настройка как маркет например.

Тогда гипотеза о прямом перетекании из исходного животного источника в человеческую популяцию также является возможным путем и также дает рекомендации для будущих исследований.

Тем не менее, результаты показывают, что гипотеза лабораторного инцидента крайне маловероятна для объяснения внедрения вируса в человеческую популяцию и, следовательно, не является гипотезой, которая подразумевает необходимость проведения будущих исследований в нашей работе для поддержки наша будущая работа в понимании происхождения вируса.

Таким образом, это обсуждение различных гипотез и того, как они помогут нам направить наши будущие исследования, было чрезвычайно полезным, и мы смогли затем разработать серию рекомендаций для будущих исследований, будущей работы в соответствии с планом, который мы изложили. В июле прошлого года в техническом задании было разработано, как мы будем подходить к пониманию происхождения вируса и какой тип последовательности в исследованиях, которые потребуются.Так что план, который мы разработали в июле 2020 года, все еще в силе. Это было чрезвычайно помогает направлять нашу работу, и рекомендации, которые мы даем в конце этих миссий, соответствуют этому подходу.

01:17:04

Итак, мы определили и предлагаем в нашем отчете большое количество ценных рекомендаций и идей для будущих исследований, но здесь я просто упомяну некоторые ключевые исследования и ключевые рекомендации, которые мы делаем .

Одним из них является расширение существующих интегрированных баз данных, которые объединяют эпидемиологические, клинические и молекулярные данные о конкретных случаях, а также чрезвычайно полезные генетические последовательности.Таким образом, вся эта информация может быть доступна и подключена через интегрированные базы данных, и это должно быть сделано на глобальном уровне, чтобы облегчить анализ и соединение данных, поступающих из разных частей мира, чтобы помочь нам лучше понять и лучше связать все данные и информацию, которые исходит из многих из этих исследовательских проектов.

Это, конечно, также будет включать данные обследований животных, экологических обследований и позволит нам интегрировать всю эту информацию и наилучшим образом использовать многие из наших исследований.

В нашем поиске, чтобы попытаться идентифицировать более ранние случаи, потому что это поможет нам лучше понять начало события, мы бы рекомендовали продолжить некоторую хорошую работу, начатую в поисках материала, который можно проанализировать, все еще доступен с того времени. Многие из этих материалов уже изучены, и мы слышали множество исследований, проведенных за последние недели и месяцы, но мы выявили новые потенциальные источники ценных материалов, которые могут быть проанализированы и, возможно, помогут нам продвинуться в этом направлении.

01:20:04

Один из них, просто чтобы привести пример, — это образцы крови из банков крови, и не только здесь, в Ухане и других городах и провинциях, представляющих интерес, но также использовать эти материалы в других местах, где есть первоначальные отчеты и признаки того, что, возможно, вирус был также присутствуют у людей в других местах и ​​других странах. Такое исследование могло бы помочь лучше понять первые дни события, если некоторые из них вернутся к положительным результатам. Поэтому мы должны продолжить поиск материала, который могут быть проанализированы и дать нам подсказки о том, что произошло в первые дни события.

Нам также следует изучить новые подходы и новые способы изучения и усиления использования серологических тестов в некоторых материалах, которые уже были протестированы. Здесь мы говорим о тестах, которые позволяют нам искать во всех образцах следы наличие вируса на тот момент. Здесь нам нужны новые подходы и новые способы сделать это.

Конечно, мы можем продолжить изучение потенциала ранних случаев. Даже если память исчезает, если люди становятся менее доступными и доступными, а клинический материал также становится все менее и менее доступным, целенаправленные углубленные исследования по-прежнему имеют значение. Некоторые из этих случаев потенциально могут предоставить более полезную информацию, но уже многое было сделано в попытках извлечь всю информацию, которую мы могли извлечь из этих ранних случаев в декабре 2019 года.

Для исследований, чтобы лучше изучить гипотезу о том, что в интродукцию были вовлечены промежуточные виды животных или исходные виды животных, здесь нам необходимо провести больше исследований определенных видов животных, которые могут быть резервуаром или действовать как резервуар и, конечно же, включает в себя больше выборок и больше исследований популяции летучих мышей не только в Китае, потому что уже много было проверено с точки зрения летучих мышей в Китае, но мы знаем, что некоторые из подобных видов, найденных в Китае, также встречаются в соседних страны субрегиона и других частей мира.Там есть недообследование, потому что во многих из этих стран было сделано немногое с точки зрения обследования летучих мышей, и там у нас также могут быть некоторые интересные исследования.

01:25:37

Нам также нужно сделать гораздо больше, чтобы понять возможную роль замороженных продуктов холодовой цепи в проникновении вируса на расстояние. Мы знаем, что вирус может сохраняться и выживать в условиях, характерных для этих холодных и замороженных окружающей среде, но мы действительно не понимаем, может ли вирус затем передаваться людям и при каких условиях это могло произойти.Было бы интересно изучить, может ли зараженное замороженное дикое животное быть потенциальным средством распространения инфекции. внедрение вируса или вирусов в рыночную среду, где мы знаем, что температура, влажность и окружающая среда могут способствовать быстрому распространению вируса в такой среде. Так что нужно проделать много работы, чтобы лучше понять эти интересные пути.

Нам также следует заглянуть в прошлое, чтобы отследить источник продуктов и, в частности, источник продуктов животного происхождения, которые были на рынке Хуанань 19 декабря.Вернитесь и посмотрите, сможем ли мы найти продукты, которые были произведены в то время и которые все еще можно посмотреть на поставщиков этих продавцов на рынке. Посмотрим, сможем ли мы пойти дальше назад в плане выявления интересных подсказок в среде ведения сельского хозяйства у видов, выращиваемых на этих фермах, и где они потенциально могли быть исходящий из до этого. Так что это еще одна область, которую мы исследуем.

При разработке гипотез для нас было важно убедиться, что они не связаны географически, потому что с самого начала мы придерживались открытого подхода, не ограничивая себя подобным образом.Одна из очевидных причин заключается в том, что возможный путь от любых исходных видов животных до рынка Хуанань мог пройти очень долгий и запутанный путь, включающий также перемещения через границы, путешествия и т. д., прежде чем попасть на рынок Хуанань.

01:29:40

Поэтому также очень интересно следить за каждой из этих подсказок, предварительных отчетов и указаний на то, что, возможно, кое-где в других местах в мире были люди, которые были инфицированы и пытаются следить за ними. на этих и снова соедините точки, соедините различные части информации, чтобы попытаться лучше понять всю эту картину, снова не ограничивая себя какими-либо предвзятыми идеями и просто следуя всем подсказкам, следуя науке, следуя грамотно спланированные и проведенные исследования.

Прошу прощения за эти два пространных представления, но мы считаем необходимым представить вам четкую картину всей работы, которую мы провели за последние четыре недели и ранее, и попытаться дать вам представление обо всех наших выводах и выводы. Теперь я снова предоставляю слово доктору Ми Фэну. Спасибо.

MF Спасибо, доктор Питер. Только что мы выслушали вступительное слово руководителей групп с обеих сторон. Они представили основное содержание и основные моменты совместного отчета.Теперь мы бы люблю отвечать на ваши вопросы. Прежде чем задать вопрос, представьтесь, указав, в каком информационном агентстве вы работаете. Чтобы дать больше шансов разным журналистам, задайте один вопрос от одного журналиста. Спасибо. Теперь мы рады ответить на ваш вопрос.

01:33:08

QU Здравствуйте. Меня зовут Джош Хорвиц. Я репортер Thomson Reuters в Шанхае. Я просто хотел бы узнать, нельзя ли более подробно изучить вероятность этих выдвинутые гипотезы.Поэтому я хочу знать, возможно ли для каждого из нас троих дать процент вероятности того, что, по нашему мнению, вирус произошел от дикой природы и впоследствии перешел в человека или через замороженные продукты.

MF Спасибо за вопрос. Доктор Питер, передаю вам слово. Спасибо.

PE Спасибо, и я попрошу Мэрион попытаться дать вам ответ.

МК Да. Большое тебе спасибо. Так что это очень сложный вопрос.Итак, что мы действительно сделали, так это разработали фигуру, которая, как было показано, помогает структурировать наше мышление, но при этом систематически. Так что это значит, он перечисляет из литературы, из исследований, где есть доказательства за или против, а где есть неопределенность. Это то, что мы затем использовали, чтобы оценить: что, по нашему мнению, более или менее вероятно? Я думаю, что точные проценты действительно завышение того, что можно сделать.

01:35:17

Он действительно разработан, чтобы помочь нам структурировать наше мышление, а также в некоторой степени структурировать обсуждения, потому что это очень сложные вопросы, и вы можете придумать множество различных возможных путей.Это ключевое его использование. Итак, мы дошли до широких категорий, наиболее вероятных и менее вероятных, и вот как, я думаю, пока мы будем это использовать. Мы также обсудили, что всякий раз, когда появляется новая информация, а это может быть в любое время Поскольку в разных частях мира ведутся исследования, мы можем повторить это еще раз и сказать, с этой новой информацией, меняется ли наша оценка этих различных путей входа?

Может быть, последний пункт в том, что в нашем полном отчете мы перечислим все элементы, которые использовались в этой оценке, то есть литературу, исследования, все аспекты, которые мы включили, чтобы сделать эту оценку.

MF Я хотел бы пригласить профессора Лян Ваньнянь, чтобы он сделал дополнительный комментарий.

LW Я аплодирую точке зрения, предложенной доктором Марион, и на самом деле будет более подробное введение в методологии и более обширные доказательства, которые будут продемонстрированы в первом совместном отчете. а также в будущих рекомендациях и предложениях по направлениям исследований. На самом деле, одно из самых глубоких впечатлений для меня заключается в том, что что касается вопроса, который вы задаете, он требует много устрашающих и требовательных усилий.У нас есть изо всех сил старались дать оценку возможных гипотез, а также других видов возможностей научным путем, развязав совместную мудрость [?] экспертов двух сторон, основанную на существующих, доступных доказательствах.

01:39:53

Это совместная работа. Кроме того, мы не использовали ни количественный, ни качественный метод в целом, как он был предложен доктором Марион. Мы использовали полуколичественный метод для проведения соответствующих исследований.У нас есть стратификация из пяти уровни и сопоставить каждую оценку различных видов возможности поместить их в различные меры, чтобы иметь всестороннее рассмотрение и оценку.

MF Следующий вопрос, пожалуйста.

QU Я работаю с CGTV [?]. У меня есть один вопрос, связанный с рынком морепродуктов Хуанань. Является ли рынок морепродуктов Хуанань источником эпидемии COVID-19 в Ухане? Каковы возможные источники заражения случаев? связано с рынком морепродуктов Хуанань? Как вирус был занесен на рынок морепродуктов Хуанань и каковы эти возможные пути ранней передачи? Рынок морепродуктов Хуанань — самый ранний источник вспышки эпидемии в Ухане?

MF Доктор Питер, передаю вам слово.

PE Спасибо за очень хорошие мысли и подробные вопросы. Это точно такие же вопросы, как и у нас самих, поэтому вам стоит присоединиться к нам в следующий раз в команде. Мы не знаем точной роли рынков Хуанань. Мы знаем, что она была распространена среди людей, которые жили, жили, работали и посещали рынок Хуанань в течение декабря. Как он был представлен и распространился на рынке, пока неизвестно. У нас есть карта, и мы нанесли ее со временем распространение вируса среди более ранних случаев, связанных с рынком.

01:42:35

Итак, у нас есть картина, где кейсы работали, например, на рынке. У нас также есть генетические последовательности для некоторых из этих случаев, которые мы можем использовать, чтобы помочь нам понять эту картину. Все это говорит нам о том, что среди людей в Хуанане было распространение Рынки в декабре, и, следовательно, рынок, вероятно, был местом, где такой спред мог легко произойти, но это еще не все. Мы знаем, что было также распространение среди лиц, не связанных с этим рынком.Они были связаны с другими рынками. У них не было связи с рынками. Так что картина в этом отношении не ясна.

Что касается вводной части, то это часть обсуждения, которое мы проводим, и работы, которую мы планируем заранее с помощью этой оценки гипотез, заключается в том, чтобы понять, как меня представили. На сегодняшний день мы все еще работаем над гипотезой о том, что он мог быть занесен инфицированным человеком, а затем передан другому человеку на рынке. Это может быть один из торговцев, это может быть посетитель, но это также может быть через представление продукта.Как я уже заметил, Среди наиболее интересных продуктов были замороженные дикие животные, выращиваемые на фермах, и некоторые из этих видов известны как виды, чувствительные к этим видам вирусов.

Итак, это дает подсказки и дает направление для следующего раунда исследований. Сейчас у нас есть много хорошего материала для дальнейшего изучения многих из этих направлений, и мы надеемся, что некоторые из них впоследствии дадут нам хорошее направление.

01:47:17

Что касается времени и места, то мы знаем, что некоторые из первых случаев, которые могли быть связаны с рынками, были обнаружены или у них проявились симптомы в первые две недели декабря. .Это указывает на то, что они, вероятно, были заражены в начале декабря или в конце ноября, но мы не можем вдаваться в подробности с учетом информации, которую мы просмотрели и которую мы изучили подробно. Спасибо.

MF Любые дополнительные комментарии от профессора Ляна?

LW Хочу дать дополнительный комментарий. Во-первых, согласно заключению текущего исследования этой совместной исследовательской группы, рынок Хуанань может быть не первым местом, где произошла вспышка, и это не так. место, где был засвидетельствован самый ранний случай, который также был представлен доктором Питером.Дата начала самого раннего случая в этом совместном исследовании — 8 декабря 2019 года. Кроме того, это самый ранний подтвержденный случай, связанный с рынком морепродуктов Хуанань. было 12 декабря. На самом деле, согласно нашему исследованию эпидемиологической группы, этот случай начался 8 декабря и фактически не имеет никакого отношения или ассоциации ни с рынком морепродуктов Хуанань.

Второй момент, который я хотел бы объяснить, заключается в том, почему мы придаем такое большое значение рынку Хуанань с точки зрения рассмотрения того, является ли рынок Хуанань одним из первых мест вспышки или даже источником вспышки? Потому что в начале у нас очень ограниченные знания о свойствах и особенностях, а также об этиологии вируса и болезни.Вначале мы обнаружили это заболевание, похожее на пневмонию, и на самом деле оно может возникать на кластерной основе. Так вот почему мы сфокусируйте наши ранние исследования на рынке Хуанань и соответствующих случаях, связанных с рынком морепродуктов Хуанань.

01:52:21

Для самых ранних случаев с подозрением на пневмонию или PUE, пневмонию неизвестной этиологии, на самом деле, при исследовании этих ранних случаев большое количество или значительная часть этих ранних случаев были связаны или имели история присутствия на рынке с Рынок морепродуктов Хуанань, но позже, когда появились лучшие и значительно улучшенные возможности тестирования, а также с улучшением и разработкой различных видов пробирок или тестовых наборов, мы значительно расширили наше понимание вирус.Поэтому, когда мы проводим ретроспективное исследование, относящееся к ранним случаям, в ранее подтвержденных случаях большинство из этих ранее подтвержденных случаев фактически не имело истории контакта с рынком морепродуктов Huanan.

Это также упоминалось доктором Питером ранее. Фактически, мы также провели соответствующее исследование возможной передачи вируса на рынке морепродуктов Хуанань. Из нескольких возможных путей проникновения, либо непосредственно из от животного к любым промежуточным хозяевам или от передачи или интродукции по холодовой цепи.Таким образом, мы полностью изучаем эти возможные пути внедрения, и это также будет основным моментом будущих исследований.

MF Следующий вопрос, пожалуйста.

01:54:02

TC Tom Cheshire, Sky News. Из четырех гипотез единственной, которую вы решительно отвергли, был лабораторный инцидент. Можете ли вы объяснить доказательства или аргументы в пользу отказа от этой гипотезы?

MF Доктор Питер, спасибо.

ЧП Спасибо.Мы оценили эту гипотезу так же, как и другую гипотезу, с помощью метода, описанного Марион. Итак, мы рассмотрели, каковы аргументы за и против такой гипотезы? Короче говоря, вы увидите в отчете более подробную оценку этих гипотез, но вкратце, речь идет о да, несчастные случаи действительно случаются. К сожалению, у нас есть много примеров прошлых аварий из многих стран мира. Конечно, это не невозможно. Это случается время от времени.

Мы также, с точки зрения аргументов против, смотрим на тот факт, что ранее этот конкретный вирус нигде не исследовался, не идентифицировался или не был известен. Не было ни публикаций, ни сообщений об этом вирусе, о другом вирусе, чрезвычайно связанном или тесно связанном. к этому, работая с любой другой лабораторией в мире. Мы также обсуждали с менеджерами и персоналом многих соответствующих лабораторий в регионе, и они также ищут и обсуждают с ними эти гипотезы.Он расскажет им, как их программа мониторинга здоровья персонала или как, например, проводится их программа аудита, и что это показало за последние месяцы и годы.

01:56:28

Мы также изучили, например, Уханьский институт вирусологии, лабораторию уровня BSL-4, и состояние этой лаборатории. Было очень маловероятно, что что-то могло ускользнуть из такого места, и мы также знаем, что когда случаются несчастные случаи в лаборатории, они конечно крайне редко.Если вы посмотрите на историю несчастных случаев в лабораториях, это чрезвычайно редкие события. Так что это не первое, что происходит на регулярной основе. Многие из этих оценок и аргументов были выдвинуты за и против и помогли мы рационально подходим к оценке вероятности того, что такое событие произойдет.

Конечно, как я сказал, мы рассматриваем как аргументы против, так и аргументы в пользу того, чтобы убедиться, что мы не были предвзяты в нашем подходе, и снова с точки зрения аргументов в пользу того факта, что, как я сказал, прошлые несчастные случаи произошло во всем мире.Конечно, некоторые из них находились в городе Ухань. Конечно, все эти аргументы были выдвинуты друг против друга, чтобы помочь нам сделать эти оценки.

Для нас было важно разработать систему оценки всех этих гипотез, в которой мы могли бы принять рациональный подход и рационально рассматривать факты и доказательства и попытаться уйти от ситуации, которая существовала в течение прошлого года, когда все мы и многие люди во всем мире высказали свои личные взгляды и чувства.Мы хотели отойти от этого пути, или, я считаю, что это так, и попытаться отойти от этого и изложить обоснование и факты. таблица, которую каждый может затем систематически просматривать. Мы чувствовали, что это гораздо более полезный подход, чем высказывать личные взгляды, чувства и т. Д. Или рассматривать только половину аргументов. Спасибо.

02:01:53

MF Профессор Лян?

LW Я согласен с ответом, предложенным доктором Питером.Гипотеза лабораторной утечки помещена в матрицу крайне маловероятных как вывод результатов исследования совместной экспертной группы на основе серьезных обсуждение и очень тщательное исследование, мы пришли к крайне маловероятному выводу. Что касается гипотезы лабораторной утечки, есть два возможных пути, если таковой был. Сначала человек сконструировал вирус, но эта гипотеза не оправдала себя. уже опровергнуты всем научным сообществом во всем мире.

Во-вторых, это может быть утечка вируса из этой лаборатории, но с точки зрения утечки вируса, это должна быть утечка существующего вируса или его отсутствия.Однако во всех лабораториях Ухани нет существующего вируса SARS-CoV-2. Если нет существования этого вируса не будет никакой возможности, чтобы этот вирус был связан. Кроме того, во всех лабораториях Ухани, включая WIV, соблюдается очень строгая и качественная система управления. Также, исходя из имеющихся данных, мы рассматриваем гипотеза лабораторной утечки крайне маловероятна. Спасибо.

MF Спасибо. Следующий вопрос, пожалуйста.

QU из сети вещания Хубэй [?].Мой вопрос в том, что девять месяцев назад число пациентов в Ухане практически полностью сократилось. Итак, с точки зрения отслеживания источников в Ухане, как совместный члены экспертной группы проводят такой поиск источников, включая выявление ранних случаев? Спасибо.

02:05:41

МК Так что, может, начну. Что было сделано, так это серия исследований. Так что, конечно же, были сообщения о незарегистрированных случаях с конца декабря, и была проведена серия исследований, чтобы попытаться выяснить, есть ли доказательства для более раннее обращение.Это было сделано путем систематического анализа, который есть в отчетах о различных регистрациях. Один из них — это регистрация, в которой указано количество людей с лихорадкой и респираторными симптомами в более широком регионе. Это смотрели, чтобы увидеть если, например, были доказательства более раннего увеличения числа людей с гриппоподобными симптомами. Это было видно в декабре, но не раньше.

То же самое было сделано и со статистикой смертности. Вы видели в других странах, что это очень хорошо коррелирует с активностью SARS-CoV-2.Итак, это снова показывает рост, пик, который говорит о значительном обращении во второй декабрь. половина декабря, но не намного раньше. Третий элемент — это очень обширный обзор пациентов и их истории болезни клиническими бригадами из… Я думаю, что это было 233 медицинских центра в Ухане, и поэтому они… Со своими знаниями Теперь, как выглядят случаи COVID, просмотрели свои записи, чтобы увидеть, нашли ли они доказательства более ранних случаев.

Вот что сделано.Итак, все исследования показали, что в декабре было зарегистрировано несколько случаев с первыми людьми, упомянутыми здесь профессором Ваннианом. Вот как это было сделано. Таким образом, мы не можем с помощью этого процесса говорят, что не было абсолютно никакого тиража и не было случаев до декабря, потому что это не то, что вы можете сделать с помощью этого подхода, но мы можем сказать, что нет никаких доказательств широкого распространения намного раньше. Так вот что делают исследования.

02:11:29

MF Профессор Лян.

LW Дополнительное введение в методологии, которые мы использовали в этом совместном исследовании. Собственно, в нашем совместном исследовании оно охватывает три вида методологии. Во-первых, мы проводим обильные и обильные ретроспективное исследование. Во-вторых, анализируя накопленную или существующую информацию или материалы, мы попытались составить обзор литературы, а также провести некоторый релевантный всесторонний анализ существующих материалов или информации. В Третий вид методологии состоит в том, что мы пытались соединить точки путем полноценного анализа различных сопутствующих факторов путем ценообразования по как можно большему количеству факторов на высоко интегрированной и систематической основе.

Итак, в нашем исследовании наши диверсифицированные и многоаспектные подходы к методологиям могут позволить нам проводить различные виды сравнительного исследования, а также лучше использовать влияние этих видов анализа причинно-следственных связей. Так что кроме тех мульти- или широкого спектра анализа, мы также даем описание текущей ситуации. Таким образом, эти всеобъемлющие исследовательские методологии могут позволить нам прийти к более полному портфелю заключений.

Мы уже два и пять часов просидели вместе на этой пресс-конференции.В связи с интересом времени, пожалуйста, последний вопрос.

02:14:15

Спасибо. Из Wall Street Journal. Мне было интересно, не могли бы вы рассказать немного больше о животных, которые были найдены живыми или мертвыми на рынке Хуанань. Например, я не думаю, что когда-либо было подтверждено, что именно были эти животные и Вы упомянули, что некоторые из них, как известно, переносят коронавирусы. Вы определили некоторые из них, которые поэтому представляют для вас больший интерес в качестве потенциальных промежуточных хозяев? Вы определили те, которые, возможно, были на рынке раньше, но к тому времени уже ушли? приехали инспекторы, когда рынок закрыли?

С точки зрения следования по следу и попыток определить промыслы, фермы и источники этих животных, вы немного подробнее расскажете, как далеко вы продвинулись, что является камнем преткновения, что нужно сделать. пока что? Быстрое продолжение об Уханьском институте вирусологии.Вы упомянули, что в Ухане не было коронавирусов, которые соответствовали бы SARS-CoV-2, но запрашивали ли вы и получали информацию, данные, образцы относительно любых экспериментов по увеличению функции, которые могли быть проведены в Институт вирусологии Ухани, который мог бы работать с одним типом улучшения его с помощью генетических манипуляций? Спасибо.

MF Д-р Питер.

ЧП Спасибо. Позвольте Марион начать с первой части вопроса. Спасибо, Марион.

МК Итак, вопрос о животных. Я думаю, прежде всего, важно подчеркнуть, что тестирование не выявило никаких положительных результатов, но было проведено полное отслеживание, очень обширное отслеживание всех животных. и продукты, представленные на рынке, показали, что существуют некоторые виды животных, которые были подтверждены как восприимчивые, как кролики, или которых можно было заподозрить, как хорьки, барсуки или бамбуковые крысы. Таким образом, это интерпретируется как действительно скажите, ну если бы они были там тогда, может быть, они могли бы быть похожими животными раньше?

02:18:11

Итак, это отправная точка для обратного расследования, потому что это шаг, который мы сейчас ищем.У нас есть более глубокое понимание ранней ситуации. Куда бы вы пошли на следующем этапе изучения происхождения? Причина, почему это Некоторый интерес вызвало также то, что некоторые из них были обнаружены на фермах или у торговцев в регионах, которые, как известно, являются местом обитания летучих мышей с ближайшими родственными вирусами. Так что это действительно рассматривается как отправная точка для обоснования следующего шага опросов. у животных на фермах. Вот как мы на это посмотрели.

PE Тогда я отвечу на вторую часть вашего вопроса об Уханьском институте вирусологии.Мы пошли туда, и нас также посетили некоторые сотрудники здесь, и они участвовали в дальнейшие обсуждения и работа с нами. Таким образом, в течение нескольких недель у нас было такое существенное взаимодействие с персоналом. Во время визита мы сначала посетили это место, институт, различные лаборатории, а затем очень долго, откровенно, открытое обсуждение с руководством и коллективом института.

Сначала они предоставили нам очень подробное описание своих исследований, как настоящих, так и прошлых, всех проектов, связанных с их исследованиями с летучими мышами, коронавирусами и так далее, а также некоторые из более продвинутых проектов.Затем мы обсудили с ними о различных гипотезах, связанных с лабораторией, потому что, конечно, они были на переднем крае дискуссии вокруг этих гипотез в течение прошлого года. Было очень интересно услышать непосредственно от них, как они думают о том, как мы можем объясни это? Как мы можем отказаться от этого? Мы используем неправильные аргументы? Предоставляем ли мы неверные доказательства? Мы неправильно отвечаем на вопросы?

02:22:30

Итак, у нас было очень интересное обсуждение их взглядов на все эти гипотезы с участием их лаборатории, и мы обсудили, как улучшить это общение, как предоставить правильные аргументы в будущем для лучшего объяснения их позиции. объясняя их Просмотры.Конечно, они лучше всех способны отклонить любое из этих утверждений и дать ответы на все вопросы, связанные с этим.

Таким образом, мы также чувствуем, что, снова применяя наш детальный и рациональный подход, мы поможем лучше прояснить некоторые из этих утверждений, касающихся конкретных исследований, увеличения функциональности, работы с образцами непосредственно от летучих мышей и т.д. в протоколы наших разных визитов и встреч с разными людьми. Этот, конечно, тоже будет в отчете.

MF Профессор Лян.

LW Я хотел бы привести несколько цифр или цифр для совместных исследований, связанных с животными. В первую очередь, мы провели испытания образцов в количестве 11000 от разных видов животных, таких как свинья, корова, коза, курица, утка и гусь с точки зрения тестирования образцов сыворотки как своего рода тестового отбора образцов от домашнего скота и птицы из 31 провинции Китая с 2019 по 2020 годы. Результаты тестирования этих 11000 образцов SARS- CoV-2 были все отрицательно.

02:27:48

Мы также провели тестирование 12 000 образцов мазков от разных видов животных в рамках ПЦР-тестирования. Результаты тестирования также были отрицательными, а также с 2019 по 2020 год мы провели ПЦР-тестирование для 26 800 сгенерированных образцов. от разных видов животных, которые распространены в 24 провинциях Китая. И снова все результаты ПЦР были отрицательными.

Между тем, что касается тестирования образцов от широких животных, во время образцов, собранных в период с ноября 2019 года до Match 2020, мы провели тестирование 1914 образцов сыворотки от 35 различных видов диких животных.Все результаты серологического исследования этого теста на антитела были отрицательными. Также до и после вспышки COVID-19 мы увеличили объем выборки на рынке морепродуктов Хуанань, а также считаем, что муниципалитет Ухань и другие города в провинции Хубэй, а также в соседних провинциях Хубэй. Мы собрали 50 000 образцов диких животных 300 различных видов. При ПЦР-тестировании этих более чем 50 000 образцов результаты тестирования снова были отрицательными.Спасибо.

MF Д-р Питер выразил желание ответить еще на один вопрос.

QU Спасибо. Я из агентства Франс Пресс, AFP. Я хотел бы спросить, поэтому китайское правительство и китайские СМИ осветили различные сообщения о случаях заражения вирусом в таких странах, как Италия и другие места за границей, появившиеся в конце 2019 года, подразумевая, что вирус пришел из-за границы. Как вы думаете, насколько это вероятно? Как вы думаете, есть ли вероятность того, что они были переданы в, казалось бы, несвязанные места через мир от необнаруженных, бессимптомных или легких случаев, которые приехали из Ухани? Как вы думаете, поскольку в Ухане в то время был явно значительный разброс с несколькими параллельными кластерами в дополнение к рынку Хуанань, как вы упомянули…

02:31:32

MK Извините.Не могли бы вы повторить свой вопрос?

QU Конечно. Я пойду медленнее. Итак, я хотел бы спросить, поэтому китайское правительство и китайские СМИ привлекли внимание к сообщениям о нескольких случаях заражения вирусом, которые произошли в других странах, кроме Китая. например, в Италии в конце 2019 года, подразумевая, что вирус возник за границей. Как вы думаете, насколько это вероятно, особенно с учетом того, что в то время в Ухане в декабре 2019 года было несколько кластеров? Как вы думаете, возможно, легкий или бессимптомный случай из Уханя поехал в эти места в разные места по всему миру, и это могло привести к этим кластерам в другом месте?

Итак, мы снова рассмотрели этот вопрос на систематической основе.Итак, изначально основное внимание здесь было сосредоточено на том, что именно мы можем узнать о начальной фазе пандемии в Ухани? Это показало наличие четкой циркуляции в декабре, но в рамках этой работы мы также рассмотрели то, что доступно в литературе, а также в базах данных о вирусах, которые могут циркулировать в других местах. Это нашло пару или несколько публикаций, которые предполагают, что, например, в Италии есть уже был распространен в декабре, возможно, в конце ноября, но его трудно узнать, потому что методы для этого не были подтверждающими.

02:33:56

Итак, они не предоставили полных доказательств этого обращения, но эта часть информации является частью того, что мы собрали, рассмотрели и включили в наши рекомендации для следующего шага. Итак, на следующем этапе мы говорим, что нам действительно нужно пойти и поискать для доказательства более раннего обращения везде, где это указано. Подобные указания можно найти в такой литературе. Поэтому это входит в наши рекомендации по дальнейшим действиям. Может быть, чтобы потом сказать, могло ли это означать, что вирус распространился из Ухани в другое место? Опять же, здесь мы применяем поэтапный подход, но глядя на то, какие доказательства есть, какие доказательства можно найти, было бы невозможно получить генетическую информацию, а затем посмотреть, что это нам говорит.

MF Д-р Питер, есть ли дополнительные комментарии? Итак, профессор Ванниан, к вам.

LW Это очень хороший вопрос, и ваш вопрос сам по себе объясняет, почему нам нужно принимать международную перспективу с точки зрения отслеживания источников SARS-CoV-2? Вот почему мы будем Необходимо совместное усилие со стороны международных ученых для проведения такого рода исследований с высокой степенью согласованности, чтобы определить возможные пути и выявить возможное обоснование.Это тоже ориентация, которую совместная исследовательская группа, а также различные ученые со всего мира будут пытаться исследовать свои планы на будущее.

02:38:13

MF Какие-нибудь заключительные комментарии от доктора Питера?

ЧП Спасибо и всем спасибо за все очень уместные и интересные вопросы. Как вы слышали, многие из них — это те же вопросы, которые мы задаем себе в последние несколько недель. Просто чтобы позволить вы знаете, сегодня мы ответили на некоторые из ваших вопросов, но других участников здесь нет, и они, конечно же, будут доступны для вопросов в ближайшие дни, и в ближайшие дни мы также организуем дополнительный доступ к средствам массовой информации для вас и ваших коллег.Когда мы вернемся домой, у нас также будет возможность вернуться через несколько дней.

Как я уже сказал, вы встретились здесь только с тремя из нас, но за последние четыре недели и даже раньше мы работали в тесном контакте с 30-40 коллегами, которые были частью совместной команды. За последние несколько недель у нас действительно были интенсивные и очень продуктивная работа среди этой особенной группы, и я хотел бы поблагодарить их всех индивидуально за их вклад и усилия.Помимо них, мы обсуждали это ранее сегодня. Возможно, более тысячи человек внесли свой вклад за последние четыре недели, предоставляя нам данные, помогая нам анализировать данные, составлять отчеты и помогая нам получать информацию и обрабатывать их. Это также возможность поблагодарить их всех за это.

Итак, как вы слышите, за результатом этой миссии, а также за надежными и очень многочисленными деталями, вытекающими из этой работы, стоит огромная группа и объем работы.Возвращаясь к самой работе в своем заключительном слове, я хотел бы указать на деталь, которая пометила меня, потому что прежде, чем приступить к этой работе, как, вероятно, многие из вас, я думал, как это будет на самом деле быть на месте и пытаться найти ответы на первые случаи? Кто они и какую информацию могут предоставить о происхождении вируса? В каком-то смысле было увлекательно осознавать, что эти люди не обладают очень интересными подсказками.

02:41:22

Когда мы разговаривали с одним из первых пациентов, у которых симптомы проявились в начале декабря, когда вы говорите об одном из этих пациентов, вы сразу же думаете, что у них, должно быть, есть какие-то особые привычки.Походы в горы, домашние животные — все это всплывают какие-то идеи. Тогда вы понимаете, что они очень похожи на всех нас, без особых интересов, проводят большую часть своих дней в Интернете или занимаются одними и теми же видами деятельности, спортом и работой, офисной работой, как и многие из нас делают.

Таким образом, это также показывает, насколько сложна эта работа, и поэтому не так просто найти все ответы после нескольких недель изучения.Поэтому мы должны понимать, что это комплексные исследования. Их нужно делать систематически. Таким образом мы постепенно сможем соединить точки и получить всю информацию, необходимую для продвижения вперед. Это наш подход. Это подход, который мы продолжим использовать, продолжая эту работу вместе с нашим коллег в Китае и в международной команде. Итак, еще раз спасибо моим коллегам и спасибо моему другу Ванняну.

02:46:27

MF Я хотел бы выразить свою признательность трем экспертам, находящимся на подиуме вместе с нами.COVID-19, глобальная пандемия, оказывает беспрецедентное и глубокое влияние на все человеческое общество и на будущий прогресс развития мирового сообщества. Однако люди из разных стран никогда не меняют своих стремлений к улучшению своей жизни. Как было упомянуто генеральным директором ВОЗ д-ром Тедросом, всегда будет свет в конце туннель. Пока мы объединяемся как одно целое, мы добьемся окончательной победы. Скоро наступит китайский Новый год, год быка.Здесь я хочу поздравить всех вас с китайским Новым годом, крепкого здоровья и всего наилучшего.

Это конец пресс-конференции. Спасибо.

Процесс подачи заявки DVM — Колледж ветеринарной медицины Университета Джорджии

Следующие ниже общие описания не являются исчерпывающими и не заменяют собой существующие правила, касающиеся проживания в штате. Это только , пояснительное руководство для проживания в Грузии для целей обучения.Подробные официальные инструкции перечислены как в Бюллетене UGA, так и в кодексах Университетской системы Джорджии.

Для получения статуса резидента Грузии следует помнить о трех самых важных вещах:

• Студенты должны сначала доказать, что они создали основное местожительство или постоянный дом в штате Джорджия , по крайней мере, 12 месяцев подряд, непосредственно предшествующих началу занятий на срок, который будет считаться резидентом. Как правило, статус резидента иждивенца связан со статусом родителя (ей) или, в случае развода, налогоплательщика или родителя, поддерживающего большинство, поэтому родитель (и) должны предъявить доказательство местожительства.
• Учащиеся и / или родители учащихся-иждивенцев также должны иметь возможность предоставить документацию, подтверждающую уплату подоходного налога штата Джорджия, так как это указывает на связь с государством, которое доказывает финансовую поддержку системы образования Джорджии. Простого владения собственностью в Грузии обычно недостаточно.
• Приемная комиссия также предлагает студентам предоставить копии любых других документов, подтверждающих их намерение стать резидентами Джорджии, таких как водительские права Джорджии, регистрация автомобиля или избирателей, право собственности на жилье, записи о полной занятости и т. Д.Посещение колледжа в Грузии не является доказательством намерения стать резидентом Грузии.

Поскольку Университет Джорджии является учреждением, поддерживаемым государством, студенты должны предъявить документальное подтверждение места жительства и продолжительности проживания, чтобы иметь право на обучение в штате.

При рассмотрении петиций на получение вида на жительство в штате, CVM UGA рассматривает ситуацию каждого студента как уникальную, поэтому универсальных формул не существует. В целом, однако, ключевыми являются три упомянутых ранее пункта.CVM UGA понимает, что существуют ситуации, например, когда родители живут в разных штатах или семья в армии, которые могут повлиять на процесс проверки.

Особые ситуации, связанные с классификацией проживания

Следующие ниже описания должны помочь понять, что принимает во внимание приемная комиссия при рассмотрении определенных ситуаций.

Зависимые и независимые студенты

Если учащийся указан как иждивенец в налоговых декларациях своего родителя / родителей или законного опекуна за предыдущий год или получает более 50% финансовой поддержки от одного из родителей или опекуна, он считается учащимся-иждивенцем, и UGA считает, что учащийся быть резидентом для целей обучения в стране проживания родителя / родителей или опекуна.(Законный опекун должен предоставить суд и / или финансовую документацию для поддержки студента.)

Независимый студент, желающий получить резиденцию в штате, должен документально подтвердить, что его / ее родитель (-и) не заявлял, что он / она является налоговым иждивенцем в течение 12 месяцев до начала семестра, и что он / она предоставил 100% своей финансовой поддержки, как указано в федеральных налоговых декларациях и налоговых декларациях штата. Ни один студент не может получать или приобретать классификацию штата во время учебы в любом высшем учебном заведении в этом штате без четких доказательств того, что он зарегистрировался в Грузии для других целей, кроме посещения высшего учебного заведения в этом штате.

За пределами США. Граждан

За пределами США. граждане имеют право на вид на жительство в штате только в том случае, если они являются законными постоянными жителями в соответствии с документами Службы иммиграции и натурализации США или получили визу в соответствующей категории. Студенческие визы F-1 не принимаются. Эти студенты по-прежнему должны предоставить документы о проживании в штате за 12-месячный период до начала семестра.

Как указывалось ранее, все ходатайства о предоставлении вида на жительство в штате рассматриваются в полном объеме, поэтому каждый файл должен быть рассмотрен на основе его собственных достоинств.Кроме того, эта страница предназначена в качестве общего руководства по проживанию в штате Джорджия для целей обучения, но не заменяет собой какие-либо существующие правила проживания в штате Джорджия, содержащиеся в Бюллетене UGA и в кодексах Университетской системы Джорджии.

* Важное примечание: после зачисления в Колледж ветеринарной медицины Университета Джорджии он / она не может изменить свою классификацию обучения, чтобы стать резидентом Джорджии для целей обучения.

Вид на жительство за пределами штата — Договорные государства

У нас есть контракты со штатами Делавэр и Южная Каролина.В каждый класс мы принимаем 17 студентов из Южной Каролины и двоих из Делавэра. Все заявители из этих двух штатов должны связаться с Комиссией по высшему образованию для подтверждения места жительства.

Южная Каролина

SC Комиссия по высшему образованию 1122 Lady Street, Suite 300 Columbia, South Carolina 29201

Телефон: 803.737.2224 Факс: 803.737.2297 Контактное лицо: Таня Роджерс
Веб-сайт

Делавэр

Комиссия по высшему образованию штата Делавэр

Государственная канцелярия Карвел, 820 Н.French Street Wilmington, Делавэр 19801

Телефон: 302.735.4120 Факс: 302.577.6765

Департамент здравоохранения штата Вашингтон

Требования к лицензии

Требования к учетным данным

Кандидаты должны иметь докторскую степень в регионально аккредитованном учебном заведении, полученную по интегрированной программе аспирантуры по психологии. Если докторская степень не была аккредитована Американской психологической ассоциацией (APA), она должна включать:

• По крайней мере, 40 семестровых часов или 60 четвертных часов курсов для аспирантов в областях учебной программы, описанных в WAC 246-924-046.Курсы должны быть четко обозначены по названию и содержанию курса как часть комплексной программы психологии.
• Один год проживания, как указано в WAC 246-924-046 (5).
• Подача оригинальной диссертации психологического характера, одобренной программой;
• Организованная, последовательная и скоординированная практика и стажировка, как описано в WAC 246-924-049 и WAC 246-924-056. Официальная стенограмма со степенью и датой, полученная непосредственно из программы соискателя.Стенограммы не на английском языке должны иметь официальный перевод.
• Все супервайзеры на часы работы с руководителями должны заполнить профессиональные справочные формы и подать их непосредственно в департамент.
Сотрудники программы
• подтверждают, что стажировка была аккредитована региональной аккредитацией или Американской психологической ассоциацией (APA).
• Опыт работы: кандидаты должны подтвердить в общей сложности 3300 часов супервизии. Кандидат не может подписаться как курирующий свои собственные часы постдокторантуры.

Практикум

Кандидаты должны пройти не менее 300 часов практики, из которых 100 часов должны быть под наблюдением, что соответствует требованиям WAC 246-924-049.

Предварительная практика

Предварительная стажировка проходит между практикой, требуемой WAC 246-924-049, и стажировкой, требуемой WAC 246-924-056. Предварительная стажировка должна соответствовать всем требованиям WAC 246-924-053, может включать до 1500 часов опыта под руководством, но не является обязательной.

Стажировка

Кандидаты должны пройти стажировку в рамках программы докторантуры.Стажировка должна включать не менее 1500 часов опыта под руководством и быть завершенной в течение 24 месяцев. Программа стажировки должна быть аккредитована Американской психологической ассоциацией; или быть членом Ассоциации центров психологической докторантуры и стажировки. Если программа не аккредитована членом APA или APPIC, она должна соответствовать требованиям, перечисленным в WAC 246-924-056.

Опыт работы с докторской степенью

Если 3000 часов контролируемого опыта не были завершены в конце программы докторантуры, то до 1500 часов контролируемого опыта после получения докторской степени, который соответствует всем требованиям WAC 246-924-059, может быть использовано для удовлетворения 3000 часов требование.Постдокторантура под руководством учителя должна быть завершена только в том случае, если кандидат еще не имеет 3000 часов опыта под руководством.

Для заявителей, которые могут продемонстрировать подтверждение квалификации в качестве специалиста по лечению наркозависимости в течение трех лет за предыдущие 10 лет, общее необходимое количество часов сокращается с 1500 до 1020 часов.

Проверка государственной лицензии

Кандидаты должны указать все штаты, в которых они имеют или имели полномочия. Этот список также должен включать, когда кандидат подал заявку на учетные данные, даже если учетные данные не были предоставлены.Юрисдикция, в которой заявитель аккредитован или был аттестован, должна заполнить и отправить форму подтверждения (PDF). Юрисдикция должна отправить заполненную форму непосредственно в департамент.

Вопросы о персональных данных

Каждый заявитель должен ответить на вопросы о личных данных. Если есть положительный ответ на вопрос об истории требований о профессиональной ответственности, заявитель должен прислать объяснение характера дела, данные и краткое изложение оказанной помощи, копии исходной жалобы и урегулирование или окончательное решение.Если дело находится на рассмотрении, заявитель должен указать статус.

Экзамены

Кандидаты, сдающие письменный экзамен, получат отсканированную форму заявки непосредственно от компании, проводящей тестирование, Pearson Vue. Вы заполняете форму и возвращаете ее в PES вместе со стоимостью экзамена. После того, как Pearson Vue получит ваше заявление и плату, он отправит вам информацию о том, как связаться с центром тестирования по бесплатному номеру телефона, чтобы записаться на экзамен. Как только мы получим подтверждение вашего прохождения EPPP и документацию о 3300 контролируемых часах, вам будет назначен экзамен по юриспруденции.Вы получите письмо о своем праве на участие и инструкции о том, как запланировать экзамен. После того, как вы получите одобрение, вы можете запланировать тест по своему усмотрению. Если вы уже прошли EPPP, мы должны получить официальную документацию с вашими оценками на экзамене.

Экзамен по юриспруденции штата Вашингтон

Экзамен по юриспруденции штата Вашингтон — последний шаг в процессе получения лицензии. Экзамен по открытой книге с несколькими вариантами ответов доступен в Интернете. Дополнительная информация на веб-странице экзамена по психологии.Как только мы получим подтверждение вашей сдачи EPPP, вы получите электронное письмо с инструкциями о том, как сдать экзамен по юриспруденции.

Требуется дополнительная информация / документы

• Успешно сдан национальный письменный экзамен (EPPP) — баллы подтверждены соответствующей организацией / агентством
• Успешно сдал экзамен по юриспруденции штата Вашингтон

Примечание. Иностранным кандидатам может быть предоставлен перевод их стенограмм и проверка их образования на предмет содержания в предлагаемом аттестационном агентстве.

Процесс подачи заявки путем подтверждения

Мы настоятельно рекомендуем кандидатам, подающим заявку путем одобрения, ознакомиться с решениями Совета на веб-странице эквивалентных штатов и стран.

Программа взаимности лицензирования / испытательная лицензия

Программа взаимности для специалистов по поведенческому здоровью, учрежденная штатом Вашингтон с 1 июля 2020 г. (Законопроект Сената 5054), в значительной степени эквивалентна лицензиям психологов других штатов в зависимости от сферы их деятельности.Если штат, в котором вы в настоящее время имеете лицензию или владели лицензией в течение последних 12 месяцев, считается департаментом практически эквивалентным по объему, вы можете подать заявление на получение временной испытательной лицензии для работы психологом штата Вашингтон. через эту программу взаимности. Кандидат не должен иметь дисциплинарного или дисквалифицирующего судимости, чтобы подать заявку на получение лицензии на испытательный срок. Департамент ведет список утвержденных штатов, из которых кандидаты имеют право подать заявку на получение лицензии на испытательный срок в рамках программы взаимности.Для психологов список можно найти ниже:

Лицензия на испытательный срок — это временная лицензия, которая может быть выдана лицу, имеющему лицензию в другом штате и подающему заявку на участие в программе взаимности Вашингтона. Лицензия на испытательный срок выдается на один год и может продлеваться один раз на другой год и требует, чтобы владелец лицензии работал в агентстве по охране психического здоровья (независимая практика не разрешена). Цель испытательной лицензии — выяснить, есть ли различия в образовании, опыте или экзамене между лицензионными требованиями другого штата и требованиями Вашингтона, и позволяет заявителям практиковать, работая над устранением этих различий.Кандидаты должны будут соответствовать полным требованиям к получению лицензии психолога в Вашингтоне.

Обратите внимание, что программа взаимности — это новый вариант, который не исключает другие варианты для заявителей из других штатов, в том числе те варианты, когда заявитель может легко претендовать на полную лицензию на основе существенного эквивалента стандартов лицензирования (если штат практически эквивалентен по этой основе).

Кроме того, любой, кто работает по лицензии на испытательный срок, может работать психологом только у лицензированного или сертифицированного поставщика услуг, как определено в RCW 71.24.025.

Процесс утверждения / отклонения заявок

Правление рассматривает заявки на утверждение после того, как специалист по аттестации удостоверяется, что заявка полностью заполнена и соответствует требованиям главы 18.83 RCW и главы 246-924 WAC. Мы проводим проверку биографических данных и убеждаемся, что заявители внесли требуемые сборы. Мы официально уведомим заявителей об отказе. Эти заявители могут потребовать проведения слушания для обжалования решения.

Требования к продлению и непрерывному образованию

Психологи должны продлевать лицензию каждый год в день своего рождения или до него.Они должны предоставить соответствующую плату и карту продления. Психологи обязаны проходить 60 часов непрерывного образования (CE) каждые три года, четыре часа должны быть посвящены этике и шесть часов должны быть посвящены суицидному вмешательству, которое соответствует требованиям WAC 246-924-255 каждые шесть лет.

Вернуться к началу

Функциональность межгенной транскрипции: эволюционное сравнение

Abstract

Хотя большая часть транскрипции человека происходит за пределами известных генов, функциональное значение этой транскрипции остается неизвестным.Мы сравнили паттерны экспрессии известных генов, а также межгенных транскриптов в областях ENCODE между людьми и шимпанзе в линиях клеток мозга, сердца, семенников и лимфобластоидных клеток. Мы обнаружили, что межгенные транскрипты демонстрируют паттерны тканеспецифической консервации их экспрессии, которые сравнимы с экзонными транскриптами известных генов. Это говорит о том, что межгенные транскрипты подвержены функциональным ограничениям, которые ограничивают скорость их эволюционных изменений, а также предполагаемый положительный отбор в степени, сопоставимой с таковой классических генов, кодирующих белок.В мозге и семенниках мы обнаружили, что часть этой межгенной транскрипции вызвана широким использованием альтернативных промоторов. Кроме того, мы обнаружили, что примерно половина различий в экспрессии между людьми и шимпанзе связана с межгенными транскриптами.

Сводка

Чтобы преобразовать генетическую информацию, закодированную в геномной последовательности организма, в функциональные характеристики, геномная последовательность должна быть транскрибирована. Согласно текущей аннотации генома, геном человека кодирует 20 000–25 000 транскриптов, кодирующих белок, и меньшее количество некодирующих транскриптов.Однако появляется все больше свидетельств того, что транскрибируется гораздо большая часть генома человека, чем это объясняется существующей аннотацией. Большая часть этих доказательств была обнаружена с использованием мозаичных массивов, микрочипов, которые позволяют измерять транскрипцию независимо от существующей аннотации. Хотя некоторые предполагают, что эти транскрипты представляют собой ранее не идентифицированные функциональные РНК, а также расширения известных генов, степень их функциональности остается неизвестной.В этом исследовании Khaitovich et al. оценить функциональность этих новых транскриптов путем тестирования степени, в которой их экспрессия сохраняется у людей и шимпанзе в различных тканях. Результаты показывают, что неожиданно на экспрессию как известных, так и новых транскриптов повлияли одни и те же функциональные ограничения во время эволюции человека и шимпанзе.

Образец цитирования: Хайтович П., Келсо Дж., Франц Х., Визажи Дж., Гигер Т., Джорчел С. и др. (2006) Функциональность межгенной транскрипции: эволюционное сравнение.PLoS Genet 2 (10): e171. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171

Редактор: Грег Гибсон, Государственный университет Северной Каролины, Соединенные Штаты Америки

Поступила: 29 июня 2006 г .; Принята к печати: 28 августа 2006 г .; Опубликован: 13 октября 2006 г.

Авторские права: © 2006 Khaitovich et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: REG поддерживается постдокторской стипендией Национального научного фонда (США) в области биологической информатики (NSF 04–539).

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что конкурирующих интересов не существует.

Сокращения: FDR, коэффициент ложного обнаружения

Введение

РНК транскрипция — это первый шаг в передаче информации, закодированной в последовательности генома, в фенотипические особенности организма.Естественно, было потрачено много усилий на определение того, какие области человеческого генома транскрибируются и для какой биологической цели. До недавнего времени эти усилия в значительной степени ограничивались либо расчетным предсказанием генов, либо выравниванием секвенированных кДНК и EST с геномной последовательностью. Основываясь на информации, собранной с помощью этих методов, аннотация человеческого генома сходится на наборе из 20 000–25 000 генов, кодирующих белок, и меньшем наборе некодирующих РНК. Однако появляется все больше доказательств, полученных с использованием множества новых подходов, которые указывают на то, что происходит гораздо больше транскрипции, чем учитывается существующей аннотацией [1–3].

Тайлинг-массивы — это новый мощный инструмент для беспристрастного обнаружения транскрипции [2,4–6]. На таких массивах зонды размещаются через равные промежутки времени по всему геному или интересующей области, независимо от аннотации или предшествующих доказательств транскрипции. Такой дизайн позволяет обнаруживать транскрипцию без каких-либо предварительных ожиданий относительно того, где она может произойти. Несколько исследований с использованием тайлинговых массивов показывают, что у людей, а также у других организмов, большое количество транскрипции РНК происходит вне ранее аннотированных генов [2,6–11].Хотя биологические роли большей части этой транскрипции еще предстоит определить, некоторые особенности этой межгенной транскрипции становятся очевидными.

В целом межгенные транскрипты, как правило, экспрессируются на низких уровнях, иногда на уровне или ниже предела обнаружения методов Нозерн-блоттинга или ОТ-ПЦР [2,9,12]. Во многих случаях, но не всегда, эти транскрипты расположены рядом с аннотированными генами или даже внутри генов, в интронах или на противоположной цепи ДНК [6,9,10,13]. Эта физическая близость предполагает, что многие межгенные транскрипты могут быть просто неаннотированными экзонами известных генов, предположение, которое было подтверждено для подмножества этих транскриптов [6,9,10,13].Наконец, что, возможно, наиболее удивительно, большинство человеческих межгенных транскриптов не консервативны на уровне последовательности ДНК по сравнению с мышами [6,9,12]. Более того, нет доказательств сохранения экспрессии в межгенных областях, которые являются консервативными у человека и мыши на уровне последовательности ДНК [14].

Это отсутствие консервативности последовательности привело к предположению, что межгенные транскрипты представляют собой продукты стохастической и непродуктивной активности аппарата транскрипции РНК и, следовательно, деградируют [15].Однако отсутствие консервативности на уровне последовательности ДНК не исключает возможности того, что эти транскрипты консервативны на уровне экспрессии. Тем не менее, на сегодняшний день эволюционное сохранение межгенной экспрессии не исследовано. Предыдущая работа показала, что сравнение экспрессии человека и шимпанзе можно использовать для оценки количества селективных ограничений (отрицательный отбор) и положительного (адаптивного) отбора, возникающих в отношении транскриптов известных генов в различных тканях [16].Чтобы определить степень положительного отбора и ограничения межгенных транскриптов, мы использовали мозаичные микрочипы для анализа уровней экспрессии известных и межгенных транскриптов в четырех тканях человека и шимпанзе.

Результаты

Транскрипция в областях ENCODE

Мы проанализировали эволюционную консервацию паттернов экспрессии между транскриптами известных генов, а также транскриптами, происходящими из межгенных областей у людей и шимпанзе, путем измерения транскрипции специфическим для цепи способом из обеих нитей ДНК в 44 геномных областях, изученных исследователем Консорциум ENCODE, покрывающий примерно 1% генома человека (который мы будем называть областями ENCODE) в четырех тканях (мозг, сердце, яички и линии лимфобластоидных клеток) от пяти людей и пяти шимпанзе, с использованием тайлинговых массивов на основе человеческого последовательность генома (таблица S1 и материалы и методы).Чтобы исключить любые различия гибридизации между образцами человека и шимпанзе, вызванные различиями нуклеотидных последовательностей между видами, мы удалили из анализа все зонды массива, которые не соответствуют последовательности генома шимпанзе со 100% идентичностью по всей их длине. Кроме того, мы исключили все матричные зонды, соответствующие аннотированным псевдогенам человека, чтобы исключить возможную перекрестную гибридизацию с транскриптами, полученными из родительских функциональных генов (материалы и методы).

Мы классифицировали оставшиеся пробы как экзонные, интронные или межгенные, используя аннотации GENCODE, предоставленные консорциумом ENCODE [17]. Мы определили экзонные и интронные зонды как зонды, комплементарные транскрибируемой цепи известных генов (материалы и методы). Напротив, мы определяем межгенные зонды как зонды, картирующие вне известных генов без учета цепи, чтобы избежать сигналов экспрессии, вызванных артефактами маркировки, возникающими в результате ложного синтеза второй цепи кДНК [18].Следует отметить, что при этом мы исключаем антисмысловые транскрипты из генных регионов из описанного анализа.

Чтобы сравнить экспрессию генных и межгенных регионов, мы не использовали подход группирования зондов в транскрипционные единицы в соответствии с их поведением экспрессии [2,6,9]. Вместо этого мы провели весь анализ на уровне отдельных зондов. Хотя этот подход не позволяет нам идентифицировать отдельные транскрипты, он позволяет сравнивать генную и межгенную экспрессию на одной и той же основе, без предвзятости в отношении конкретной длины транскрипта или интенсивности сигнала.Сначала мы сравнили относительные уровни экспрессии известных и межгенных транскриптов, изучив распределение интенсивности сигналов для экзонных и межгенных зондов (рис. 1). В соответствии с предыдущими исследованиями [19], мы обнаружили, что основная часть экспрессируемых зондов находится в межгенных регионах, но что большая часть этой межгенной экспрессии имеет низкую интенсивность сигнала по сравнению с таковой у известных генов (Рисунок 1). Однако не все межгенные зонды обладают низкой интенсивностью. Фактически, поскольку общее количество межгенных зондов больше, чем количество экзонных зондов, сопоставимое количество экзонных и межгенных зондов экспрессируется с более высокой интенсивностью.Единственным исключением являются 5% зондов с самой высокой экспрессией, где преобладают экзонные зонды.

Рисунок 1. Интенсивность сигналов экзонных и межгенных зондов

Диапазон интенсивности сигнала, представленный на основном рисунке, охватывает 95% всех матричных зондов с положительной интенсивностью сигнала. На вставке показан диапазон интенсивности сигнала, включая дополнительные 4% матричных зондов. На оси x показано количество экзонных и межгенных зондов. Красный цвет указывает на долю зондов, которые мы классифицировали как выраженные.Поскольку не существует эмпирически установленного порога для классификации зондов мозаичного массива на «выраженные» и невыраженные, мы выбрали произвольное пороговое значение, основанное как на абсолютной интенсивности сигнала, так и на относительном выражении зондов идеального совпадения и несовпадения (материалы и методы). Представленное здесь распределение основано на среднем показателе четырех тканей. Взятые отдельно, все ткани показывают очень похожее распределение (Рисунок S1).

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.g001

Кроме того, хотя общее количество экспрессированных зондов различается для разных тканей, при этом мозг и яички имеют в среднем 20% зондов, классифицированных как экспрессированные, а линии сердца и лимфобластоидных клеток содержат в среднем 12% зондов, классифицированных как экспрессированные, мы находим что относительные пропорции экспрессированных экзонных, интронных и межгенных зондов у людей или шимпанзе одинаковы во всех тканях (Рисунки 2 и S2, Таблица S2). А именно, в каждой ткани примерно 20% экспрессируемых зондов приходится на экзоны, 45% — на интроны и 35% — на межгенные области (Таблица S2).Следовательно, большая часть экспрессируемых зондов находится в интронах. Это неудивительно, учитывая, что мы исследовали экспрессию в образцах общей клеточной РНК, которые могли включать значительную часть частично обработанных или необработанных транскриптов (материалы и методы). Поскольку мы не можем скорректировать эти эффекты в нашем анализе, мы ограничили следующие анализы зондами, расположенными внутри экзонов и межгенных областей, соответственно.

Рис. 2. Распределение экспрессируемых зондов среди экзонов, интронов и межгенных областей

Распределение экспрессированных зондов среди экзонных (синий), интронных (серый) и межгенных (красный) участков в четырех тканях у человека и шимпанзе.Размер кружков отражает количество датчиков (Таблица S2). Все распределения представляют собой среднее значение двух цепей ДНК, измеренное независимо. Не было выявленных различий между выраженными распределениями зондов на двух нитях (рисунок S2). «Всего» указывает распределение всех зондов массива, независимо от их уровней экспрессии.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.g002

По сравнению с общим распределением массивов зондов (6% в экзонах, 40% в интронах и 54% в межгенных областях), большая доля экзонные зонды и меньшая часть межгенных зондов классифицируются как экспрессированные.Тем не менее, в каждой ткани мы обнаруживаем в среднем в 2,4 раза больше экспрессированных межгенных зондов, чем экспрессированных экзонных зондов (Таблица S2). Следует отметить, однако, что соотношение экспрессируемых экзонных и межгенных зондов во многом зависит от определения экспрессии, то есть от выбранного порогового значения (Рисунок 1).

Затем мы исследовали, экспрессируются ли одни и те же зонды у людей и шимпанзе в каждой ткани. Это важно, потому что если межгенная экспрессия носит стохастический характер, мы могли бы ожидать найти сходные количества транскрипции, но небольшое перекрытие между межгенными зондами, экспрессируемыми у двух видов.Поскольку надежность обнаружения экспрессии сильно зависит от интенсивности сигнала, а экзонные и межгенные зонды имеют разные распределения интенсивности сигнала, мы ограничили наш анализ экзонными и межгенными зондами, выбранными так, чтобы иметь одинаковое распределение интенсивности сигнала (рисунок S3 и материалы и методы). Мы обнаружили, что среди этого набора экспрессируемых межгенных зондов 76–90% перекрываются между людьми и шимпанзе. Это в 3-8 раз больше совпадений, чем можно было бы ожидать случайно. Эти высокие степени перекрытия наблюдаются во всех четырех тканях (рис. 3).Для сравнения, 77–92% экспрессированных экзонных зондов перекрываются между видами. Кроме того, мы обнаруживаем сходную степень перекрытия между экспрессируемыми межгенными и экспрессированными экзонными зондами при сравнении различных тканей у людей и шимпанзе (Рисунок S4). Таким образом, сайты межгенной экспрессии не распределены в геноме случайным образом, но демонстрируют почти такую ​​же консервативность в отношении своего местоположения, как и экзонная экспрессия. Однако это не обязательно указывает на то, что межгенная экспрессия имеет функциональное значение, поскольку вполне возможно, например, что определенные межгенные последовательности будут случайно иметь высокое сродство к аппарату транскрипции РНК и, таким образом, запускать ложную транскрипцию.Из-за высокой степени сходства последовательностей ДНК между людьми и шимпанзе такая ложная транскрипция будет в значительной степени общей между людьми и шимпанзе.

Рисунок 3. Перекрытие экспрессируемых зондов между видами

Показано наложение экспрессированных экзонных (слева, более светлые оттенки) и межгенных (справа, более темные оттенки) зондов между людьми и шимпанзе в мозге (B), линии лимфобластоидных клеток (C) , сердце (H) и яички (T) для положительной (левая панель) и отрицательной (правая панель) цепей хромосом.Горизонтальные линии внутри столбцов показывают случайное перекрытие. Столбики ошибок представляют собой 95% доверительные интервалы, основанные на начальной загрузке 1000 поднаборов экзонных и межгенных зондов, имеющих одинаковое количество зондов из каждой категории и одинаковое распределение интенсивности сигнала.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.g003

Transcriptome Evolution

Предыдущие исследования показали, что гены, экспрессируемые в разных тканях, испытывают разную степень отрицательной и положительной селекции как по последовательности ДНК, так и по уровням экспрессии генов [16,20].На уровне экспрессии генов это отражается в различиях в разнообразии и моделях дивергенции между тканями. Среди изученных на сегодняшний день тканей больше всего различаются мозг и яички. То есть в мозге отрицательный отбор действует наиболее сильно, что приводит к значительному сокращению дивергенции экспрессии между видами. Напротив, в семенниках соотношение дивергенции к разнообразию экспрессии значительно больше, чем в других тканях, вероятно, из-за положительного отбора, действующего на репродуктивную систему самцов [16].Сначала мы проверили, верны ли эти наблюдения для экзонных транскриптов, измеренных на мозаичных массивах. Мы обнаруживаем одинаковые качественные различия в моделях разнообразия и дивергенции экспрессии экзонных зондов среди тканей, используемых в обоих исследованиях, то есть мозга, сердца и семенников (рис. 4). Таким образом, мозаичные массивы могут обнаруживать эволюционные различия в паттернах тканевой экспрессии, наблюдавшиеся ранее, с использованием массивов, предназначенных для обнаружения транскриптов, кодирующих белок.

Рисунок 4.Схематическое представление разнообразия экспрессии и дивергенции у людей и шимпанзе в трех тканях

Выражение было измерено с использованием либо «классических» массивов на основе транскриптов (верхний ряд), либо экзонных зондов на мозаичных массивах (нижний ряд). Деревья выводятся из среднего квадрата разности интенсивностей экспрессии всех обнаруженных наборов зондов [16] или всех экспрессированных экзонных зондов (материалы и методы). Большая вариация, наблюдаемая внутри видов для экспрессии экзонного зонда, вероятно, связана с большими техническими вариациями, связанными с измерениями мозаичных массивов, вызванными конструктивными ограничениями зонда, и тем фактом, что измерения мозаичного массива основаны на интенсивности сигнала зонда, а не на совокупной интенсивности набор щупов.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.g004

Затем мы исследовали, наблюдаются ли различия в разнообразии и дивергенции для межгенных транскриптов. Поскольку мы предполагаем, что эти различия в экспрессии транскриптов, наблюдаемые среди тканей, возникают из-за различий в степени функциональных ограничений и положительного отбора в этих тканях, в отсутствие какой-либо функции таких различий ожидать не следует. Таким образом, если мы принимаем в качестве нулевой гипотезы, что межгенные транскрипты не имеют функции и представляют собой продукты ложной активности аппарата транскрипции РНК, мы ожидаем, что их разнообразие экспрессии и паттерны дивергенции должны быть одинаковыми для трех тканей.Поэтому мы проверили, так ли это, сравнив паттерны экспрессии межгенных и экзонных зондов в трех тканях. Чтобы избежать артефактов, вызванных различиями в технических ошибках измерения, связанных с различной интенсивностью зондового сигнала, мы сравнили экзонные и межгенные зонды, имеющие одинаковое распределение интенсивности сигнала (рисунок S3 и материалы и методы). Во всех трех органах мы наблюдаем в 1,1-1,7 раза большую дивергенцию экспрессии между людьми и шимпанзе для межгенных, чем для экзонных зондов, что указывает на то, что межгенные транскрипты имеют тенденцию эволюционировать между видами быстрее, чем экзонные транскрипты (Таблица S3).Однако, когда мы сравниваем паттерны разнообразия и расхождения, основанные на экспрессии межгенных зондов среди трех тканей, мы обнаруживаем, что мозг показывает меньшее расхождение, чем два других органа (рис. 5A), в то время как семенники демонстрируют большее соотношение расхождения к разнообразию. (Рисунок 5B) в степени, сопоставимой с результатами для экзонных зондов. Это открытие противоречит нашей нулевой гипотезе и предполагает, что межгенные транскрипты подвержены функциональным ограничениям и положительному отбору в той же относительной степени в этих тканях, что и экзонные транскрипты.Это, в свою очередь, указывает на то, что большая часть межгенной транскрипции выполняет пока еще не охарактеризованные функции [19].

Рис. 5. Дивергенция экспрессии и отношение дивергенции к разнообразию в трех тканях для экзонных и межгенных зондов

Показаны среднее расхождение экспрессии (A) и соотношение дивергенции к разнообразию (B) между людьми и шимпанзе в мозге ( желтый), сердце (синий) и семенник (красный) для экзонных и межгенных зондов. Цветные области указывают 95% доверительные интервалы на основе начальной загрузки 1000 подмножеств экзонных и межгенных зондов, имеющих одинаковое количество зондов из каждой категории и одинаковое распределение интенсивности сигнала.Более темные оттенки указывают на экспрессию положительной цепи ДНК, а более светлые оттенки указывают на экспрессию отрицательной цепи ДНК. Символы представляют собой среднее значение для каждой ткани на положительной () или отрицательной (○) пряди, соответственно.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.g005

Характеристики межгенной транскрипции

Потенциальным альтернативным объяснением наблюдаемой разницы в паттернах межгенной экспрессии среди тканей является перекрестная гибридизация транскриптов известных генов с межгенными зондами.Мы проверили, может ли это быть так, путем последовательного удаления всех зондов, которые отображаются более чем в одном месте в геноме человека с нулевым, одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью несовпадениями, соответственно. Хотя эта процедура не обязательно удаляет все зонды, которые могут перекрестно гибридизоваться с транскриптами известных генов, мы ожидаем, что разница между тканями, показанная на рисунке 5, будет существенно и постепенно уменьшаться, если перекрестная гибридизация будет основной причиной этого эффекта. Однако мы не находим такого уменьшения (таблица S3) ни для дивергенции, ни для отношения дивергенции к разнообразию.Кроме того, если бы основная часть наблюдаемой межгенной транскрипции была результатом перекрестной гибридизации, можно было бы ожидать, что экспрессированные межгенные зонды будут случайным образом распределены в межгенных областях. Однако мы обнаружили, что, хотя экзонные зонды демонстрируют значительно большую кластеризацию, чем межгенные зонды, вероятно, из-за их более высокой средней интенсивности сигнала, в соответствии с предыдущими исследованиями [6,9,14], экспрессированные межгенные зонды значительно группируются во всех четырех тканях (рис. S5).

Ранее сообщалось [6], что межгенные транскрипты имеют тенденцию располагаться близко к известным генам.В соответствии с этим мы видим значительно более короткие расстояния, чем ожидалось случайно (тест Вилкоксона, p <10 ^-6 ) между экспрессируемыми межгенными зондами и ближайшим экзоном во всех четырех тканях. Это может указывать на то, что некоторая межгенная экспрессия возникает из еще не аннотированных расширений известных генов. Чтобы проверить, может ли это быть так, мы вычислили корреляцию между интенсивностью сигнала межгенных зондов с интенсивностью сигнала ближайшего экзона.В целом, мы не находим такой корреляции (Рисунок S6), тогда как мы находим значительную положительную корреляцию между интенсивностями сигналов экзонных зондов и зондов в соседних экзонах. Затем мы повторили тот же анализ, используя разницу в интенсивности сигналов между людьми и шимпанзе, а не абсолютную интенсивность сигнала. Это частично решает проблему, заключающуюся в том, что интенсивности зондов в значительной степени зависят от последовательности зондов и не очень точно отражают фактические уровни экспрессии транскриптов.Действительно, в этом случае мы обнаруживаем положительную корреляцию между межгенными зондами и зондами в ближайшем экзоне в яичках и, в меньшей степени, также в головном мозге (корреляционный тест Спирмена, бутстрап p <0,05), но не в сердце ( p = 0,39), ни в линиях лимфобластоидных клеток ( p = 0,36). И в головном мозге, и в семенниках эта положительная корреляция наблюдается для зондов, расположенных выше, но не ниже ближайшего экзона (рис. 6). Следовательно, часть наблюдаемой межгенной экспрессии, по крайней мере, в головном мозге и семенниках, вероятно, является следствием неаннотированных 5′-удлинений известных генов.Это говорит о том, что гены, экспрессируемые в головном мозге и семенниках, используют альтернативные промоторы чаще, чем в других исследованных тканях; это наблюдение подтверждается результатами анализа последовательности полноразмерной кДНК, показывающим, что мозг и семенники имеют наибольшее количество тканеспецифичных предполагаемых альтернативных промоторов [21]. ]. Отсутствие корреляции на 3′-конце генов указывает на то, что транскрипционное «прочтение» из известных генов не является основным источником межгенной транскрипции, и что альтернативное полиаденилирование либо менее распространено, чем использование альтернативного промотора, либо лучше аннотировано.Последнего можно ожидать, учитывая 3′-смещение большинства библиотек EST.

Рис. 6. Корреляция между разницей интенсивности сигналов межгенных зондов и ближайшего экзона

Буквы и цвета обозначают ткани (B, желтый — мозг; C, зеленый — клеточная линия; H, синий — сердце; T, красный — семенники). ). Корреляцию рассчитывали отдельно для зондов, расположенных выше (5 ‘) или ниже (3’) от ближайшего экзона. Ширина полос пропорциональна количеству областей ENCODE, показывающих значимые корреляции (тест корреляции Спирмена, p <0.05, исправлено для множественного тестирования). Среднее значение столбцов показывает средний коэффициент корреляции, а границы столбцов представляют собой доверительный интервал 75%. Планки погрешностей отображают 95% доверительный интервал коэффициента корреляции, рассчитанного путем загрузки списка межгенных зондов в каждой области 500 раз (материалы и методы).

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.g006

Наконец, мы идентифицировали экзонные и межгенные зонды со значительными различиями экспрессии между людьми и шимпанзе (тест Стьюдента t , p <0.001, уровень ложного обнаружения [FDR] <5%). Мы обнаружили, что в каждой отдельной ткани примерно половина от общего числа по-разному экспрессируемых зондов происходит из межгенных областей (Рисунок 7; Таблицы S4 и S5). В семенниках как известные, так и межгенные транскрипты показывают в три-четыре раза больше различий в экспрессии между видами, чем в трех других тканях. Это наблюдение согласуется с предыдущими исследованиями [16] и отражает большое соотношение дивергенции к разнообразию, наблюдаемое в этой ткани как для экзонных, так и для межгенных зондов.

Рис. 7. Пропорции экзонных и межгенных зондов со значительной разницей в экспрессии между людьми и шимпанзе

Цвета показывают пропорции экзонных (синий) и межгенных (красный) зондов. Цифра представляет собой среднее число зондов, идентифицированных как по-разному выраженные на положительной и отрицательной цепях. Размер кружков отражает количество датчиков.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.g007

Discussion

Взятые вместе, наши результаты показывают, что экспрессия межгенных транскриптов развивается при тех же уровнях функциональных ограничений и положительного отбора, что и экзонные транскрипты.Это наблюдение подразумевает, что межгенные транскрипты играют функциональную роль, поскольку не следует ожидать различий в степени положительного и отрицательного отбора между тканями, если основная масса межгенных транскриптов представляет собой транскрипционный «шум». Любое альтернативное объяснение функциональности межгенной транскрипции должно включать механизм, который учитывает разницу в избирательном давлении на нефункциональную транскрипцию в разных тканях. Хотя такой сценарий не является полностью невозможным, он определенно не прост.

Хотя наши результаты убедительно указывают на то, что межгенные транскрипты выполняют функциональные роли, остается множество важных вопросов. Во-первых, в соответствии с предыдущими исследованиями [6, 9, 12], мы не обнаруживаем заметных различий в сохранении последовательности ДНК между межгенными зондами, экспрессируемыми во всех четырех тканях, экспрессируемыми по крайней мере в одной ткани, и зондами, не экспрессируемыми на обнаруживаемых уровнях (Рисунок S8. и материалы и методы). Напротив, мы находим гораздо большую консервативность последовательности ДНК для экзонных зондов, чем для любой из категорий межгенных зондов (рис. S8).Однако следует отметить, что эти оценки сохранения последовательности включают сравнения с отдаленно родственными видами, такими как курица, данио и фугу. Таким образом, сохраняется вероятность того, что сохранение последовательности может быть обнаружено в течение более короткого эволюционного периода времени. Для ответа на этот вопрос потребуется дальнейший анализ, включающий сравнения с несколькими видами приматов.

Во-вторых, невозможно количественно сравнить степень функциональности межгенного транскрипта с таковой экзонов известных генов.Во всех тканях мы видим сходную, но несколько большую дивергенцию экспрессии межгенных транскриптов по сравнению с расхождением экзонных транскриптов (Рисунок 5, Таблица S3). Точно так же мы видим сопоставимые, но несколько меньшие различия между паттернами тканевой экспрессии межгенных транскриптов, чем экзонных транскриптов (Рисунок 5, Таблица S3). Однако в настоящее время неясно, происходит ли это из-за того, что часть межгенных транскриптов вообще не ограничена, или если большинство межгенных транскриптов ограничены, но в несколько меньшей степени, чем экзонные транскрипты.

В-третьих, мы отмечаем, что большая часть нашего анализа рассматривает только экзонные и межгенные зонды, имеющие одинаковое распределение интенсивности сигнала. Таким образом, этот анализ игнорирует гораздо большую долю межгенной, чем экзонной транскрипции с низкой интенсивностью сигнала. Хотя различия в паттернах эволюции между тканями можно наблюдать в большом диапазоне интенсивности сигналов как для межгенных, так и для экзонных зондов (рис. S9), когда мы ограничиваем наш анализ зондами с низкой интенсивностью сигнала, очевидных различий в паттернах эволюции между тканями не наблюдается. наблюдается (Рисунок S10).Поскольку технический шум быстро увеличивается с уменьшением интенсивности сигнала, невозможно сказать, отражает ли это наблюдение техническое ограничение технологии микрочипов или биологическое явление. Поэтому для анализа возможной функциональности низкоинтенсивной межгенной транскрипции необходимо дождаться технических подходов, позволяющих проводить более точные и высокопроизводительные измерения транскриптов с низкой интенсивностью сигнала.

Наконец, тот факт, что часть межгенной транскрипции, по крайней мере, в головном мозге и семенниках, происходит из 5′-удлинений известных генов, предполагает, что некоторые межгенные транскрипты эволюционируют под тем же давлением отбора, что и известные гены, просто потому, что они представляют собой еще не обнаруженные части известные гены.Поскольку мы находим 5′-расширения известных генов в основном в головном мозге и семенниках, они вряд ли могут объяснить основную часть межгенной транскрипции, наблюдаемой во всех четырех изученных тканях. Тем не менее, необходимы дальнейшие исследования, чтобы выяснить, какая доля межгенной транскрипции относится к этой категории.

Таким образом, мы показываем, что межгенные транскрипты сходны с экзонными транскриптами в степени функциональных ограничений, лежащих в основе их экспрессии. Кроме того, мы обнаружили, что в каждой отдельной ткани около половины от общего числа зондов, по-разному экспрессируемых у людей и шимпанзе, происходят из межгенных регионов (рис. 7).Это предполагает, что межгенные транскрипты могут вносить вклад в функциональные различия между видами в степени, сопоставимой с экзонными транскриптами.

Материалы и методы

Сбор данных образцов тканей и микрочипов.

Посмертные образцы головного мозга, сердца и яичек были получены от людей, которые умерли внезапно по причинам, не связанным с их участием в этом исследовании, и без какого-либо отношения к используемым тканям. Все образцы мозга, использованные в этом исследовании, были взяты из одной и той же области дорсолатеральной префронтальной коры (область Бродмана 9) одним и тем же человеком (ПК).Образцы человека и шимпанзе были сопоставлены по полу и относительному возрасту (Таблица S1). Полную РНК выделяли из 100 мг замороженной ткани или 40 мл жидкой культуры, содержащей приблизительно 2,5 × 10 ⁷ живых клеток, с использованием реагента ТРИЗол (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США) в соответствии с инструкциями производителя и очищали с помощью MiniElute. (Qiagen, Валенсия, Калифорния, США) в соответствии с инструкциями производителя без каких-либо изменений. Все образцы РНК, использованные в этом исследовании, были высокого и сопоставимого качества, что определялось соотношением 28S и 18S рибосомных РНК, оцененным с помощью системы Agilent 2100 Bioanalyzer (Фостер-Сити, Калифорния, США) (Таблица S1).Образцы тотальной РНК подвергали строгой обработке ДНКазой (инкубация с 4 единицами ДНКseI на 20 мкг РНК при 37 ° C в течение 30 минут) для удаления любых возможных следов геномной ДНК.

Все образцы были обработаны, помечены и гибридизированы с массивами Affymetrix (Санта-Клара, Калифорния, США) ENCODE 0.1 FORWARD и REVERSE в соответствии с протоколом анализа метки целевого объекта с чувством полного транскрипта (http://www.affymetrix.com/support/technical /manuals.affx) с небольшими изменениями. А именно: 2 мкг общей РНК были использованы в протоколе восстановления рРНК вместо рекомендуемого количества 1 мкг; 2.На стадии синтеза кДНК использовали в 5 раз больший, чем рекомендуемый, общий реакционный объем; Очистку кДНК проводили в соответствии со стандартным протоколом экстракции фенол-хлороформ; все количество очищенной кДНК использовали для стадии синтеза кРНК, проводимой с помощью набора Ambion Megascript (Остин, Техас, США) в соответствии с инструкциями производителя в течение 16 часов при 37 ° C; и все этапы очистки РНК в протоколе были выполнены с помощью набора Qiagen MiniElute в соответствии с инструкциями производителя без каких-либо изменений.

Образцы для версий FORWARD и REVERSE массивов были обработаны, помечены и гибридизированы независимо.

Анализ данных микрочипов.

Данные изображения микрочипа

Affymetrix были получены с помощью сканера Affymetrix 3000 с настройками по умолчанию. Интенсивность отдельных зондов рассчитывалась с использованием стандартного программного обеспечения Affymetrix GeneChip Operating Software. Полученные необработанные файлы интенсивности зонда были проанализированы с использованием R (http://www.r-project.org). Перед анализом мы замаскировали все олигонуклеотидные зонды, которые не на 100% идентичны по своей полной длине последовательностям генома человека (сборка NCBI 35) и шимпанзе (panTro1).Это уменьшило количество доступных для анализа зондов с 755 455 до 503 459. Мы определили каждый зонд как пару последовательностей, одна из которых полностью соответствует указанной геномной последовательности (PM), а другая — с трансверсией в центральном положении (MM).

Все массивы, использованные в этом исследовании, были нормализованы вместе с использованием процедур коррекции фона и масштабирования на основе всех оставшихся 503 459 зондов. Значения экспрессии для каждого зонда были рассчитаны с использованием программного пакета affy Bioconductor (http: // www.bioconductor.org) как разность между интенсивностями сигналов идеального PM и несовпадающего MM.

Мы извлекли аннотации генов, созданные рабочей группой GENCODE (http://genome.imim.es/gencode) консорциума ENCODE [17] для известных генов, предполагаемых генов и псевдогенов из базы данных браузера генома UCSC (http: / /hgdownload.cse.ucsc.edu/goldenPath/hg17/encode/database/). Используя эти аннотации, мы назначили зонды массива геномным областям, соответствующим известным генам, предполагаемым генам и псевдогенам.Мы исключили зонды, относящиеся к псевдогенам, из дальнейшего анализа. Это дополнительно уменьшило количество зондов с 503 459, присутствующих на каждой цепи, до 498 556 на положительной и 498 527 на отрицательной цепи. Для каждой цепи ДНК оставшиеся зонды были разделены на те, которые отображены в экзонах и интронах известных генов, расположенных на соответствующей цепи, и межгенных зондах. Межгенные зонды были определены как картирование вне экзонов и интронов известных генов на обеих цепях. Это исключило из анализа все потенциальные антисмысловые транскрипты, соответствующие областям генома известных генов.Однако известно, что используемый нами протокол мечения производит ложные транскрипты второй цепи на первой стадии синтеза кДНК, которые затем классифицируются как «антисмысловые транскрипты» [18]. Поэтому наше определение межгенной области исключает все такие «теневые» транскрипты известных генов, которые могут быть экспериментальными артефактами. Количество зондов на положительной и отрицательной цепях соответственно составляло 30 994 и 32 216 экзонных; 202,205 и 202,821 для интроника; и 187 966 для межгенных регионов.Части регионов, которые мы классифицировали как межгенные, были аннотированы рабочей группой GENCODE (http://genome.imim.es/gencode) консорциума ENCODE на основе предсказаний генов как предполагаемых генных регионов. Однако исключение зондов, нанесенных на карту в этих регионах, не повлияло ни на один из наших результатов (см., Например, Таблицу S3 и Рисунок S5).

Экспрессированные зонды были определены как зонды с интенсивностью сигнала PM выше, чем интенсивность сигнала MM у всех пяти особей одного и того же вида, и со средней разницей между интенсивностями сигналов PM и MM у этих пяти особей более 50.Количество зондов, классифицированных как выраженные, показано в таблице S2.

Перекрытие экспрессируемых зондов в экзонах и межгенных областях определяли следующим образом. Во-первых, мы взяли подвыборку с заменой 1000 раз из общего количества экзонных и межгенных зондов на равное количество зондов, имеющих одинаковое распределение интенсивности сигнала. Во-вторых, для каждого из 1000 подмножеств зондов мы определили долю экспрессированных зондов, которые перекрываются между людьми и шимпанзе для экзонных и межгенных зондов независимо.Случайно ожидаемое перекрытие было рассчитано с использованием вероятности перекрытия, рассчитанной с использованием одного и того же числа случайно выбранных экспрессированных и невыраженных зондов у двух видов.

Дивергенция экспрессии между людьми и шимпанзе рассчитывалась как среднеквадратическая разница между средней интенсивностью сигнала зонда человека и средней интенсивностью сигнала шимпанзе. Вариация экспрессии рассчитывалась как средняя вариация интенсивности сигнала зонда среди пяти особей одного и того же вида. Для каждой ткани деревья, представляющие расстояния экспрессии, были построены с использованием PHYLIP [22] на основе квадратов средних разностей экспрессии для всех зондов, экспрессируемых в ткани, рассчитанных во всех попарных сравнениях.В каждой ткани мы наблюдали кластеризацию всех образцов по видам для всех классов зондов, таких как экзонические, межгенные или интронные. Среднее расхождение экспрессии и отношение дивергенции к разнообразию для каждой ткани, а также 95% доверительные интервалы были рассчитаны путем подвыборки с заменой 1000 раз из общего набора экспрессированных экзонных и экспрессированных межгенных зондов равным количеством зондов, имеющих такое же распределение интенсивности сигнала (пример представлен на рисунке S3), а затем вычисление дивергенции выражения и отношения дивергенции к разнообразию для каждого подмножества.Тот же анализ был повторен после исключения всех зондов, которые картируются внутри предполагаемых генных областей, как определено аннотацией GENCODE, или после исключения зондов, потенциально способных перекрестно гибридизоваться.

Кластеризацию зондов проверяли путем расчета геномных расстояний (на основе положений зондов согласно NCBI build 35) между двумя ближайшими зондами для всех межгенных и экзонных экспрессируемых зондов. Распределение расстояний, ожидаемых случайно, было рассчитано по 1000 перестановок экспрессируемых назначений зондов в экзонных и межгенных областях (рисунок S5A).Тот же анализ был повторен после исключения всех зондов, которые картируются в предполагаемых генных областях (рисунок S5B).

Близость между экспрессируемыми межгенными зондами и известными экзонами проверяли в каждой из 44 областей ENCODE путем вычисления геномного расстояния между всеми экспрессируемыми межгенными зондами и ближайшим аннотированным экзоном. Распределение шансов рассчитывали по 1000 перестановок экспрессируемых назначений зондов в межгенных областях. Разница между наблюдаемыми распределениями расстояний для всех регионов сравнивалась с ожидаемой случайно с помощью рангового критерия Вилкоксона.

Корреляция между экспрессируемыми межгенными зондами и ближайшим экспрессированным экзоном, основанная либо на абсолютном сигнале, либо на разнице интенсивности сигнала между людьми и шимпанзе, рассчитывалась следующим образом: сначала мы вычисляли среднюю интенсивность сигнала или разницу средней интенсивности сигнала для каждого GENCODE известный или известный + предполагаемый экзон с использованием всех зондов, расположенных внутри экзона. Для каждой ткани мы определили экспрессированные экзоны как экзоны, содержащие по крайней мере один экспрессируемый зонд.Кроме того, для каждого экспрессированного межгенного зонда в каждой из 44 областей ENCODE мы определили ближайший экспрессируемый экзон, либо игнорируя их относительные положения, либо отдельно определяя ближайшие экзоны, расположенные в 5 ‘или 3’ от межгенного зонда. Затем мы определили ранговую корреляцию Спирмена между абсолютными сигналами или между различиями в интенсивности сигналов всех экспрессированных межгенных зондов и зондов в ближайшем экзоне в каждой из 44 областей ENCODE. Области, содержащие менее 100 экспрессированных экзонных зондов, исключались из корреляционного анализа.Для каждой ткани средний коэффициент корреляции был основан на коэффициентах корреляции для всех областей, показывающих значительную корреляцию ( p <0,05, скорректировано на количество областей, используемых в анализе). Для результатов, представленных на Фигуре 6, в каждой ткани в среднем 24 области имели 100 или более экспрессированных экзонных зондов. Из этих областей шесть и девять областей показали значительную корреляцию в головном мозге, три и одна в клеточных линиях, три и две в сердце и 16 и 16 в яичках для зондов, расположенных выше (5 ') или ниже (3') от ближайший экзон соответственно.Повторный анализ с использованием значений из всех областей ENCODE, содержащих более 100 экспрессированных экзонных зондов, не изменил результатов. 95% доверительный интервал среднего коэффициента корреляции был рассчитан путем бутстрепинга экспрессированных межгенных зондов в каждой из 44 областей ENCODE 500 раз. Корреляционный анализ применяли отдельно к измерениям интенсивности сигнала каждой цепи ДНК. Результаты, полученные для двух нитей, были согласованными на протяжении всего анализа. Тот же подход был использован при корреляционном анализе экзонных зондов и соседних с ними экзонов.

Зонды, показывающие значительную разницу в экспрессии между людьми и шимпанзе, были идентифицированы путем применения теста Стьюдента t к преобразованным по основанию двум логарифмам интенсивностям сигналов образцов человека и шимпанзе всех зондов, экспрессируемых в данной ткани. FDR, соответствующий заданному номинальному порогу значимости, был рассчитан путем 1000 случайных перестановок меток выборки. Для выбранного порогового значения номинальной значимости ( p <0,001) FDR во всех тканях составляла менее 5%.Геномные координаты по-разному экспрессируемых зондов в геноме человека (сборка 35) приведены в таблице S5. Мы протестировали семь экзонных и межгенных областей, показывающих значительную разницу экспрессии между людьми и шимпанзе в головном мозге, и подтвердили различия в экспрессии массива в шести из этих областей с помощью количественной ПЦР (рисунок S7).

Маскирование зондов с различиями в последовательностях между видами и удаление зондов с потенциалом перекрестной гибридизации.

Все зонды на массивах ENCODE были разработаны с использованием последовательности генома человека в качестве эталона.Чтобы исключить влияние дивергенции последовательностей между людьми и шимпанзе на оценку уровней экспрессии, мы исключили из всех анализов массивы зондов, которые не соответствуют последовательностям генома человека (сборка 35 NCBI) и шимпанзе (panTro1) со 100% идентичностью. по всей длине зонда. Используя BLAT [23], мы выровняли все последовательности зондов Affymetrix (http://www.affymetrix.com/support/downloads/library_files) как с геномами человека, так и с геномами шимпанзе. Олигонуклеотидные зонды, которые полностью соответствовали обоим геномам, оставляли для анализа, в то время как зонды с несоответствием любому геному были замаскированы.

Кроме того, чтобы изучить потенциальные эффекты перекрестной гибридизации, мы удалили из набора идеально совпадающих зондов те зонды, которые могли быть выровнены более чем в одном месте генома с нулевым, одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью несовпадениями.

Анализ сохранения последовательности ДНК.

баллов по сохранению последовательности ДНК были основаны на мерах по сохранению последовательности для каждого положения нуклеотида, предоставленных баллами по сохранению последовательности PhastCons для восьмифакторного множественного выравнивания между геномом человека и геномами семи сборок видов позвоночных в сборке генома человека hg17, май 2004 г. ( http: // геном.ucsc.edu/goldenPath/help/phastCons.html). В эти сопоставления включены семь видов: шимпанзе, собака, мышь, крыса, курица, рыба данио и фугу. PhastCons использует максимальную вероятность подгонки филогенетической скрытой марковской модели к данным последовательностей различных видов. Каждой базе генома присваивается оценка, отражающая вероятность того, что позиция основания находится в наиболее консервативном состоянии в соответствии со скрытой марковской моделью. Для каждого зонда оценка сохранности была рассчитана как среднее значение всех доступных оценок сохранности PhastCons для оснований в зонде.Зонды без доступных оценок сохранения PhastCons были исключены из анализа.

Количественная ПЦР.

Пары праймеров

были разработаны для точного совпадения последовательностей генома человека и шимпанзе. Длина продукта ПЦР была выбрана от 150 до 300 п.н. В качестве матрицы ПЦР мы использовали очищенную кДНК, полученную из общей РНК, экстрагированной из образцов мозга трех человек и трех особей шимпанзе с использованием случайных гексамеров или поли (dT) праймера для синтеза первой цепи кДНК.Чтобы контролировать возможную амплификацию геномной ДНК, мы использовали в качестве отрицательного контроля кДНК, полученную без добавления обратной транскриптазы во время синтеза. В качестве положительного контроля использовали праймеры ПЦР для транскрипта GAPDH. Праймеры для этого транскрипта помещали в разные экзоны, в результате чего получали продукт ПЦР длиной 602 п.н., если была амплифицирована геномная ДНК, и продукт ПЦР длиной 285 п.н., если амплифицировали кДНК. Продукты ПЦР визуализировали на агарозных гелях с помощью окрашивания бромидом этидия.Интенсивность сигнала полос ПЦР определяли количественно с помощью ImageQuant (GE Healthcare, Chalfont St. Giles, United Kingdom). Интенсивность сигнала с полосы отрицательного контроля вычитали из интенсивностей сигналов продуктов для корректировки неспецифической амплификации и фона сигнала. Кроме того, мы нормализовали интенсивности сигналов продуктов, используя интенсивность сигнала транскриптов GAPDH, измеренную четыре раза у шести человек, использованных в Q-PCR, чтобы скорректировать различия в общем количестве кДНК, полученной от каждого человека.Последовательность праймеров, их расчетные температуры плавления, их соответствующие положения в геноме человека, размер продукта, температура плавления, содержание GC и ожидаемая длина продукта показаны в таблице S6.

Вспомогательная информация

Рисунок S1. Интенсивность сигналов экзонных и межгенных зондов в четырех тканях

Распределение интенсивности сигналов экзонных (слева) и межгенных (справа) зондов показано для мозга (A), линии лимфобластоидных клеток (B), сердца (C) и семенник (D).Диапазон интенсивности сигнала, представленный на каждой панели, охватывает 95% всех матричных зондов с положительной интенсивностью сигнала. На оси x показано количество экзонных и межгенных зондов. Красный цвет указывает на долю зондов, которые мы классифицировали как выраженные.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.sg001

(260 КБ PDF)

Рисунок S2. Распределение экспрессируемых зондов из двух нитей ДНК среди экзонов, интронов и межгенных областей

Распределение экспрессированных зондов среди экзонных (синий), интронных (серый) и межгенных (красный) участков показано в четырех тканях у человека (верхний ряд) и шимпанзе (нижний ряд) для зондов, соответствующих положительной (А) и отрицательной (В) цепи ДНК.«Всего» указывает распределение всех зондов массива независимо от их уровней экспрессии. Размер кружков отражает количество датчиков.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.sg002

(391 КБ PDF)

Рисунок S3. Пример подвыборки равного количества экспрессированных экзонных и межгенных зондов на основе одинакового распределения интенсивности сигнала

Показаны исходные распределения интенсивности сигнала экзонных и межгенных зондов, экспрессируемых в яичках человека (A), и распределения интенсивности сигнала зонда. подмножества (B).Подмножества зондов, полученные с помощью этой процедуры, включали в среднем 90% экзонных и 46% межгенных зондов из исходных распределений.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.sg003

(87 КБ PDF)

Рисунок S4. Перекрытие экспрессируемых зондов между четырьмя тканями

Перекрытие между тканями показано для экспрессированных экзонных (слева) и межгенных (справа) зондов. Столбики представляют собой долю перекрытия между экспрессируемыми зондами, рассчитанную во всех парных сравнениях среди четырех тканей для зондов, расположенных на положительной (A) и отрицательной (B) цепях хромосомы.Области красного цвета внутри столбцов показывают случайное перекрытие.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.sg004

(149 КБ PDF)

Рисунок S5. Расстояния между ближайшими экспрессируемыми экзонными и межгенными зондами в четырех тканях

Расстояния рассчитывали либо с учетом (A), либо без (B) зондов, сопоставленных с предполагаемыми генами. Распределение расстояний показано отдельно для мозга (верхняя левая панель), линий лимфобластоидных клеток (нижняя левая панель), сердца (верхняя правая панель) и семенников (нижняя правая панель).Для всех тканей диапазон расстояний, представленный на рисунке, включает более 90% всех расстояний. Красный цвет обозначает случайное распределение расстояний.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.sg005

(486 КБ PDF)

Рисунок S6. Корреляция между абсолютной интенсивностью сигнала экзонных зондов межгенного зонда и ближайшего экзона

Корреляции показаны для межгенных (четыре столбца слева) или экзонных зондов (четыре столбца справа). Буквы и цвета обозначают ткани (B, желтый — мозг; C, зеленый — клеточная линия; H, синий — сердце; T, красный — яички).Ширина полос пропорциональна количеству областей ENCODE, показывающих значимые корреляции (тест корреляции Спирмена, p <0,05, с поправкой на множественное тестирование). Среднее значение столбцов показывает средний коэффициент корреляции, а границы столбцов представляют собой доверительный интервал 75%. Планки погрешностей отображают 95% доверительный интервал коэффициента корреляции, рассчитанного путем загрузки списка межгенных зондов в каждой области 500 раз.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pgen.0020171.sg006

(68 КБ PDF)

Рисунок S7. Сравнение различий экспрессии между видами, измеренными на мозаичных массивах и с помощью Q-PCR

Показаны различия экспрессии между видами в семи геномных областях, измеренные на мозаичных массивах (красный) и с помощью Q-PCR с использованием в качестве матрицы кДНК, созданной с использованием случайных праймеров (темные синий) или поли (dT) грунт (голубой). Первая и седьмая тестируемые области соответствуют межгенным транскриптам; остальное — к транскриптам известных генов.Планки погрешностей представляют собой стандартную ошибку среднего.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.sg007

(112 КБ PDF)

Рисунок S8. Средние оценки сохранности последовательности ДНК для межгенных и экзонных зондов

Показаны средние оценки сохранности последовательности ДНК (материалы и методы), рассчитанные для межгенных зондов, экспрессированных во всех четырех тканях (A), по крайней мере, в одной ткани (B), не экспрессируемых. в любой из четырех тканей (C) и для экзонных зондов (D).Планки погрешностей отображают 95% -ный доверительный интервал средней оценки сохранности, рассчитанной путем бутстрапирования оценок сохранения последовательности в каждом списке 1000 раз.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.sg008

(74 КБ PDF)

Рисунок S9. Изменения дивергенции экспрессии и отношения дивергенции к разнообразию в трех тканях в зависимости от интенсивности сигнала

Показаны среднее расхождение экспрессии (A и B) и соотношение дивергенции к разнообразию (C и D) между людьми и шимпанзе в мозг (синий), сердце (черный) и яички (красный) для экзонных (A и C) и межгенных (B и D) зондов, измеренных в скользящем окне в диапазоне интенсивности сигнала от 50 до 1200.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.sg009

(323 КБ PDF)

Рисунок S10. Дивергенция экспрессии и отношение дивергенции к разнообразию в трех тканях для сигналов низкой интенсивности

Показаны среднее расхождение экспрессии (A) и отношение дивергенции к разнообразию (B) между людьми и шимпанзе в мозге (желтый), сердце ( синий) и семенники (красный) для экзонных и межгенных зондов с интенсивностью сигнала ниже 50 у обоих видов. Цветные области показывают 95% доверительные интервалы, основанные на загрузке 1000 поднаборов экзонных и межгенных зондов.Более темные оттенки указывают на экспрессию на положительной цепи ДНК, а более светлые оттенки указывают на экспрессию на отрицательной цепи ДНК. Символы представляют собой среднее значение для ткани на положительной (Δ) или отрицательной (○) пряди.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.0020171.sg010

(237 КБ PDF)

Благодарности

Мы благодарим К. Аллена и Х. МакКлюра из Центра приматов Йеркса, Атланта, и У. Коллиньона и Р. Бонтроп из Биомедицинского исследовательского центра приматов, Рейсвейк, за предоставленные образцы тканей шимпанзе; Катрин Кёлер за предоставление материала клеточной линии; Катарину Стаффа и Наим Маташи за помощь с Q-PCR; Эккехарду Петцольду за помощь в анализе данных; Кристин Грин за критическое прочтение рукописи и всех членов нашей группы за полезные обсуждения; Обществу Макса Планка и Bundesministerium für Bildung und Forschung за финансовую поддержку.

Вклад авторов

ПК и СП разработали и разработали эксперименты. HF, TG и SJ проводили эксперименты. PK, JK, SJ, EP и REG проанализировали данные. JK, JV, REG, ML и SP предоставили реагенты / материалы / инструменты для анализа. PK, JK, REG и SP написали статью.

Список литературы

1. 1. Саха С., Спаркс А.Б., Раго С., Акмаев В., Ван С.Дж. и др. (2002) Использование транскриптома для аннотирования генома. Nat Biotechnol 20: 508–512.
2. 2.Капранов П., Коули С.Е., Дренков Дж., Бекиранов С., Штраусберг Р.Л. и др. (2002) Крупномасштабная транскрипционная активность в хромосомах 21 и 22. Science 296: 916–919.
3. 3. Semon M, Duret L (2004) Доказательства того, что функциональные единицы транскрипции покрывают по крайней мере половину генома человека. Тенденции Genet 20: 229–232.
4. 4. Селинджер Д.В., Чунг К.Дж., Мей Р., Йоханссон Э.М., Ричмонд С.С. и др. (2000) Анализ экспрессии РНК с использованием массива генома Escherichia coli с разрешением 30 пар оснований.Nat Biotechnol 18: 1262–1268.
5. 5. Shoemaker DD, Schadt EE, Armor CD, He YD, Garrett-Engele P и др. (2001) Экспериментальная аннотация генома человека с использованием технологии микрочипов. Nature 409: 922–927.
6. 6. Бертоне П., Столц В., Ройс Т.Э., Розовский Дж.С., Урбан А.Е. и др. (2004) Глобальная идентификация транскрибируемых последовательностей человека с помощью массивов тайлинга генома. Наука 306: 2242–2246.
7. 7. Ямада К., Лим Дж., Дейл Дж. М., Чен Х., Шинн П. и др.(2003) Эмпирический анализ транскрипционной активности в геноме Arabidopsis. Наука 302: 842–846.
8. 8. Schadt EE, Edwards SW, GuhaThakurta D, Holder D, Ying L и др. (2004) Исчерпывающий индекс транскрипции генома человека, созданный с использованием микрочипов и вычислительных подходов. Геном Биол 5: R73.
9. 9. Кампа Д., Ченг Дж., Капранов П., Яманака М., Брубакер С. и др. (2004) Новые РНК, идентифицированные в результате углубленного анализа транскриптома хромосом 21 и 22 человека.Genome Res 14: 331–342.
10. 10. Cheng J, Kapranov P, Drenkow J, Dike S, Brubaker S (2005) Транскрипционные карты 10 хромосом человека с разрешением 5 нуклеотидов. Наука 308: 1149–1154.
11. 11. Дэвид Л., Хубер В., Грановская М., Тодлинг Дж., Палм С.Дж. и др. (2006) Карта транскрипции в геноме дрожжей с высоким разрешением. Proc Natl Acad Sci U S A 103: 5320–5325.
12. 12. Ринн Дж. Л., Ойскирхен Г., Бертоне П., Мартоне Р., Ласкомб Н. М. и др.(2003) Транскрипционная активность хромосомы 22 человека. Genes Dev 17: 529–540.
13. 13. Капранов П., Дренкоу Дж., Ченг Дж., Лонг Дж., Хелт Дж. И др. (2005) Примеры сложной архитектуры человеческого транскриптома, выявленные с помощью RACE и массивов листов высокой плотности. Genome Res 15: 987–997.
14. 14. Babak T, Blencowe BJ, Hughes TR (2005) Систематический поиск новых некодирующих РНК млекопитающих указывает на слабую консервативную межгенную транскрипцию. BMC Genomics 6: 104.
15. 15. Wyers F, Rougemaille M, Badis G, Rousselle JC, Dufour ME и др. (2005) Транскрипты Cryptic pol II разрушаются путем контроля ядерного качества с участием новой поли (A) полимеразы. Ячейка 121: 725–737.
16. 16. Хаитович П., Хеллманн И., Энард В., Новик К., Лейнвебер М. и др. (2005) Параллельные закономерности эволюции геномов и транскриптомов человека и шимпанзе. Наука 309: 1850–1854.
17. 17. Консорциум проектов ENCODE (2004) Проект ENCODE (Энциклопедия элементов ДНК).Наука 306: 636–640.
18. 18. Castle J, Garrett-Engele P, Armor CD, Duenwald SJ, Loerch PM и др. (2003) Оптимизация массивов олигонуклеотидов и протоколов амплификации РНК для анализа структуры транскриптов и альтернативного сплайсинга. Геном Биол 4: R66.
19. 19. Джонсон Дж. М., Эдвардс С., Шумейкер Д., Шадт Э. Э. (2005) Темная материя в геноме: свидетельства широко распространенной транскрипции, обнаруженные с помощью экспериментов по укладке микрочипов. Тенденции Genet 21: 93–102.
20. 20. Лемос Б., Мейкледжон С.Д., Касерес М., Хартл Д.Л. (2005) Темпы расхождения в профилях экспрессии генов у приматов, мышей и мух: стабилизирующий отбор и изменчивость среди функциональных категорий. Evolution Int J Org Evolution 59: 126–137.
21. 21. Кимура К., Вакамацу А., Сузуки Ю., Ота Т., Нисикава Т. и др.